补肾良品——菟丝子

菟丝子为旋花科植物菟丝子或大菟丝子的种子,一种寄生植物,生于田边、荒地及灌丛中,常寄生于豆科等植物上。主产于中国山东、河北、山西、陕西、江苏、黑龙江、吉林等地。菟丝子作为一个既补肾阳又补肾阴的补肾良品,在中国最早的中药专著《神农本草经》中已被列为上品之药,称其具有良好补益效果。     

中药菟丝子抗衰老作用研究进展

随着全球人口老龄化的快速到来,与衰老相关的疾病发病率逐渐升高,严重影响人们的生活质量,也给社会带来较大的经济负担。然而,衰老是一个复杂的生物学过程,其确切的发病机制尚无定论。中药菟丝子是临床常用的补益中药,是古代抗衰老方剂中高频次出现的抗衰老药物,同时也是现代医学抗衰老研究的讨论热点之一。现有证据证明,中药菟丝子抗衰老作用涉及多种机制,如清除自由基、抗氧化、免疫调节和细胞周期调控等。本文综述了衰老的病因机制以及菟丝子抗衰老作用的研究进展,以期为菟丝子抗衰老研究的不断深入提供参考,也为中医临床辨证提供借鉴。     

菟丝子抗衰老作用的实验研究

采用自然衰老小鼠，观察菟丝子水煎剂对老龄小鼠红细胞膜超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、血清过氧化脂质（ＬＰＯ）水平、脑组织脂褐素含量，肝单胺氧化Ｂ（ＭＡＯ－Ｂ）活性及血硒含量的影响。结果表明：菟丝子可使老龄小鼠红细胞膜ＳＯＤ活性增高，血清ＬＰＯ水平和脑脂褐素含量显著降低，肝ＭＡＯ－Ｂ活性降低，对血硒水平无影响。揭示菟丝子可增加老龄小鼠ＳＯＤ活性，抑制体内脂质过氧化物及终产物生成，抑制ＭＡＯ－Ｂ活性，进而延缓机体衰老过程。     

生菟丝子、盐制菟丝子对D-半乳糖所致衰老模型小鼠免疫功能影响

菟丝子具有强壮生殖、心血管、保肝、免疫调节作用和抗衰老作用，有研究表明，菟丝子可明显提高烧伤模型小鼠免疫功能，可以增加老龄小鼠SOD活性，抑制体内脂质过氧化及MAO-B活性,减少老年大鼠心线粒体DNA缺失而延缓机体衰老。现代研究发现，菟丝子炮制后炮制品中有效成分总黄酮、多糖含量较生品含量均有增加，其中以盐制品增加最多；在临床上，菟丝子生制兼用，现代生用菟丝子更多。本实验采用D-半乳糖衰老模型小鼠研究生菟丝子和炮制品盐制菟丝子的抗衰老免疫学机制并加以比较，为其临床使用和开发中药资源提供理论依据。     

对药典中菟丝子炮制方法的商榷

笔者认为《中国药典》2 0 0 0年版一部中菟丝子所规定的“盐炙法”[1] 之炮制方法值得商榷 ,其“盐炙法”若改为“酒炙法”则更具临床实用意义。1　以古人之经验为商榷的基础　　菟丝子以酒炮制是古代医学长期临床运用的经验之结晶 ,早在公元三世纪晋·葛洪的《肘后备急方》中就记载“菟丝子 ,酒渍服。”后来梁·陶弘景对酒制菟丝子的意义作了概括性的论说 ,在其《本草经集注》中曰 :“宜丸不宜煮 ,得酒者良”。此后 ,各时代的医家几乎都使用了酒炮制菟丝子的方法 ,只是炮制的具体操作方法不完全相同罢了。唐·孙思邈在其《千金方》中载 :“…     

