邻苯二甲酸酯类首批化学对照品的标定及其色谱检测方法的建立

目的:对供含量测定用的6种邻苯二甲酸酯类首批化学对照品进行标定,同时建立检测该类物质的色谱方法。方法:结合文献,应用UV、IR、NMR和ESI-MS等谱学技术对邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二正戊酯(DAP)、邻苯二甲酸二异戊酯(DIAP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)和邻苯二甲酸二(2-甲氧乙基)酯(DMEP)6种邻苯二甲酸酯类化学对照品的结构进行鉴定,采用高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)进行纯度分析,利用质量平衡法进行定值;利用HPLC和GC同时检测多种邻苯二甲酸酯类化合物。结果:HPLC法测得DMP、DBP、DAP、DIAP、DCHP、DMEP的纯度分别为99.4%、99.9%、99.5%、99.9%、99.9%、99.2%,GC法测得其纯度分别为99.6%、100.0%、99.4%、99.9%、100.0%、99.1%。在选定的HPLC色谱条件下,12种邻苯二甲酸酯类化合物的检测限为0.05~0.40μg·m L-1,定量限为0.20~1.20μg·m L-1,RSD为0.6%~0.9%;在选定的GC色谱条件下,其检测限为0.12~1.28μg·m L-1,定量限为0.47~4.28μg·m L-1,RSD为2.2%~2.7%。结论:建立了6种邻苯二甲酸酯类首批化学对照品;初步建立检测12种邻苯二甲酸酯类化学成分的HPLC和GC的方法,为该类化学成分的检测提供一定的参考依据。     

毛细管气相色谱法测定邻苯二甲酸二乙酯中16种邻苯二甲酸酯类杂质含量

目的:建立邻苯二甲酸二乙酯中16种邻苯二甲酸酯类杂质的测定方法。方法 :采用毛细管气相色谱法,以(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷为固定液,柱温为150℃,保持1 min,以10℃.min-1升温至220℃,再以5℃.min-1升温至300℃,保持6 min;进样口温度为250℃;检测器温度为350℃;载气流量为1℃.min-1;进样量1μL,分流比10:1。以邻苯二甲酸二乙酯为对照品,按标准曲线法以峰面积计算邻苯二甲酸二乙酯中16种邻苯二甲酸酯类杂质的含量。结果 :在选定的色谱条件下,邻苯二甲酸二乙酯与16种邻苯二甲酸酯类杂质分离良好,邻苯二甲酸二乙酯在12.6～126μg.mL-1的范围内线性关系良好,回归方程为Y=0.0271X+0.0007(r=1);16种邻苯二甲酸酯类杂质邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHP)、邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二辛酯(DEHP)、邻苯二甲酸二苯酯、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)检出限均在0.25μg.mL-1以下;精密度RSD均在2.0%以下;平均回收率均在82.3%～105.4%范围内。结论:该方法准确、可靠,可用于邻苯二甲酸二乙酯中16种邻苯二甲酸酯类杂质的检测。     

阴离子交换高效液相色谱法测定3-硝基邻苯二甲酸及其杂质4-硝基邻苯二甲酸和邻苯二甲酸的含量

目的:采用阴离子交换高效液相色谱法对3-硝基邻苯二甲酸及其杂质4-硝基邻苯二甲酸、邻苯二甲酸进行色谱分离,并测定杂质4-硝基邻苯二甲酸、邻苯二甲酸的含量。方法:SIELC Primesep D(4.6 mm×50 mm,5μm)色谱柱;流动相:0.01%H2SO4水溶液-乙腈,梯度洗脱;流速:1.0 m L·min-1;柱温:30℃;进样量:5μL;检测波长:222 nm、226 nm、262 nm。采用杂质外标法对3-硝基邻苯二甲酸样品中4-硝基邻苯二甲酸、邻苯二甲酸进行定量。结果:3种物质在0.5μg·m L-1~20μg·m L-1范围内线性关系良好(r>0.9995),检测限分别为0.03μg·m L-1、0.1μg·m L-1、0.05μg·m L-1。结论:该方法快速简便,灵敏度高,重现性好,可用于两杂质的定量分析。     

