血清钴离子浓度升高对小鼠肝、肾、心脏功能与形态的影响

目的 探讨血清钴离子浓度升高对小鼠肝、肾、心脏功能与形态的影响.方法 将断乳1周的40只雄性ICR小鼠(美国癌症研究所Institute of Cancer Researcch分送各国饲养实验,各国称为ICR小鼠)随机分成4组,即低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组,每组10只.实验组小鼠每天腹腔内分别注射剂量为0.82 mg/kg、1.64 mg/kg和3.28 mg/kg氯化钴溶液(CoCl2);空白对照组腹腔注射灭菌双蒸水.分别于注射后第4天、1、2、3周从每组小鼠眼球采血测定血清中钴离子含量,第1、2、3周测定血液生化指标[谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)]并作各组间的比较.第3周采用摘眼球放血方式将小鼠全部处死取心、肝、肾做病理切片及电镜观察.结果 注射氯化钴溶液后第4天、1、2、3周分别测量血清中钴离子含量,结果显示随着注射剂量的增加,小鼠血清中钴离子含量相应增加,实验组之间比较差异有统计学意义.术后第1、2、3周分别测量血液生化指标,结果显示低、中剂量组AST、ALT、BUN、Cr、CK活性正常,高剂量组AST、ALT、CK与空白对照组比较,随时间的延长氯化钴对肝、心的毒性影响有加重趋势.病理切片及电镜观察显示:各实验组的心、肝出现坏死、凋亡等病理性改变,但肾脏无毒性变化.结论 高剂量的血清钴离子浓度具有肝毒性与心脏毒性,但肾毒性不显著;低、中剂量对肝、心、肾功能与形态无明显影响.     

血清钴离子浓度升高对小鼠肝、肾、心脏功能与形态的影响

目的 探讨血清钴离子浓度升高对小鼠肝、肾、心脏功能与形态的影响.方法 将断乳1周的40只雄性ICR小鼠(美国癌症研究所Institute of Cancer Researcch分送各国饲养实验,各国称为ICR小鼠)随机分成4组,即低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组,每组10只.实验组小鼠每天腹腔内分别注射剂量为0.82 mg/kg、1.64 mg/kg和3.28 mg/kg氯化钴溶液(CoCl2);空白对照组腹腔注射灭菌双蒸水.分别于注射后第4天、1、2、3周从每组小鼠眼球采血测定血清中钴离子含量,第1、2、3周测定血液生化指标[谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)]并作各组间的比较.第3周采用摘眼球放血方式将小鼠全部处死取心、肝、肾做病理切片及电镜观察.结果 注射氯化钴溶液后第4天、1、2、3周分别测量血清中钴离子含量,结果显示随着注射剂量的增加,小鼠血清中钴离子含量相应增加,实验组之间比较差异有统计学意义.术后第1、2、3周分别测量血液生化指标,结果显示低、中剂量组AST、ALT、BUN、Cr、CK活性正常,高剂量组AST、ALT、CK与空白对照组比较,随时间的延长氯化钴对肝、心的毒性影响有加重趋势.病理切片及电镜观察显示:各实验组的心、肝出现坏死、凋亡等病理性改变,但肾脏无毒性变化.结论 高剂量的血清钴离子浓度具有肝毒性与心脏毒性,但肾毒性不显著;低、中剂量对肝、心、肾功能与形态无明显影响.     

