miR-542-3p调控Rho基因对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨microRNA-542-3p (miR-542-3p)靶向调控Rho基因对小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护作用。方法将小鼠随机分为正常组、假手术组和模型组,构建CIRI模型(MCAO)。用TUNEL染色检测3组小鼠海马组织中海马神经元的凋亡情况,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)分别检测各组小鼠海马组织的miR-542-3p和Rho的mRNA和蛋白表达水平;分离提取3组小鼠海马神经元体外传代培养,选择第三代细胞分为:正常组、空白组、阴性对照组、miR-542-3p mimic组、miR-542-3p inhibitor组、siRNA-Rho组和miR-542-3p inhibitor+siRNA-Rho组,双荧光素酶报告基因实验验证miR-542-3p和Rho的靶向关系,用qRT-PCR和Western Blot法分别检测各组细胞中miR-542-3p、Rho的mRNA和蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各组细胞转染后的增殖能力变化情况,流式细胞术检测各组细胞转染后的凋亡情况。结果与正常组相比,模...     

miR-331—3p在肝细胞癌中表达的研究

目的运用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）技术检测miR-331—3p在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达,探讨其在肝癌中表达的临床意义及潜在临床价值。方法采用基于2^-△△Cr的qRT—PCR检测miR-331—3p在正常肝细胞株（HL-7702）、不同侵袭转移能力的肝癌细胞株（HepG2、MHCC97-H、HCCLM3）的表达,同时收集5例正常肝组织、30例肝癌组织及癌旁组织,进行定量分析,并分析miR-331—3p与肝癌患者临床病理特征的关系。结果与正常肝细胞株相比,miR-331—3p在肝癌细胞株中表达下调,且随着肝癌细胞株侵袭转移程度增加,其表达下调越明显（P〈0．05）;与正常肝组织相比。肝癌组织中miR-331—3p有不同程度的表达下调（P〈0．05）,且与肝癌患者肿瘤多发结节（P=0．036）、低分化程度（P=0．035）以及伴有静脉浸润（P=0．016）等临床病理特征相关。结论miR-331-3p在肝癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,miR-331—3p有望成为肝癌新的生物标志物或预后因子。     

miR-509-3p与Rab11a在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨miR-509-3p和预测靶基因Rab11a在喉癌发病中的作用.方法:通过实时荧光定量逆转录PCR检测15例喉癌组织及癌旁正常组织中miR-509-3p和预测靶基因Rab11a的表达情况.用miR-509-3p mimics转染喉癌Hep-2细胞株后,检测预测靶基因Rab11a的表达情况,并分析其相关性.结果:①实时荧光定量逆转录PCR检测结果显示,在喉癌组织中miR-509-3p表达低于癌旁正常组织;而Rab11a的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.05).②经转染miR-509-3p mimics喉癌Hep-2细胞株实验组中Rab11a的表达较阴性对照组下调,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-509-3p作为抑癌因子在喉癌组织表达水平低于正常组;预测靶基因Rab11a在喉癌组织表达水平高于正常组;经转染miR-509-3p的喉癌Hep-2细胞株Rab11a表达明显高于对照组.结论:miR-509-3p可能靶基因之一为Rab11a,通过下调预测靶基因Rab11a表达的负向调控机制,发挥抑癌作用.揭示miR-509-3p在喉癌中可能通过减少致癌基因Rab11a表达发挥抑癌作用.     

AMI患者血浆miR-221-3p、miR-208b-3p表达水平与心肌损伤标志物及左心功能的关系

目的 研究急性心肌梗死(AMI)患者血浆微小MicroRNA(miR)-221-3p、miR-208b-3p表达与心肌损伤标志物及左心功能的关系.方法 132例AMI患者为AMI组,另选取48例健康查体人群作为对照组.采用全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分对AMI患者进行危险分层,采用实时荧光定量PCR法检测各...     

