膀胱癌荧光原位杂交检测及其临床意义

目的:分析膀胱移行细胞癌的染色体畸变情况,探讨荧光原位杂交(FISH)技术在膀胱癌的临床应用价值.方法:采用3、7、17号染色体着丝粒探针和9号染色体p16基因位点探针对56例膀胱移行细胞癌患者和20名健康人群的新鲜尿液进行FISH检测,统计染色体的畸变并分析其与病理分级、分期的关系.对所有病例同步进行尿细胞学分析.结果:膀胱癌患者尿脱落细胞核中3、7、17号染色体及9号染色体p16基因畸变率分别为58.9%、39.3%、58.9%和75.0%,各染色体畸变在膀胱癌不同分期之间的差异无统计学意义(P>0.05),3、7、17号染色体畸变在不同分级之间的差异具有统计学意义(P<0.05),四染色体探针组合诊断膀胱癌的总阳性率为80.4%;膀胱癌尿脱落细胞的FISH检出率明显高于尿细胞形态学.结论:膀胱癌的发生发展与染色体的畸变有关,膀胱癌尿脱落细胞的FISH检测,对膀胱癌的早期诊断、预后评估及复发监测等具有重要价值.     

端粒酶活性检测在膀胱肿瘤早期诊断中的应用

目的：探讨检测端粒酶活性在膀胱癌早期诊断中的临床意义。方法：采用TRAP-PCR-ELISA法检测32例膀胱癌患者尿液和膀胱冲洗液中脱落细胞、膀胱癌组织、20例正常膀胱组织及14例非膀胱肿瘤患者尿液脱落细胞中端粒酶活性，并行尿脱落细胞学检查。结果：32例膀胱癌患者尿液脱落细胞、膀胱冲洗液脱落细胞、膀胱癌组织中端粒酶活性阳性率分别为65．6％（21／32）、71．9％（23／32）和84．0％（27／32），20例正常膀胱组织端粒酶活性均为阴性，14例非膀胱肿瘤患者尿液中1例端粒酶活性阳性。端粒酶活性阳性表达与肿瘤的分级、分期之间差异无明显相关性（P〉0．05），敏感性明显高于脱落细胞病理学检查。结论：尿液、膀胱冲洗液脱落细胞端粒酶活性测定敏感性较高．可用于膀胱癌的早期诊断。     

应用荧光原位杂交技术检测膀胱癌的研究

目的应用荧光原位杂交((fluorescence in situ hybridization,FISH)技术检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中染色体异常,评估FISH在中国人群中诊断膀胱癌的作用。方法2007年1月至2008年8月,随机留取20例良性前列腺增生症患者的新鲜尿液,用3号和7号、17号及p16位两组混合探针,通过在尿液脱落细胞标本上进行FISH检测,建立正常人群的阈值;其后随机留取30例门诊膀胱镜活检证实的膀胱癌患者的尿液,同时进行尿液脱落细胞的细胞形态学分析及FISH检测,对比检查结果。结果3号、7号和17号染色体非整倍性改变及p16位点异常正常阈值分别为8.5%、7.1%、6.8%和9.2%,FISH与细胞学检查总敏感性分别为76.6%和43.3%(P<0.05)。T_(is)及T_a、T_1患者FISH检测的敏感性分别为80.0%和64.2%,脱落细胞组织学检测显示敏感性分别为40.0%和35.7%;T_(2-3)患者FISH的敏感性为90.9%,而脱落细胞组织学检测为54.7%(P<0.05),低级别尿路上皮癌FISH及细胞学敏感性分别为68.4%和31.6%;高级别分别为90.9%和63.6%。结论与尿液脱落细胞组织学检测相比,对尿液脱落细胞进行FISH检测可以提高膀胱癌的诊断率,FISH可以作为诊断膀胱癌的一种无创伤的新方法。     

人膀胱癌细胞角蛋白20 mRNA表达的研究

目的　评估细胞角蛋白 2 0mRNA(CK2 0mRNA)是否可以作为膀胱癌临床诊断的一种有用标志物。方法　对 84例肉眼血尿患者的尿液进行尿脱落细胞学及CK2 0mRNA标记物RT/PCR检测。分析参数包括肿瘤数目、大小及WHO分级 ,术前或活检前尿脱落细胞学和CK2 0mRNA标志物。结果　病理活检证实 2 2例移行细胞癌中 ,CK2 0mRNA 18例为阳性 ,4例阴性 ;6 2例非膀胱癌患者中 ,CK2 0mRNA标志物 2例假阳性。与尿脱落细胞学比较 ,CK2 0mRNA标志物对膀胱移行细胞癌诊断的特异性和阳性预报值更高 ,分别为 96 .8%比 77.4 % (U =3.2 1,P <0 .0 1) ,90 %比 5 1.7% (U =2 .81,P <0 .0 1) ;但两者在敏感性和阴性预报值间无显著性差异 (U值分别为 :1.0 4和 1.2 1,P >0 .0 5 )。CK2 0mRNA表达与肿瘤分级间无明显相关性。结论　通过RT/PCR方法检测CK2 0mRNA是诊断膀胱移行细胞癌的一种良好生物标志物 ,其特异性明显优于尿脱落细胞学。     