血清钴离子浓度升高对小鼠肝、肾、心脏功能与形态的影响

目的 探讨血清钴离子浓度升高对小鼠肝、肾、心脏功能与形态的影响.方法 将断乳1周的40只雄性ICR小鼠(美国癌症研究所Institute of Cancer Researcch分送各国饲养实验,各国称为ICR小鼠)随机分成4组,即低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组,每组10只.实验组小鼠每天腹腔内分别注射剂量为0.82 mg/kg、1.64 mg/kg和3.28 mg/kg氯化钴溶液(CoCl2);空白对照组腹腔注射灭菌双蒸水.分别于注射后第4天、1、2、3周从每组小鼠眼球采血测定血清中钴离子含量,第1、2、3周测定血液生化指标[谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)]并作各组间的比较.第3周采用摘眼球放血方式将小鼠全部处死取心、肝、肾做病理切片及电镜观察.结果 注射氯化钴溶液后第4天、1、2、3周分别测量血清中钴离子含量,结果显示随着注射剂量的增加,小鼠血清中钴离子含量相应增加,实验组之间比较差异有统计学意义.术后第1、2、3周分别测量血液生化指标,结果显示低、中剂量组AST、ALT、BUN、Cr、CK活性正常,高剂量组AST、ALT、CK与空白对照组比较,随时间的延长氯化钴对肝、心的毒性影响有加重趋势.病理切片及电镜观察显示:各实验组的心、肝出现坏死、凋亡等病理性改变,但肾脏无毒性变化.结论 高剂量的血清钴离子浓度具有肝毒性与心脏毒性,但肾毒性不显著;低、中剂量对肝、心、肾功能与形态无明显影响.     

多药耐药基因转染对肝癌小鼠大剂量化疗支持作用

目的观察多药耐药（MDR1）基因保护骨髓进行大剂量化疗杀伤肿瘤及在体内表达情况。方法BALB／C小鼠H22肝癌模型，^60Co-γ照射，移植转染MDR1的骨髓造血细胞后化疗，计数白细胞，测定瘤体大小；外周血、骨髓、脾、肿瘤等行P-糖蛋白免疫组织化学，流式细胞术以及MDR1RT-PCR。PCR检测。结果MDR1转染小鼠白细胞明显较高（P〈0．01），单纯骨髓移植小鼠白细胞前3周高于BC组，第4周后差异无统计学意义；化疗剂量较大抑瘤率高。MDR1转染后肿瘤组织无P-糖蛋白表达；外周血，肾PCR检测有特异条带而RT-PCR检测未发现。结论MDR1保护骨髓支持大剂量化疗可抑制肿瘤生长。外源MDR1仅在骨髓有效表达。     

不同剂量蛇床子素对OPG基因敲除小鼠和去卵巢骨质疏松大鼠作用疗效的比较研究

目的 观察不同剂量蛇床子素对OPG基因敲除小鼠和去卵巢骨质疏松大鼠的影响。方法 选择3种不同剂量的蛇床子素作用于OPG基因敲除小鼠和去卵巢骨质疏松大鼠,以双能X骨密度仪检测动物全身骨密度的变化;将动物腰椎做硬组织切片,并进行骨形态计量学分析其骨小梁的变化。结果 对于OPG基因敲除小鼠,蛇床子素能提高其全身BMD,以中剂量（10mg/（kg?d））组提高最为明显,低剂量（5mg/（kg?d））次之,而高剂量（15mg/（kg?d））组效果最差。蛇床子素能提高OPG基因敲除小鼠腰椎骨小梁体积分数,增加骨小梁数目,增加骨小梁厚度,降低骨小梁分离度,其中以5mg/(kg?d)组作用最明显,其次为10mg/(kg?d)组,而15mg/(kg?d)组则效果最差;对于去卵巢骨质疏松大鼠,不同剂量的蛇床子素均能显著提高大鼠全身BMD,其中以中剂量（100mg/（kg?d））组为最佳。蛇床子素能显著提高大鼠腰椎骨小梁体积分数,以100mg/（kg?d）组最明显。显著增加大鼠腰椎骨小梁数目,以75mg/（kg?d）组最明显。蛇床子素100mg/（kg?d）组能增加大鼠腰椎骨小梁厚度。不同剂量的蛇床子素均能显著降低大鼠腰椎骨小梁分离度,其中以75mg/（kg?d）组和100mg/（kg?d）组最明显。结论 蛇床子素能促进骨形成,抑制骨吸收,从而起到抗骨质疏松的作用,其疗效与给药剂量密切相关。     

