马桑内酯对瞬时外向钾电流的影响及在致痫机制中的作用

目的本实验拟采用全细胞膜片钳记录技术,研究马桑内酯(CL)对培养大鼠皮层神经元瞬时外向钾电流(ⅠA)的影响,从而探讨CL致癫痫的电生理机制及与ⅠA的关系,为临床更有效地防治癫痫提供新的依据。方法采用全细胞膜片钳技术记录ⅠA,进行以下方面实验①培养大鼠皮层神经元ⅠA的特性及鉴定;②三种不同浓度CL对神经元ⅠA的影响;③CL对神经元ⅠA的I-V曲线的影响。结果测试电压为+65mV时,三种不同浓度CL后均可抑制IA的电流振幅,其抑制差异均有统计学意义。结论CL具有抑制瞬时外向钾电流的作用,且在一定范围内抑制呈剂量依赖性,推测CL致癫痫的发生机制可能与IA的抑制有关。     

大鼠心室肌细胞急性酶分离及瞬时外向钾电流的记录

目的：探索成年SD大鼠心室肌细胞急性酶分离及记录瞬时外向钾电流的方法。方法以成年SD大鼠为研究对象,利用Langendorff灌流系统,利用Ⅱ型胶原酶二步灌流方法分离细胞,利用膜片钳技术记录大鼠心室肌瞬时外向钾电流。结果镜下可见存活心肌院呈杆状或矩形,表面干净,横纹清晰,立体感强,能记录出瞬时外向钾电流达3000 pA。结论本实验所用的方法细胞成活率高,能记录出瞬时外向钾电流。     

槟榔碱对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的：研究槟榔碱(Are)对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(I_(to))的影响。方法：利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_(to)。结果：10.0μmol·L~(-1) Are可以降低I_(to),使I_(to)幅值从(10.6±s 1.2)pA·pF~(-1)降至(6.2±0.9)pA·pF~(-1)(P＜0.01,n=20)。在1～100μmol·L~(-1)范围内Are的作用呈浓度依赖性,IC_(50)为8.2μmol·L~(-1)。10.0μmol·L~(-1)Are使稳态激活曲线右移,半激活电压(V_(1/2))从(-11.6±0.6)mV移至(-2.3±0.1)mV,但曲线斜率基本不变。Are对失活曲线影响不大,但10.0μmol·L~(-1)Are使通道失活后恢复时间常数从(88±16)ms延长为(152±24)ms(P＜0.01,n=18)。结论：Are浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_(to)。     

血清素抑制大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流

目的:观察血清素(5-HT)对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流I_(to)的影响并探讨其作用机制.方法:全细胞膜片箝技术记录I_(to).结果:I_(to)电流密度在正常心肌和肥厚心肌细胞无明显差异.在实验电压为 70mV时,5-HT浓度依赖性抑制I_(to),在正常和肥厚心肌细胞,其半数抑制浓度分别为(4O ±5)μmol/L和(38±7)μmol/L.5-HT_2受体阻断剂米胺舍林和磷脂酶C抑制剂 Compound 48/80均可逆转 5-HT抑制I_(to)的作用;蛋白激酶激动剂醋酸佛波酯显著加强5-HT的抑制作用,而蛋白激酶抑制剂白屈菜季铵碱则逆转5-HT抑制I_(to)的作用.结论:5-HT具有抑制心肌细胞I_(to)的作用.此作用是通过激动 5-HT_2受体,启动磷脂酶C信号转导途径,进一步激活蛋白激酶从而抑制心肌I_(to)。     

