幽门螺杆菌对胃癌及癌旁组织中Bcl-2家族基因表达的影响

目的　研究幽门螺杆菌 (H .pylori)感染对胃癌及癌旁组织中Bcl 2家族基因表达的影响。方法　收集 95例胃癌及癌旁组织标本 ,应用半定量RT PCR法检测Bid、Bax和Bcl 2mRNA的表达。结果　胃癌组织中Bid和BaxmRNA表达按H .pylori阴性组、Ca gA-H .pylori感染组和CagA H .pylori感染组顺序依次增高 (P <0 0 5 ) ,H .pylori阴性组的Bcl 2mRNA表达低于H .pylori阳性组 (P<0 0 5 ) ;癌旁组织中 ,Bid、Bax和Bcl 2表达按H .pylori阴性组、CagA-H .pylori感染组和CagA H .pylori感染组顺序均依次递增 (P <0 0 5 )。H .pylori阴性组中 ,胃癌组织的Bid和Bax表达与Bcl 2表达呈负相关 (P <0 0 5 ) ,而在H .pylori感染组中 ,胃癌组织的Bid和Bax表达与Bcl 2表达无相关性 ;癌旁组织的Bid和Bax表达与Bcl 2表达呈正相关 (P <0 0 5 )。结论　H .pylori有促进Bid、Bax和Bcl 2表达的作用 ,并且能够诱发这些细胞凋亡调控基因的表达紊乱 ,这也许是H .pylori诱导胃癌发生的途径之一。     

雷米芬太尼对失血性休克大鼠肺内凋亡因子表达影响的实验研究

目的　探讨雷米芬太尼对失血性休克大鼠肺损伤及肺内凋亡因子C Jun、Bax、Bcl 2表达的影响。方法　健康SD大鼠 72只 ,制作失血性休克模型 ,然后随机分为假复苏组 (Ⅰ组)、乳酸钠林格液复苏组 (Ⅱ组 )和复苏 雷米芬太尼组 (Ⅲ组 )。观察失血及复苏后4h全过程血流动力学改变。在休克前、失血休克、复苏 2h、复苏 4h 4个时间点 ,活杀动物取肺组织用于光镜和免疫组织化学检测 ,计算C Jun、Bax、Bcl 2的阳性率。结果　成功地复制急性肺损伤模型。各组不同时间点肺脏细胞内均有Bax和Bcl 2表达。Ⅰ组二者的表达始终处于一种低水平状态。Ⅱ组Bcl 2表达在休克建立时略有升高 ,之后一直保持较低水平 ,而Bax的表达从休克开始就显著高于休克前 (P<0 0 5 ) ,之后继续升高。Ⅲ组的结果介于其他两组之间。C Jun蛋白表达早于Bax和Bcl 2 ,休克即刻就有阳性细胞弥漫性分布。II组Bax/Bcl 2比值在复苏 2h后显著升高 (P <0 .0 5 )。结论　雷米芬太尼可通过下调肺内凋亡因子C Jun、Bax、Bcl 2的表达减轻失血性休克及复苏后再灌注性肺损伤。     

肝细胞生长因子及其c-Met受体表达与原发性小肝癌术后复发关系的初步研究

目的　探讨原发性小肝癌 (SHCC)切除术后血清肝细胞生长因子 (HGF)水平和癌组织中c Met受体表达与术后复发的关系。方法　采用ELISA对手术前后血清HGF浓度变化进行检测 ,并利用Western、Northern印迹杂交方法 ,测定肿瘤与非肿瘤组织内c Met蛋白表达量。结果　术前血清HGF浓度为 0 64± 0 15ng/ml,术后 3天为 1 41±0 2 8ng/ml,二者差异有显著性意义 (P <0 0 0 1)。术后 3天血清HGF浓度是术前的 2 3 2± 0 5 5倍。术后HGF的增长倍数与肿瘤组织内c Met蛋白的过度表达在术后复发与未复发者中差别有显著性意义(P <0 0 5 ) ,两年内复发者明显高于两年后复发及未复发者。结论　SHCC切除术后血清HGF水平明显增高 ,肿瘤组织本身c Met蛋白过度表达 ,可能与SHCC术后早期复发有关     

