何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺凋亡的影响

目的探讨何首乌饮抗下颌下腺衰老的作用。方法分别在预防性和治疗性实验中应用何首乌饮,对D-半乳糖诱发的衰老大鼠模型应用不同剂量何首乌饮。通过TUNEL法检测凋亡细胞,观察下颌下腺凋亡细胞数量。结果预防性实验中下颌下腺细胞凋亡以衰老组最高,正常组最低,预防性应用何首乌饮后以预防中剂量组凋亡最少（P〈0．01）。治疗性实验中下颌下腺细胞凋亡以自然恢复组最高,阴性对照组最低,治疗性应用何首乌饮后以治疗中剂量组凋亡最少（P〈0．01）。结论衰老模型大鼠下颌下腺的凋亡细胞数增多,应用何首乌饮干预后下颌下腺凋亡细胞数减少。何首乌饮可能具有抗下颌下腺衰老的作用。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺EGF、EGF mRNA表达的影响

目的 观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺表皮生长因子(EGF)及EGF mRNA表达的影响.方法 采用D-半乳糖衰老大鼠模型,何首乌饮干预分为治疗和预防两部分,用免疫组化及原位杂交法检测下颌下腺EGF、EGF mRNA阳性表达的改变.结果 预防性实验部分EGF、EGF mRNA表达以正常组最高,模型组最低,各预防组中预防中剂量组最高,组间比较有高度统计学意义(P＜0.01).治疗性实验部分以正常组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组最高,组间比较差异显著(P＜0.01).结论 何首乌饮可提高下颌下腺EGF、EGF mRNA的表达而达到抗衰老的作用.     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mRNA表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子（NGF）及NGF mRNA表达的影响。方法用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,免疫组化及原位杂交法检测何首乌饮预防量、治疗量灌胃后衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mRNA阳性表达的改变。结果预防实验部分NGF、NGF mRNA的表达,模型组与其他各组比较差异均有统计学意义（P（0.05或（0.01）,其中以正常组最高,模型组最低,各预防组中预防中剂量组最高。治疗性实验部分NGF、NGF mRNA的表达,自然恢复组与其他各组比较差异均有统计学意义（P（0.01）,其中以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组最高。结论何首乌饮可提高衰老大鼠下颌下腺NGF、NGF mR-NA的表达而达到抗衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺磷酸化cyclinD1蛋白表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺磷酸化细胞周期素D1(cyclinD1)蛋白表达的影响。方法实验90只SD雌性大鼠,随机分为何首乌饮干预预防组和治疗组两大部分,采用免疫组化方法检测大鼠下颌下腺磷酸化cyclinD1蛋白的表达,并观察何首乌饮对其影响。结果磷酸化cyclinD1阳性产物散在分布于细胞质内,呈黄色或棕黄色,在各组大鼠下颌下腺的腺泡细胞、颗粒曲管及导管上皮细胞中均有表达(P0.01)。多重比较结果显示,以正常组最高,模型组最低,各预防组中以预防中剂量组效果最好。治疗各组间比较,以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组中以治疗中剂量组(Tm)最高。结论何首乌饮延缓下颌下腺细胞衰老的作用可能与提高磷酸化cyclinD1蛋白表达有关。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、EGF表达的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠,随机分为正常组、模型组及何首乌饮干预预防组和治疗组,用SP免疫组化法检测下颌下腺NGF、EGF表达的改变。结果预防性实验各组间NGF、EGF表达均以正常组最高,模型组最低,且中剂量预防组效果最好(P0.01)。治疗性实验各组间NGF、EGF表达均以正常组最高,自然恢复组最低,且中剂量治疗组最高(P0.01)。结论何首乌饮可提高下颌下腺NGF、EGF的表达而达到延缓衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGF mRNA表达的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)基因表达的影响。方法选用8周龄SD雌性大鼠90只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,用原位杂交法检测各组大鼠下颌下腺NGF mRNA、EGFmRNA表达的情况。结果预防性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以正常组最高,模型组最低,各预防组处于中间水平,其中预防中剂量组最高。治疗性实验部分的组间NGF mRNA、EGF mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组处于中间水平,其中中剂量组最高。结论何首乌饮可在基因转录水平提高NGF、EGF的表达。     

