整合素αvβ3抑制剂Cyclo-RGDfK对纤连蛋白诱导乳腺上皮细胞间质转化的影响

目的本研究探讨整合素αvβ3抑制剂(Cyclo-RGDfK)对纤连蛋白(fibronectin,FN)诱导人乳腺上皮细胞MCF-10A上皮间质转化的影响。方法体外传代培养MCF-10A细胞,采用FN诱导建立上皮间质转化(EMT)模型。Western blot实验检测αv integrin、β3 integrin、上皮标志物E-cadherin和间充质标志物N-cadherin、Vimentin的蛋白表达;划痕修复实验和Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果 Western blot结果显示FN作用48 h后可明显增强αv integrin、β3 integrin、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达,下调E-cadherin蛋白表达,在给予Cyclo-RGDfK作用后,FN诱导的N-cadherin和Vimentin表达上调和E-cadherin表达下调被明显逆转;划痕修复实验和Transwell小室实验结果表明,FN能显著增强MCF-10A细胞迁移和侵袭能力,Cyclo-RGDfK能显著抑制FN的诱导作用。结论 Cyclo-RGDfK能抑制FN诱导乳腺上皮细胞MCF-10A的EMT过程,降低细胞的侵袭和迁移能力,其可能是治疗乳腺癌转移的潜在药物。     

蛇葡萄素对人前列腺癌DU145细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨蛇葡萄素（AMP）对人前列腺癌DU145细胞增殖、迁移和侵袭的影响,研究其对转化生长因子β（TGF-β）诱导的上皮间质转化（EMT）模型的作用。方法：用不同浓度的AMP处理DU145细胞,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖情况;Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力;细胞免疫荧光实验表征不同浓度TGF-β处理后细胞内E-cadherin和Vimentin表达情况,确定EMT模型最佳诱导浓度;Western blot法进一步检测加药后EMT模型E-cadherin和Vimentin表达情况。结果：AMP对DU145细胞增殖具有显著的抑制作用,24、48、72 h的IC50分别为35.62、32.71、28.43 μg·mL-1;Transwell实验显示AMP处理后穿膜细胞数明显减少,显著抑制细胞的迁移和侵袭能力;细胞免疫荧光实验表征发现TGF-β诱导后细胞内E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调,确定10 ng·mL-1为TGF-β诱导EMT模型的最佳浓度。Western blot法检测显示,与对照组相比,TGF-β组和TGF-β+AMP组的细胞内E-cadherin表达下调,Vimentin表达上调,此外,与TGF-β组相比,TGF-β+AMP组细胞内E-cadherin表达变化无统计学差异,但Vimentin表达降低（P<0.05）,表明AMP具有逆转EMT过程的作用。结论：AMP不仅能够抑制人前列腺癌DU145细胞的增殖,还可抑制其迁移和侵袭能力,这可能与逆转EMT过程有关。     

小檗胺对肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移的影响

目的 研究小檗胺对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移作用的影响及其可能的机制。方法 在体外用不同浓度小檗胺处理肝癌SMMC-7721细胞,采用MTT法检测细胞活力的变化;采用细胞划痕试验、Transwell迁移和侵袭试验检测肿瘤细胞侵袭转移能力;采用Western blot法检测细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达。结果 MTT结果显示浓度<20 μmol·L^-1的小檗胺对SMMC-7721细胞存活率无显著影响。划痕试验和Transwell结果显示,小檗胺呈浓度依赖性抑制肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭过程。Western blot结果表明,小檗胺显著增强SMMC-7721细胞中E-cadherin表达,而减弱Vimentin表达。结论 人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力可被小檗胺抑制,其机制可能与其调控上皮间质转化相关蛋白的表达有关。     

小檗碱通过TGF-β/Smad通路抑制TGF-β1诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化的研究

目的探讨小檗碱(berberine)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的人肝癌HepG2细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用及其机制。方法MTT法检测小檗碱对HepG2细胞增殖活性;采用10 ng·L-1 TGF-β1诱导HepG2细胞EMT模型形成,并加入小檗碱处理;克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室实验分别检测HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;免疫荧光法检测EMT间质标志物Vimentin的表达;Western blot法检测EMT标志物蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Snail)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、TGF-β/Smad通路蛋白(Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3)的表达。结果小檗碱呈浓度时间依赖性抑制HepG2细胞活性;与TGF-β1组比较,小檗碱可以明显抑制HepG2细胞的克隆形成能力、迁移和侵袭能力;并且小檗碱可以抑制TGF-β1上调的E-cadherin蛋白表达,和TGF-β1下调的N-cadherin、Vimentin、Snail、MMP-2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结论小檗碱可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路,干预TGF-β1诱导HepG2细胞的EMT进程,抑制HepG2细胞的迁移和侵袭能力。     

