越鞠丸对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏PPARα表达的影响

目的 观察越鞠丸对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARα)表达的影响.方法 采用喂饲高脂饲料的方法复制NAFLD大鼠模型,实验分组为正常对照组、模型组、东宝肝泰对照组和越鞠丸高、低剂量组.提取肝脏总RNA,运用半定量RT-PCR方法观察各组大鼠肝脏PPARα mRNA的表达情况,同时测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆TC、TG的含量,并做病理切片.结果 模型组大鼠PPARα mRNA的含量明显降低,血脂和肝脏脂质含量明显升高,肝脏呈明显脂肪变性,经药物治疗后,各治疗组大鼠肝脏PPARα mRNA表达明显增强,血脂和肝脏脂质含量显著降低,肝脂变程度明显减轻.结论 越鞠丸能增强NAFLD大鼠肝脏PPARα mRNA的表达,可能是其治疗NAFLD的分子机制之一.     

消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏解偶联蛋白2 mRNA表达的影响

目的 观察消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏解偶联蛋白2 mRNA(UCP2 mRNA)表达的影响,探讨其防治NAFLD的部分作用机制.方法采用喂饲高脂饲料的方法复制NAFLD大鼠模型,实验分为正常对照组、模型组、东宝肝泰对照组和消瘀化痰方高、低剂量组.提取肝脏总RNA,运用半定量RT-PCR技术观察各组大鼠肝脏UCP2 mRNA的表达情况,同时测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆TC、TG的含量,并做病理组织切片.结果模型组大鼠UCP2 mRNA的表达增强,血脂和肝脏脂质含量明显升高,肝脏呈明显脂肪变性.经药物治疗后,各治疗组大鼠肝脏UCP2 mRNA的表达减弱,血脂和肝脏脂质含量显著降低,肝脂变程度明显减轻.结论消瘀化痰方通过调控NAFLD大鼠肝脏UCP2 mRNA的适度表达,可能是其治疗NAFLD的分子机制之一.     

益气化痰解毒中药对脂肪肝大鼠脂联素及肝脏瘦素受体mRNA的影响

[目的]探讨益气化痰解毒中药治疗脂肪肝分子生物学机制.[方法]将60只大鼠随机分为正常组与模型组(采用高脂饮食加白酒灌胃建立大鼠脂肪性肝炎模型),模型组所有大鼠再随机分为对照亚组、中药亚组、东宝肝泰亚组.用药4周后,观察并比较模型组及其各亚组与正常组对血清脂联素(APN)、瘦素(leptin)及肝脏瘦素受体(OB-R) mRNA、肿瘤坏死因子-α的影响.[结果]模型组与正常组比较血清leptin浓度升高,APN及肝脏OB-RmRNA表达显著下降(P＜0.01),治疗后中药亚组APN水平明显升高,肝脏OB-R mRNA表达上调,同时血清leptin、肝组织肿瘤坏死因子-α含量下降,明显优于东宝肝泰亚组(P＜0.01).[结论]益气化痰解毒中药通过提高APN,上调肝脏OB-RmRNA的表达,以调节leptin水平达到有效治疗脂肪性肝炎的作用.     

环氧合酶2抑制剂对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型回肠Acsl基因家族表达的影响

目的研究环氧合酶2(COX-2)抑制剂对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型回肠Acsl基因家族表达的影响及意义。方法将45只SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n=15只,普通饲料)、NAFLD模型组(n=15,高脂饲料)、尼美舒利组(n=15,高脂饲料+尼美舒利)。所有SD大鼠喂养到第12周处死。采集下腔静脉血,检测其总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。肝组织行HE染色和油红O染色,评价各组大鼠肝组织脂肪变性程度。实时荧光定量PCR法检测回肠Acsl家族各基因的表达情况。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与正常对照组大鼠比较,NAFLD模型组血清TC、TG值均明显增加,肝脏脂肪变性明显(P值均0.05);尼美舒利组与NAFLD模型组比较,血清TC、TG值均明显下降,肝脏脂肪变性程度减轻(P值均0.05);与正常对照组大鼠相比,NAFLD模型组大鼠回肠COX-2的表达明显升高(P 0.05);与NAFLD模型组大鼠相比,尼美舒利组回肠COX-2的表达明显降低(P 0.05);与正常对照组相比,NAFLD模型组回肠Acsl3、Acsl5基因的表达明显增加(P值均0.05);与NAFLD模型组相比,尼美舒利组Acsl3、Acsl5基因的表达明显降低(P值均0.05)。结论 COX-2抑制剂尼美舒利对NAFLD大鼠回肠Acsl基因家族表达有调控作用,提示COX-2抑制剂可能通过Acsl基因抑制NAFLD的进展。     

