microRNA-145的表达量对子宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的探究microRNA-145(miR-145)的表达量对Hella细胞侵袭及迁移能力的影响。方法将实验室连续传代培养的Hela细胞分为两组:转染miR-145的实验组和转染miR-145模拟物的阴性对照组,进行肿瘤细胞侵袭实验及肿瘤细胞迁移实验,分析miR-145的高表达与Hela细胞侵袭和迁移能力的关系。结果 miR-145在Hela细胞中高表达,与Hela细胞的迁移、侵袭能力的降低存在相关性(P<0.05)。结论 miR-145在宫颈癌发展过程中可以抑制宫颈癌细胞的侵袭、迁移。可用作宫颈癌的基因靶向治疗及预后的评测指标。     

宫颈癌组织中角质细胞生长因子受体的表达以及对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移能力的影响

目的 探讨宫颈癌组织中角质细胞生长因子受体(KGFR)的表达以及对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力的影响。 方法 选取2017年1月－2018年4月郑州中心医院保存的宫颈癌组织标本52例(宫颈癌组),同时选取正常宫颈组40例作为对照组,采用免疫组化染色法检测KGFR表达;选取宫颈癌Hela细胞株,随机分为对照组、空白shRNA组和KGFR-shRNA组,其中空白shRNA组转染空白慢病毒载体,KGFR-shRNA组转染沉默KGFR表达的慢病毒载体,采用RT-PCR和Western blot检测Hela细胞KGFR mRNA和蛋白表达,CCK-8检测Hela细胞增殖情况,Transwell细胞迁移实验检测Hela细胞迁移能力。 结果 宫颈癌组KGFR阳性表达率为76.92%,明显高于对照组(χ²=54.438,P＜0.05);宫颈癌TNM分期Ⅲ期患者KGFR阳性表达率为100.00%,明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(χ²_校正=5.183,P＜0.05);宫颈癌中低分化患者KGFR阳性表达率为91.89%,明显高于高分化患者(χ²_校正=13.399,P＜0.05);KGFR-shRNA组的KGFR mRNA和蛋白相对表达量分别为(0.354±0.065)和(0.603±0.122),明显低于对照组和空白shRNA组(P＜0.05);KGFR-shRNA组培养24、48、72 h细胞OD值明显低于对照组和空白shRNA组(P＜0.05);KGFR-shRNA组穿膜细胞数分别为(53.11±7.49)个,明显低于空白shRNA组和对照组(P＜0.05)。 结论 宫颈癌组织中KGFR表达上调,与患者临床病理特征有一定关系;KGFR表达沉默可抑制宫颈癌Hela细胞的增殖和迁移能力。     

转染YAP蛋白对宫颈癌细胞株Hela、SiHa增殖、迁移能力的影响研究

目的探究转染YAP蛋白对宫颈癌细胞株Hela、SiHa增殖、迁移能力的影响。方法对宫颈癌Hela、SiHa细胞株进行培养,建立稳定转染的YAP-shRNA实验组及空载质粒组。采用Real Time-PCR法、Werstern Blot法、MTT实验、Transwell小室实验、流式细胞仪分别检测YAP基因表达、YAP蛋白表达、细胞增殖能力、细胞迁移能力以及细胞周期及凋亡情况。结果 Hela细胞及SiHa细胞中YAP转染组YAP蛋白及YAP mRNA表达水平均明显降低,与空载质粒组比较差异有统计学意义(P0. 05);细胞培养24 h、48 h、72 h后,YAP转染组较空白对照组及空载质粒组细胞吸光度(A)值明显降低,而空转组及未处理组生长曲线接近一致,且随着培养时间延长,其抑制作用越明显(P0. 05); YAP转染组穿孔细胞数较空载质粒组及对照组明显减少(P0. 05); YAP转染组与空载质粒组及对照组比较,G1期细胞比例增加,G2期细胞比例减少,细胞被阻滞于G1期,YAP转染组Hela、Siha细胞凋亡率显著高于空载质粒组及对照组(P0. 05)。结论 YAP蛋白转染可以有效降低宫颈癌细胞株Hela、SiHa中YAP蛋白及YAP mRNA表达水平,抑制宫颈癌细胞株Hela、SiHa增殖、迁移能力,提高Hela、Siha细胞凋亡率,对宫颈癌的治疗有重要的参考价值。     