茜草双酯的制备纯化研究

目的茜草双酯的制备与纯化。方法以邻苯二甲酸二乙酯和丁二酸二乙酯为原料合成茜草双酯。结果及结论本方法使纯品产率稳定在34%左右,优于以往文献报道的方法。     

一次性无菌注射器的浸出有机物研究

目的:研究一次性无菌注射器(简称一次性注射器)与有机助溶剂接触后的浸出有机物,确定其结构并测定含量。方法:采用含橡胶活塞的三件式一次性注射器及不含橡胶活塞的二件式一次性注射器与注射剂中常用的乙醇、丙二醇、聚乙二醇400及甘油等有机助溶剂接触,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器、质谱确定浸出有机物的结构;模拟已上市注射剂处方,以高效液相色谱法定量测定一次性注射器分别与5%²0%乙醇溶液、20%20%乙醇溶液、20%⁶0%丙二醇溶液及20%60%丙二醇溶液及20%⁶0%聚乙二醇400溶液接触后浸出有机物的含量。结果:三件式一次性注射器与甘油接触后无明显浸出有机物;与乙醇、丙二醇及聚乙二醇400接触后有有机物浸出,其中乙醇中浸出量最高;二件式一次性注射器与上述有机助溶剂接触均无浸出物出现。浸出有机物来源于注射器中的橡胶活塞,为增塑剂邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)。一次性注射器与不同浓度的有机助溶剂接触5 min以内,浸出的DEHP含量均低于1.5μg/ml,远低于人体可耐受的日摄入量。结论:采用一次性注射器注射含有机助溶剂的注射剂,短时间内使用安全性风险较低。     

塑化剂的危害与防治研究进展

台湾塑化剂风波后,塑化剂的危害与防治开始受到越来越多人的重视.少量摄入塑化剂不会对健康产生影响,但是长期大量食用会给人体的生殖系统、免疫系统、消化系统带来慢性危害.本文对塑化剂的危害与防治进行回顾分析,为人们正确认识塑化剂提供参考.     

海金沙根的化学成分

目的研究海金沙[Lygodium japonicum(Thunb.)Sw.]根的化学成分。方法海金沙的干燥根及根茎用体积分数为70%的乙醇回流提取,经过萃取后正丁醇层采用各种色谱技术进行分离,并结合理化性质,波谱学分析及文献对照鉴定化合物结构。结果从正丁醇层分离并鉴定5个化合物,分别鉴定为:苯甲酸(benzoic acid,1)、芹菜素(apigenin,2)、3,4-dihydroxybenzoic acid4-O-(4′-O-methyl)-β-D-glucopyranoside(3)、罗汉松甾酮C(makisterone C,4)、邻苯二甲酸二异辛酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,5]。结论化合物1、2、5均为首次从该科植物中分离得到。     

邻苯二甲酸二乙基己酯体内代谢和毒性机制研究进展

塑化剂被广泛用于各种塑料制品当中,其中以邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)最为典型。随着食品中添加塑化剂的新闻不断被曝光,塑化剂对人体健康的危害逐渐引起大众关注。塑化剂及其体内代谢物在体内的蓄积可导致多个器官的损伤。塑化剂生殖器官蓄积可造成生殖系统明显的损伤,在肝脏累积可导致氧化应激而引发肝细胞凋亡,同时塑化剂又能作为佐剂影响免疫系统。该文将就DEHP的生殖毒性、肝脏毒性和免疫毒性及其有关机制进行了系统阐述。     

邻苯二甲酸二乙基己酯对成年大鼠睾丸前列腺素E2含量及COX-2 mRNA表达的影响

目的:研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DE-HP)对成年大鼠睾丸前列腺素E2(PGE2)含量及环氧合酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法:雄性SD成年大鼠40只,随机分成4组,每组10只,设3个染毒剂量组(10、100、500 mg.kg-1.d-1DEHP溶媒为玉米油)和1个对照组(玉米油),饲养4周后处死。用ELISA测定睾丸组织PGE2含量;应用免疫组化法检测40只雄性SD成年大鼠睾丸组织中COX-2的表达及其定位情况;RT-PCR法检测各组睾丸组织COX-2 mRNA表达及其定位情况。结果:实验组睾丸组织中PGE2含量和睾丸组织的COX-2mRNA表达均低于对照组,COX-2则主要表达于精原细胞。结论:DEHP能使成年大鼠睾丸生精细胞功能损伤,使睾丸组织PGE2合成降低,其机制可能与下调COX-2 mRNA表达有关。     

邻苯二甲酸二丁酯的毒性研究

邻苯二甲酸二丁酯(DBP)在工业上作为塑料生产的主增塑剂,并广泛用于硝化纤维素漆、胶膜、粘合剂、电缆外皮、橡胶等生产。已有一些国家提出了车间空气中DBP的MAC和ADI等卫生标准,但相互差距较大,如苏联规定的MAC为0.5mg/m~3;ACGIH推荐的TLV为5mg/m~3,TLV-STEL为10mg/m~3,我国尚无此项卫生标准。为保护接触者的健康,並为制订卫生标准提供科学依据,我们对DBP进行了毒性研究。     