NGF/TrkA轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨神经生长因子（NGF）/原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)轴对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 体外培养正常宫颈上皮细胞HUCEC和宫颈癌细胞SiHa,将SiHa细胞分为对照组（正常培养）、L-NGF组（50μg/L重组人NGF蛋白）、H-NGF组（100μg/L重组人NGF蛋白）、H-NGF+L-K252a组（100μg/L重组人NGF蛋白+50μg/L K252a）、H-NGF+H-K252a组（100μg/L重组人NGF蛋白+100μg/L K252a）。Western blot检测NGF、TrkA、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达;CCK-8法检测SiHa细胞增殖情况;流式细胞术检测SiHa细胞凋亡;划痕愈合实验测定细胞迁移;Transwell试验测定细胞侵袭。结果 SiHa细胞较HUCEC细胞NGF、TrkA水平升高（P<0.01）。与对照组相比,L-NGF组、H-NGF组NGF、TrkA水平,增殖活力,迁移率,侵袭细胞数量以及N-cadherin、Vimentin蛋白水平...     

三叶青黄酮抗肺癌作用研究

目的研究三叶青黄酮对肺癌A549细胞增殖抑制和侵袭转移作用及其机制。方法采用MTT法检测三叶青黄酮对A549细胞增殖的抑制作用;集落形成试验检测三叶青黄酮对A549细胞抗癌活性的影响;划痕试验检测三叶青黄酮对细胞迁移力的影响;Transwell实验检测三叶青黄酮对A549细胞侵袭力变化;Western blot法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-2等侵袭转移相关蛋白表达水平。结果三叶青黄酮抑制A549细胞增殖程度与用药浓度、时间呈正相关;随着药物浓度的增高,细胞集落形成的数量明显减少,细胞向划痕区的迁移速度不断减慢;穿过Transwell小室的侵袭细胞亦明显减少;MMP-2、MMP-9蛋白表达逐渐降低,TIMP-2蛋白表达升高,呈浓度依赖性。结论三叶青黄酮能够抑制肺癌A549细胞的侵袭转移,可能与降低MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。     

RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号促进人胃癌MGC803细胞上皮间质转化

目的 探讨RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号对促进人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化(epithelial–mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。Western blot与免疫荧光检测RORα/β-catenin信号相关分子,免疫共沉淀检测RORα蛋白与β-catenin蛋白结合。结果 MTT检测显示,T0901317处理组较MGC803细胞增殖能力呈时间依赖性增加(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验显示,T0901317处理组细胞迁移与侵袭能力较MGC803细胞明显增强(P<0.05)。Western blot检测显示,T0901317处理后较未处理组RORα蛋白明显下调(P<0.05),并且可上调MGC803细胞β-catenin总蛋白与核内β-catenin(P<0.05)。T0901317处理后较对照组RORα蛋白与β-catenin蛋白结合分别明显减少(P<0.05)。T0901317处理的细...     

桦木酸对人胃癌MKN-45细胞上皮-间充质转化的影响北大核心CSCD

目的观察桦木酸(betulinic acid,BA)对转化生长因子-β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)诱导的人胃癌MKN-45细胞迁移与侵袭能力的影响,并从上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)方面探讨相关作用机制。方法体外培养MKN-45细胞,采用CCK-8法分别检测24、48和72 h不同浓度BA对MKN-45细胞增殖的影响;通过细胞划痕实验和Transwell侵袭实验观察BA(5、10、20μmol·L^(-1))和TGF-β1抑制剂LY2109761(10μmol·L^(-1))对TGF-β1(10μg·L^(-1))诱导后MKN-45细胞侵袭与转移水平的影响;采用Western blot法检测各组MKN-45细胞中TGF-β1、E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达情况。结果BA能以时间及浓度依赖性地抑制MKN-45细胞的增殖,干预24、48、72 h后的IC 50值分别为212.8、22.72、13.17μmol·L^(-1)。与空白组相比,TGF-β1诱导后MKN-45细胞的划痕迁移(P<0.05)与Transwell侵袭(P<0.01)水平明显增加;MKN-45细胞中TGF-β1(P<0.01)、N-Cadherin(P<0.05)、MMP-2(P<0.01)明显上调,E-Cadherin(P<0.01)明显下调。与TGF-β1组相比,LY2109761能明显逆转TGF-β1诱导的MKN-45细胞迁移与侵袭能力(P<0.01),下调TGF-β1、N-Cadherin、MMP-2(P<0.01),并上调E-Cadherin(P<0.01);BA能呈浓度依赖性地抑制TGF-β1诱导下MKN-45细胞的迁移与侵袭能力(P<0.01),下调TGF-β1(P<0.01)、N-Cadherin(P<0.01)、MMP-2(P<0.05或P<0.01),并上调E-Cadherin(P<0.01)。结论BA能抑制胃癌MKN-45细胞的迁移与侵袭能力,其机制可能与阻滞TGF-β1诱导的EMT进程有关。     