何首乌饮对实验性衰老大鼠下颌下腺T-AOC、MDA的影响

目的观察何首乌饮干预的衰老模型大鼠下颌下腺总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的改变,探讨何首乌饮的抗衰老作用。方法用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,观察下颌下腺T-AOC和MDA改变。结果预防性实验部分:T-AOC水平以正常组最高,模型组最低,各预防组处于中间水平(P<0.01);MDA水平以模型组最高,正常组最低,各预防组处于中间水平(P<0.01)。治疗性实验部分:T-AOC水平以阴性对照组最高,自然恢复组最低,各治疗组处于中间水平(P<0.01);MDA水平以自然恢复组最高,阴性对照组最低,各治疗组处于中间水平(P<0.01)。结论何首乌饮具有抗模型大鼠下颌下腺衰老的作用。     

何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺端粒酶活性的影响

目的观察何首乌饮对衰老大鼠下颌下腺端粒酶活性的影响。方法选用8周龄清洁级SD雌性大鼠20只,随机分为正常组、模型组、何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组,每组5只,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,采用端粒重复扩增-微孔板杂交法检测下颌下腺细胞端粒酶活性。结果衰老模型组大鼠下颌下腺端粒酶OD值表达最低,正常组最高,何首乌饮预防组低于正常组,但高于何首乌饮治疗组(P<0.01)。结论何首乌饮可提高衰老大鼠下颌下腺端粒酶活性,且以预防量效果较好。     

松花粉对衰老大鼠睾丸p53/Rb细胞转导通路相关基因和蛋白表达的影响

目的 通过检测p53、Rb、p16、p19、p21在D-半乳糖所致衰老大鼠睾丸组织的表达,探讨松花粉对睾丸组织p53/Rb细胞传导通路的影响.方法 采用RT-PCR检测p53、Rb基因在睾丸的表达;Westem印迹检测大鼠睾丸磷酸化Rb(p-Rb)、p16、p19、p21蛋白表达.结果 模型组睾丸组织p53、Rb基因和p16、p19、p21蛋白的表达明显高于正常组(P<0.01);p-Rb蛋白表达显著低于正常组(P<0.01).而松花粉能降低p53、Rb基因和p16、p19、p21蛋白的表达提高p-Rb的表达,且明显好于阳性对照组(P<0.05).结论 松花粉通过调节睾丸组织p53/Rb细胞传导通路相关蛋白及基因的表达,起到延缓睾丸组织衰老的作用.     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺超微结构的影响

目的 观察实验性衰老大鼠下颌下腺超微结构的改变,探讨何首乌饮的干预作用.方法 用D.半乳糖制造衰老大鼠模型,用何首乌饮干预(预防和治疗),观察下颌下腺主要细胞器超微结构改变.结果 模型组大鼠下颌下腺细胞器的超微结构呈现明显的退行性变;何首乌饮预防组下颌下腺细胞器的超微结构退行性变的情况明显好于治疗组,治疗组改变程度较自然恢复组明显减轻.结论 D-半乳糖模型大鼠下颌下腺超微结构发生明显衰老改变,何首乌饮可改善衰老大鼠下颌下腺超微结构的衰老变化,预防用药效果更好.     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺β-半乳糖苷酶表达的影响

目的 通过观察何首乌饮干预的衰老大鼠下颌下腺β-半乳糖苷酶(β-gal)表达的改变,探讨何首乌饮的抗衰老作用.方法 用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,检测β-半乳糖苷酶活性,观察下颌下腺衰老细胞数目改变.结果 预防性实验部分:模型组衰老细胞数目多于正常组和各预防性用药组;治疗性实验部分:用药各组与自然恢复组相比,衰老细胞数目明显减少,其中治疗中剂量组最低.结论 何首乌饮具有抗模型大鼠下颌下腺细胞衰老的作用.     

何首乌饮对亚急性衰老大鼠卵巢细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 探讨何首乌饮对亚急性衰老大鼠卵巢细胞凋亡和相关基因Fas和FasL及其蛋白表达的影响.方法 采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,同时以何首乌饮灌胃作为延缓衰老组;造模后应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠卵巢细胞凋亡情况;测定各组Fas和FasL的信使核糖核酸(mRNA)水平;SP免疫组化法检测卵巢细胞Fas和FasL蛋白的表达情况.结果 与正常对照组比较,模型组大鼠卵巢细胞中有凋亡细胞数增多现象、Fas和FasL的mRNA和蛋白表达均显著增强(P＜0.01);延缓衰老组较模型组凋亡率明显下降(P＜0.01),并抑制Fas和FasL的表达,呈现量效关系,以何首乌饮高剂量组效果作用最佳.结论 何首乌饮方剂能延缓衰老大鼠卵巢细胞凋亡的发生,其作用机制可能是通过干预Fas/FasL的表达,阻止死亡信号的转导,抑制卵巢细胞凋亡.     