超高效液相色谱-紫外/串联质谱法检测药品中非法添加的邻苯二甲酸二异癸酯

目的：建立超高效液相色谱-紫外/串联四极杆质谱法检测药品中非法添加的邻苯二甲酸二异癸酯（DIDP）。方法：色谱柱为ACQUITY UPLC~（TM）BEH C_8（50 mm×2.1mm,1.7μm）,以甲醇（A）-0.1%甲酸（B）为流动相,梯度洗脱分离,紫外检测波长254 nm;同时采用串联四极杆质谱,电喷雾正离子扫描和多反应监测模式检测。结果：超高效液相-串联四极杆质谱法,DIDP被准确定性,定性离子对（m/z）为447.6/148.9和447.6/307.2。超高效液相-紫外法,DIDP的检测限为0.4 ng;在0.6~5.0μg·ml~（-1）质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 4;回收率为100.2%（RSD=4.8%）。结论：该方法专属、灵敏、测定结果准确,可用于定性、定量检测药品中非法添加的DIDP。     

DEHP致大鼠甲状腺毒性作用中的机制研究北大核心CSCD

目的探讨自噬在邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)致雄性大鼠甲状腺毒性作用中的机制。方法 SD种雄性大鼠24只,随机分为4组,每组6只。用50.0、158.2和500.0 mg/kg·bw DEHP连续灌胃染毒4周,动态观察大鼠的一般情况和体重变化;检测不同浓度DEHP染毒后大鼠血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)及促甲状腺素(TSH)的变化情况及甲状腺组织病理改变;测定大鼠血清、甲状腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)及活性氧(ROS)水平;Western blot检测LC3和p62蛋白表达变化。结果 DEHP染毒后,大鼠体重无明显变化。光学显微镜下可见高剂量组甲状腺滤泡体积变小,腔内胶质密度下降。DEHP高剂量染毒组大鼠血清T3和T4水平显著下降。高剂量组血清及甲状腺组织SOD活性下降,而ROS升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示DEHP可显著上调甲状腺组织中LC3Ⅱ蛋白表达、下调p62蛋白表达,表明DEHP作用下甲状腺组织自噬活性增加。相关性分析结果显示ROS与LC3Ⅱ蛋白表达成正相关,与p62蛋白表达成负相关。结论 DEHP可通过氧化应激引起甲状腺功能减退,同时可通过诱导自噬,降低ROS对细胞的毒性伤害,提示自噬是DEHP致甲状腺毒性作用中的自我保护机制。     

罗红霉素片有关物质检查中包衣材料带入杂质峰的研究

目的:研究罗红霉素片有关物质检查中包衣材料带入的杂质峰.方法:用紫外光谱法及高效液相色谱法对相关材料进行实验研究.结果:包衣材料中邻苯二甲酸二乙酯可在有关物质中带入杂质峰.结论:罗红霉素片有关物质检查应去除包衣.     

盐酸索他洛尔爆破型脉冲片的制备及释放度研究

目的:以盐酸索他洛尔为模型药物,研制爆破型脉冲片并考察其体外释药特性.方法:通过体外释放实验,考察片芯崩解剂种类、包衣组成与厚度、增塑剂种类与用量、致孔剂种类与用量等处方因素对脉冲片体外释放的影响;并通过吸水实验分析脉冲片的释药机制.结果:以乙基纤维素(EC)为包衣材料,邻苯二甲酸二乙酯(DEP)为增塑剂,聚乙二醇6000(PEG6000)为致孔剂,采用薄膜包衣法,制备含盐酸索他洛尔30 mg 的脉冲片.该制剂在体外延迟释放时间为4 h～6 h,时滞后1.5 h累积释药达90%.结论:盐酸索他洛尔爆破型脉冲片在体外具有脉冲释放特性.     

冬凌草的化学成分

目的 从冬凌草（Rabdosia rubescens Hemsl.） 中提取分离活性成分。方法 采用硅胶柱色谱等分离方法对冬凌草乙醇冷浸提取物进行分离,并通过NMR﹑ESI-MS和TLC等多种方法对分离得到的化学成分进行结构鉴定。结果分离得到15个化合物,分别鉴定为：α-香树脂醇（1）、胡萝卜苷（2）、乌索酸（3）、β-谷甾醇（4）、enmenol-glucoside（5）、lasiodonin（6）、葡萄糖（7）、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌索酸（8）、冬凌草甲素（9）、胡麻素（10）、肌醇（11）、冬凌草乙素（12）、dayecrystals B（13）、尿嘧啶（14）、邻苯二甲酸-二(2-乙基-2己基)酯（15）。结论 化合物14为首次从该属植物中分离得到,化合物8、13为首次从该植物中分离得到;邻苯二甲酸二-(2乙基-2己基)酯为实验材料中所引入的化合物。     