VEGF、Cath-D在喉复发癌组织芯片中的表达和意义

目的　研究VEGF、Cath D蛋白的表达与喉癌复发的关系 ,对预后进行估计。方法　回顾性分析 195 8～1999年喉癌手术病例 5 74例 ,术后随访 3年 ,确诊术后复发 5 6例 ;正常喉对照标本 39例。标本制成组织芯片 ,采用免疫组化SABC法对芯片标本进行染色。结果　VEGF、Cath D在喉癌组织中有表达 ,其阳性率不同。VEGF、Cath D蛋白的表达在喉癌复发组明显增强 ,与未复发组的表达差异有统计学意义 (P <0 0 0 1) ,与喉癌复发呈正相关。VEGF、Cath D蛋白在喉癌组织的表达与正常组织的表达比较差异有统计学意义 (P <0 0 0 1)。结论　VEGF、Cath D蛋白的表达可作为估计喉癌预后的指标     

黏附分子E-cadherin、CD44和Tenascin在喉复发癌组织芯片中的表达和意义

目的　研究E cadherin、CD4 4和Tenascin黏附分子的表达与喉癌复发的关系 ,以对预后进行评估。方法　回顾分析 195 8～1999年喉癌手术病例 5 74例 ,术后随访 3年 ,确诊术后复发 5 6例 ;正常喉对照标本 39例。标本制成组织芯片 ,采用免疫组化SABC法 ,对芯片标本进行染色。结果　E cadherin、CD4 4和Tenascin在喉癌组织中有表达 ,其阳性率各有不同。E cadherin蛋白的表达在喉癌复发组明显降低 ,与未复发组比较差异显著 (P <0 0 0 1) ,与喉癌复发呈负相关。而CD4 4、Tenascin蛋白的表达在喉癌复发组明显升高 ,与未复发组比较差异显著(P <0 0 0 1) ,与喉癌复发呈正相关。E cadherin、CD4 4和Tenascin黏附蛋白在喉癌组织的表达与正常组织比较差异有统计学意义 (P <0 0 0 1)。结论　黏附分子E cadherin、CD4 4和Tenascin的表达可作为喉癌预后估计的指标。     

rhIL-11对急性放射病小鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的　研究rhIL 11对急性辐射损伤后骨髓造血细胞凋亡的影响。方法　应用原位末端标记、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法分别在照射后不同时间观察了rhIL 11对 5 5Gy6 0 Coγ射线全身照射小鼠骨髓造血细胞凋亡的影响。应用免疫组织化学法观察了各组小鼠骨髓细胞Bcl 2和P5 3蛋白的表达变化。结果　①照射前应用rhIL 11可使照射后 6h小鼠骨髓造血细胞凋亡率下降 ,而照射后给药组照射后 12h凋亡率下降更加明显。②照射后 3d给药组P5 3蛋白表达均较照射对照组明显降低 (P <0 0 1) ,Bcl 2蛋白表达则明显升高 ;照射后 7d给药组Bcl 2升高仍明显。结论应用rhIL 11可有效抑制照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡 ,有利于造血功能的恢复。rhIL 11对细胞凋亡的影响可能与Bcl 2和P5 3等蛋白的调节密切相关。     