熊果酸对IL-6介导的乳腺癌细胞侵袭与迁移的抑制作用

目的 探讨熊果酸对白细胞介素6(IL-6)介导的乳腺癌MDA-MB-231细胞（简称“231细胞”）的侵袭与迁移的抑制作用。方法 采用CCK-8法检测20、40、80、160、320μmol/L熊果酸对231细胞增殖率的影响。将细胞分为对照组、模型组和给药组,划痕实验与Transwell实验检测细胞的迁移能力与侵袭能力;实时荧光定量聚合酶链式反应（q-PCR）法与Western blot法检测细胞上皮间质转化相关标志物E钙黏蛋白（E-cad）、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、波形蛋白（Vim）、CD44分子（CD44）、醛脱氢酶1家族成员A1(ALDH1A1)mRNA与蛋白的相对表达情况;Western blot法检测Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3(JAK2/STAT3)通路中JAK2、STAT3的磷酸化水平[以磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2比值、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3比值计]。结果 实验选取熊果酸低浓度20μmol/L（对细胞增殖能力无明显抑制作用）作为后续给药浓度。与对照组比较,模型组细胞的迁移、侵袭能力均显著增强（P<0...     

七氟醚对卵巢癌干细胞特性及增殖、侵袭迁移能力的影响

目的 探究七氟醚对卵巢癌细胞SKOV3干细胞特性及增殖、侵袭迁移能力的影响。方法 常规培养人卵巢癌细胞SKOV3于培养瓶中,分为七氟醚组及对照组,七氟醚组以5% CO₂和1%七氟醚培养24 h,对照组仅以5% CO₂培养24 h,MTT法检测两组细胞增殖能力的变化,Transwell侵袭及迁移实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blotting检测两组细胞干细胞特性相关分子（Oct4及Sox2）及上皮间充质转化（EMT）相关分子（E-cadherin、Vimentin）的表达差异。结果 七氟醚组细胞72、96 h时间点增殖能力显著低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。七氟醚组穿透Matrigel基质胶的细胞数、迁出Transwell上小室的细胞数均明显少于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。七氟醚组Oct4、Sox2、Vimentin表达均显著低于对照组,E-cadherin表达显著高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 七氟醚可通过减轻卵巢癌细胞EMT进程及干细胞特性,抑制细胞增殖及侵袭迁移能力。     

长链非编码RNA HOTAIR促进胶质瘤细胞侵袭

目的探讨长链非编码RNA HOTAIR对人脑胶质瘤细胞侵袭的促进作用。方法采用HOTAIR-siRNA寡聚核苷酸转染胶质瘤U87和U251细胞系,通过实时荧光定量PCR技术检测HOTAIR在胶质瘤细胞中的表达水平。利用Western blot验证上皮间质化相关通路蛋白(Snail、Stat3和β-catenin)、标记蛋白(E-cadherin、CDH13和Vimentin)和侵袭迁移相关基质金属蛋白酶(MMP2、MMP9)的表达变化。采用Transwell实验,观察敲低HOTAIR后其对胶质瘤细胞侵袭的影响。结果下调HOTAIR表达后,U87和U251细胞的上皮间质化相关信号通路蛋白降低,E-cadherin和CDH13升高,Vimentin降低,MMP2和MMP9表达下降,细胞侵袭能力减弱(P<0.01)。结论 HOTAIR通过诱导上皮间质化促进了胶质细胞侵袭能力。     

