钙调蛋白1基因多态性和青少年特发性脊柱侧凸不同亚型的关系

目的 探讨钙调蛋白1基因rs12885713(-16C>T)、rs5871等位基因多态性和特发性脊柱侧凸及其不同临床亚型的关联性.方法 2005年10月至2007年4月,北京协和医院接受手术治疗的青少年特发性脊柱侧凸患者100例(Cobb角>30.),对照组100例.QIAamp DNA微型血液试剂盒外周静脉血提取DNA.设计钙调蛋白1基因~12885713、rs587l所在序列引物,完成PCR扩增反应;ABl3730测序仪分析SNP位点基因型.结果 所有患者按照PUMC分型、主弯顶点位置以及Cobb角分组.结果 显示:(1)rs12885713位点等位基因多态性分布情况在PUMC Ⅱ型患者和对照组之间差异有统计学意义(P=O.034);(2)rsl2885713等位基因多态件分布情况在腰弯患者和对照组之间差异有统计学意义(P=-0.009);(3)rs5871位点等位基因多念性分布情况在胸弯患者和对照组之间差异有统计学意义(P=0.035).结论 钙调蛋白1基冈不同SNP位点等位基因多态性可能和特发性脊柱侧凸小同临床亚型相关联:(1)rsl2885713位点等位基因多态性可能和PUMCⅡ型特发性脊柱侧凸相关联;(2)腰弯侧凸可能和rsl2885713化点等位基凶多念性关联;(3)胸弯侧凸可能和rs5871位点等位基凶多态性关联.     

Association of calmodulin1 gene polymorphisms with susceptibility to adolescent idiopathic scoliosis

Objective: To investigate whether: (i) rs12885713 (?16C > T) and rs5871 polymorphisms in the Calmodulin1 (CALM1) gene are predisposing factors for adolescent idiopathic scoliosis (AIS); and (ii) different single nucleotide polymorphisms (SNP) correlate with different subtypes of AIS. Methods: A total of 100 AIS patients with Cobb angle above 30° were recruited for this study together with 100 healthy controls. Curve pattern, Cobb angle, and Risser sign were recorded. Two polymorphic loci, rs12885713 (?16C > T) and rs5871 loci, of the CALM1 gene were analyzed. All patients were grouped according to the Peking Union Medical College (PUMC) classification, the apical location of the major curve, and the Cobb angle. Results: There was a statistically significant difference in the distribution of rs12885713 site polymorphism (P = 0.034) between PUMC type II (double curve) patients and controls, in the distribution of rs12885713 site polymorphism (P = 0.009) between lumbar curve cases and controls and in the distribution of rs5871 site polymorphism (P = 0.035) between thoracic curve patients and controls. Conclusion: Different subtypes of AIS might be related to different SNP. The susceptibility of PUMC type II (double curve) AIS and lumbar curve might be related to CALM1 rs12885713 site polymorphism, while rs5871 site polymorphism might be a risk indicator for thoracic curve cases.     

青少年特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因多态性与骨密度的关系

目的探讨青少年特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因多态性与骨密度的关系。方法取青少年特发性脊柱侧凸女性患者92例,年龄10～19岁,Cobb角25°～134°,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态(PCRRFLPs)的方法分析雌激素受体基因型,同时用双能X线骨密度吸收仪分别对其腰椎(L24)和股骨近端(股骨颈、大转子、Wards三角)的骨密度进行测量。结果特发性脊柱侧凸患者雌激素受体基因型PvuⅡ多态性PP,Pp,pp型分别为19.6%,46.7%,33.7%,XbaⅠ多态性XX,Xx,xx型分别为22.8%,33.7%,43.5%;XX型的腰椎、股骨大转子和Wards三角的骨密度明显低于xx型(P<0.05),而PvuⅡ基因的各基因型与骨密度无关;联合分析PvuⅡ和XbaⅠ位点,PPXX基因型的腰椎、股骨大转子和Wards三角的骨密度明显低于Ppxx和ppxx型(P<0.05)。结论雌激素受体XbaⅠ基因多态性与特发性脊柱侧凸患者的骨密度有关,PPXX基因型的骨密度较低,有助于较早发现特发性脊柱侧凸的低骨量者。     