103Pd放射性支架抑制再狭窄的作用及对平滑肌细胞凋亡基因表达的影响

目的　观察1 0 3Pd放射性支架对兔腹主动脉中膜平滑肌细胞凋亡相关基因Bcl 2及BaxmRNA表达的影响 ,探讨其防治血管成形术后再狭窄的作用机理。方法　将雄性新西兰大白兔 5 0只随机分为普通支架组及1 0 3Pd放射性支架组 ,设正常对照。分别于术后 3、7、14、2 8和 5 6d取材 ,进行病理形态学研究 ,并用原位杂交的方法测定血管中膜平滑肌细胞中Bcl 2mRNA及BaxmRNA的表达。结果　光镜下发现 ,放射性支架组管腔狭窄程度明显低于普通支架组 ,术后第 5 6天最显著(P <0 0 1)。与对照组比较 ,术后 3～ 2 8d普通支架组与放射性支架组Bcl 2mRNA表达均明显增加 ,而放射性支架组的表达则较普通支架组降低 (P <0 0 1)。BaxmRNA的表达 ,术后第 3～ 2 8天两支架组均超过对照组 ,而放射性支架组的表达较普通支架组显著增加 (P <0 0 1)。Bcl 2mRNA与BaxmRNA的比值显示 ,普通支架组术后第 3、14和 2 8天均大于对照组 (P <0 0 1) ,放射性支架组虽也大于对照组 ,但无统计学差异 (P >0 0 5 )。术后第 3～ 2 8天 ,放射性支架组的比值均小于普通支架组(P <0 0 5 )。结论　1 0 3Pd放射性支架增加细胞凋亡的BaxmRNA表达 ,减少抑制细胞凋亡的Bcl 2mRNA表达 ,使凋亡细胞比例增加 ,降低再狭窄的发生     

放射或放射联合泰素对鼻咽癌细胞p57kip2蛋白表达的影响

目的　研究放射或放射联合泰素对鼻咽癌细胞抑癌基因p5 7kip2 蛋白表达的影响。方法　采用免疫组织化学法和WesternBlot法检测鼻咽癌细胞照射前后p5 7kip2 蛋白表达情况。结果p5 7kip2 蛋白在鼻咽癌细胞中弱阳性表达 ,单纯照射组和照射联合泰素组可见p5 7kip2 蛋白在照射后随吸收剂量增加和时间延长其表达均上调 (P <0 0 1) ,照射联合泰素组的p5 7kip2 蛋白表达比单纯照射组明显增强 (P <0 0 1)。结论　放射或放射联合泰素对鼻咽癌细胞抑癌基因p5 7kip2 蛋白表达有明显的增强作用     

表皮钙黏素和nm23蛋白在声门上喉癌中的表达及意义

目的 :观察表皮钙黏素和nm2 3蛋白在声门上喉癌组织中的表达 ,探讨其与喉癌临床病理指标间的关系。方法 :应用免疫组化方法观察了 5 7例声门上喉癌组织中表皮钙黏素和nm2 3蛋白的表达。结果 :表皮钙黏素和nm2 3蛋白的表达与喉癌病理分级 (P <0 .0 1)、临床分期 (P <0 .0 1)密切相关。临床检查发现并经病理证实有淋巴结转移 (cN+ pN+ )及临床检查未发现但经病理证实有淋巴结转移 (cN-pN+ )组的表皮钙黏素和nm2 3蛋白的表达均显著高于经病理证实无淋巴结转移组 (pN-) (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,而cN+ pN+ 和cN-pN+ 比较无显著差异。结论 :表皮钙黏素和nm2 3蛋白表达可作为声门上喉癌预后及筛选有潜在淋巴结转移临床病例的重要指标     

胃癌组织线粒体基因组不稳定与Bcl-2和Bax mRNA表达的关系

目的　探讨胃癌及其癌前病变线粒体DNA微卫星不稳定 (mtMSI)与Bcl 2、BaxmRNA表达的关系。方法　采用PCR SS CP方法检测mtMSI,并采用RT PCR方法检测了Bcl 2和BaxmRNA的表达。结果　胃黏膜肠化 (5 3 3% )、异型增生 (70 % )组织Bcl 2mRNA表达率显著高于浅表性胃炎组(10 % ) (P <0 0 5 ) ,而慢性萎缩性胃炎 (5 0 % )和胃癌 (30 % )Bcl 2mRNA表达率与浅表胃炎组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;胃黏膜异型增生组织Bcl 2mRNA表达率显著高于胃癌组织 (P <0 0 5 )。异型增生 (6 0 % )组BaxmRNA表达率显著高于浅表胃炎组 (P <0 0 5 ) ,而慢性萎缩性胃炎(5 0 % )、肠化 (4 6 7% )和胃癌 (33 3% )的BaxmRNA表达率与浅表性胃炎组 (10 % )比较差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。mtMSI( )组Bcl 2mRNA表达率为 5 0 % ,mtMSI(- )组为 4 0 5 % ;mtMSI( )组BaxmRNA表达率为 4 4 4 % ,mtMSI(- )组为 4 0 5 % ,mtMSI( )组Bcl 2和BaxmRNA表达率与mtMSI(- )组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　mtMSI可能在部分胃癌的发生中起重要作用 ;胃癌发生过程中出现的mtMSI与Bcl 2、BaxmRNA的异常表达可能无关     