大鼠miR-142-3p、 miR-145-3p表达模式分析

摘要： 目的 筛选并鉴定对大鼠乳腺发育和泌乳调控起关键作用的微 RNAs （miRNAs）。方法 以 U6 为内参基因, 运用实时荧光定量 PCR, 比较 miR-142-3p、 miR-145-3p 在泌乳 21 d 大鼠乳腺、 肝、 心、 脾、 肺、 肾、 卵巢、 子宫各器官的组织样品表达量的差异及不同泌乳阶段 （1、 7、 21 d） 乳腺组织 miR-142-3p、 miR-145-3p 的表达规律。结果 miR-142-3p 在泌乳 21 d 各组织的表达存在差异, 乳腺中的表达量显著高于心、 脾、 肺、 肾、 卵巢和子宫, 仅次于肝中的表达量 （P < 0.05）。miR-145-3p 在乳腺中的表达量显著高于肝、 脾和肾, 而在心、 肺、 卵巢和子宫中差异无统计学意义 （P > 0.05）。乳腺组织在泌乳 1、 7、 21 d 比较, miR-142-3p 的相对表达量持续下调, 而 miR-145-3p 的相对表达量先下调后上调。结论 miR-142-3p 和 miR-145-3p 在大鼠各组织及不同生理时期存在表达差异; miR-142-3p 可通过调节靶基因催乳素受体 （Prlr） 来调控乳腺的发育和泌乳的形成, miR-145-3p 可能具有与 miR-145、 miR-145-5p 相似的功能。     

2型糖尿病肾病患者血清miR-27b-3p、miR-342-3p表达特点及临床意义

目的 探讨2型糖尿病肾病（DN）患者血清miR-27b-3p、miR-342-3p表达特点及其对DN的诊断价值。方法 将157例2型糖尿病患者根据尿白蛋白与肌酐比率（UACR）分为正常白蛋白尿（NA）组49例、微量白蛋白尿（MA）组41例、大量白蛋白尿（DN）组67例。收集临床资料,采用实时定量聚合酶链反应检测血清miR-27b-3p、miR-342-3p表达,全自动生化分析仪检测血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测尿液Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原肽（PCⅢ）。分析DN发病的影响因素以及miR-27b-3p、miR-342-3p对DN的诊断价值。结果 与NA组比较,DN组和MA组HbA1c、UACR、尿Ⅳ-C、尿LN、尿PCⅢ水平均增加,而miR-27b-3p、miR-342-3p表达均降低（P<0.05）,DN组BUN、Scr水平增加、估算肾小球滤过率（eGFR）水平降低（P<0.05）。较高水平的尿PCⅢ是DN的危险因素,而较高水平的miR-27b-3p、miR-342-3p、eGFR是DN保护因素（P<0.0...     

血清中微小RNA-542-3p和组织中血管生成素-2在甲状腺乳头状癌患者中的表达及临床意义

目的 探讨血清中微小RNA-542-3p(mi R-542-3p)和组织中血管生成素-2(Ang-2)在甲状腺乳头状癌（PTC）患者中的表达及临床意义。方法 选取2020年1月至2022年6月厦门市海沧医院的40例PTC患者作为PTC组,选取同期40例良性甲状腺疾病患者作为对照组。比较两组患者mi R-542-3p和Ang-2阳性的表达,不同临床资料参数中mi R-542-3p和Ang-2阳性的表达。分析mi R-542-3p、Ang-2阳性与不同病理特征的相关性,并采用受试者工作特征（ROC）曲线分析其临床诊断价值。结果 PCT组患者血清中的mi R-542-3p水平低于对照组,组织中的Ang-2阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;PCT组患者术后血清中的mi R-542-3p水平高于术前,差异有统计学意义（P<0.05）;病灶最大径>1 cm以及发生淋巴转移患者血清中的mi R-542-3p水平低于病灶最大径≤1 cm以及未发生淋巴转移PCT患者,组织中的Ang-2阳性表达率高于病灶最大径≤1 cm以及未发生淋巴转移的PCT患者,差异有统计学意...     

Survivin在头颈部肿瘤中研究进展

Survivin是一种IAP家族蛋白,具有抗细胞凋亡的功能,并且参与细胞有丝分裂的调节和胞质分裂。Survivin在头颈部肿瘤如口腔SCC、口咽SCC、喉SCC肿瘤组织中明显升高,并且与头颈部恶性肿瘤的恶性程度与生存率明显相关。联合Survinvin抑制剂、化学治疗、放射性治疗等能够增加对头颈部恶性肿瘤的治疗效果。     