Matrilin-1基因多态性对青少年特发性脊柱侧凸进展的预测价值

目的 探讨Matrilin-1基因多态性在预测青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathicscoliosis,AIS)是含进展为严重脊柱侧凸方面的价值.方法 2006年6月至2007年3月在我院就诊的AIS患者267例,男40例,女227例.104例手术治疗,163例定期门诊随访,记录患者末次随访或术前最大Cobb角、初潮年龄、侧凸弯型、身高、臂长及体重.选取Matrilin-1基因启动子区域位点rs1149048进行聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length poly-morphism,PCR-RFLP)基因分型.进展型侧凸(脊柱侧凸进展成为严重脊柱侧凸)定义为骨骼发育未成熟时Cobb角>40°或骨骼发育成熟时Cobb角>50°.AIS患者被分为进展型与非进展型两组,比较两组间的临床特征及基因型分布的差异.分析侧凸进展的危险因素.结果 267例AIS患者中162例(60.7%)为非进展型,105例(39.3%)为进展型.进展型组月经初潮年龄较晚(>13岁),且三弯及胸腰双主弯所占比例高,基因型GG的个体在进展型组比例高(55.2%).初潮年龄晚、三弯、胸腰双主弯及基因型CG为侧凸进展的危险因素.结论 Matrilin-1基因多态性可被用来预测AIS进展,结合其他相关预测因素可提高预测的准确性.     

AANAT基因与青少年特发性脊柱侧凸的关联研究

目的 探讨人体内褪黑素合成通路与青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)发病之间的关系.方法 以单核苷酸多态性(SNP)位点为遗传标记,用测序法对性别(女性比率分别为77.67%和75.00%,P=0.648)和年龄[平均年龄分别为(15.18±2.15)岁和(15.58±2.50)岁,P=0.217]匹配的103例AIS患者和108例对照组进行基因分型筛查,对最小等位基冈频率(MAF)≥5%的位点结果 分别用SNPStats软件在线进行Hardy-Weinberg遗传平衡检验和单位点统计分析,用Unphased V3.07进行连锁不平衡(LD)检验和单倍体分析.结果 位于功能区的9个SNPs位点中只有rs28936679、rs4238989和rs3760138三个位点满足MAF≥5%,并满足Hardy-Weinberg遗传平衡检验;单位点分析结果 显示,5个Logistic回归分析模型检验的所有P值均＞0.05,提示这3个位点与AIS的发病无关;LD检验显示它们之间没有两个处在同一个单倍体块(D＞0.8)上,因而无法进行单倍体检验.结论 AANAT基因不是AIS的易感基因,我们需要对其他褪黑素合成相关的酶基因进行筛查研究.     

青少年特发性脊柱侧凸患者胰岛素样生长因子-1受体基因多态性研究

目的 探讨胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)易感性之间的关联性.方法 实验对象为200例MS患者(AIS组)和200名年龄、性别匹配的健康青少年(对照组),记录AIS组的身高、体蓖、月经初潮年龄(女性)、侧弯类型、最大Cobb角和Risser征等临床指标.采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对所有研究对象进行IGF-1R基因分型,比较不同基因型在AIS组和对照组之间的分布差异,并分析基因多态性与临床指标的相关性.结果 AIS组与对照组的IGF-1R基因等位基因及基因型分布无统计学差异(P＞0.05).女性AIS患者不同基因型所对应的最大Cobb角、Risser征及月经初潮年龄之间差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 IGF-1R基因多态性与AIS的发生发展均无相关性.     