吗啡对小鼠血清IL-6和NK细胞活性的影响

目的 探讨不同剂量吗啡对小鼠血清IL－6、NK细胞活性的影响。方法 选择BABL／C小鼠,随要分组。第一部分为6组,其中4组分别注射不同剂量的吗啡,另2组为完全空白对照组,生理盐水对照组,第二部分将小鼠分为5组,1－4组先注射不同剂量纳洛酮,15min后每组半数小鼠注射纳洛酮（30mg/kg）,余下的半数小鼠注射生理盐水。第5组是小鼠先注射吗啡（30mg/kg),15min后注射纳洛酮（1mg/kg)。检测血清IL－6、NK细胞活性、脾细胞cAMP含量。结果 第一部分：与对照组相比：①腹腔注射吗啡100mg/kg使IL－6明显增加;②3mg/kg吗啡即可使小鼠的NK细胞活性明显降低;③腹腔注射吗啡30mg/kg、100mg/kg使小鼠cAMP明显降低。第二部分：①注射纳洛酮和吗啡与同浓度纳洛酮加生理盐水组相比,IL－6含量没有明显改变;②纳洛酮0．1mg/kg不能拮抗吗啡NK细胞活性的抑制;而纳洛酮1.0mg/kg,10mg/kg能增加NK细胞的活性,但与对照组相比没有明显差别;③纳洛酮1.0mg/kg,10mg/kg可拮抗吗啡对cAMP的抑制作用;④不同注射顺序吗啡和纳洛酮的对IL－6和cAMP无影响,但先注射吗啡,后注射纳洛酮对NK活性的抑制较轻。结论 吗啡对小鼠的免疫功能的调节作用,大剂量使IL－6含量明显增加,纳洛酮没有明显的拮抗作用;小剂量吗啡即可使NK细胞活性受到抑制,且呈剂量依赖性,但纳洛酮不能反转抑制;cMAP降低呈吗啡剂量依赖性,纳洛酮对此拮抗作用,也呈剂量依赖性。后注射纳洛酮对NK细胞活性抑制要明显低于先注射纳洛酮组。     

异丙酚条件性位置偏爱效应形成的神经机制

目的 异丙酚是否可引起精神依赖性尚不清楚,本研究利用条件性位置偏爱实验模型评价异丙酚的精神依赖性。方法　48只小鼠分成4组,分别给予不同剂量的异丙酚（0,50mg/kg、75mg/kg和100mg/kg）,在腹腔注射后,观察条件性位置偏爱箱停留的时间,判断小鼠精神依赖的情况。应用免疫组化的方法检测小鼠中枢不同脑区即刻早基因（c-fos）的表达水平。结果　50mg/kg和100mg/kg异丙酚组伴药盒有位置偏爱的趋势,仅75mg/kg组于伴药盒位置偏爱停留箱停留时间（214±72）s与正常组（121±49）s有明显差异（P<0.01）。应用免疫组化技术观察75mg/kg组小鼠中枢额前叶皮质和梨状皮质c-fos基因表达呈阳性。结论 异丙酚具有一定的成瘾性,但与以往经典的伏隔核-腹侧被盖多巴胺奖赏系统无关,可能存在其它新的传导通路。     