羧甲基壳聚糖对豚鼠单-心室肌细胞延迟外向钾电流的作用

研究羧甲基壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流 (IK)的作用 ,从离子通道角度初步探讨其作用机理。应用膜片钳全细胞记录方式 ,设保持电位为 - 50 m V,指令电位为 - 50～ 70 m V,步阶脉冲 1 0 m V,刺激频率 1 Hz,波宽 1 0 0 0 ms,刺激间隔 5s的方波钳制方案。羧甲基壳聚糖能抑制 IK,并呈浓度依赖关系。选择指令电位 70 m V时给药前后 IK 的变化进行统计 ,当浓度为 0 .1 %时 ,IK由给药前的 1 .1 6± 0 .30 n A减少至药后的 0 .96± 0 .2 7n A(n=4,P<0 .0 1 ) ,其抑制率是 1 7.70± 0 .0 5%。当浓度为 0 .2 %时 ,IK 由给药前的 1 .46±0 .62 n A减少至给药后的 1 .0 6± 0 .49n A(n=4,P<0 .0 1 ) ,抑制率是 2 8.66± 0 .0 6%。其它指令电位下的 IK 的改变也符合此趋势。羧甲基壳聚糖抑制豚鼠单一心室肌细胞延迟外向 K 电流。     

辣椒素对培养的大鼠三叉神经节神经元瞬时外向钾电流和延迟整流钾电流的影响

目的探讨辣椒素(capsaicin)对大鼠三叉神经节神经元瞬时外向钾电流(I_A)和延迟整流钾电流(I_K)的不同影响。方法采用全细胞膜片钳方法。结果对于辣椒素敏感神经元，辣椒素可选择性、剂量依赖性地抑制其I_A电流，但辣椒素对I_K无明显选择性作用；对于辣椒素不敏感神经元，辣椒素对I_A和I_K均无作用，且对I_A和_IK激活动力学亦无影响。结论辣椒素可选择性抑制对其敏感的三叉神经节神经元I_A，这可能是初次应用辣椒素时其致痛作用的原因之一。     

慢性房颤患者心肌瞬时外向钾通道电流密度变化

目的 旨在研究慢性房颤患者心房肌瞬时外向钾通道电流的变化，为房颤机制的阐明提供更多的实验依据。方法心房肌标本取材于体外循环手术患者右心耳。采用全细胞膜片钳技术研究心房肌瞬时外向钾通道电流密度的变化。结果慢性心房颤动患者心房肌瞬时外向钾通道电流密度降低，在测试电位-20mV以上各电位水平时均有显著性差异（n=16，P〈0．05）。结论慢性房颤时瞬时外向钾电流密度降低对房颤的电重构起一定的作用。     

积分法:一种药理学中分析电压依赖性瞬时外向钾电流的方法(英文)

目的　评价一种药理学中分析电压依赖性瞬时外向钾电流 (Ito)的积分方法。方法　Ito的失活相可被 2指数或 3指数方程拟合。原始电流曲线下面积 (AUC)可通过指数方程积分获得。以细胞膜电容标准化后的曲线下面积表示除极化时程中钾离子的净通量 ,作为比较指标。钙调磷酸酶过表达转基因鼠心肌细胞表现Ito下调 ,此数据用于验证Ito的积分分析方法的可靠性。结果　AUC可通过 3指数或2指数方程的积分公式获得 :AUC =A1τ1+A2 τ2 +A3τ3+A0 t -A1τ1e-t/τ1-A2 τ2 e-t/τ2 -A3τ3e-t/τ3或AUC =A1τ1+A2 τ2 +A0 t-A1τ1e-t/τ1-A2 τ2 e-t/τ2 。小鼠心室肌 5 0 %和 90 %动作电位时程分别约为 10ms和 30ms。将Ito0～ 10ms (AUC50 )和 0～ 30ms(AUC90 )的曲线下面积以细胞膜电容进行标准化。野生型鼠心肌细胞的AUC50 和AUC90 明显高于钙调磷酸酶过表达转基因鼠 ,此结果与转基因鼠心室肌细胞动作电位时程延长相一致 ,与前期发表结果一致 (钙调磷酸酶过表达转基因鼠心肌细胞Ito各成分下调 )。结论　积分法是药理学中一种简便准确的分析Ito的方法。     