Matrilin-1基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸支具疗效的相关性

目的 探讨matrilin-1基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者支具治疗效果的相关性.方法 自2005年1月至2008年12月,对门诊行规范化支具治疗的AIS患者进行前瞻性研究.入选对象要求:女性患者;骨骼发育为未成熟状态(Risser征0～3级);月经初潮未至或来潮1.5年以内;标准站立位全脊柱X线片上侧凸Cobb角为20°～40°;排除了先天性和神经肌源性以及其他原因引起的侧凸;无已知的可影响骨塑型和钙代谢的病史和药物使用史;初诊前无支具治疗史;接受支具治疗(Boston支具或Milwaukee支具)期间每3个月复诊1次,随访时间超过2年.符合下述条件之一者,则予以剔除:最终随访不足2年;支具治疗过程中依从性(每日实际佩戴时间与建议佩戴时间的比值)较差(<75%);支具治疗期间未按照医嘱自行更换支具.根据患者侧凸类型选择相应的支具进行治疗.记录初次就诊及末次随访的原发弯的Cobb角.支具治疗失败的标准为原发弯增加>5°.选取matrilin-1基因启动子区域位点rs1149048进行PCR-RFLP基因分型.按支具疗效分为治疗失败和治疗成功两组,比较两组之间的初诊年龄、Risser征、侧凸类型、初诊Cobb角及基因型分布的差异并进行统计学分析.结果 共有77例AIS女孩入选并完成本研究.初诊时平均年龄为(13.0±1.5)年,平均主弯Cobb角为29.5°±7.8°.在平均(2.6±0.3)年随访后,平均主弯Cobb角为30.3°±11.9°.支具治疗失败总共19例(24.7%),支具治疗成功58例(75.3%).支具治疗失败组的初诊Cobb角较大(P>0.05).在不同的侧凸类型中,胸腰双主弯的支具治疗失败率最低(19.4%).基因型GG个体支具治疗失败率(66.7%)明显高于基因型为从或AG的个体.结论 通过早期规范化支具治疗,大部分脊柱侧凸进展可得到控制.初诊Cobb角较大及基因型GG的AIS患者支具疗效较差.     

耐酒石酸酸性磷酸酶5基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸患者相关性研究

目的 探讨耐酒石酸酸性磷酸酶5 (ACP5)基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)易感性和严重程度的相关性.方法 选择2006年1月至2008年12月372例AIS患者(AIS组)和2005年3月至2006年8月239名健康青少年(正常对照组),所有AIS患者Cobb角均≥10°.结合汉族人单倍体型资料,选取rs2229531、rs2071484两个单核苷酸多态性位点,采用PCR-限制性片段长度多态性的方法对这两个位点进行基因分型.比较不同基因型在AIS组与正常对照组之间的分布差异,并分析基因多态性与Cobb角的相关性.结果 AIS组与正常对照组的rs2229531位点均未见多态性.AIS组ACP5基因rs2071484位点的基因型及等位基因分布与正常对照组比较差异无统计学意义(x2=3.336和1.438,P＞0.05).rs2071484多态性位点AA、AG、GG基因型所对应的平均最大Cobb角分别为38°±19°、34°±14°、38°±21°,三者相比差异无统计学意义(P =0.157).结论 ACP5基因多态性可能与AIS的发生发展没有明显关系.     

褪黑素受体1A基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸相关性研究

目的研究褪黑素受体1A基因（MTNR1A）多态性与青少年特发性脊柱侧凸（AIS）发生发展的关系。方法共纳入226例AIS患者及277例正常对照者。记录AIS患者组最大Cobb角。采用PCR-RFLP的方法对MTNR1A基因启动子区域多态性位点rs2119882进行基因分型。结果AIS患者组MTNR1A基因多态性位点rs2119882的基因型及等位基因分布与正常对照组比较没有明显差异。在AIS组内,多态性位点rs2119882不同基因型所对应的最大Cobb角没有明显差异。结论MTNR1A基因rs2119882位点多态性与AIS的发生发展都没有关系。     

Matrilin-1基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸易感性的关系

疾病严重程度有关.     

HTR1A和HTR1B基因与青少年特发性脊柱侧凸的关联研究

目的 研究HTR1A和HTR1B基因多态性与青少年特发性脊柱侧凸(MS)的发生及其表型(性别、Cobb角和PUMC分型)间的关系.方法 对2006年1月至2007年3月诊治的103例MS患者和同期就诊或健康体检的性别和年龄匹配的108例对照者,以单核苷酸多态性(SNPs)位点(rs6294和rs6296)为遗传标记进行分型筛查,对结果分别进行基于等位基因和基因型的单位点关联分析、基因型与表型关联分析.结果 rs6294位点(THR1A基因)的等位基因A在病例组中的频率要明显高于对照组,差异有统计学意义(P=0.041).该位点在病例组中的基因型分布与PUMC分型相关(P=0.008),它的基因型A/A+A/G与PUMCⅢ型患者的发病相关.结论 HTR1A基因可能是PUMCⅢ型脊柱侧弯的一个易感基因,PUMC分型可能有一定的遗传学基础.     