何首乌饮对衰老大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法选用18月龄Wistar大鼠为自然衰老动物模型,以12月龄大鼠作为青年对照,采用原位末端标记法和流氏细胞术分别检测何首乌饮灌胃用药60 d和30 d的18月龄大鼠睾丸组织细胞凋亡率变化和DNA含量的变化。结果与青年对照组相比,自然衰老组睾丸细胞凋亡率明显增高,单倍体和4倍体细胞明显减少并以二倍体为主,G_1/G0期细胞明显增多(P<0.05),细胞增殖指数明显降低(P<0.05);而何首乌饮用药后与自然衰老组相比,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);4倍体和单倍体比例明显增加(P<0.05),与青年对照组无显著性差异(P>0.05);细胞增殖指数明显升高(P<0.05),G_1/G_0期细胞明显减少(P<0.05)。结论何首乌饮可以抑制生精细胞凋亡,促进细胞增殖,达到延缓睾丸组织衰老的效果,但其具体作用机制有待研究。     

何首乌饮对衰老大鼠抗氧化能力及血脂的影响

目的探讨何首乌饮的抗衰老机制。方法采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,测定何首乌饮灌胃后大鼠血清中血脂和丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧物酶（GSH-Px）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果亚急性衰老模型组大鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、MDA含量明显升高,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、SOD、GSH-Px、T-AOC明显下降,与正常对照组大鼠比较差异显著（P〈0.05,P〈0.01）,经何首乌饮灌胃治疗后TG、TC、MDA含量下降,HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC含量升高均接近正常水平,与模型组大鼠有显著差异（P〈0.01）。结论何首乌饮明显提高衰老大鼠体内的HDL-C、SOD、GSH-Px、T-AOC水平,降低TG、TC、MDA含量,何首乌饮具有抗衰老作用,其抗衰老作用可能与此有关。     

D-半乳糖诱发的衰老对大鼠下颌下腺端粒酶活性的影响

目的观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺抗氧化能力和端粒酶活性的改变。方法选用8周龄清洁级SD雌性大鼠10只,体重180²20 g,随机分为正常组和模型组,每组5只。采用D-半乳糖诱导大鼠衰老模型,观察下颌下腺谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)改变及采用端粒重复扩增-微孔板杂交法检测下颌下腺细胞端粒酶活性。结果衰老模型组大鼠下颌下腺GSH-Px、T-AOC及端粒酶OD值表达最低,正常组最高(P<0.01)。结论 D-半乳糖所致的大鼠下颌下腺细胞衰老与端粒酶活性降低相关。     

菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响

目的 研究菟丝子醇提液对衰老模型大鼠肝细胞p16和cyclinD1基因表达的影响,探讨菟丝子延缓衰老作用的机制.方法 实验以50只Wistar大鼠为研究对象,采用D-半乳糖法制作衰老模型,采用经胃灌服法按照0.8g·kg-1 ·d-1给药,采用半定量RT-PCR法测定大鼠肝组织p16和cyclinD1 mRNA的表达,免疫组化SABC法检测p16和cyclinD1蛋白的表达,并观察菟丝子醇提液对其影响.结果 衰老模型大鼠p16 mRNA及蛋白表达较青年组明显增高(P＜0.01),而cyclinD1 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).菟丝子醇提液可降低p16基因表达(P＜0,01),使cyclinD1基因表达增强(P＜0.05),并呈现时间渐进性改变.结论 菟丝子醇提液通过影响细胞调控因子p16、cyclinD1表达延缓肝细胞的衰老.     