雷公藤甲素通过miR-320bAR轴对前列腺癌细胞的抑制作用

目的 观察雷公藤甲素(triptolide, TPL)对前列腺癌细胞恶性生物学行为的作用,探究其作用机制。方法 用实时荧光PCR(real-time fluorescence PCR,RT-PCR)检测LNCaP、PC-3、DU145前列腺癌细胞、RWPE-1人正常前列腺上皮细胞中miR-320b和雄激素受体(androgen receptor, AR)mRNA的表达水平。用不同剂量的TPL处理PC-3细胞,用MTT法检测细胞的增殖活力。用RT-PCR检测miR-320b和AR的表达水平。用6.25 nmol·L^(-1) TPL处理细胞,在TPL处理的基础上转染miR-320b NC/mimics,用Transwell和平板克隆形成实验检测细胞的侵袭和克隆能力。用Western blot检测AR及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)过程中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。用荧光素酶实验验证miR-320b与AR的靶向关系。结果 与RWPE-1人正常前列腺上皮细胞比较,miR-320b和AR分别在前列腺癌细胞中呈低表达和高表达状态(P<0.01)。与Control组比较,TPL可上调PC-3细胞miR-320b的表达水平、下调AR的表达水平,抑制细胞的增殖、侵袭能力,抑制AR、N-cadherin和vimentin的表达、上调E-cadherin的表达水平(P<0.05)。与TPL组比较,miR-320b可提高TPL对PC-3细胞侵袭和增殖能力的抑制作用,抑制AR、N-cadherin和vimentin的表达、上调E-cadherin的表达(P<0.05)。荧光素酶实验显示,AR是miR-320b的潜在靶基因,miR-320b对AR存在显著调控作用(P<0.01)。结论 TPL可能通过miR-320b/AR轴抑制前列腺癌细胞的恶性生物学行为。     

沉默T-cadherin对ox-LDL诱导人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo生物学行为的影响

目的 探讨沉默T-钙黏蛋白（T-cadherin）对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo生物学行为的影响。方法 将人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白对照组、ox-LDL组、Tcadherin小干扰RNA(siRNA)阴性对照组、T-cadherin siRNA组。各组细胞转染后,实时荧光定量PCR检测各组Tcadherin mRNA水平;MTT法检测HTR-8/SVneo细胞增殖情况;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell小室实验、划痕实验分别检测细胞侵袭、迁移能力;蛋白免疫印迹实验检测细胞胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达水平。结果 与空白对照组相比,ox-LDL组和T-cadherin siRNA阴性对照组T-cadherin mRNA、细胞增殖抑制率、凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表达水平升高,克隆形成率、侵袭细胞数、划痕愈合率、Bcl-2、MMP-2、...     

Survivin异常表达对前列腺癌转移及TGF-β/Smad通路的调节作用#br#

目的　探讨生存素（Survivin）异常表达在前列腺癌（PCa）转移中的作用及机制。方法　（1）通过TCGA数据库分析Survivin mRNA在正常前列腺组织和PCa组织中表达差异,分析有无淋巴结转移、Gleason分级以及预后信息。（2）采用免疫组化染色检测15例良性前列腺增生（BPH）活检标本和60例PCa活检标本中Survivin蛋白表达,比较患者不同临床特征间Survivin蛋白表达的差异。（3）常规培养人前列腺增生细胞系BPH和人PCa细胞系LNCaP、Du-145、PC-3,Western blot检测Survivin蛋白表达。利用LNCaP细胞构建Survivin稳定过表达组（Survivin-OE组）和相应对照组（Vector组）,同时在PC-3细胞中构建Survivin稳定敲低组（Survivin-KD组）和相应对照组（NC组）。CCK-8增殖实验与Transwell实验检测敲低和过表达Survivin后细胞增殖、侵袭能力的变化。Western blot检测2种细胞中Survivin、上皮间质转化（EMT）特征分子上皮细胞钙黏素（E-cadherin）、神经钙黏素（N-cadherin）,以及转化生长因子（TGF）-β/Smad通路相关蛋白TGF-β1、磷酸化Smad2/3（pSmad2/3）、Smad2/3、Smad4蛋白表达水平的改变。结果　（1）TCGA数据库分析结果显示,Survivin在PCa组织中异常高表达,出现淋巴结转移的患者Survivin表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.01）;且随着Gleason分级的升高,Survivin表达水平越高（P＜0.01）;同时Survivin高表达的PCa患者的无进展生存时间明显短于Survivin低表达的患者（P＜0.01）。（2）免疫组织化学证实,PCa标本中Survivin蛋白高表达比例明显高于BPH组织（60.0% vs. 26.7%,χ2=5.357,P＜0.05）。且临床分期T3+T4期、局部淋巴结转移和远处转移者Survivin高表达比例明显升高（P＜0.05）。（3）体外实验结果显示,LNCaP、Du-145、PC-3细胞中Survivin表达水平均高于BPH（P＜0.05）。LNCaP细胞过表达Survivin后,细胞增殖和侵袭能力增强,上皮标志物E-cadherin表达下降、间质标志物N-cadherin表达升高,同时TGF-β1、pSmad2/3和Smad4蛋白表达水平增加。而PC-3细胞敲低Survivin后,细胞增殖和侵袭能力减弱,上皮标志物E-cadherin表达增加、间质标志物N-cadherin表达降低,TGF-β1、pSmad2/3和Smad4蛋白表达水平降低。结论　Survivin在PCa中异常高表达,其可以通过调节TGF-β/Smad通路来促进肿瘤细胞EMT,进而提高PCa的转移与侵袭能力。     