金属蛋白酶组织抑制剂-2基因多态性与青少年特发性胸椎侧凸的相关研究

目的 探讨金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)启动子区基因多态性与青少年特发性胸椎侧凸疾病易感性和严重程度的相关性.方法 研究对象为2007年1月至2009年3月诊治的354例女性胸弯型青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者(AIS组)和2005年3月至2006年6月210名健康体检女性青少年(对照组).选取TIMP-2基因启动子区418G.C(rs8179090)单核苷酸多态性位点,采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对这该位点进行基因分型.比较不同基因型在AIS组与对照组之间的分布差异,并分析基因多态性与临床表型的相关性.结果 rs8179090多态性位点的等位基因及基因型分布在两组中差异无统计学意义(P>0.05).AIS组中,体质量指数(BMI)<17 kg.m~2或主弯cobb角≥40°的患者中c等位基因的比例分别显著高于BMI≥17 kg.m~2或主弯cobb角<40°者(P<0.05).已经达到骨骼成熟且自然史未受干扰的患者中,GC型和CC型患者的主弯Cobb角平均值显著大于GG型患者(卢<0.05).结论 TIMP-2基因启动子区-418G.C(rs8179090)多态性位点与女性胸弯型AIS患者青春期异常生长模式和侧凸进展有关,TIMP-2基因是胸弯型AIS的疾病修饰基因.     

ER-α基因多态性与无BRCA1/2基因突变的有遗传倾向的乳腺癌的关系

目的 探讨ER-α基因PvuⅡ和Xba Ⅰ多态性在上海地区无BRCA1/BRCA2基因突变的有遗传倾向的乳腺癌人群中的分布及其与乳腺癌发病风险的相关性.方法 对113例无BRCA1/2突变的家族性/早发性乳腺癌患者和113例正常对照者进行ER-α基因2号内含子的聚合酶链反应扩增,随后进行DNA直接测序鉴定PvuⅡ和XbaⅠ多态性的基因型,比较基因型分布和发病风险的关系;危险度OR及95%CI,应用非条件Logistic回归分析计算.结果 113例病例和113例对照均成功进行测序,ER-α基因PvuⅡ多态性的CC、CT、TT基因型在病例组中的分布频率分别为16例（14.2%）,58例（51.3%）,39例（34.5%）;XbaⅠ多态性AA、AG、GG基因型在病例组中的分布频率分别为76例（67.2%）,34例（30.1%）,3例（2.7%）.分别以CC基因型和AA基因型为参照,PvuⅡ和Xba Ⅰ多态性与乳腺癌无明显关联;但在绝经前妇女中,PvuⅡ多态性的C/T基因型提高乳腺癌发病风险达2.1倍（P=0.044）;XbaⅠ多态的GG基因型携带者患乳腺癌发病危险降低达9倍（OR=0.11,P=0.058）.基因型的联合分析表明,与CC＋GG基因型相比,同时携带PvuⅡCT和XbaⅠ AA的绝经前妇女患乳腺癌的发病危险增加达11倍（OR=11.4;95% CI 1.12～116.7）,P=0.03.结论 ER-α基因PvuⅡ和Xba Ⅰ多态性可能与有遗传倾向乳腺癌的遗传易感性有关,尤其是绝经前发病者（含早发性）.     

汉族人群青少年特发性脊柱侧凸家系中存在复合型杂合DOCK9基因突变

目的探讨青少年特发性脊柱侧凸(AIS)家系中可能的致病基因突变。方法对一个汉族AIS家系的3名成员(先证者及其表型正常的父母)进行全基因组测序,筛选潜在的致病基因突变,并通过Sanger测序验证所有发现的突变。结果在AIS家系中发现DOCK9基因存在复合型杂合基因突变c.3259TC(p.F1087L)和c.2465AG(p.Y822C)。患者的父母是未出现AIS表型的突变基因携带者,父亲携带c2465AG突变,而母亲携带c.3259TC突变。结论复合型杂合DOCK9基因突变可能导致AIS的发生,其在AIS发生机制中的作用有待于进一步探索。     