HPLC法测定葡萄糖输液袋（瓶）中增塑剂溶出量

目的：建立HPLC法测定葡萄糖输液袋（瓶）中增塑剂邻苯二甲酸二-（2-乙基已基）酯（DEHP）溶出量。方法：采用Inertsil ODS-sp（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相：100%甲醇;流速：1.0 ml·min~（-1）;检测波长：230 nm;柱温：30℃;进样量：20μl。结果：DEHP在0.56~9.05μg·ml~（-1）范围内线性关系良好（r=0.999 2）,回收率为99.3%（RSD=1.2%,n=9）。结论：该方法专属性强,灵敏度高,重复性好,适用于静脉输液袋（瓶）的质量控制。     

邻苯二甲酸二乙基己基酯对新生大鼠肺组织发育的影响

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)和转化生长因子β1(TGF-β1)是否参与邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)影响肺组织形态发育的过程。方法 SD新生大鼠于出生后第1天开始分别ip给予DEHP 10,100和750 mg.kg-1,每天1次。每组1/2大鼠持续染毒14 d,剩余1/2大鼠持续染毒21 d。染毒结束后第2天处死大鼠,取新鲜肺组织,提取总RNA,用实时定量PCR方法检测MMP-9,TIMP-1和TGF-β1mRNA的表达;其余部分石蜡包埋,制备石蜡切片,HE染色进行组织形态观察,或者免疫组化染色检测MMP-9,TIMP-1和TGF-β1蛋白表达。结果 DEHP染毒14 d,与溶剂对照组比较,DEHP 100和750 mg.kg-1组新生大鼠肺泡发育受抑制,肺间质比例增大(P<0.05);DEHP10,100和750 mg.kg-1组MMP-9和TGF-β1mRNA表达随着DEHP染毒剂量的增加而增加(r=0.979,P<0.01;r=0.990,P<0.01),MMP-9和TGF-β1蛋白表达亦随着DEHP染毒剂量的增加而增加(r=0.770,P<0.01;r=0.959,P<0.01);TIMP-1 mRNA和蛋白表达下降(r=0.904,P<0.01;r=0.795,P<0.01)。DEHP染毒21 d,DEHP 10,100和750 mg.kg-1组肺间质比例与溶剂对照组比较无明显变化;MMP-9和TGF-β1mRNA表达随着DEHP染毒剂量的增加而下降(r=0.879,P<0.01;r=0.904,P<0.01),MMP-9和TGF-β1蛋白表达亦随着DEHP染毒剂量的增加而下降(r=0.935,P<0.01;r=0.819,P<0.01);TIMP-1 mRNA和蛋白表达增加(r=0.819,P<0.01;r=0.619,P<0.01)。结论 DEHP通过影响肺组织MMP-9,TIMP-1和TGF-β1基因和蛋白的表达影响新生大鼠肺组织形态发育。     

邻苯二甲酸二异丁酯——新型的ANO2通道开放剂

目的 筛选ANO2的特异性配体药物,为医药行业开发靶向ANO2新药提供先导化合物的结构信息。方法 构建ANO2过表达的HEK293细胞株,应用共聚焦显微镜-膜片钳全细胞记录模式技术筛选ANO2的特异性配体。结果 在胞内外钳制电压100 mV及含1μmol·L^-1钙离子电极内液的记录条件下,邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate, DIBP)给药前ANO2介导的氯电流密度为(14.67±2.87) pA/pF,给药后ANO2介导的氯电流电导为(28.75±4.05) pA/pF,差异具有统计学意义(P<0.01);钙荧光成像实验结果表明DIBP无调节胞内游离钙信号的作用;在0μmol·L^-1钙离子条件下,DIBP对静息状态的ANO2通道不具有直接的激活作用。结论 DIBP通过直接作用增强已活化ANO2通道的电导,其作为一种新型的促ANO2通道开放剂为开发靶向ANO2的药物提供结构信息,同时也为研究其他邻苯二甲酸酯类物质的毒理作用提供一定的理论基础。     

邻苯二甲酸二丁酯致畸性研究

邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalateDBP)是目前广为使用的一种主增塑剂。某些塑料制品中掺入的DBP比例多达总量的1/3～1/2。文献报道,大鼠经口LD_(50)为8000mg/kg。本实验室的急性毒性研究也得到相似的结果。文献报道,DBP的某些同系物,如邻苯二甲酸二辛酯(DOP)可能具有致癌作用,因此对DBP的远