小鼠隐睾动物模型中CGRP的表达变化

目的 通过氟他胺(Flutamide,FLU)诱导小鼠隐睾动物模型的建立,探索其睾丸组织中降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP) mRNA表达的变化.方法 将妊娠BALB/c小鼠随机分成A、B、C、D、E5组;在母鼠孕第12～21d持续10d给予A、B、C、D、E5组氟他胺灌胃,剂量依次为0mg/kg、150mg/kg、300 mg/kg、500 mg/kg、700 mg/kg,A组为空白对照组;在出生后第8周时运用Real-Time PCR技术检测子代小鼠睾丸组织中CGRP mRNA的表达情况及单侧隐睾小鼠中患侧与健侧睾丸CGRP mRNA的表达情况.结果 A组小鼠无隐睾,B、C组有单侧隐睾;D、E组有双侧隐睾的发生.与对照组相比,随着给药剂量的增大,CGRP mRNA的表达强度明显低于对照组(P＜0.01).单侧隐睾小鼠中患侧和对侧睾丸的CGRPmRNA均减少(P＜0.05).结论 剂量为150mg/kg与300 mg/kg的氟他胺能诱导产生单侧隐睾模型,剂量为500与700 mg/kg的氟他胺能诱导产生双侧隐睾模型;单侧隐睾小鼠中双侧睾丸均有损害;CGRP是隐睾产生过程中一个重要的影响因素.     

小鼠无精子症动物模型的构建

目的:建立一种稳定的小鼠无精子症动物模型。方法:60只清洁级C5BL/6小鼠,分为化疗组(1次性腹腔注射白消安10mg/kg体重、环磷酰胺120mg/kg体重)、激素组(每日皮下注射苯甲酸雌二醇40mg/kg,连续注射15d),每组30只。注射后4、12、20周,观察小鼠睾丸生精小管结构的变化以及终止干预后生精功能恢复的情况。结果:化疗组化疗后第4周,睾丸生精小管内精子及精子细胞消失,20周时仍保持无生精状态;激素组连续注射苯甲酸雌二醇后第4周,生精小管内精子及精子细胞消失,但20周时部分生精小管内可以找到精子细胞和精子。化疗组小鼠睾丸重量明显低于激素组(P<0.05)。结论:经过化疗处理的小鼠无精子症模型稳定,雌二醇皮下注射的无精子症模型形成慢而不稳定。相对于雌激素注射方法,化疗是构建小鼠无精子症动物模型比较可靠的方法。     

白消安致小鼠精子再生模型的精子发生量化评价

目的:量化评价白消安二次腹腔注射制备的小鼠精子再生模型。方法:54只8～10周龄雄性昆明白小鼠随机分为对照组和两个模型组,每组18只。模型组小鼠分别以10mg/kg和15mg/kg白消安间隔24d二次腹腔注射建立精子再生模型,对照组小鼠以50%二甲基亚砜溶液10ml/kg间隔24d二次腹腔注射。采用Johns-en评分量化给药后3、4和8周时生精上皮精子发生,运用实时定量PCR技术检测这3个时期支持细胞GATA结合蛋白4(GATA-4)mRNA和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA表达水平。结果:对照组Johnsen评分在各时期无显著差异(P>0.05)。给药后3周和4周,两模型组Johnsen评分均显著低于对照组(P<0.01);给药后4周和8周,15mg/kg组Johnsen评分均低于10mg/kg组(P<0.05);给药后8周,15mg/kg组Johnsen评分仍显著低于对照组(P<0.05),而10mg/kg组和对照组间无显著差异(P>0.05)。各组各时期支持细胞GATA-4mRNA表达均无显著差异(P>0.05)。对照组各时期支持细胞GDNF mRNA表达无显著差异(P>0.05)。两模型组支持细胞GDNF mRNA表达在给药后3周均高于对照组,而在给药后4周均低于对照组(P<0.01);给药后8周,15mg/kg组支持细胞GDNF mRNA表达低于对照组(P<0.01),而10mg/kg组与对照组无显著差异(P>0.05)。在以上3个时期,15mg/kg组GDNF mRNA表达均低于10mg/kg组(P<0.01)。结论:10mg/kg白消安间隔24d二次腹腔注射是建立小鼠精子再生模型的适宜剂量,增大剂量可使支持细胞GDNF mRNA表达不足,导致精子发生不能完全恢复。     

