巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒（CMV）DNA在儿科CMV感染诊断中的价值.方法 对565例临床疑诊CMV感染患儿分别应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、酶联免疫法（ELISA）检测尿液CMV-DNA及血清CMV-IgM抗体.结果 FQ-PCR检测尿CMV-DNA的阳性率为42 83%,ELISA检测婴儿血清CMV-IgM抗体阳性率为20 18%.两种方法对CMV感染诊断符合率为76 46%,前者诊断阳性率显著高于后者（χ^2=33 59,P〈0 01）.结论 FQ-PCR检测尿液CMV-DNA是早期诊断婴儿CMV感染的敏感有效的方法.     

脐血巨细胞病毒抗体阳性患儿尿中巨细胞病毒DNA水平调查

目的 调查脐血巨细胞病毒(CMV)抗体IgG、IgM阳性的发生率,并进一步研究阳性患儿尿巨细胞病毒DNA(CMV-DNA)水平,为临床对高危患儿早期干预提供依据.方法 分析调查2010年10月-2011年3月在医院分娩的350例新生儿脐血CMV抗体IgG和IgM的阳性例数,并进一步检测2组抗体阳性的患儿在0、1、3月时的CMV-DNA水平,分析其排毒情况.结果 350例新生几中,共检测出CMV抗体IgG阳性例数212例占60.6％,IgM阳性例数17例占4.9％,IgG阳性组患儿在0、1、3月龄时的CMV-DNA水平＞上限的分别为:41、33、40例;IgM阳性组患儿在0、1、3月龄时的CMV-DNA水平＞上限的分别为:8、4、3例.结论 脐血巨细胞病毒抗体阳性患儿,尿巨细胞病毒DNA检出率较高,体内CMV复制活跃,应加强其防治措施.     

巨细胞病毒的3种检测方法在诊断小儿巨细胞病毒感染中的评价

目的探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)、化学发光法、HCMV-PP65抗原检测在小儿巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染诊断上的应用价值。方法分别采用FQ-PCR、化学发光法、HCMV-PP65抗原检测3种检测方法分析52例确诊HCMV感染及48例非HCMV感染患儿的尿液或血液标本,并对敏感性、特异性、总符合率等指标进行对比分析。结果 PP65抗原检测的特异度、阳性预测值、阳性似然比、总符合率均高于尿液FQ-PCR和化学发光,Youden指数与化学发光相同,高于PCR,误诊率最低;化学发光的灵敏度、阴性预测值高于其他2种方法 ,漏诊率最低;尿液FQ-PCR与PP65抗原这2种检测方法所测结果无相关性(χ2=2.401,P=0.121),Kappa值为0.114,P=0.07,结果缺乏一致性;化学发光检测与PP65抗原这2种检测方法所测结果有显著相关性(χ2=10.178,P=0.001),Kappa值为0.226,P=0.062,结果缺乏一致性;尿液FQ-PCR与化学发光这2种检测方法所测结果有显著相关性(χ2=11.802,P=0.001),Kappa值为0.342,P=0.104,结果缺乏一致性;化学发光检测、尿液FQ-PCR和PP65抗原检测的ROC曲线下面积分别为:0.743、0.695和0.676。结论 PP65抗原阳性细胞数能反映HCMV的数量,可监测早期活动性HCMV感染及疗效观察,检测方法特异、灵敏、操作简单,且与化学发光检测有显著相关性,应为临床实验室首选。     

婴儿人巨细胞病毒感染中巨细胞病毒DNA的诊断应用

目的定量检测母乳及婴儿尿液、血液人巨细胞病毒(HCMV)DNA,探讨两种方式在诊断婴儿HCMV感染中临床效果以及母乳对婴儿HCMV感染的影响。方法选取96例婴儿均疑似感染HCMV,采集所有对应患儿母亲的乳汁及患儿的尿液、血液,定量检测HCMV的DNA水平,分离患儿血清酶联免疫法检测HCMV-IgM抗体。结果 96例疑似患儿的尿液荧光定量检测HCMV-DNA阳性60例,阳性率为62.50%,血液检测中HCMV-DNA阳性46例,阳性率为47.92%,均明显高于酶联免疫HCMV-IgM的阳性率(P<0.05);疑似患儿母乳HCMV-DNA检测中阴性37例,阳性59例,阳性率61.46%,阴、阳性结果比较差异有统计学意义(P<0.05);尿检中阴性36例,阳性60例,阳性率62.50%,阴、阳性结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论母乳感染HCMV是婴儿HCMV感染的重要途径,与传统免疫化学检测方法相比,检测婴儿血液中HCMV-DNA水平对于诊断婴儿HCMV感染具有重要意义,而检测婴儿尿液中HCMV的DNA水平确诊婴儿HCMV感染更加有效且敏感。     