PTEN抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231体外增殖及其机制的探讨

目的:观察PTEN对乳腺癌细胞MDA-MB-231体外增殖和迁移的影响,进一步探讨其可能机制.方法:选用人乳腺癌细胞MDA-MB-231并体外培养,质粒转染技术建立过表达PTEN的稳定细胞株MDA-MB-231/PTEN作为实验组,空载体细胞株MDA-MB-231/pcDNA3.1作为阴性对照组,以未转染细胞为正常对照组,RT-PCR检测各组细胞PTEN的表达水平,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖能力,Transwell小室迁移实验检测各组MDA-MB-231细胞的迁移能力.结果:PTEN在MDA-MB-231/PTEN细胞中表达稳定,且其表达量明显高于阴性对照组和正常对照组,而阴性对照组和正常对照组PTEN表达量差异无统计学意义.转染PTEN基因可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移能力.结论:PTEN与乳腺癌的增殖和迁移有关,对乳腺癌细胞的体外增殖和迁移能力起到抑制作用.     

siRNA干扰△Np63基因表达对人宫颈癌Siha细胞增殖及凋亡影响研究

目的 通过抑制宫颈癌细胞株Siha中△Np63的表达,探讨△Np63对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 将宫颈癌细胞株Siha分为实验组和对照组,实验组转染△Np63的特异性siRNA,对照组转染阴性对照siRNA.实时荧光定量PCR(QRT-PCR)及蛋白质印迹法检测Siha细胞转染前后△Np63基因在mRNA及蛋白水平的变化;CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 实验组Siha细胞转染siRNA后,△Np63的mRNA表达为0.32±0.06,低于阴性对照组0.95±0.08(t=10.92,P＜0.05).实验组Siha细胞转染siRNA后,△Np63的蛋白表达为0.32±0.09,低于阴性对照组1.00±0.06(t=9.78,P＜0.05).实验组Siha细胞生长速度明显低于阴性对照组,实验组Siha细胞凋亡率为2.13±0.75,低于阴性对照组14.19±1.36(t=15.36,P＜0.05).结论 人宫颈癌细胞株中存在△Np63的表达,特异性siRNA可下调宫颈癌细胞株Siha中△Np63基因的表达,对细胞的增殖具有负性调节作用,并能诱导细胞凋亡.     

CPEB4沉默对宫颈癌Siha细胞的增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨胞质聚腺苷酸化物结合蛋白4 (CPEB4)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌Siha细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采集本院2017年5月—2018年5月42例宫颈癌患者手术切除的癌变组织及其正常癌旁组织,采用实时定量PCR和Western blot方法检测宫颈癌及其癌旁组织中CPEB4的表达;采用siRNA转染沉默宫颈癌Siha细胞中CPEB4的表达,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测P53、Twist1的蛋白表达。结果与癌旁组织相比,宫颈癌组织中CPEB4 mRNA和蛋白表达均显著上调;转染CPEB4 siRNA的Siha细胞增殖活性减弱,迁移和侵袭能力均显著下降(P0.05),且细胞中P53蛋白表达上调、Twist1蛋白表达显著下调(P0.05)。结论 CPEB4在宫颈癌中高表达,可能通过调控P53和Twist1的表达影响宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭,有望成为宫颈癌诊断标志物及潜在的治疗靶点。     

miR-494通过抑制SIRT1表达调节人宫颈癌Hela细胞系增殖和迁移

目的观察宫颈癌组织中miR-494的表达情况及其对宫颈癌细胞系Hela增殖和迁移的影响,并对其相关机制进行初步的分析。方法 RT-PCR方法检测miR-494在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达情况。克隆形成实验检测miR-494对宫颈癌细胞系Hela增殖能力的影响;划痕实验检测miR-494对宫颈癌细胞系Hela迁移能力的影响。Target Scans软件预测miR-494可能的靶基因,并采用荧光素酶报告基因实验验证预测的靶基因。Western blot方法检测miR-494对预测靶基因表达的影响。结果 miR-494在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中的表达较正常组织相比显著降低(P0.01)。转染miR-494可显著抑制Hela细胞的增殖和迁移能力(P0.01),而转染anti-miR-494可增加Hela细胞的增殖和迁移能力(P0.01)。Targetsscan软件预测miR-494可能的靶基因为去乙酰化酶1(sirtuin 1,SIRT1),且得到荧光素报告实验结果证实。Western blot结果显示转染miR-494可显著抑制Hela细胞中SIRT1的表达(P0.01),而转染anti-miR-494可增加Hela细胞中SIRT1的表达(P0.01)。结论 miR-494可通过调节SIRT1的表达而发挥宫颈癌抑制作用。     