溴隐亭联合肿瘤坏死因子-α对人肝癌耐药细胞株化疗敏感性的影响

目的 研究溴隐亭联合肿瘤坏死因子-α（TNF—α）基因处理人肝癌耐药细胞株HepG2／ADM后对其化疗敏感性的影响。方法 脂质体转染TNF-α基因至肝癌耐药细胞HepG2／ADM;实验分4组：空白对照组HepG2（A组）、耐药组HepG2／ADM（B组）、转染TNF—α基因组（C组）及联合溴隐亭和TNF—α组（D组）;流式细胞仪检测各组罗丹明123细胞内潴留率变化、四唑盐比色法（MTT）检测C、D两组细胞耐药指数及用免疫组织化学染色、Western blot和RT—PCR方法测定各组PKC-α、P-gP蛋白、MDR1 mRNA表达的变化,流式细胞仪检测Bcl-2蛋白的表达,AnnexinV-FITC,PI双标检测各组肿瘤细胞化疗后凋亡的变化。结果 MTT测定C、D两组之间耐药逆转率有显著差异（P〈0.01）,罗丹明123潴留率实验发现C、D两组均能明显增强其潴留作用且两组差异有统计学意义（P〈0．01）;P-gP蛋白和MDR1基因表达显示C、D两组之间MDR1基因和P—gp蛋白的表达无统计学意义（P〉0．05）,但C、B两组之间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;PKC—α蛋白表达在D组明显下调（P〈0．01）;B组细胞Bcl-2蛋白表达明显增强,C、D两组细胞Bcl-2蛋白表达明显下调,与A组比较均有统计学意义（P〈0．01）,但C、D两组细胞Bcl-2蛋白表达无统计学意义（P〉0．05）。细胞凋亡率C、D两组比较有统计学意义（P〈0．01）,D、A两组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论 溴隐亭和TNF—α通过不同的机制逆转肿瘤的多药耐药性,两者联合明显加强抗肿瘤药物对细胞的毒力。     

活性纳米羟基磷灰石复合胶原/聚乳酸材料修复颅骨极限缺损的实验研究

目的检测重组人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein2,rhBMP-2)与纳米羟基磷灰石/胶原/聚乳酸(nano-hydroxyapatite/collagen/polylactic acid,nHAC/PLA)复合后形成的活性nHAC/PLA(active nHAC/PLA,AnHAC/PLA)修复颅骨极限缺损的效果。方法新西兰大白兔48只,体重2.0～2.5kg。制备直径为15mm的颅骨全层缺损模型,随机分成4组,每组12只。阳性对照组:缺损区植入自体髂骨;空白对照组:缺损区不植入任何材料;阴性对照组:缺损区植入nHAC/PLA;实验组:缺损区植入AnHAC/PLA,每块AnHAC/PLA上平均吸附rhBMP-21.431mg。术后8、16周通过比较颅骨缺损区X线阻射面积占总缺损面积百分比、HE染色和Masson's三色法染色观察颅骨极限缺损的修复情况。结果术后8、16周,各组颅骨缺损区X线阻射程度,阳性对照组分别为67.21%±2.06%、86.48%±1.73%,空白对照组分别为5.84%±1.92%、9.48%±2.72%,阴性对照组分别为19.13%±2.51%、35.67%±3.28%,实验组分别为58.84%±2.55%、85.61%±3.36%。其中除16周实验组与阳性对照组以及空白对照组8、16周比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余各组各时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学观察显示,阳性对照组骨缺损区16周骨小梁较8周增宽,被大量骨组织充填;空白对照组8、16周骨缺损区均被纤维组织充填,无新骨生成;阴性对照16周骨缺损区为剩余材料与纤维组织充填,周边新骨较8周形成增多;实验组8周材料植入区为新生骨替代,16周新生骨呈板层状,缺损区材料残留较少,且周围可见较多成骨细胞。结论nHAC/PLA是rhBMP-2的良好载体,两者复合后制备的AnHAC/PLA具有良好骨形成能力,有望应用于临床上修复较大型骨缺损。     