外源性Rb基因对神经细胞衰老的影响

目的　观察外源性 Rb基因对神经细胞衰老的影响 ,并探讨 Rb基因对神经细胞 P2 1基因表达的调控。方法　用外源性 Rb基因重组腺病毒载体感染体外培养的胚胎大鼠神经细胞 ,以β-半乳糖苷酶染色观察神经细胞的衰老变化 ,用免疫组化法测定 P2 1蛋白表达水平。结果　外源性Rb基因导入神经细胞后 ,P2 1蛋白水平显著增高 ,与衰老相关的 β-半乳糖苷酶表达也增加。结论　 Rb基因可能通过上调 P2 1基因表达促进神经细胞衰老。     

D-半乳糖致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子及其mRNA的表达

目的 观察D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺神经生长因子(NGF)及NGF mRNA的表达.方法 选用SD雌性大鼠18只,随机分为正常组、模型组,用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,用免疫组化及原位杂交法检测衰老大鼠下颌下腺NGF、NGFmRNA的阳性表达.结果 下颌下腺NGF阳性反应颗粒及NGF mRNA杂交反应产物为浅棕色或深褐色颗粒,NGF阳性反应颗粒主要分布于GCT细胞及纹状管细胞顶部胞质中,腺泡细胞为阴性;NGFmRNA杂交信号主要分布于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中,其上皮细胞胞质呈阳性,腺泡细胞为阴性,正常组NGF、NGF mRNA表达明显高于模型组(P＜0.01).结论 D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺NGF、NGFmRNA表达较正常大鼠明显减少.     

哈蟆油对雌性衰老大鼠子宫组织p16和cyclinD1蛋白表达的影响

目的 探讨哈蟆油(OR)对D-半乳糖所致雌性衰老大鼠子宫组织细胞增殖负性调控因子p16和正性调控因子cyclinD1蛋白表达的影响,进一步探讨OR延缓雌性大鼠生殖器官衰老机制.方法 SPF级SD雌性青年大鼠40只随机分为模型组(D-gal组)、维生素E(VE组)、哈蟆油高剂量组(OR-H组)、中剂量组(OR-M)、低剂量组(OR-L组),每组8只,D-半乳糖颈背部皮下注射42 d,建立亚急性衰老模型.另取雌性青年大鼠8只,同样部位每日注射生理盐水,作为空白组.第15天开始灌胃给药,给药时间28 d.给药结束后,免疫组化法检测衰老大鼠子宫组织p16和免疫印迹法检测cyclinD1蛋白的表达情况.结果 雌性衰老大鼠子宫组织免疫组化结果表明,子宫组织p16阳性染色多为胞浆着色,见于子宫内膜、上皮细胞胞浆、子宫间质腺体腺上皮细胞胞浆,外膜上皮也有表达,弥漫性、灶性分布均有.D-gal组p16阳性细胞积分与空白组比较升高(P＜0.01).OR各剂量组与D-gal组相比,p16阳性细胞积分降低,差异有显著性(P均＜0.01).免疫印迹法结果表明D-gal组子宫组织cyclinD1蛋白表达与空白组比较降低,差异有显著性(p＜0.01).OR-H、M、L组cyclin D1蛋白表达与D-gal组比较,表达均升高(P值均＜0.01),OR-H组尤为明显.结论 应用OR可以减缓衰老子宫组织结构的损伤,改善衰老子宫萎缩和衰老程度,OR可降低雌性衰老大鼠子宫组织细胞增殖负性调控因子p16蛋白的高表达,同时显著提高细胞增殖正性调控因子cyclinD1蛋白的表达,促进衰老雌性大鼠子宫细胞增殖.哈蟆油延缓雌性生殖器官衰老作用可能通过调控子宫p16-cyclinD1信号通路来促进有关增殖调控蛋白表达发挥延缓衰老作用.     

肺纤维化形成中细胞凋亡与p16蛋白表达的关系

目的分析小鼠肺纤维化（PF）形成中细胞凋亡与p16蛋白表达的关系,探讨特发性肺纤维化（IPF）的发病机制。方法将72只小鼠随机分为模型组、对照组各36只,模型组采用博来霉素导致PF。实验后3、7、14、28d分别处死两组小鼠8只,取出肺组织,采用苏木精—伊红及马松三色染色观察其肺组织病理变化;免疫组化及Western blot法检测肺组织p16蛋白表达;末端细胞凋亡原位标记法检测肺组织细胞凋亡情况。结果与对照组比较,模型组肺组织出现典型纤维化改变,肺泡上皮细胞凋亡指数升高,肺组织p16蛋白表达随时间延长而增强,p16蛋白阳性细胞数量增多（P〈0.05或〈0.01）。相关分析显示,p16蛋白表达与肺泡上皮细胞凋亡呈正相关（P〈0.05）。结论 PF进程存在p16蛋白异常表达,过表达的p16蛋白可能介导肺泡上皮细胞凋亡过程,这可能是最终IPF发生、发展的机制之一。