双色荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮肿瘤诊断中的应用价值

 目的 探讨双色荧光原位杂交技术（FISH)诊断膀胱尿路上皮肿瘤的临床应用价值。方法 标记为3,7,17号染色体着丝粒及9号染色体p16位点9p21区带探针,采用FISH对80例膀胱尿路上皮肿瘤患者尿液间期细胞核进行荧光原位杂交,同时选取20例健康体检者作为正常对照组,建立阈值,以组织病理结果作为诊断“金标准”,统计染色体畸变情况,分析其与病理分期、分级的关系以及染色体畸变组合诊断膀胱尿路上皮肿瘤的敏感性。结果 3、7、17号染色体和9p21的畸变率分别为47.5%（38/80）、60.7%（49/80）、51.3%（41/80）和58.8%（47/80）,3、7、9和17号染色体联合检测膀胱癌的阳性率为76.3%(61/80),畸变和肿瘤分期无相关性,3、7、17号染色体与肿瘤病理分级有显著相关性（P﹤0.05）。 结论 膀胱尿路上皮肿瘤的进展可能与染色体的畸变有关,FISH可以作为膀胱尿路上皮肿瘤诊断的一项重要方法,并可能在术后监测复发以及预后判断中具有重要临床意义。     

荧光原位杂交检测尿路上皮癌分子细胞遗传学变异的临床应用研究*

目的:探讨荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）在检测尿路上皮癌患者尿液中脱落细胞核染色体畸变的临床应用价值。方法:采用3 号、7 号及17号染色体着丝粒特异性探针及p16位点特异性DNA探针对20例正常人尿液进行FISH检测,建立阈值。对115 例疑似尿路上皮肿瘤血尿患者的尿液进行FISH检测,以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为诊断阳性。同时采用常规HE染色法进行尿脱落细胞形态学分析。结果:荧光原位杂交（FISH）技术和尿脱落细胞学诊断尿路上皮癌的灵敏度分别为86.7%（78/90）和10.0%（9/90）（P<0.001）;特异度分别为96.0%（24/25）和100%（25/25）（P>0.05）;阳性预测值分别为98.7%（78/79）和100%（9/9）（P>0.05）;阴性预测值分别为66.7%（24/36）和23.6%（25/106）（P<0.05）。 FISH技术诊断尿路上皮癌的灵敏度与尿路上皮癌的病理分级及分期无关,低级别和高级别尿路上皮癌FISH技术诊断的阳性率分别为85.7% 和87.5%（P>0.05）;非肌层浸润性和肌层浸润性尿路上皮癌的阳性率分别为84.2% 和88.4%（P>0.05）。 结论:尿脱落细胞荧光原位杂交技术诊断尿路上皮癌灵敏度高,特异度强,无创伤性,可作为尿路上皮癌早期诊断的一项重要方法,并可在预测肿瘤生物学行为及预后关系上具有重要的临床意义。      

环氧化酶-2 在膀胱癌组织及尿脱落细胞中的表达和意义

 目的 探讨COX-2在膀胱癌组织中的表达，了解尿脱落细胞COX-2表达在膀胱癌早期诊断中的价值。方法 应用免疫组化技术检测48例膀胱移行细胞癌组织、免疫细胞化学技术检测40例膀胱移行细胞癌患者和30例非肿瘤患者尿脱落细胞COX-2的表达。结果 膀胱移行细胞癌组织COX-2阳性表达率为72．9％，对照组正常膀胱黏膜无表达。COX-2的表达与膀胱癌临床分期显著相关(P<0．05)，不同病理分级膀胱癌的表达差别无显著性意义。非肿瘤患者尿脱落细胞无COx-2表达，膀胱癌尿脱落细胞COX-2免疫细胞化学检测阳性率为67．5％，明显高于常规尿细胞学的37．5％(P<0．05)，尤其对于G1级和Ta～T1期的低级、早期肿瘤，尿脱落细胞COX-2免疫细胞化学检测与常规尿细胞学检查相比，具有显著性意义(P<0．05)。结论 COX-2在膀胱移行细胞癌的发生发展中起重要作用，与肿瘤的浸润、转移相关。尿脱落细胞COX-2表达检测特异性高，可作为早期诊断膀胱癌的一种标志物。     