人肿瘤坏死因子α联合溴隐亭对人肝癌裸鼠耐药模型耐药性逆转的研究

目的探讨人肿瘤坏死因子α(TNFα)联合溴隐亭(BCT)对人肝癌裸鼠耐药模型耐药性的逆转作用。方法将人肝癌细胞系HepG2及其经阿霉素(ADM)诱导建立的耐药细胞系HepG2ADM和转染TNFα基因后的耐药细胞系HepG2ADMTNFα分别原位种植BALB/C裸鼠肝脏,建立裸鼠原位肝移植瘤模型。64只裸鼠分为4组:HepG2组(HepG2细胞系种植瘤裸鼠),ADM组(HepG2ADM细胞系种植瘤裸鼠),TNFα组(HepG2ADMTNFα细胞系种植瘤裸鼠)和BCT组(HepG2ADMTNFα细胞系种植瘤裸鼠同时口服BCT),成瘤后均给以每天腹腔内注射0.15g/kg的氟脲嘧啶+1.5mg/kg的丝裂霉素+10mg/kg的ADM,连续3d;BCT组化疗的同时另行BCT灌胃治疗(6.25mg·kg-1·d-1)。B超观察种植瘤的大小变化,病理观察组织学结构及裸鼠生长状况和对化疗药物的敏感性。采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测各组种植瘤的多药耐药相关基因(MDR1)和肺耐药相关蛋白(LRP)在mRNA水平、蛋白水平的变化,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测化疗后肿瘤组织凋亡指数情况。结果细胞系原位种植裸鼠肝脏成功率100%,种植瘤组织学特点符合人肝癌特征;TNFα组和BCT组种植瘤生长速度慢,与HepG2和ADM两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。化疗14d后,BCT组重量抑瘤率(67%)最明显,与HepG2、TNFα和ADM3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4组均有MDR1和LRPmRNA表达,组间差异具有统计学意义(P<0.05);免疫组化显示TNFα和BCT组肿瘤组织MDR1蛋白表达比ADM组低,差异具有统计学意义(P<0.01),与HepG2组比较差异无统计学意义(P>0.05);BCT、TNFα组凋亡指数比ADM组高(P<0.05),且TNFα和BCT两组之间差异亦有统计学意义(P<0.05),但与HepG2组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论TNFα基因能下调MDR1和LRPmRNA及蛋白表达,联合BCT能加强对化疗药物的敏感性。     

激素性股骨头坏死过程中骨矿物盐的变化

目的：探讨骨矿物盐在激素性股骨头坏死发病过程中改变的意义。方法：选用50只健康成年新西兰大白兔,随机分为2组。激素造模组每周一次臀肌注射甲基强的松龙（辉瑞生物）4mg／kg,至第8周末停药,该组动物分别在四个不同时间段处死。正常对照组每周一次臀肌注射等量生理盐水,上述各组动物均肌内注射青霉素钠15万u／只,每周2次预防感染。各组分别于处理后的第2、4、8、10周测定股骨头及股骨颈的骨密度,并检测血清钙、磷水平,同时观察其体重、精神、毛发情况等一般指标变化。结果：与正常对照组比较,激素造模组动物造模1周后体重开始进行性下降,股骨颈骨密度从第2周开始、股骨头骨密度从第4周开始显著下降（P〈0．05,P〈O．01）,且激素造模组10周时股骨颈骨密度明显低于第8周时（火0．05）。与正常对照组比较,激素造模组血清钙、磷水平均从第2周开始即显著显著降低（火0．05,P〈O．01）,且激素造模组10周时血清钙水平明显低于第8周时（P〈0．05）。结论：本次实验发现,给予激素后,动物模型中的股骨头坏死迅速出现。激素性股骨头坏死与股骨头、颈骨密度降低及骨矿物盐平衡的破坏有关。     