银杏总黄酮对NAFLD大鼠生化指标及血清脂联素水平的影响

[目的]探讨银杏总黄酮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠发病过程中生化指标及血清脂联素(Adipo)水平的影响。[方法]72只SPF级雄性大鼠随机分为3组:正常对照组、NAFLD模型组、银杏总黄酮治疗组。利用高脂饲料喂养法构建NAFLD大鼠模型。观察各组大鼠肝脏组织形态改变。全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清Adipo含量,RT-PCR和Western-blot法分别测定肝组织AdipoR_2mRNA及蛋白表达。[结果]随着时间延长,NAFLD模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC含量逐渐增高,血清Adipo含量逐渐减少,肝组织中AdipoR_2mRNA及蛋白表达水平逐渐下降;银杏总黄酮治疗组大鼠血清ALT、AST、TG、TC含量逐渐降低,血清Adipo含量、肝组织AdipoR_2mRNA及蛋白表达水平逐渐增加,与NAFLD组比较均差异有统计学意义(P0.05)。[结论]银杏总黄酮对NAFLD大鼠肝脏有防治作用,降低血清ALT、AST、TG、TC含量,可能通过增加AdipoR_2表达所致。     

保肝降脂饮对脂肪肝大鼠护肝作用的实验研究

目的探讨保肝降脂饮治疗脂肪肝的药学机制。方法采用高脂饮食诱导大鼠脂肪肝模型,实验分组为脂肪肝模型组、保肝降脂饮大、中、小剂量组、东宝肝泰对照组和正常对照组共6组。观察大、中、小剂量保肝降脂饮和东宝肝泰对大鼠血清中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量和肝组织的超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,以及肝组织形态学的变化。结果模型组大鼠血清中TC、TG明显高于正常组和各治疗组(P<005),而其SOD的活性较正常组和各治疗组明显降低。肝组织切片脂滴明显堆积,正常组没有脂滴堆积,各治疗组肝组织切片显示脂滴堆积较模型组轻。结论保肝降脂饮可显著降低脂肪肝大鼠血清TC、TG含量,减轻肝细胞脂滴堆积,提高肝组织SOD活性,从而发挥降脂保肝的作用。     

华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠一氧化氮、一氧化氮合酶及血管内皮生长因子的影响

目的:探讨华夏小葱制剂对大鼠脂肪肝的防治作用及其机制.方法:SD大鼠分为空白对照组,模型对照组,华夏小葱制剂低、中、高剂量组,东宝肝泰片组共6个组.空白对照组大鼠用普通饮食及普通水喂养;其他组用高脂饮食及酒精水喂养,并且每周一次行后肢皮下注射四氯化碳色拉油溶液建立大鼠脂肪肝模型.华夏小葱制剂低、中、高剂量组及东宝肝泰片组大鼠分别给予相应剂量的华夏小葱制剂或东宝肝泰片混悬液.8周后处死各组大鼠,采用全自动生化分析仪测定血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量,一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS),RT-PCR法测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的含量.结果:大鼠血浆TC、TG值,肝组织NO、NOS值及VEGF值各组比较,模型对照组显著高于空白对照组(P＜0.01),华夏小葱制剂低、中、高剂量组及东宝肝泰片组均显著低于模型对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论:华夏小葱制剂具有降低TG、TC,改善活性氮的作用,其治疗脂肪肝的机制可能与减少细胞因子损伤有关.     

肝脂康胶囊对非酒精性脂肪肝的防治作用

目的:探讨肝脂康胶囊治疗非酒精性脂肪肝的作用机制.方法:采用高脂饮食制作脂肪肝动物模型,以东宝肝泰作对照观察肝脂康胶囊对模型大鼠的影响.结果:与模型组相比,肝脂康胶囊大、中剂量组能显著降低模型大鼠体重、肝指数、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),升高高密度脂蛋白(HDL),同时肝组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、维生素E及TG恢复到接近正常.在降低肝指数、TC、AST,升高HDL,肝脂康胶囊优于东宝肝泰(P<0.05,<0.01).病理结果显示:在使模型大鼠肝细胞脂肪变性恢复正常或显著减轻方面,肝脂康胶囊也优于东宝肝泰(P<0.05).结论:肝脂康胶囊具有良好的抗脂肪肝作用.     