病毒载量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的 评估全血及尿液巨细胞病毒(CMV)载量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染及判断预后的价值.方法 在血清学检测CMV-IgM或者CMV-IgG滴度≥40阳性患儿中筛选PP65抗原阳性CMV活动性感染婴幼儿50例,用更昔洛韦抗病毒治疗,一个疗程前后检测全血及尿液CMV荧光定量及治疗后PP65抗原.结果 治疗前全血CMV荧光定...     

不同标本巨细胞病毒检测在诊断小儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的探讨尿液、淋巴细胞和母乳的HCMV-DNA检测以及血清HCMV-IgM检测在小儿人巨细胞病毒(HCMV)感染诊断中的意义。方法用实时荧光定量PCR检测189例疑似HCMV感染患儿尿液、淋巴细胞和母乳的HCMV-DNA,用化学发光法检测其血清HCMV-IgM,并分年龄分性别对其阳性率进行分析比较。结果新生儿组母乳HCMV-DNA阳性检出率(60.3%)显著高于尿液(5.2%,P<0.001)和淋巴细胞(12.1%,P<0.001),也显著高于血清HCMV-IgM阳性率(3.4%,P<0.001);婴儿组母乳(48.1%)与尿液(55.0%)HCMV-DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05),但两者均显著高于淋巴细胞HCMV-DNA阳性率(22.1%,P<0.001)和血清HCMV-IgM阳性率(24.4%,P<0.001);婴儿组的尿液HCMV-DNA、血清HCMV-IgM阳性率均显著高于新生儿组(P<0.01);两组各指标男女阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);母乳HCMV-DNA阳性率与尿液、淋巴细胞HCMV-DNA阳性率及血清HCMV-IgM阳性率均呈显著正相关(r=0.630,P=0.000;r=0.413,P=0.000;r=0.341,P=0.000)。结论联合尿液、淋巴细胞HCMV-DNA和血清HCMV-IgM检测有助于患儿HCMV感染的辅助诊断;在无法联合检测的条件下,婴儿首选尿液HCMV-DNA检测可获得较高检出率;母乳HCMVDNA检测并正确喂养有助于预防HCMV感染。     

酶联免疫反应加速仪在巨细胞病毒IgG抗体检测中的应用

目的:探讨酶联免疫反应加速仪在巨细胞病毒(CMV)IgG检测中的临床应用价值。方法:取标准品、阴性和阳性对照血清、已知结果的临床血清标本,使用酶联免疫收附试验(传统法)和酶联免疫反应加速仪法(加速法)进行巨细胞IgG检测,比较观察加速法检测CMVIgG的重复性、灵敏度和特异度是否符合试剂盒标准。结果:线性相关性分析加速法和传统法定量结果呈正相关关系。加速法的变异系数为10%～2.1%,灵敏度为98.2%,特异度为96.3%,均在规定范围内。结论:加速仪用于CMVIgG检测,各项指标均符合试剂盒要求,可在临床检测中使用。     

青岛地区供血者巨细胞病毒特异性抗体检测

我们采集青岛地区344名供血者单份血清做巨细胞病毒(HCMV)感染状况调查。用IFA测HCMV-IgG,ELISA测HCMV-IgM、HCMV-IgA。其抗体阳性率分别为99.45%、4.65%和3.20%。结果表明青岛地区供血者HCMV感染普遍,活动性感染的发生率高于国外的报道。根据目前的状况,以HCMV-IgG做为筛选供血者的指标是不现实的。     