特瑞普利单抗联合化疗一线治疗晚期食管鳞状细胞癌的成本-效果分析

目的 从中国卫生体系角度评估特瑞普利单抗与安慰剂联合化疗作为晚期食管鳞状细胞癌患者的一线治疗方案的成本效果。方法 通过构建3种健康状态的分区生存模型,分析了2种方案的成本-效果。有关成本、健康效用和临床结果等参数信息来自相关网站、已发表的文献和JUPITER-06 III期随机临床试验。采用质量调整生命年(quality-adjusted life year,QALY)为产出指标衡量增量成本效果比(incremental cost-effectiveness ratio,ICERs),并选择中国人均国内生产总值的3倍作为意愿支付(willingness to pay,WTP)阈值来判断是否经济。通过单因素敏感性分析、概率敏感性分析评估模型的稳健性,还进行了额外情境分析评价特瑞普利单抗联合化疗对比信迪利单抗联合化疗的经济性。结果 基础案例中,在晚期食管鳞状细胞癌患者中,特瑞普利单抗联合化疗相比安慰剂联合化疗可以改善生存获益并增加成本,ICER为38 083元/QALY。单因素敏感性分析表明,每周期特瑞普利单抗成本是影响ICER的关键因素,概率敏感性分析表明,在WTP阈值为每QALY为257 094元的情况下,与安慰剂联合化疗相比,特瑞普利单抗联合化疗具有成本效果的概率为100%。情境分析结果显示特瑞普利单抗联合化疗相比信迪利单抗联合化疗为相对优势方案。结论 从中国卫生体系的角度来看,特瑞普利单抗联合化疗作为晚期食管鳞状细胞癌患者一线治疗是一种具有成本效果的选择。     

食管鳞癌组织中iNOS的表达及意义

目的研究食管癌组织中iNOS的表达,探讨iNOS与食管癌临床病理的关系。方法用免疫组化SABC法检测食管鳞癌组织和癌旁正常食管组织中iNOS的表达,并分析其相互关系。结果 iNOS在食管癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织中的表达水平(P<0.01),iNOS的表达与食管癌的组织学分级(P<0.01)、临床TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与患者性别无关(P>0.05)。结论 iNOS蛋白在食管癌组织中有较高的阳性表达,iNOS与食管癌的恶性进程有关。     

老年胸段食管鳞癌的手术安全性分析

比较高龄老年患者与年轻老年患者胸段食管鳞癌的手术安全性。回顾性分析我院2011年10月至2014年12月收治的胸段食管鳞癌老年患者125例,其中60～74岁患者归为年轻老年组,75岁及以上的患者归为高龄老年组,比较2组患者临床指标、术后并发症与死亡情况。住院时间与医疗费用比较高龄老年组显著性高于年轻老年组（P＜0.01）,肺部感染与谵妄发生率比较高龄老年组明显高于年轻老年组（P＜0.05）,死亡率比较高龄老年组显著高于年轻老年组（P＜0.01）。高龄老年患者普遍存在住院时间较长的现象,术后并发症较多,相对风险较高,可通过简单手术减少风险,并重点防治肺部感染与谵妄。     

Survivin在人口腔黏膜白斑和鳞状细胞癌中表达的研究

目的　探讨Survivin在口腔黏膜白斑和鳞状细胞癌组织中的表达及意义以及与口腔鳞状细胞癌发生发展的关系。方法　采用免疫组织化学方法检测口腔正常黏膜 (10例 ) ,口腔黏膜白斑 (34例 )和鳞状细胞癌(2 7例 )中Survivin的表达。结果　正常黏膜组中未见Survivin表达 ;异常增生性白斑组和鳞状细胞癌组中发现Survivin的表达 ,但表达强度不同。三组之间差异具有显著性 (P <0 .0 5 )。在异常增生性白斑组 ,随异常增生程度的增加 ,Survivin的表达逐渐增强 (P <0 .0 5 )。鳞状细胞癌中Survivin表达随细胞分化程度降低而表达增强 (P <0 .0 5 )。结论　Survivin的表达与细胞的增殖的分化有关 ,Survivin的表达水平增高是口腔黏膜白斑恶变发生发展中的早期事件 ,在鳞状细胞癌的发生发展中起着十分重要的作用 ,可以将其作为预测口腔黏膜白斑恶变潜能的重要标志物。     