菟丝子提取物对衰老小鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

目的研究菟丝子水煎剂对D-半乳糖所致衰老模型小鼠细胞凋亡的抑制作用。方法 30只小鼠按体重随机分为青年对照组、模型组、菟丝子给药组。激光共聚焦显微镜测定细胞内钙、免疫组化法检测bcl-2和bax表达、流式细胞仪检测心肌细胞凋亡。结果菟丝子组与衰老模型相比细胞内钙显著降低(P<0.05),bcl-2/bax比值高于模型组,心肌细胞凋亡指数减少(P<0.05)。结论菟丝子对D-半乳糖致衰老小鼠的心肌细胞凋亡有抑制作用。     

菟丝子黄酮对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察菟丝子黄酮对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min,再灌注2 h建立心肌缺血再灌注模型。将50只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组及菟丝子黄酮低、高剂量组和消心痛组。再灌注结束后检测血清肌酸激酶和乳酸脱氢酶,DNA末端标记法计算凋亡指数,免疫组织化学法和Western Blotting法检测心肌Bcl-2和Bax蛋白表达,计算Bcl-2/Bax值。结果与假手术组比较,缺血再灌注组心肌酶肌酸激酶、乳酸脱氢酶和凋亡指数显著增高(P<0.01),Bcl-2和Bax蛋白表达增强(P<0.01);与缺血再灌注组比较,菟丝子黄酮低、高剂量组及消心痛组能降低血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶含量和凋亡指数(P<0.01),增加Bcl-2而减少Bax的表达(P<0.01)。结论菟丝子黄酮能够抑制缺血再灌注损伤大鼠的心肌细胞凋亡,与消心痛效果相近。     

菟丝子醇提物对胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的 探讨菟丝子(CCL)醇提物诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的作用.方法 以CCL(10、50、100 mg/L)作用于人胃癌SGC7901细胞,同时设DMSO和培养液作为对照组.采用HE染色法观察细胞形态变化,琼脂糖凝胶电泳法分析SGC7901细胞的DNA片段化.结果 HE染色镜下可见较为典型的凋亡形态学变化:细胞变小,核皱缩,荧光强度增强,核仁消失,新月体样改变,凋亡小体形成等;琼脂糖电泳出现明显的"梯状"条带,并存在剂量依赖性,而对照组未出现梯状条带.结论 CCL能够诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡.     

菟丝子提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用

目的探讨菟丝子提取物对实验性衰老小鼠的抗衰老作用及机制。方法以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型,同时给予灌胃不同浓度的菟丝子提取物,6 w后,观察各组小鼠的行为学及学习记忆改变,分别测定小鼠脾脏和胸腺指数,采用比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果菟丝子提取物能明显改善衰老模型小鼠的学习记忆能力,提高胸腺及脾指数,显著增加SOD和GSH-Px活性,降低血清MDA含量。结论菟丝子提取物抗衰老作用可能通过提高抗氧化酶SOD、GSH-Px活力,降低脂质过氧化物MDA含量而实现。     

菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响

目的观察菟丝子总黄酮对血管平滑肌细胞凋亡的影响,并探讨其保护作用机制。方法菟丝子经溶剂提取,聚酰胺柱分离得黄酮提取物;大鼠胸主动脉平滑肌细胞传代培养,实验分四组,采用流式细胞仪检测细胞凋亡、Westen印迹法测定细胞Bcl-2和Bax蛋白表达及RT-PCR测定C-myc基因表达情况。结果菟丝子总黄酮高剂量组能够增加活细胞数量,降低死亡细胞数,特别是降低早期凋亡细胞数,与模型组比较有显著差异(P<0.05);菟丝子总黄酮高剂量组能够下降Bax蛋白表达量,与模型组比较有显著差异(P<0.05),而菟丝子总黄酮低剂量组升高Bcl-2蛋白表达量,与模型组比较有显著差异(P<0.05);菟丝子总黄酮高剂量和低剂量组C-myc m RNA表达量显著升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),无剂量依从效应。结论菟丝子总黄酮能抑制平滑肌细胞凋亡,其可能是通过能够下降Bax蛋白和升高Bcl-2蛋白表达,改善抗凋亡和促凋亡的蛋白失衡,增加细胞周期C-myc的基因的表达来发挥对心血管起保护作用。     