不同剂量普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度和生化指标的影响

目的 观察盐酸普萘洛尔片对于去卵巢大鼠骨密度（BMD）、骨代谢标志物的影响。方法 将60大鼠随机分组：假手术组,模型空白组（生理盐水）,高剂量组[20mg/（kg.d）],中等剂量组[5mg/(kg.d）],低剂量组[1mg(/kg.d）]。假手术组在卵巢附近切除等量脂肪组织,其余各组行双侧卵巢摘除手术,术后3个月后,检测骨密度,之后,假手术组和模型空白组给予生理盐水,其余根据剂量不同每日给予大鼠灌胃相应剂量普萘洛尔水溶液。分别于第4周和第8周,检测各组BMD及骨代谢生化指标。结果 假手术组均高于各组（P＜0.01）,低剂量和中等剂量组高于高剂量组和生理盐水组（P＜0.05）,高剂量组与生理盐水组无统计学差异（P＞0.05）。结论 低剂量的普萘洛尔对于骨质疏松大鼠模型,可抑制骨量丢失,增加成骨细胞活性。高剂量的普萘洛尔对于骨量调节不明显。     

Numb基因上调对人肾细胞癌细胞周期和增殖的影响

目的 研究Numb基因上调对人肾细胞癌的细胞周期和增殖能力的影响及相关机制.方法 选取人肾细胞癌细胞786-O为研究对象,使用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照及空白对照组.采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组Numb基因和肿瘤增殖抗原Ki-67的表达;采用流式细胞技术检测细胞周期,计算G0/G1期细胞比例、增殖指数(PI)和S期分数(SPF);以MTS法检测细胞的增殖活力.结果 实验组Numb的相对表达水平为(18.97±1.49),显著的高于阴性对照组(3.34±0.41)和空白对照组(3.21±0.39);实验组Ki-67的相对表达水平为(4.31 ±0.58),明显少于阴性对照组(10.35±0.84)和空白对照组(9.89±0.73),差异有统计学意义(P＜0.01).细胞周期检测:实验组中G0/G1期细胞的比例(％)为60.47±1.58,明显高于阴性对照组(49.67±1.97)和空白对照组(52.52±2.47)(P＜0.01).实验组的PI和SPF均低于两对照组(P＜0.01).增殖检测:实验组在24、48、72h的吸光度(A)值均低于两对照组(P＜0.01).结论 在786-O细胞中上调Numb基因可以抑制Ki-67的表达,减低细胞的PI和SPF,促使细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞的增殖活力,实验结果提示Numb基因在肾细胞癌中可能发挥抑癌因子作用.     

Evaluation of long-term sequential changes in bone mass and strength following withdrawal of incadronate disodium (YM175) in ovariectomized rats

We evaluated the long-term effects of withdrawal of a newer third-generation bisphosphonate, incadronate disodium (YM175), on both cancellous and cortical bone mass and strength in ovariectomized (OVX) rats. One hundred and sixty female SD rats at 13 weeks of age were randomized into four groups: sham-operated, OVX, and low- and high- YM (0.01 or 0.1 mg/kg s.c., three times a week after OVX). After 4 weeks of treatment with vehicle or incadronate disodium, rats from each group (n = 8) were killed at 0 (baseline), 3, 6, 9, and 12 months after the withdrawal of YM175. Histomorphometric studies of the proximal tibia revealed a dose-dependent decrease in OVX-induced bone turnover; cancellous bone volume was significantly higher in the YM groups compared with the OVX control group up to 6 months after withdrawal at low dose and up to 12 months after withdrawal at high dose. The low-dose group showed little effect on tibial diaphyseal cortical bone volume and width, while the high-dose group preserved both cortical parameters 12 months after withdrawal. Mechanical testing of femurs revealed that both metaphyseal and diaphyseal strengths were significantly higher at high dose compared with the OVX group until 12 months after withdrawal. These observations demonstrated that high-dose incadronate disodium preserved both cancellous and cortical bone mass and strength in OVX rats for 12 months after withdrawal of the agent. Received: July 7, 2000 / Accepted: October 3, 2000     