下调FoxM1 mRNA对子宫颈癌细胞的增殖及侵袭能力的影响

目的探讨宫颈癌细胞中叉头框转录因子(Fox M1) mRNA表达下调对其增殖、侵袭能力的影响。方法采用RNA干扰技术(si Fox M1)下调子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha中的Fox M1 mRNA表达为干扰处理组,未经si FoxM1处理的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha作为对照组,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法(Westren-blot)检测转染24 h后两组Fox M1 mRNA、蛋白的表达情况,采用四甲基偶氮唑蓝染色观察两组转然后的细胞增殖能力,采用Transwell方法检测转染48 h后细胞的侵袭能力。结果 si Fox M1转染处理24 h后,干扰处理组的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha中的Fox M1 mRNA及蛋白表达水平均低于对照组(P<0. 05); si Fox M1转染处理48 h后,干扰处理组的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha增殖能力均低于对照组(P<0. 05); si Fox M1转染处理48 h后,干扰处理组的子宫颈癌细胞系C33A、Hela及Siha中的穿透Transwell小室的细胞数均低于对照组(P<0. 05)。结论宫颈癌细胞中Fox M1 mRNA表达下调可以抑制肿瘤细胞的增殖及侵袭能力。     

RNA干扰STIM1基因表达抑制宫颈癌细胞增殖侵袭及Wnt/β-catenin信号通路的机制研究

目的探讨抑制宫颈癌基质相互作用蛋白分子1(STIM1)基因表达对癌细胞增殖侵袭及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法人宫颈鳞癌siha细胞分为空白对照组、阴性对照组和STIM1-siRNA组,通过RT-PCR及WesteRnbloting检测STIM1的siRNA转染细胞48h的效果;CCK8法于转染的24h、48h和72h检测各组细胞的活力;TRanswell小室检测转染48h的各组细胞的侵袭能力;WesteRnbloting检测增殖蛋白细胞增殖核抗原(PCNA)、侵袭蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及Wnt/β-catenin信号通路的β-连环蛋白(β-catenin)和c-myc的蛋白表达。结果TIM1-siRNA组STIM1的mRNA及蛋白相对表达量均显著低于空白对照组(P<0.05),而空白对照组和阴性对照组间STIM1的mRNA及蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);STIM1-siRNA转染细胞24h的细胞活力无明显变化,转染48h和72h后的细胞活力均显著低于空白对照组(P<0.05);与空白对照组比较,STIM1-siRNA组细胞侵袭能力显著降低,PCNA、MMP-2、β-catenin、c-myc的蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论抑制宫颈癌细胞STIM1基因表达可通过下调Wnt/β-catenin信号通路降低癌细胞的增殖及侵袭能力。     

黄芪多糖通过JAK-STAT信号通路对宫颈癌细胞增殖迁移及侵袭的调控机制

目的探讨分析黄芪多糖通过JAK-STAT信号通路对宫颈癌细胞增殖、迁移侵袭调控机制研究。方法取对数生长的宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测不同浓度黄芪多糖(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0) mg/ml分别作用24 h、48 h、72 h对Hela细胞增殖抑制作用;采用划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验检测黄芪多糖对宫颈癌Hela细胞迁移、侵袭能力抑制作用;采用Western blot法检测黄芪多糖处理后宫颈癌Hela细胞SHP2、SOCS3、PIAS1蛋白表达含量。结果与对照组相比较,不同浓度黄芪黄多干预Hela细胞24 h、48 h、72 h均具有着显著的增殖抑制作用,并且抑制作用呈剂量和时间依赖性:同一药物浓度,作用时间越长,Hela细胞增殖抑制率越高;相同作用时间,药物浓度越高,Hela细胞增殖抑制率越高。黄芪多糖干预后,宫颈癌Hela细胞伤口愈合速度慢于对照组,48 h后对照组细胞基本完全愈合,而黄芪多糖组细胞伤口在48 h仍未愈合。黄芪多糖处理后Hela细胞迁移数明显降低(P0.05),且随着黄芪多糖浓度增加细胞迁移数明显降低(P0.05)。黄芪多糖处理后Hela细胞侵袭数明显降低(P0.05),且随着黄芪多糖浓度增加细胞侵袭数明显降低(P0.05)。不同浓度黄芪多糖作用Hela细胞随黄芪多糖浓度的增高SHP2、SOCS3蛋白相对表达量明显升高(P0.05),PIAS1蛋白相对表达量明显无明显变化(P0.05)。结论黄芪多糖对宫颈癌Hela细胞增殖具有明显的抑制作用,且其抑制作用呈显著的浓度-时间依赖性,同时黄芪多糖可有效抑制宫颈癌Hela细胞的迁移和侵袭,其作用机制可能与上调宫颈癌Hela细胞SHP2、SOC3蛋白表达,抑制JAK-STAT细胞信号通路过度活化有关。     

医疗服务操作分类与编码的设计与应用简

医疗服务操作分类与编码是医学信息标准化的重要组成部分,是临床数据提取、分析和应用的基础。世界卫生组织及世界多国一直致力于开发、更新和维护此分类与编码。我国此前一直沿袭美国准备在2014年停止使用的ICD-9-CM-3（卷3）,中国需要结合国际主流设计思路,根据国情开发出适宜的多轴、一体化的医疗服务操作分类与编码体系。     