芒柄花黄素通过circ0020123/miR-145对胰腺癌细胞增殖迁移侵袭的影响

摘要：目的:探讨芒柄花黄素对胰腺癌细胞的影响及分子机制。方法:将胰腺癌细胞SW1990分为对照组、芒柄花黄素低、中、高剂量组(10,30,100μmol·L-1)、si-circ0020123组、si-NC组、芒柄花黄素(100μmol·L-1)+pcDNA-circ0020123组、芒柄花黄素(100μmol·L-1)+pcDNA组;蛋白质印迹（Western blot）法检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测集落形成数;划痕实验检测细胞划痕愈合率;Transwell检测侵袭细胞数;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测circ0020123和miR-145的表达水平;双荧光素酶报告实验检测circ0020123和miR-145的靶向关系。结果:不同剂量芒柄花黄素处理后,胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制率、E-钙黏蛋白（E-cadherin）及miR-145表达水平升高,集落形成数和侵袭细胞数减少,细胞划痕愈合率、N-钙黏蛋白（N-cadherin）及circ0020123表达水平降低（P<0.05）。干扰circ0020123表达后,细胞增殖抑制率、E-cadherin及miR-145表达水平升高,集落形成数和侵袭细胞数减少,细胞划痕愈合率、N-cadherin及circ0020123表达水平降低（P<0.05）。circ0020123过表达可减弱芒柄花黄素对SW1990增殖迁移侵袭的抑制作用。circ0020123靶向调控miR-145。结论:芒柄花黄素通过调控circ0020123/miR-145抑制胰腺癌细胞的增殖与转移。     

汉黄芩素调控miRNA-135b-3p靶向SIX4抑制A549细胞上皮间质转化的分子机制

目的 探究汉黄芩素对人非小细胞肺癌A549细胞侵袭转移的影响及其对EMT的作用和分子机制。 方法 （1）研究汉黄芩素对A549增殖、侵袭转移的影响。MTT实验检测汉黄芩素对A549细胞的毒性作用，HE染色观察汉黄芩素处理前后形态学变化，划痕实验、Transwell小室实验检测侵袭转移能力，Western Blot和qRT-PCR实验测定EMT相关标志物表达情况。（2）研究A549细胞EMT相关miRNA及调控机制。利用高通量测序技术，检测汉黄芩素处理TGF-β1诱导的A549后差异表达的miRNA，进行qRT-PCR验证；划痕实验、Transwell小室实验分析细胞转染miRNA mimic、inhibitor和NC后A549细胞侵袭转移能力，Western Blot和qRT-PCR实验测定EMT相关标志物的表达情况。运用GO和KEGG数据库分析，找出目标miRNA作用的靶基因；Western Blot实验和qRT-PCR实验验证miRNA mimic、inhibitor和NC转染后靶基因及蛋白的表达情况；双荧光素报告酶基因实验证明该miRNA对靶基因翻译的调控作用。 结果 （1）汉黄芩素可抑制A549细胞的生长增殖，上调TGF-β1诱导的A549细胞E-cadherin及下调Vimentin的表达，降低细胞迁移的能力，逆转细胞的形态变化。（2）高通量测序得到差异表达的miRNA，其中汉黄芩素可逆转miRNA-135b-3p在A549细胞EMT过程中的过表达，抑制A549细胞的侵袭和转移。 pathway分析及miRNA数据库靶基因预测miRNA-135b-3p可调控SIX4的表达。双荧光素报告基因实验显示miRNA-135b-3p可结合于SIX4基因的3’-UTR产生调控，过表达miRNA-135b-3p的A549细胞SIX4表达降低，敲低miRNA-135b-3p后可恢复。 结论 汉黄芩素调控miRNA-135b-3p靶向SIX4抑制A549细胞的侵袭转移和EMT过程。     