膀胱癌中Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达及意义

目的 探讨凋亡调节基因Fas、FasL、Bcl-2及Bax在膀胱移行细胞癌中的表达及其与膀胱癌发生、发展和预后之间的关系。方法 采用免疫组化染色法检测40例膀胱移行细胞癌、24例正常膀胱组织中Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达。结果 Fas表达于正常组织和膀胱癌组织中,FasL、Bcl-2及Bax仅表达于膀胱癌组织中;Fas的表达与膀胱癌病理分级负相关,FasL、Bcl-2的表达与膀胱癌病理分级正相关;Fas、Bax在初发膀胱癌组织中的表达大于复发膀胱癌。结论 Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达,可能与膀胱癌细胞的凋亡及免疫逃避等密切相关,影响膀胱癌的发生、发展和预后。     

葡萄籽原花青素联合顺铂对喉癌细胞Hep-2生物学作用及机制研究

目的利用葡萄籽原花青素及其联合顺铂在体外作用于喉癌细胞Hep-2,观察其对喉癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨抗肿瘤作用的可能机制。方法 MTT法检测各组药物对喉癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;TUNEL法检测各组药物对喉癌细胞凋亡率的影响;采用流式细胞仪分析凋亡细胞比例,Western blot法检测各组药物对喉癌细胞Bax/Bcl-2表达情况的影响。结果 MTT和TUNEL结果显示,GSPE+顺铂组的喉癌细胞抑制增殖作用明显高于单纯GSPE组和单纯顺铂组,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞周期结果显示,GSPE+顺铂组处于S+G2M期的细胞数明显低于单纯GSPE和单纯顺铂组,差异均有统计学意义(P<0.05);蛋白表达结果显示,GSPE+顺铂组的Bax/Bcl-2的表达明显高于单纯GSPE组和单纯顺铂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论葡萄籽原花青素可诱导喉癌Hep-2细胞凋亡;与单纯应用葡萄籽原花青素或顺铂比较,葡萄籽原花青素联合顺铂可以起到更好的增殖抑制并诱导喉癌细胞凋亡,两者具有协同作用。     

自噬相关因子 LC3、Bnip-3和凋亡相关因子Bcl-2、Bax在实验性糖尿病大鼠脑组织中的表达

目的：探讨自噬相关因子LC3、Bnip-3及凋亡相关因子Bcl-2、Bax在实验性糖尿病大鼠脑组织损伤中的作用。方法30只SD大鼠随机分为糖尿病组和对照组。糖尿病组一次性腹腔注射1％链脲佐菌素（60 mg／kg体质量）,对照组一次性腹腔注射柠檬酸缓冲液,饲养12周后活杀大鼠,留取脑组织标本。经HE染色观察其病理学改变,采用免疫组化S-P法检测大鼠脑组织中LC3、Bnip-3、Bcl-2及Bax的表达。结果与对照组大鼠相比,糖尿病大鼠脑组织病理学显示细胞排列紊乱,分布不均,胞体缩小,胞质淡红色,正常形态神经细胞数减少;LC3、Bnip-3及Bax阳性数较对照组明显升高,差异有统计学意义（ P＜0．05）;Bcl-2阳性数较对照组明显降低,差异有统计学意义（P＜0．001）;LC3与Bnip-3呈弱正相关（P＜0．05）,与Bcl-2及Bax不相关;Bnip-3与Bax呈正弱相关（P＜0．05）,与Bcl-2无相关;Bcl-2与Bax无相关。结论糖尿病大鼠脑组织中LC3、Bnip-3及Bax存在过度表达,Bcl-2呈弱表达,表明自噬因子与凋亡因子参与了糖尿病大鼠脑组织损伤的过程,可能是脑组织损伤的机制之一。     