两种实验室检测方法在小儿巨细胞病毒感染诊断中的比较

目的探讨胶体金法与实时荧光定量PCR法在临床小儿巨细胞病毒(HCMV)感染中的诊断效果。方法收集浙江衢化医院2011年6月-2016年6月收治的疑似HCMV感染患儿100例。采集患儿血清及尿液,采用实时荧光定量PCR法(A组)及胶体金法(B组)检测患儿血清中HCMV的感染情况;采用实时荧光定量PCR法检测患儿尿液中HCMV的感染情况。比较两组血清中HCMV阳性率。参考HCMV感染诊断方案及临床诊断标准,统计HCMV感染阳性例数,并以此为金标准,统计两组对血清中HCMV感染的诊断效能(计算准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值)。比较实时荧光定量PCR法对血液中、尿液中HCMV感染的检测阳性率及诊断效能。结果 A组HCMV检测阳性率为19.0%,明显高于B组的9.0%(P0.05)。在对血中HCMV诊断效能方面,A组准确度、敏感度、阴性预测值均明显高于B组(P0.05)。通过比较实时荧光定量PCR法对血液及尿液中HCMV的诊断效能,发现尿液中HCMV诊断的准确度明显高于血液(P0.05)。结论实时荧光定量PCR法在检测HCMV感染方面较胶体金法更准确、敏感;在选择检测标本方面应优先选择尿液。     

血浆EB病毒DNA载量检测在儿童EB病毒感染中的应用价值

目的评价血浆EB病毒DNA(EBV-DNA)载量检测在儿童EBV感染中的应用价值。方法采用实验室指标对照研究,选取189例EB病毒感染患儿(EBV原发感染123例,EBV复发感染66例)及153例非EBV感染患儿(EBV既往感染135例,无EB病毒感染18例),采用实时荧光定量PCR方法检测血浆EBV-DNA载量及间接免疫荧光法(IFA)检测EBV抗体谱,跟踪监测33例EB病毒原发感染患儿2周,2、6个月的血浆EBV-NDA载量及EBV抗体谱变化。结果 EBV感染组血浆EBV-DNA阳性率22.2%,血浆EBV-DNA平均载量为3.72lgCopies/ml,EBV原发感染组与复发感染组血浆EBV-DNA阳性率分别为26.8%、13.6%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);患儿EB病毒感染的诊断中,血浆EBV-DNA的敏感度22.2%、特异度100.0%、诊断符合率57.0%,血浆EBV-DNA与EBV-CA IgM的诊断符合率差异无统计学意义;在患儿EB病毒原发感染诊断中,血浆EBV-DNA的敏感度26.8%、特异度95.7%、诊断符合率54.4%,血浆EBV-DNA与EBV-CA IgM的诊断符合率差异有统计学意义(P<0.05);血浆EBV-DNA与EBV-CA IgM检测结果一致性不佳,差异有统计学意义(P<0.05);33例EB病毒急性感染患儿血浆EBV-DNA转阴率2周为84.8%、2个月为93.9%,EBV抗体谱原发感染转为既往感染率2个月为6.1%、6个月为93.9%。结论血浆EBV-DNA载量检测有助于患儿EBV感染的治疗效果观察和愈后评估。     

尿液CMV-DNA联合血清CMV-IgM检测对婴幼儿巨细胞病毒感染的诊断价值

目的:研究尿液巨细胞病毒DNA (CMV-DNA)联合血清巨细胞病毒特异抗体(CMV-IgM)检测对婴儿巨细胞病毒(CMV)感染的诊断价值.方法:选取2012年8月～2014年8月聊城市人民医院疑似CMV感染的婴幼儿70例,应用化学发光法检测血清CMV-IgM,采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测尿液CMV-DNA,比较抗病毒治疗前后的检测结果.结果:单独检测尿CMV-DNA的阳性率为62.86％ (44/70),单独检测血清CMV-IgM的阳性率为55.71％ (39/70),两者比较差异无统计学意义(P＞0.05);两者联合检测的阳性率为77.14％ (54/70),与两种方法单独检测比较差异均有统计学意义(P＜0.05);抗病毒治疗后两种检测结果均显著降低,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:尿液CMV-DNA联合血清CMV-IgM检测能显著提高婴儿CMV感染的阳性率.     

血清、尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在儿童尿路感染中的变化

目的 探讨血清和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在儿童尿路感染中的变化,同时联合检测血清NGAL、尿NGAL、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)及尿β2微球蛋白(β2-MG),评价其在判断儿童尿路感染部位中的价值.方法 选取本院2018年3月-2019年3月收治的尿路感染(UTI)患儿88例作为观...     