依折麦布和辛伐他汀对缺血再灌注大鼠心肌细胞瞬时外向钾电流的影响#br#

目的 研究依折麦布和辛伐他汀单独及联合使用对模拟缺血再灌注大鼠心肌细胞瞬时外向钾电流 （Ito） 的影响。方法 将 75 只雄性 SD 大鼠按随机数字表法分为正常对照（CON）组、 模拟缺血再灌注（CIR）组、 依折麦布（EIR） 组、 辛伐他汀 （SIR）组和依折麦布+辛伐他汀 （ESIR） 组, 分别予生理盐水或其溶解的药物灌胃 2 周后分离右室心肌细胞, 采用全细胞膜片钳技术记录 Ito。结果 （1） Ito电流密度 （+60 mV）： CIR 组较 CON 组下降, EIR 组与 CIR 组比较差异无统计学意义（P＞0.05）, SIR 组、 ESIR 组与 CIR 组比较均升高, SIR 组与 ESIR 组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）Ito稳态失活曲线最大半数失活电压（V1/2）： CIR 组较 CON 组显著增大, EIR 组与 CIR 组比较差异无统计学意义（P＞0.05）, SIR 组和 ESIR 组较 CIR 组均显著减小（P＜0.05）, SIR 组和 ESIR 组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。斜率因子（K）各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。（3）失活后恢复曲线失活时间常数（τ）值： CIR 组较CON 组显著增加, EIR 组与 CIR 组间差异无统计学意义 （P＞0.05）, SIR 组、 ESIR 组较 CIR 组明显减低 （P＜0.05）, 而SIR 组与 ESIR 组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 辛伐他汀、 依折麦布+辛伐他汀预处理可以逆转模拟缺血再灌注对心肌细胞 Ito的影响, 且效果相似, 而依折麦布未表现出这种效果。     

伊布利特对兔左心室中层细胞瞬间外向钾电流活性的影响

目的观察正常左心室中层心肌细胞(M细胞)瞬间外向钾电流(transient outside potassium current,Ito)的离子通道的变化,了解伊布利特抗室性心律失常的可能机制。方法新西兰纯种白兔60只,取其心脏行Langendorff灌流,以酶解法分离出单个左心室中层心肌细胞,以伊布利特10-6mol/L细胞外液及伊布利特10-5mol/L细胞外液对M细胞进行灌注,以膜片钳技术分别记录Ito的电流密度、电流-电压曲线(I-V)、失活曲线、失活后再恢复等变化,和对照组进行对比。结果 +60mV电流密度对照组为(17.4±5.2)pA/pF(n=14cells),10-6mol/L组(n=14cells)为(6.0±1.2)pA/pF,与对照组相比下降明显(P<0.01)。10-5mol/L组(n=14cells)为(4.5±1.1)pA/pF,与对照组比较有明显下降(P<0.01)。10-5mol/L组与10-6mol/L组比较差异有统计学意义(P<0.01)。I-V曲线比较显示伊布利特组I-V曲线均下移。伊布利特组与对照组相比,失活曲线明显左移(P<0.05或P<0.01),10-6mol/L组与10-5mol/L组半数最大失活电压与对照组比较下降显著(P<0.01)。Ito失活后再恢复明显减慢。结论伊布利特呈浓度依赖性抑制正常左心室中层心肌细胞Ito电流,可能是伊布利特临床上抗心律失常作用的机制之一。     

Effect of haloperidol on transient outward potassium current in rat ventricular myocytes

Although sigma ligand haloperidol is known to affect repolarization in heart, its effect on potassium currents in cardiomyocytes has not yet been studied. We analyzed the effect of 1 micromol/l haloperidol on transient outward K(+) current (I(to)) in enzymatically isolated rat right ventricular cardiomyocytes using the whole-cell patch-clamp technique at room temperature. Haloperidol induced a decrease of amplitude and an acceleration of apparent inactivation of I(to), both in a voltage-independent manner. The averaged inhibition of I(to), evaluated as a change of its time integral, was 23.0+/-3.2% at stimulation frequency of 0.1 Hz. As a consequence of slow recovery of I(to) from the haloperidol-induced block (time constant 1482+/-783 ms), a cumulation of the block up to about 40% appeared at 3.3 Hz. We conclude that haloperidol causes a voltage-independent block of I(to) that cumulates at higher stimulation frequencies. Based on the computer reconstruction of experimental data, a block of I(to)-channels in both open and open-inactivated states appears to be likely mechanism of haloperidol-induced inhibition of I(to).     