Cyclin D1、PCNA、Ki-67细胞周期相关蛋白在喉复发癌组织芯片中的表达和意义

目的研究Cyclin D1、PCNA、Ki-67细胞周期相关蛋白的表达与喉癌复发的关系,并评价其对预后评估的作用.方法回顾分析1958～1999年喉癌手术病例574例,术后随访3年,确诊术后复发56例;正常喉对照标本39例.标本制成组织芯片,采用免疫组化SABC法,对芯片标本进行染色.结果 Cyclin D1、PCNA、Ki-67在喉癌组织及正常喉组织中均有表达,且在喉癌组织的表达强于正常喉组织(P<0.01),在喉癌复发组强于未复发组(P<0.01),与喉癌复发呈正相关.结论 Cyclin D1、PCNA、Ki-67细胞周期相关蛋白的表达可作为估计喉癌预后的指标.     

氡诱发小鼠肺损伤与P53和Bcl-2、Bax蛋白表达的研究

目的 建立氡染毒小鼠肺损伤模型,观察不同剂量组小鼠肺组织损伤情况,分析氡对P53、Bcl-2、Bax在肺组织中表达的影响。方法 建立氡染毒小鼠模型,使染毒累积剂量分别达到30工作水平月(WLM)和60WLM;采用TUNEL法检测小鼠肺组织细胞凋亡程度;采用免疫组化SP法及Westernblot法,检测各组肺组织P53、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 与正常对照组相比,氡染毒30和60WLM小鼠肺细胞凋亡指数均明显增加(t=18.11、-10.30,P<0.05);氡染毒30WLM组P53蛋白明显增加(t=-11.08,P<0.05);60WLM组P53蛋白和Bax蛋白表达明显增加(t=-7.00、-2.52,P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显下降(t=4.36,P<0.05);氡染毒30和60WLM与对照组相比,Bcl-2、Bax比值均明显下降(t=2.78、4.07,P<0.05)。结论 氡染毒可使小鼠肺损伤,出现肺细胞凋亡,P53、Bcl-2、Bax途径可能参与了肺细胞的凋亡调节。     

P16、P21蛋白表达与肝细胞癌预后的关系

 目的 研究P16、P21蛋白表达与肝细胞癌(HCC)预后的关系.方法 采用免疫组化SABC法染色检测46例HCC组织与38例癌旁组织P16、P21蛋白的表达情况,并分析其与预后的关系.结果 P16蛋白的阳性表达率在HCC(41.3%)显著低于癌旁组织(65.8%)(P＜0.05),P16蛋白阳性表达在术后3年复发组(17.4%)显著低于无复发组(73.7%)(P＜0.01),在3年存活组(64%)显著高于死亡组(11.8%,P＜0.01).P21蛋白的阳性表达率在HCC(19.6%)显著低于癌旁组织(52.6%)(P＜0.01),P21蛋白阳性表达在术后3年复发与无复发组差异无统计学意义,在术后3年存活组与死亡组差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 P16、P21蛋白的表达缺失同HCC的发生密切相关.且P16蛋白表达缺失与HCC的预后相关.P16蛋白的表达缺失是HCC预后的一个可靠因子.     