皮瓣重建阴囊对家兔生殖功能的影响

目的 通过检测皮瓣重建阴囊后睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,以探讨皮瓣重建阴囊后对兔生殖功能的影响.方法 以育龄期新西兰大白兔作为实验动物,雄性动物随机分为实验组(皮瓣重建阴囊组)48只、对照组(皮瓣重建阴囊假手术组)24只和空白组18只.建模后的第3～8周末应用原位末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡和免疫组织化学法(SABC法)检测PCNA表达情况;第8周末各组分别对未取睾丸活检的12只雄性家兔与雌兔配对喂养,观察生育情况.结果 凋亡检测结果 :空白组正常睾丸生精细胞的凋亡指数为7.73±4.95.在第3周末实验组凋亡指数为22.59 4-3.04,对照组为21.13±1.68;在第8周末实验组凋亡指数为71.85±2.69.对照组为13.64±2.09.实验组在重建阴囊后3～8周内随着时间延长生精细胞凋亡指数逐渐增加,其凋亡指数明显高于空白组(P＜0.05);在第3周末实验组与对照组凋亡指数比较差异无统计学意义(P＞0.05);在第8周末实验组与对照组凋亡指数比较差异具有统计学意义(P＜0.05);第3周末对照组凋亡指数与空白组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);第8周末对照组凋亡指数与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).PCNA检测即增殖指数检测结果 :空白组正常睾丸生精细胞的增殖指数为43.07±2.25.第3周末及第4周末实验组增殖指数分别为9.32±9.30及12.52±3.87,对照组第3周末为45.69±4.98,实验组第3、4周末增殖指数分别与对照组第3周末及空白组增殖指数比较差异具有统计学意义(P＜0.05);实验组第7周末及第8周末增殖指数分别为46.98±18.92及49.53±9.79,对照组在第8周末为39.90±5.10,实验组第7、8周末增殖指数分别与对照组第8周末及空白组增殖指数比较差异无统计学意义(P＞0.05);对照组增殖指数在第3周末和第8周末分别与空白组增殖指数比较差异均无统计学意义(P＞0.05).配对结果 :空白组、对照组配对后对应母兔均受孕生崽,平均生崽数分别为(6.0±1.28)只、(5.92±1.31)只,两组生崽数差异无统计学意义(P＞0.05);实验组配对后对应母兔均未受孕,与空白组和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 皮瓣重建阴囊导敛的家兔生殖功能障碍主要是由于生精细胞的过度凋亡所致,生精细胞的增殖能力仪在重建阴囊早期受到一定的影响.而后期则无明显受损表现.     

珍珠层聚乳酸人工骨复合成骨细胞体内异位成骨研究

目的探讨珍珠层聚乳酸(nacre／polylactic acid，N／P)人工骨与同种异体成骨细胞复合，植入体内后异位成骨的作用机制，以及作为骨组织工程支架材料的可行性。方法成年雄性新西兰大白兔18只，按2、4和8周3个时间点随机分成3组，每组6只。将体外培养的同种异体新西兰大白兔成骨细胞，种植到N／P人工骨材料上，并植入每只兔左侧背部皮下为实验组；以不复合成骨细胞的N／P人工骨材料植入右侧背部皮下作对照，分别于植入后不同时间点取材，经大体观察、组织学检查和免疫组织化学方法检测。结果实验组2周时材料周围有少许炎性细胞聚集，4周时有类骨质形成，8周时有成熟骨组织形成，其中可见骨髓腔；对照组2、4周时仅见大量纤维组织长入材料内，8周时材料内纤维组织增多，但无成骨发生。结论N／P人工骨可作为理想的骨组织工程支架材料。