青少年特发性脊柱侧凸患者椎旁肌中钙调蛋白的表达及临床意义

目的:探讨青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者椎旁肌钙调蛋白的表达及其对肌浆网钙离子通道的影响。方法:AIS患者共30例,Cobb角40°～100°,其中Cobb角≥50°者15例(A组),Cobb角<50°者15例(B组);对照组(C组)5例患者均为非脊柱侧凸病例。于手术中取A、B组患者顶椎区两侧椎旁肌、取C组患者非病变部位两侧椎旁肌作为标本进行分子生物学分析,采用RT-PCR方法检测所有标本钙调蛋白和肌浆网钙离子通道的mRNA表达量。结果:A、B组患者椎旁肌钙调蛋白mRNA的表达比C组高(P<0.05),并且A组患者凸侧椎旁肌钙调蛋白mRNA显著高于凹侧(P<0.05),而B组患者其凹凸侧钙调蛋白mRNA没有显著性差异(P>0.05);C组椎旁肌肌浆网钙离子通道mRNA的表达比A组患者高(P<0.05),A组患者凸侧椎旁肌肌浆网钙离子通道mRNA显著低于凹侧(P<0.05),而B组患者其凹凸侧肌浆网钙离子通道mRNA没有显著性差异。结论:钙调蛋白mRNA在AIS患者椎旁肌中的表达较无脊柱侧凸者高,而且其表达随着侧凸程度的加重而增高;AIS患者椎旁肌肌浆网钙离子通道表达有异常,钙调蛋白的过度表达可能导致了钙离子通道的损伤。     

Association of aromatase and estrogen receptor gene polymorphisms with hip fractures

Summary Two polymorphisms of the aromatase and estrogen receptor genes appeared to interact to influence the risk of hip fractures in women. Introduction Allelic variants of the aromatase gene have been associated with bone mineral density and vertebral fractures. Our objective was to analyze the relationship between two polymorphisms of the aromatase and estrogen receptor genes and hip fractures. Methods We studied 498 women with hip fractures and 356 controls. A C/G polymorphism of the aromatase gene and a T/C polymorphism of the estrogen receptor α gene were analyzed using Taqman assays. Aromatase gene expression was determined in 43 femoral neck samples by real-time RT-PCR. Results There were no significant differences in the overall distribution of genotypes between the fracture and control groups. However, among women with a TT genotype of the estrogen receptor, the CC aromatase genotype was more frequent in women with fractures than in controls (39 vs. 23%, p = 0.009). Thus, women homozygous for T alleles of estrogen receptor and C alleles of aromatase were at increased risk of fracture (odds ratio 2.0; 95% confidence interval 1.2–3.4). The aromatase polymorphism was associated with RNA levels in bone tissue, which were three times lower in samples with a CC genotype (p = 0.009). Conclusions These common polymorphisms of the aromatase and estrogen receptor genes appear to interact, influencing the risk of hip fractures in women. Supported by grants from Fondo de Investigaciones Sanitarias (FIS 04/28 and 06/34).     

Distinct association of gene polymorphisms of estrogen receptor and vitamin D receptor with lumbar spondylosis in post-menopausal women

Contribution of genetic backgrounds to the etiology of lumbar spondylosis has been suggested by epidemiological studies. This study was designed to determine the association of restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) of estrogen receptor (ER), vitamin D receptor (VDR), parathyroid hormone (PTH) and interleukin-1β (IL-1β) genes with the radiological severity of lumbar spondylosis at the disk level from L1/2 to L5/S1 in Japanese post-menopausal women. ER and VDR RFLP haplotypes were associated with the severity of spondylosis in the upper levels (L1/2 and L2/3) more than in the lower levels. Association of ER genotype was more pronounced in the group younger than average than in the older group, while that of VDR genotype was more significant in the older group. Neither PTH nor IL1-β RFLP was associated with the severity at any levels in either stratified group. We thus conclude that ER and VDR genes may contribute to lumbar spondylosis in a distinct manner: estrogen sensitivity influences the severity in the early phase after menopause while vitamin D plays an important role at older ages when the contribution of estrogen loss is weaker.     

褪黑素受体1B基因与青少年特发性脊柱侧凸患者骨密度的相关性

目的 探讨褪黑素受体1B基因(MTNR1B)多态性与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者骨密度之间的相关性.方法 选取511例年龄在12～18岁之间的女性AIS患者,采用双能X线骨密度吸收仪测量优势侧近端股骨的骨密度.同时,采取患者外周静脉血,采用试剂盒提取DNA.通过PCRRFLP的方法检测MTNRlB基因启动子区上2个基因多态性位点的基因型.采用ANOVA的统计学方法比较不同基因型对应骨密度大小.结果 MTNRlB基因2个多态性位点各基因型所对应的骨密度差异无显著性(P＞0.05).结论 MTNRlB基因多态性与AIS患者的骨密度之间没有相关性,它可能在MS患者的低骨量中不发挥作用.