尿脱落细胞FISH检测在膀胱癌诊断中的应用

目的:研究尿脱落细胞FISH检测提高膀胱癌早期诊断的可行;方法:收集68例腺膀胱炎患者晨尿通过FISH检测GLP p16、CSP3、CSP17和CSP7染色体异常信号,并用统计学方法计算出阈值.为了验证FISH检测的优越,实验选取临床诊断膀胱癌最常用的尿脱落细胞学检测作为研究对照方法,收集100例疑似膀胱癌患者尿液标本,分别对尿脱落细胞和FISH检查诊断膀胱癌的敏感、特异、FISH检测与膀胱癌临床及病理特征的关系进行统计学分析.结果:100例疑似膀胱癌患者尿脱落细胞及FISH检测的阳率分别为56.0％ (56/100)和77.0％(77/100),敏感度分别为56.10％(46/82)和82.02％(73/89),经统计学分析两种检查方法之间的差异具有统计学意义.FISH检测的敏感和总阳率明显高于尿脱落细胞,而特异两者差异无统计学意义.FISH检测与膀胱癌的病理分级和临床分期均无相关.结论:FISH检测技术是能够成为提高膀胱癌早期诊断的一种新技术.     

荧光原位杂交在尿路上皮癌诊断中的应用

目的:检测尿路上皮肿瘤患者尿液脱落细胞染色体的缺失和非整倍异常,探讨FISH技术作为尿路上皮肿瘤患者无创诊断方法的价值.方法:收集可疑尿路上皮肿瘤患者和健康对照人群的新鲜尿液,同步进行细胞形态学分析及荧光原位杂交(Fluorescencein situ hybridization,FISH)检测3号、7号及17号染色体、9号染色体p16位点异常.共入选可疑尿路上皮肿瘤患者100例,正常健康对照组20例,采用正常对照组患者各染色体异常数据设定阈值用于肿瘤患者的实验室诊断.根据检验结果与病理结果对照分别计算FISH和脱落细胞的敏感度和特异度并进行统计学分析.结果:与正常对照组相比,尿路上皮肿瘤患者尿液脱落细胞染色体异常明显增多.尿脱落细胞学的敏感度和特异度分别为71%和80%,FISH的敏感度和特异度分别为88%和80%(P<0.01).根据两种检测方法的敏感度和特异度绘制的接受者工作特征(ROC)曲线显示尿脱落细胞学和FISH的曲线下面积分别为0.758和0.842.结论:对可疑尿路上皮肿瘤的患者进行FISH检测是一种有价值的无创检测方法.FISH的总体敏感度高于尿脱落细胞学,特异度与尿脱落细胞学相当.     

细胞角蛋白20对膀胱癌早期诊断的前瞻性研究

目的：评估细胞角蛋白20（CK20）标志物作为膀胱癌早期诊断及临床监测的价值。方法：对62例患者的尿液进行尿脱落细胞学及CK20标志物免疫荧光检测的前瞻性研究。分析参数包括肿瘤数目、大小及WHO分级，术前或活检前尿脱落细胞学和CK20标志物。结果：病理活检证实15例移行细胞癌中，CK20为13例阳性，2例阴性；47例非膀胱癌中，CK20标志物2例假阳性。与尿脱落细胞学比较，CK20标志物对膀胱移行细胞癌诊断的特异性和阳性预报值更高，分别为96．0％比82．5％（U＝2．18，P＜0．05），86．7％比52．4％（U＝2．16，P＜0．05）；但两者在敏感性和阴性预报值间无显著性差异（U值分别为：0．91和1．02，P＞0．05）。CK20表达与肿瘤分级间无明显相关性。结论：CK20是诊断膀胱移行细胞癌的一种良好标志物，其特异性明显优于尿脱落细胞学。     

RT-PCR法检测尿脱落细胞中XIAP的表达在膀胱癌诊断中的价值

目的：比较膀胱癌患者尿液脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法和常规尿脱落细胞病理学检测在膀胱癌诊断中的临床价值。方法：采用逆转录聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测51例膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中XIAP-mRNA的表达,同时行常规尿脱落细胞病理学检测,20例非肿瘤人员作为对照组。结果：实验组51例尿脱落细胞XIAP-mRNA RT-PCR检测阳性27例（53%）,尿脱落细胞学病理学检测阳性12例（24%）,对照组20例尿脱落细胞XIAP-mRNA检测阳性1例（5.0%）,对照组尿脱落细胞病理学检测阳性0例（0%）。实验组RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌患者尿脱落细胞中XIAP表达的敏感性高于尿脱落细胞病理学检测,差异有极显著统计学意义（P〈0.01）,实验组RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌患者尿中XIAP表达的敏感性显著高于非肿瘤对照组,差异有极显著统计学意义（P〈0.01）。结论：膀胱尿路上皮癌患者尿脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法较常规尿脱落细胞病理学检测更敏感,临床上作为膀胱癌的筛选方法,有一定的临床价值。     