阿司匹林对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移与侵袭作用机制研究

目的 探讨阿司匹林对人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移与侵袭的影响和机制。方法 将人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞株分为对照组和阿司匹林（0.00、1.25、2.50、5.00、10.00mmol/L）处理组。噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度阿司匹林作用24、48、72h后对CNE-1、5-8F细胞的增殖能力,以半数抑制浓度（IC₅₀）作为后续实验药物处理浓度。集落形成实验检测CNE-1和5-8F细胞增殖能力,Transwell实验检测CNE-1和5-8F细胞迁移及侵袭能力的变化,Western blotting法检测CNE-1和5-8F细胞中蛋白激酶B（Akt）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Snail蛋白相对表达水平。结果 人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞分别经1.25、2.50、5.00、10.00mmol/L阿司匹林处理后,细胞增殖均受到不同程度抑制,且呈时间及浓度相关性,IC₅₀分别为3.3、2.7mmol/L。与对照组相比,经阿司匹林处理后,鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞的细胞增殖和集落形成能力明显下降（P＜0.01）。与对照组相比,经阿司匹林处理后,划痕愈合率显著降低（P＜0.05）。Trasnwell迁移实验结果表明,与对照组相比,阿司匹林处理组鼻咽癌细胞CNE-1和5-8F 48h穿过小室的数目显著减少（P＜0.05、0.001）。与对照组相比,阿司匹林处理组CNE-1、5-8F细胞的E-cadherin蛋白表达显著增加（P＜0.05）,PI3K、Akt、Vimentin、Snail蛋白表达显著下降（P＜0.05、0.01）。结论 阿司匹林可通过上调E-cadherin蛋白的表达、抑制上皮间质转化进程从而抑制人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞迁移侵袭,同时下调PI3K、Akt、Vimentin、Snail蛋白的表达进而抑制CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移和侵袭能力。     

肥大细胞对前列腺癌细胞上皮间质转化的作用

目的利用体外细胞共培养模型,探讨肥大细胞对前列腺癌细胞增殖及侵袭、转移的作用。方法选取肥大细胞瘤P815细胞系及前列腺癌LNCa P细胞,使用24孔Transwell小室构建2种细胞体外共培养模型。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色试验检测前列腺癌LNCa P细胞的增殖,反转录定量聚合酶链反应(q RT-PCR)方法和蛋白印迹法检测前列腺癌LNCa P细胞E-cad、N-cad、Vimentin的表达。结果前列腺癌LNCa P细胞与不同浓度肥大细胞共同培养12 h后吸光度(A)值变化与对照组差异无统计学意义(P>0.05),共同培养24 h及48h后A值显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,实验组E-cad表达明显减弱;N-cad、Vimentin表达增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肥大细胞可促进前列腺癌细胞的增殖并促进前列腺癌细胞的上皮间质转化,可能促进前列腺癌细胞侵袭、转移。     

迷迭香酸对前列腺癌细胞生物行为学的影响

目的初步探讨迷迭香酸对人前列腺癌细胞DU-145恶性生物行为学的影响。方法培养前列腺癌细胞DU-145,利用MTT方法检测药物对癌细胞存活率和生长状态的影响;用流式细胞仪分析细胞总体的凋亡情况;采用细胞划痕试验和利用Transwell小室检测不同浓度的药物处理一定时间后前列腺癌细胞DU-145的运动、迁移、侵袭能力的变化;通过Western blot法检测迷迭香酸作用前列腺癌细胞DU-145后丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路P38,ERK、JNK蛋白表达量的情况。结果MTT结果显示迷迭香酸呈浓度梯度抑制前列腺癌细胞DU-145的生长;迷迭香酸能够抑制前列腺癌细胞DU-145的运动、迁移、侵袭;通过Western blot方法检测表明,迷迭香酸增加磷酸化的P38和JNK蛋白表达,降低磷酸化的ERK蛋白量表达。结论迷迭香酸可以抑制前列腺癌细胞DU-145的存活率,促进癌细胞凋亡,抑制其迁移能力,其机理可能与调节MAPK通路有关。