Effect of antipsychotic drug perphenazine on fast sodium current and transient outward potassium current in rat ventricular myocytes

Antipsychotic drug perphenazine belongs to the phenothiazine group commonly reported to induce ECG changes and tachyarrhythmias. Data about its effect on ionic membrane currents in cardiomyocytes are missing. We analyzed the effect of perphenazine (0.1–100 μM) on fast sodium current I _Na and transient outward potassium current I _to in enzymatically isolated rat right ventricular myocytes by the whole-cell patch-clamp technique at room temperature. Perphenazine reversibly blocked I _Na (reducing its amplitude; IC₅₀ = 1.24 ± 0.10 μM) and I _to (accelerating its apparent inactivation with a slight decrease of its amplitude; IC₅₀ = 38.2 ± 3.5 μM, evaluated from changes of the time integral). The fast time constant of I _to inactivation was significantly decreased in a concentration-dependent manner (IC₅₀ = 30.0 ± 6.6 μM). Both blocks were use and frequency dependent at 3.3 Hz. We conclude that perphenazine causes concentration-, use-, and frequency-dependent block of I _Na and I _to . Computer simulations suggest that perphenazine interacts preferentially with I _Na channels in inactivated states and with I _to channels in both open and open-inactivated states.     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_to, 研究苄基四氢巴马汀（BTHP）对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (I_to) 的影响. 结果显示,5.0 μmol·L^-1 BTHP可以降低I_to, 使I_to幅值从（13.8±2.2）pA·pF^-1降至（5.1±1.4）pA·pF^-1（P＜0.01）. 在1～100 μmol·L^-1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性,IC₅₀为3.6 μmol·L^-1,该药不改变I_to 电流-电压曲线的形状,而使电流幅值减少. 5.0 μmol·L^-1 BTHP使稳态激活曲线右移,半激活电压（V_1/2）从（－6.8±0.2）mV移至（－1.5±0.1）mV,但曲线斜率基本不变. BTHP对失活曲线影响不大,5.0 μmol·L^-1 BTHP使通道失活后恢复时间常数从（75±19）ms延长为 （119±21）ms（P＜0.01）. 结果说明,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_to.     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的Ito,研究苄基四氢巴马汀 (BTHP)对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (Ito)的影响 .结果显示 ,5 .0 μmol·L- 1BTHP可以降低Ito,使Ito幅值从 (13.8± 2 .2 )pA·pF- 1降至 (5 .1± 1.4 )pA·pF- 1(P <0 .0 1) .在 1～ 10 0μmol·L- 1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性 ,IC50 为3.6μmol·L- 1,该药不改变Ito电流 电压曲线的形状 ,而使电流幅值减少 .5 .0 μmol·L- 1BTHP使稳态激活曲线右移 ,半激活电压 (V1/2 )从 (- 6.8±0 .2 )mV移至 (- 1.5± 0 .1)mV ,但曲线斜率基本不变 .BTHP对失活曲线影响不大 ,5 .0 μmol·L- 1BTHP使通道失活后恢复时间常数从 (75± 19)ms延长为(119± 2 1)ms(P <0 .0 1) .结果说明 ,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的Ito.     

醋柳黄酮对大鼠心室肌细胞瞬间外向整流钾电流的影响

目的探讨醋柳黄酮对大鼠心室肌细胞膜瞬间外向钾电流(Ito)的影响。方法用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录瞬间外向钾电流。结果①醋柳黄酮呈浓度和电压依赖性抑制Ito,在+50mV时,0.06、0.1和0.14g.L-1醋柳黄酮分别阻断Ito峰电流(18.34±0.99)%、(25.32±1.43)%和(38.88±1.96)%。②0.14g.L-1醋柳黄酮使Ito失活曲线明显左移,但对激活和复活曲线无影响。结论醋柳黄酮呈浓度和电压依赖性抑制心肌细胞Ito,这可能是其抗心律失常作用的重要机制之一。     

灯盏花素对豚鼠心室肌细胞迟发性外向钾电流的影响

目的　观察灯盏花素对心室肌细胞迟发性外向钾离子电流的影响。方法　应用全细胞膜片钳制技术。结果　灯盏花素以剂量依赖的方式增加Ik,0 0 1g·L-1灯盏花素使Ik 增大 4 4 6 % (0 0 1

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