RT-PCR法检测尿脱落细胞中XIAP的表达在膀胱癌诊断中的价值

目的:比较膀胱癌患者尿液脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法和常规尿脱落细胞病理学检测在膀胱癌诊断中的临床价值。方法:采用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测51例膀胱尿路上皮癌患者尿液脱落细胞中XIAP-mRNA的表达,同时行常规尿脱落细胞病理学检测,20例非肿瘤人员作为对照组。结果:实验组51例尿脱落细胞XIAP-mRNA RT-PCR检测阳性27例(53%),尿脱落细胞学病理学检测阳性12例(24%),对照组20例尿脱落细胞XIAP-mRNA检测阳性1例(5.0%),对照组尿脱落细胞病理学检测阳性0例(0%)。实验组RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌患者尿脱落细胞中XIAP表达的敏感性高于尿脱落细胞病理学检测,差异有极显著统计学意义(P<0.01),实验组RT-PCR检测膀胱尿路上皮癌患者尿中XIAP表达的敏感性显著高于非肿瘤对照组,差异有极显著统计学意义(P<0.01)。结论:膀胱尿路上皮癌患者尿脱落细胞中XIAP表达的RT-PCR检测法较常规尿脱落细胞病理学检测更敏感,临床上作为膀胱癌的筛选方法,有一定的临床价值。     

尿液核基质蛋白22在膀胱移行上皮癌筛检中的价值

目的：评价尿核基质蛋白22(NMP22)在膀胱移行上皮癌筛检中的意义。方法：采用酶联免疫法检测28例膀胱移行上皮癌、25例泌尿系良性疾病和10例泌尿系非移行上皮癌患者尿NMP22水平，并与尿脱落细胞学检查进行比较。结果：膀胱移行上皮癌患者尿NMP,,中位值为66．5u／ml，明显高于泌尿系良性疾病和非移行上皮癌，与肿瘤分期、分级、数目无关，以10u／ml为临界，诊断膀胱癌敏感性为85．7％，特异性为60％，尿脱落细胞学检查敏感性为32．1％，特异性为100％。结论：尿NMP22检测膀胱移行上皮癌敏感性、特异性均较高，可用于膀胱移行上皮癌的筛选和术后随访。     

多色荧光原位杂交在膀胱尿路I皮癌诊断中的应用

背景与目的:膀胱尿路上皮癌是我国泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤.本研究旨在分析中国人膀胱尿路上皮癌中染色体畸变的情况,探讨多色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,M-FISH)技术辅助诊断膀胱尿路上皮癌的可行性和有效性.方法:用随机引物法标记3、7、17号染色体着丝粒及9p21区带探针,对57例膀胱尿路上皮癌间期细胞核进行荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH),统计染色体畸变情况并分析其与病理分期、分级的关系以及染色体畸变组合诊断膀胱尿路上皮癌的阳性率.结果:3、7、17号染色体和9p21的畸变率分别为47.4%(27/57)、50.9%(29/57)、56.1%(32/57)和59.6%(34/57),畸变与分期无相关性,3、7和17号染色体畸变与病理分级有显著相关性(P＜0.01).四个探针组合诊断膀胱尿路上皮癌的总阳性率为54.4%.结论:M-FISH技术检测有助于探索3、7、17号染色体畸变与病理分级的关系.     

Comparison of chromosomal aberrations detected by fluorescence in situ hybridization with clinical parameters, DNA ploidy and Ki 67 expression in renal cell carcinoma.

To evaluate the significance of chromosomal aberrations in renal cell carcinoma, fluorescence in situ hybridization (FISH) was used to determine its prevalence and correlation with clinical parameters of malignancy. In addition, correlation of chromosomal aberration with Ki 67 expression was analysed. We performed FISH with chromosome-specific DNA probes, and the signal number of pericentromeric sequences on chromosomes 3, 7, 9 and 17 was detected within interphase nuclei in touch preparations from tumour specimen. The incidence of loss of chromosome 3 was significantly higher than those of chromosomes 7, 9 and 17 (P < 0.001, P = 0.03 and P < 0.001 respectively). Hyperdiploid aberration of chromosomes 3 and 17 was significantly correlated with tumour stage (P = 0.03, P = 0.02 respectively), whereas hyperdiploid aberration of chromosome 9 was associated with nuclear grade (P = 0.04). Disomy of chromosome 7 was correlated with venous involvement (P = 0.04). Ki 67 expression was significantly associated with hyperdiploid aberration of chromosome 17 (P = 0.01), but not with aberration of chromosome 3. There was a significant relationship between hyperdiploid aberration of chromosome 7 and Ki 67 expression (P = 0.01). In conclusions, gain of chromosome 17 may reflect tumour development, and aberration of chromosome 7 may affect metastatic potential of malignancy, whereas loss of chromosome 3 may be associated with early stage of tumour development in renal cell carcinoma.