菟丝子复方制剂对衰老小鼠心肌Cyt C和caspase-3的影响

目的 研究菟丝子及其复方制剂对衰老小鼠心肌细胞色素C(Cyt C)、caspase-3活性及心肌细胞凋亡的影响作用机制.方法 40只雄性昆明种小鼠,随机分为青年对照组、衰老模型对照组、菟丝子治疗组、菟丝子复方制剂组.采用D-半乳糖注射法制作衰老模型,然后灌服菟丝子水煎剂及复方制剂治疗7 w.使用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用酶联免疫标记法测定Cyt C含量、分光光度法检测caspase-3活性.结果 衰老模型组与青年组比较,心肌组织Cyt C释放增加(P＜0.01),caspase-3活性增加(P＜0.01),心肌细胞凋亡增加(P＜0.01);菟丝子及其复方制剂组与模型组比较,能够减少胞浆Cyt C含量(P＜0.01),降低心肌细胞内caspase-3活性(P＜0.05),抑制心肌细胞凋亡(P＜0.05).与菟丝子组比较,其复方制剂的效果与菟丝子没有显著差异(P＞0.05).结论 菟丝子及其复方制剂可能通过减少线粒体Cyt C的溢出,降低caspase-3活性,从而减少衰老模型小鼠心肌细胞的凋亡率.菟丝子是菟丝子复方制剂发挥作用的主要成分.     

菟丝子醇提液对衰老模型小鼠肝线粒体保护作用的实验研究

目的探讨菟丝子醇提液对衰老模型小鼠肝脏线粒体的保护作用及机制。方法将纯系昆明种小鼠50只,随机分为青年组、衰老模型组、给药15d组、给药30d组和给药45d组。D-半乳糖制作衰老模型,经胃灌服菟丝子醇提液。采用比色分析法测定呼吸链复合体Ⅳ活性,PCR法检测线粒体DNA缺失,RT-PCR法检测COⅠmRNA的表达水平;同时观察不同给药天数对上述指标的影响。结果D-半乳糖可诱导小鼠肝线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性降低（P〈0.01）,肝mtDNA的缺失增加,呼吸链复合体ⅣCOⅠ亚基mRNA的表达水平增高。菟丝子醇提液可提高呼吸链复合体Ⅳ活性,减少mtDNA缺失,降低呼吸链复合体ⅣCOⅠ亚基mRNA的表达。结论菟丝子醇提液可提高衰老模型小鼠呼吸链复合体Ⅳ活性,降低COⅠ亚基mRNA表达,减少mtDNA缺失,而发挥保护肝脏线粒体的作用,并随给药时间的延长作用更显著。     

菟丝子黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的观察菟丝子黄酮对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min,再灌注2 h建立心肌缺血再灌注模型。将40只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、菟丝子黄酮低、高剂量组及消心痛组。再灌注结束后检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH),DNA末端标记法(TUNEL法)计算凋亡指数(AI)与免疫组化法检测心肌Bcl-2和Caspase-3蛋白表达。结果与空白对照组比较,其余四组心肌酶CK、LDH和AI显著增高(P<0.01),Bcl-2和Caspase-3蛋白表达增强(P<0.01);与模型组比较,菟丝子黄酮低、高剂量组及消心痛组能降低CK、LDH含量和AI(P<0.05),增加Bcl-2和减少Caspase-3的表达(P<0.01);菟丝子黄酮高剂量组与消心痛组比较无差异(P>0.05)。结论菟丝子黄酮预处理能够减少心肌酶CK、LDH含量,上调Bcl-2蛋白表达,下调Caspase-3蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡,与消心痛效果相近。     

菟丝子水提物对衰老模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响

目的 探讨菟丝子水提物对大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合体活性的影响.方法 将Wistar大鼠30只,随机分为青年对照组,衰老模型组,模型给药组,制作D-半乳糖衰老模型,模型给药组同时灌服菟丝子水提物.观察各组大鼠心肌线粒体丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性的变化.结果 菟丝子水提物可提高心肌线粒体SOD的活性、降低MDA的含量;并且使呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活性明显升高.结论 菟丝子水提物能提高心肌线粒体抗氧化能力,改善线粒体能量代谢障碍,维护线粒体功能.     

菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响

目的 研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制.方法 实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8g·kg-1 ·d-1给药,采用半定量RT-PCR法测定大鼠肝组织p16和cyclinD1 mRNA的表达,免疫组化SABC法检测p16和cyclinD1蛋白的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响.结果 衰老模型大鼠p16 mRNA及蛋白表达较青年组明显增高(P＜0.01),而cyclinD1 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).菟丝子醇提液可降低p16基因表达(P＜0,01),使cyclinD1基因表达增强(P＜0.05),并呈现时间渐进性改变.结论 菟丝子醇提液通过影响细胞调控因子p16、cyclinD1表达延缓肝细胞的衰老.     

淫羊藿甙、菟丝子提取物对雄激素部分缺乏大鼠生殖保护作用的比较研究

目的 探讨淫羊藿甙、菟丝子提取物对雄激素部分缺乏大鼠的生殖保护作用.方法 以环磷酰胺造成生殖系统受损、雄激素部分缺乏大鼠模型,灌胃淫羊藿甙和菟丝子提取物7 d后,检测血清睾酮、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）含量;以HE染色和原位末端标记法（TUNEL）检测,光镜下观察睾丸组织、阴茎海绵体平滑肌细胞变化情况.结果 ①血清睾酮水平：淫羊藿甙组明显高于空白组和模型组,但低于睾酮组（P＜0.05）;菟丝子提取物组高于模型组,低于睾酮组（P＜0.05）,但与空白组间无统计学差异.②血清LH、FSH水平各组间均未见明显统计学差异.③阴茎海绵体平滑肌细胞的凋亡率：睾酮组和淫羊藿甙组明显低于模型组（P＜0.05）;菟丝子组与模型组则未见明显统计学差异.结论 淫羊藿甙、菟丝子提取物对雄激素部分缺乏大鼠均具有生殖保护作用,但淫羊藿甙作用效果强于菟丝子提取物.     

菟丝子提取物对自然衰老小鼠学习记忆能力及肝和脑组织ATP酶活力的影响

目的研究菟丝子提取物对自然衰老小鼠的抗衰老作用及机制。方法以自然衰老小鼠为模型,同时给予灌胃不同浓度的菟丝子提取物,6 w后,通过Y迷宫评价法观察正常对照组、衰老模型组、低、中、高剂量给药组学习记忆改变,测定血清过氧化脂质(LPO)水平、过氧化氢酶(CAT)活性和肝脑组织中ATP酶活力。结果菟丝子提取物能明显改善衰老模型小鼠的学习记忆能力,显著升高肝脑组织中ATP酶活力和CAT活性,降低其LPO含量(P0. 05)。结论菟丝子提取物抗衰老作用可能通过提高ATP酶活力和CAT活性,降低LPO含量而实现。     

D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化改变及菟丝子醇提液对其作用的研究

目的 研究D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化作用及菟丝子醇提液对其影响,探讨衰老发生的机制及菟丝子延缓衰老作用的机制.方法 采用D-半乳糖制作衰老大鼠模型,观察15、30、45 d时的糖化血红蛋白(GHb)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)活性的变化.采用半定量RT-PCR法测定大鼠胸主动脉糖化终末产物受体(RAGE)mRNA的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响.结果 D-半乳糖导致GHb、MDA和RAGE-mRNA水平升高(P＜0.01),SOD活性降低(P＜0.01),并呈现时间渐进性改变.菟丝子醇提液使大鼠GHb、MDA降低(P＜0.01),SOD活性增加(P＜0.01),RAGE-mRNA表达水平降低(P＜0.01).结论 D-半乳糖诱导非酶糖基化发生,菟丝子醇提液抑制D-半乳糖致衰大鼠非酶糖基化反应,在给药30d即有显著的作用效果.