食管鳞癌中Ezrin蛋白、CD44-v6的表达及其临床意义

目的探讨Ezrin蛋白、CD44-v6的表达对食管鳞癌的诊断价值.方法应用组织芯片技术进行免疫组织化学法(SP法)检测76例食管鳞状细胞癌患者组织标本及癌旁正常鳞状上皮中Ezrin蛋白和CD44-v6的表达情况,结合临床相关因素进行统计学分析.结果76例食管癌旁正常鳞状上皮中Ezrin蛋白表达阳性35例(46.1%);CD44-v6的表达阳性19例(25%),而在76例食管鳞癌组织中Ezrin蛋白表达阳性69例(90.7%),CD44-v6的表达阳性55例(72.4%),有淋巴转移患者的Ezrin蛋白、CD44-v6阳性率高于无淋巴转移患者(P＜0.05);随肿瘤分化程度的降低,CD44-v6的表达阳性率逐渐增加.Ezrin蛋白与CD44-v6同时表达52例患者中淋巴结转移率高达67.3%,而Ezrin蛋白与CD44-v6同时不表达的7例患者中均无淋巴结转移.结论利用组织芯片技术联合检测Ezrin蛋白、CD44-v6的表达有助于综合判断食管癌的恶性程度和转移潜能.Ezrin蛋白有望成为判断预后的新指标.     

微小RNA-3682-3p通过下调GAS8基因促进肝癌细胞迁移、侵袭的研究

目的探讨肝细胞癌中miR-3682-3p的表达情况、临床意义和作用机制。方法待实验所需肝癌细胞、正常肝细胞(L02)培养与转染后,采用实时定量PCR(qPCR)检测miR-3682-3p在肝癌组织、癌旁组织、L02细胞和肝癌细胞系中的表达情况,利用TCGA数据库分析正常肝组织、肝癌组织中miR-3682-3p的表达差异,分析miR-3682-3p的表达与肝癌患者临床病理特征、预后的关系;通过Transwell实验评价细胞侵袭、迁移能力;通过TargetScan数据库预测获得下游靶基因,采用qPCR、Western blotting法分析miR-3682-3p对生长抑制特异性基因8(GAS8)的表达的调控作用,并利用双荧光素酶报告基因实验加以验证。结果与癌旁组织和正常肝细胞比较,miR-3682-3p在肝癌组织、细胞系中均高表达(P0.05),并与门静脉侵犯、Edmondson分级、TNM分期有关;基于TCGA数据库数据的生存分析显示,miR-3682-3p高表达与不良预后相关;在MHCC97-H细胞中敲减miR-3682-3p显著抑制细胞的侵袭、迁移(P0.05);通过生物信息学预测加以实验验证证实GAS8是miR-3682-3p的直接靶基因,并通过回复实验证实GAS8介导了miR-3682-3p对肝癌细胞侵袭及迁移能力的促进作用。结论 miR-3682-3p在肝癌中通过靶向抑制抑癌基因GAS8从而促进肝癌细胞侵袭、迁移。     

VEGF与MMP-9蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义

目的检测VEGF和MMP-9蛋白在食管鳞癌中的表达,探讨其病理临床意义及其相关性。方法应用免疫组化SP法检测51例食管鳞癌组织、27例癌旁非典型增生和15例正常食管黏膜组织中VEGF和MMP-9蛋白的表达,分析其与食管癌的临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移的关系及二者的相关性。结果VEGF和MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中的表达明显高于癌旁非典型增生组织和正常食管黏膜(P<0.05),在中晚期食管癌组织中的表达高于早期,在侵及纤维膜组中的表达明显高于未侵及纤维膜组,在有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组,差异均有统计学意义(均P<0.05),但VEGF在高分化组和低分化组的表达差异无统计学意义(P>0.05),而MMP-9在高分化组和低分化组的表达差异有统计学意义(P<0.05);两者的表达呈正相关关系(rs=0.419)。结论VEGF和MMP-9在食管癌组织中的表达和临床分期、浸润深度、淋巴结转移有关,两者的表达呈正相关性。     

食管鳞癌组织中葡萄糖转运蛋白-1表达的临床意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）的表达与食管鳞癌发生、发展的关系。方法对95例食管癌患者的手术切除标本及胃镜活检标本采用免疫组化S—P法检测GLUT-1表达水平。结果GLUT-1在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管组织中的阳性表达率、不同浸润程度时的表达率、临床病理分型的表达率、淋巴结转移的表达率之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GLUT-1在食管鳞癌的发生、发展中具有重要作用，有可能成为临床食管鳞癌诊断和判断预后的一个重要指标。