18F-FDG PET-CT对裸鼠鼻咽癌移植瘤放疗疗效的早期评估及与Ki67表达的相关性研究

Objective To investigate the value of 18F-FDG PET-CT scans on early assessing the therapeutic effects on human nasopharyngeal carcinoma (NPC) xenograft in nude mice after radiotherapy,and preliminarily analyze the relation of 18F-FDG PET-CT scans and the positive expression rate of Ki67, and provide a basis for further clinical studies. Methods Fifteen xenograft nude mice of NPC were randomly divided into three groups (5 nude mice per group). Control group: all mice immediately executed after the 18F-FDG PET-CT scans and taken pathology; 6 Gy radiotherapy group: all mice took 18F-FDG PET-CT scans before and 1 d after receiving 6 Gy irradiation, and were killed immediately to take pathology; 12 Gy radiotherapy group: all mice received 12 Gy irradiation (6 Gy each time, totally 2 times). They took 18F-FDG PET-CT scans before radiotherapy, after receiving the first 6 Gy irradiation, 2 d and 6 d after receiving 12 Gy irradiation respectively ,and then were executed to take pathology after the last scan. The expression of Ki67 in xenografts of different groups was detected and the relation between their changes and T/NT were analyzed.Results ①For 12 Gy radiotherapy group, the average T/NT ratios of the NPC xenograft of pre-radiotherapy, after the first 6 Gy irradiation, 2 d and 6 d after 12 Gy radiotherapy were 2.17±0.31, 1.68±0.42, 1.41±0.40,and 0.70±0.12, respectively. The average T/NT ratios were not statistically difference before and after the first 6 Gy irradiation. The average T/NT ratio of 2 d after radiotherapy decreased significantly than pre-radiotherapy (t=2.80, P<0.05) and after the first 6 Gy irradiation (t=3.14, P<0.05); The average T/NT ratio of 6d after radiotherapy was decreased seriously than 2 d after radiotherapy(t=3.49, P<0.05, compared with preradiotherapy t=8.01, P<0.01). ② The positive expression rates of Ki67 of NPC xenograft markedly decreased after receiving irradiation. There were significant differences in the positive expressions of Ki67 between different group s(F=21.95, P<0.01).The positive expression of Ki67 in the 12 Gy radiotherapy group decreased significantly compared with the control group (t=7.145, P<0.01) and the 6 Gy radiotherapy group (t=2.384, P<0.05). The positive expression of Ki67 in the 6 Gy radiotherapy group was less than the control group, also have statistical significance(t=4.320, P<0.01).③There was no correlation between the T/NT ratio of NPC xenograft and the positive expression of Ki67. ④Positive correlation was found between the variance of T/NT ratio and the variance of the positive expression of Ki67 of NPC xenograft (r=0.532, P<0.05).Conclusions 18F-FDG PET-CT imaging has an important value on early assessing the therapeutic effects of NPC xenograft in nude mice after radiotherapy, and the 6th day after radiotherapy is an appropriate time point.18F-FDG PET-CT imaging can reflect the variance of the positive expression of Ki67 of NPC, and yet indirectly reflect the sensitivity of NPC to radiotheraphy.     

兔肺动脉栓塞再灌注肺泡细胞凋亡及调控基因的实验研究

目的 探讨兔肺动脉栓塞／再灌注损伤中的细胞凋亡及其基因调控机制。方法 健康新西兰白兔36只，雌雄不拘，运用5F Berman球囊堵塞左下肺动脉，然后球囊放气，复制肺动脉栓塞缺血再灌注模型，随机分为6组：对照组，假手术组，肺栓塞1h组、肺栓塞2h组，肺栓塞2h再灌注1h组、肺栓塞2h再灌注2h组。实验结束取肺组织，测定肺组织湿干比，采用流式细胞分析法检测肺组织细胞凋亡率和免疫组织化学法检测肺上皮细胞Bax、Bcl-2、Fas／FasL蛋白表达的变化。结果兔肺动脉栓塞时肺组织细胞凋亡明显增加，再灌注后1h、2h凋亡细胞继续增加，并随着再灌注时间延长而增加（P〈0．05），Bax、Fas及FasL蛋白表达在肺动脉栓塞缺血及再灌注后明显增加（P〈O．01）。肺泡上皮细胞凋亡指数与肺组织湿干比、Bax、Fas、FasL蛋白表达之间存在非常显著的正相关关系（r=0．721，0．806，0．820，0．820；P〈0．01），与Bcl-2、Bcl-2／Bax比值呈显著负相关关系（r=-0．602，-0．829；P〈0．01）。结论肺动脉栓塞／再灌注中诱导肺组织细胞凋亡增加，肺组织细胞凋亡和Bax、Bcl-2，Fas、FasL系统活化可能参与了肺栓塞缺血再灌注肺损伤的发生。