婴儿黄疸患儿尿中及母乳中人巨细胞病毒感染的研究

目的:了解婴儿黄疸患儿尿中人巨细胞病毒(HCMV)感染情况及HCMV通过母乳对婴儿的传播情况。方法:应用荧光定量PCR方法对858例患黄疸的婴儿尿及配对的316例母乳进行HCMV-DNA检测。结果:黄疸患儿尿中的HCMV-DNA阳性率为29.02%,母乳中的阳性率为59.18%;母乳HCMV-DNA阳性配对的患儿尿的HCMV-DNA阳性率为40.11%,母乳HCMV-DNA阴性配对患儿尿HCMV-DNA阳性率为18.60%,两组之间具有显著性差异(P<0.01)。结论:婴儿黄疸与HCMV感染有一定关系,HCMV感染母乳是婴儿获得性感染引起黄疸的主要途径之一。     

黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的荧光定量PCR检测

目的:调查黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的情况。方法:采用荧光定量PCR方法对203例黄疸婴儿尿液标本进行HCMV-DNA定量检测。结果:在所检测的203例婴儿中,HCMV-DNA阳性的有52例,感染率为25.62%。HCMV-DNA拷贝数与黄疸持续时间无相关性。结论:HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,荧光定量PCR检测婴儿尿液中的HCMV-DNA快速、方便,检出率高,可及时诊断出巨细胞病毒的感染,以便及时治疗,降低畸形儿发生率。     

Determination of serum neutralizing antibodies reveals important difference in quality of antibodies against pertussis toxin in children after infection

ObjectivesTo determine neutralizing antibodies to pertussis toxin (PTNAs) in children with suspected pertussis and to compare results of PTNAs and anti-PT IgG antibodies.Methods172 hospitalized children with suspected pertussis were included. Pertussis was confirmed by culture, PCR and/or serology. PTNAs were determined by Chinese hamster ovary (CHO) cell assay.ResultsA correlation between titers of PTNAs and anti-PT IgG levels was noticed in 172 patients (Spearman R = 0.68, P < 0.001). Subjects with same concentrations of anti-PT IgG antibodies could have different titers of PTNAs and the maximum difference observed reached to 1024 times in ELISA-confirmed patients. Moreover, subjects with same titers of PTNAs could have different concentrations of anti-PT IgG antibodies.ConclusionsOur results indicated that in some children high concentrations of anti-PT IgG antibodies do not always mean effective PTNAs induced after infection, stressing the importance of detecting PTNAs after infection and vaccination.Clinical trial registry: Not applicable.     

血清降钙素原和血浆D-二聚体水平检测在危重症患儿感染时的临床探讨

目的 探讨血清降钙素原(PCT)和血浆D-二聚体(D-D)水平检测在早期诊断小儿危重症感染中的临床价值.方法 采用固相免疫色谱法和免疫比浊法检测302例危重症患儿血清PCT、血浆D-D、血浆C反应蛋白(CRP)及WBC计数.结果 临床感染组(208例)患儿血清PCT阳性率和血浆D-D水平分别为96.6％(201/208)、(1.65±0.73) mg/L,均显著高于临床非感染组(94例)的10.6％(10/94)、(0.45±0.21)mg/L,差异有统计学意义(P＜0.05),而WBC计数和血浆CRP水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).血清PCT水平和血浆D-D水平均与患儿的病情严重程度呈正相关(P＜0.05).结论 血清PCT和血浆D-D水平检测可作为早期诊断危重症患儿感染、病情严重程度评估及疗效判断的重要敏感性指标;血浆D-D水平检测对早期判断危重症患儿感染时凝血功能异常程度与广度具有重要临床指导意义,同时为临床早期合理应用抗凝药物治疗方面提供积极有效的理论依据.     