Adenocarcinoma of the stomach and esophagus and drinking water and dietary sources of nitrate and nitrite

We conducted a population-based case-control study of adenocarcinoma of the stomach and esophagus in Nebraska, U.S.A. Nitrate concentrations in public drinking water supplies were linked to residential water source histories. Among those using private wells at the time of the interview, we measured nitrate levels in water samples from wells. Dietary nitrate and nitrite were estimated from a food-frequency questionnaire. Among those who primarily used public water supplies (79 distal stomach, 84 esophagus, 321 controls), average nitrate levels were not associated with risk (highest versus lowest quartile: stomach OR=1.2, 95% CI [0.5-2.7]; esophagus OR=1.3, 95% CI [0.6-3.1]). We observed the highest ORs for distal stomach cancer among those with higher water nitrate ingestion and higher intake of processed meat compared with low intakes of both; however, the test for positive interaction was not significant (p=0.213). We did not observe this pattern for esophagus cancer. Increasing intake of nitrate and nitrite from animal sources was associated with elevated ORs for stomach cancer and with a significant positive trend in risk of esophagus cancer (P-trend=0.325 and 0.015, respectively). Larger studies with higher exposures to drinking water sources of nitrate are warranted to further evaluate N-nitroso compound precursors as risk factors for these cancers.     

环境中双酚A的污染及降解去除的研究进展

近10年来随着科学与社会的发展,环境雌激素污染日益引起人们的关注。双酚A是环境雌激素的一种,用途广泛,但具有多方面的毒性。对其毒理、污染及降解去除的研究已经成为国际上的研究热点。该文拟对上述几方面的研究进展情况作一简要介绍。     

Absorption and excretion of cholecalciferol and of 25-hydroxycholecalciferol and metabolites in birds

The absorption and excretion in vivo of cholecalciferol or 25-hydroxycholecalciferol (25-HCC) were determined in chicks (Gallus domesticus) and turkeys (Meleagris gallopavo). The overall net cholecalciferol or 25-HCC absorption in chicks and cholecalciferol in turkey poults was 66.5 +/- 3.3, 74.9 +/- 3.7 and 83.6 +/- 7.1% of the intake, respectively. The absorption of cholecalciferol or 25-HCC in chicks and turkeys occurred at the upper part of the intestine. 25-HCC, esters and non-polar metabolites of cholecalciferol or 25-HCC, and their polar metabolites, were secreted in the duodenum of chicks and turkeys but were partially reabsorbed at the upper part of the jejunum.     

Drinking water and dietary sources of nitrate and nitrite and risk of glioma

OBJECTIVE: Dietary nitrite has been associated with increased glioma risk; however, drinking water nitrate has not been extensively evaluated. METHODS: We conducted a population-based case-control study of adult glioma in Nebraska. Water utility nitrate measurements were linked to residential water source histories. We computed average nitrate exposure over a 20-year period. A food frequency questionnaire was used to assess dietary nitrate and nitrite. RESULTS: Increasing quartiles of the average nitrate level in drinking water were not significantly associated with risk (adjusted odd ratios: 1.4, 1.2, 1.3). Risk was similar among those with both higher and lower intakes of vitamin C, an inhibitor of N-nitroso compound formation. Dietary nitrite intake was not associated with risk. CONCLUSIONS: Our study does not support a role for drinking water and dietary sources of nitrate and nitrite in risk of adult glioma.     

人事聘用与工资制度改革的实践与体会

宜都市第一人民医院试行了以因事设岗、职位分级；竞争上岗、按岗聘用；岗位工资、绩效考核为内容的岗位聘用合同制和工资制度的改革实践，采取宣传发动、报批方案、分步实施、有序指导的改革措施，促进了该院员工观念的转变．加快了医院发展步伐，推进了“两个文明”建设，获得了诸多体会。     

结核病的"复燃"及其防治对策

1 .国内外结核病疫情现状结核病在 2 0世纪 6 0年代曾被宣称“作为一个公共卫生问题将于 2 0 0 0年被消灭”[1] 。此后 ,由于各国对结核病控制工作的忽视、人口流动的增加、耐药结核病的增多以及结核病与艾滋病合并感染等原因 ,结核病在全球死灰复燃 ,严重危害了人类的健康 ,不仅成为严重的公共卫生问题 ,也是影响各国发展的重大的社会和经济问题。 1993年世界卫生组织(WHO)宣布“结核病全球紧急状态” ,全球每年约有2 0 0万人死于结核病 ,2 0 2 0年死亡总数估计将达到35 0 0万[2～ 3] 。我国是世界上 2 2个结核病高负担国家之一 ,结核病…