血清C-反应蛋白、降钙素原和免疫功能检测在儿童肺炎中的应用

目的研究血清C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和免疫功能检测在儿童肺炎中的应用效果。方法选取2015年7月-2016年6月杭州市儿童医院儿童肺炎患儿88例,其中轻度肺炎45例为轻度肺炎组、重症肺炎43例为重症肺炎组。另选取同期健康体检儿童22例为对照组。比较3组儿童入院时、急性期和恢复期白细胞计数(WBC)、CRP、PCT和免疫功能指标(IgM、IgG、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)。结果入院时重症肺炎组、轻度肺炎组WBC、CRP、PCT水平高于对照组(P0.05)。重症肺炎组入院时、急性期WBC、CRP、PCT水平高于轻度肺炎组(P0.05)。重症肺炎组急性期WBC、CRP、PCT水平高于入院时,恢复期低于入院时(P0.05);轻度肺炎急性期与入院时比较差异无统计学意义(P0.05),恢复期低于入院时(P0.05)。CRP、PCT敏感度与特异性、阳性预测值、阴性预测值均优于WBC,CRP、PCT曲线下面积0.790、0.829,截断值13.00 mg/L、11.10 ng/ml。入院时重症肺炎组、轻度肺炎组IgM、IgG高于对照组,CD4~+、CD4~+/CD8~+低于对照组,CD8~+高于对照组(P0.05)。重症肺炎组,患儿急性期IgM、IgG、CD4~+、CD4~+/CD8~+低于入院时,CD8~+高于入院时(P0.05),恢复期IgM、IgG、CD8~+低于入院时,CD4~+、CD4~+/CD8~+高于入院时(P0.05);轻度肺炎组急性期与入院时比较差异无统计学意义(P0.05),恢复期与入院时比较差异有统计学意义(P0.05);重症肺炎组、轻度肺炎组恢复期与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CRP、PCT联合检测有助于儿童肺炎早期诊断、病情评价、临床用药指导,且优于传统指标;同时免疫功能变化参与儿童肺炎疾病发生发展过程,为临床治疗使用免疫调节剂提供参考依据。     

ELISA法与胶体金法在检测新型冠状病毒血清抗体中的应用探讨

目的 探讨酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法与胶体金法检测新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)血清抗体的诊断价值。方法 选取湖南省新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎,COVID-19)确诊病例88例作为病例组,51例核酸检测阴性者作为对照组。采集研究对象血标本,采用ELISA法和胶体金法对所采集标本进行抗体检测,比较两种方法检出率差异;以核酸检测结果作为金标准,评估ELISA法和胶体金法的检验效能。结果 本研究结果显示,ELISA法和胶体金法检测2019-nCoV IgM 检出率均为20.97%,2019-nCoV IgG检出率分别为 43.55%、35.48%。不同采样时间ELISA法和胶体金法检测2019-nCoVIgM 检出率差异无统计学意义(均P>0.05)。发病-采样时间间隔≤7 d时,两种检测方法对2019-nCoV IgG检测结果差异有统计学意义(χ²=5.55,P=0.02),ELISA检出率(26.47%)高于胶体金法(5.71%)。通过对比不同发病-采样间隔发现,无论是ELISA法还是胶体金法,在一定时间内,间隔时间越长,2019-nCoV IgM和IgG检出率越高。以核酸检测结果为金标准,检测 IgG和IgM时,ELISA法和胶体金法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义。结论 ELISA法与胶体金法检验效能相当,两者特异度高,但灵敏度上都存在局限性,不建议用于筛查,可以作为确诊的补充诊断手段或应用于聚集性疫情溯源。     

血清CRP和FC与尿I-FABP联合检测对早产儿肠道感染并发NEC的早期预测价值

目的 探讨血清C-反应蛋白(CRP)、粪钙卫蛋白(FC)和尿肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)联合检测对早产儿肠道感染并发坏死性小肠结肠炎(NEC)的早期预测价值。方法 选择2018年1月-2021年3月南通大学附属妇幼保健院84例肠道感染的早产儿为病例组研究对象,根据是否并发NEC分为NEC组26例、非NEC组58例。选择同期无肠道感染的早产儿50例为对照组。病例组患儿在怀疑NEC 12 h内、24 h内、48 h,对照组于纳入研究后第2天检测血清CRP、尿I-FABP和粪FC水平。受试者工作特征曲线(ROC)分析上述指标对NEC的预测价值。结果 病例组胎龄、出生体质量均低于对照组(P<0.05);NEC组胎龄、出生体质量均低于非NEC组,病前喂养、肺炎、呼吸衰竭、感染性休克、低钠血症占比均高于非NEC组(P<0.05); NEC组不同时间CRP、尿I-FABP和粪FC水平均高于非NEC组和对照组(P<0.05),非NEC组与对照组比较差异无统计学意义;24 h内CRP、尿I-FABP和粪FC联合检测预测NEC的曲线下面积为0.902,灵敏度为0.924,特异度为0...