Tribbles相关蛋白及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白在非酒精性脂肪肝中的表达变化

目的:对Tribbles相关蛋白3(Tribbles related protein 3,TRB3)及CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)在高脂高糖饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)中的表达变化进行研究并探讨他们在NAFLD中的作用.方法:将30只Wistar大鼠随机分为正常组和NAFLD模型组,每组各15只.模型组大鼠采用高脂高糖饮食诱导NAFLD,正常组大鼠则给予普通饲料喂养,造模时间总计为16 wk.血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein,HDL)和低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein,LDL)的含量采用全自动生化分析仪进行检测;应用PCR技术对肝脏中TRB3及CHOP m RNA水平的改变进行检测;应用免疫组织化学技术对肝脏中TRB3及CHOP蛋白水平的改变进行检测;采用流式细胞仪检测细胞凋亡改变.结果:模型组大鼠血清中TC、TG和LDL含量较正常组大鼠显著升高(P0.05),而HDL则明显低于正常组(P0.05);与正常组相比,模型组大鼠肝脏中TRB3及CHOP m RNA水平均显著增加(P0.05或P0.01);免疫组织化学结果显示模型组大鼠肝脏中TRB3及CHOP蛋白表达水平较正常组大鼠显著升高(P0.01);此外流式细胞仪对大鼠肝细胞凋亡进行检测发现,模型组大鼠肝细胞凋亡与正常组相比明显增多.结论:TRB3和CHOP在基因及蛋白水平表达上调可能与高脂高糖诱导的NAFLD的发生发展有关.     

电针对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核因子-κB活性与PPARγ表达的影响

目的:应用电针刺激SD大鼠肝俞、足三里、丰隆、太冲穴,观察其对高脂饮食所致的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织病理改变的影响。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和西药组,每组10只。正常组大鼠予普通饮食喂养,模型组、电针组和西药组大鼠均给予高脂饮食12周;12周后正常组、模型组同前喂养,其他两组大鼠分别进行电针和西药熊去氧胆酸(UDCA)治疗,共4周;16周全部大鼠断头处死,用HE染色观察大鼠肝组织光镜下的病理改变;EMSA法测定大鼠肝组织NF(核因子)-κB活性;逆转录聚合酶链反应观察各组大鼠肝组织PPAR(过氧化物酶体增殖物激活受体)γmRNA的表达情况。结果:模型组和西药组大鼠的NF-κB活性明显高于正常组(P均<0.01)和电针组(P均<0.05)。模型组、电针组和西药组大鼠肝组织PPARγmRNA的表达均较正常组有不同程度减弱(P<0.01),且模型组大鼠的表达明显低于电针组(P<0.01)。结论:肝组织NF-κB的活性增强及PPARγ的表达减弱与NASH的发生密切相关;电针可以起到增强大鼠肝组织PPARγ的表达及降低NF-κB的活性作用。电针可能通过抑制NF-κB的活性、激活PPARγ的作用而达到治疗NASH的目的。     

姜黄素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α表达的影响

目的研究姜黄素防治非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的作用及其机制。方法采用高脂饮食制备大鼠NASH模型。大鼠分正常对照组、模型组、姜黄素防治组、东宝肝泰防治组，观察肝细胞脂肪变性、炎症活动程度；采用免疫组化和Western blot技术检测各组大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白表达变化。结果与模型组相比，姜黄素防治组大鼠肝细胞脂肪变性、炎症活动程度皆有明显改善（P〈20．05），TNF-α蛋白含量显著减少（P〈0．01），部分作用明显优于东宝肝泰防治组（P〈0．01或P〈0．05）。结论姜黄素有防治NASH作用，作用机制考虑与纠正致炎因子TNF-α蛋白高表达相关。     

蓝莓对非酒精性脂肪性肝病大鼠Bcl-2、Bax表达的影响

目的:研究蓝莓对非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠的保护作用及相关机制.方法:40只健康大鼠随机分为4组:正常组、蓝莓组、姜黄素组、模型组.正常组饲喂正常饲料,其余各组饲喂高脂饲料.蓝莓组每日灌胃蓝莓原浆[15 m L/(kg·d)];姜黄素组每日灌胃姜黄素溶液[200 mg/(kg·d)];其余组大鼠灌胃等体积生理盐水,12 wk后处死.HE染色、油红O染色观察各组肝细胞损伤及脂肪沉积情况;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT),谷草转氨酶(aspartate transaminase,A S T),甘油三脂(t r i g l y e r i d e,T G),胆固醇(total cholesterol,TC)含量;酶联免疫吸附法检测肝组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、甘油三酯(triglyeride,TG)含量;免疫组织化学、Western blot和逆转录-聚合酶链反应检测大鼠肝组织中B淋巴细胞瘤-2(B-celllymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(bclassociated x protein,Bax)的表达.结果:与模型组大鼠相比,蓝莓组、姜黄素组HE染色、油红O染色肝组织中脂肪沉积明显减少,血清AST、ALT、TG、TC含量升高幅度较小(P0.01),肝组织中TG、MDA含量升高幅度也较小(P0.01),而SOD活性、GSH含量明显增高(P0.01).与模型组大鼠相比,蓝莓组、姜黄素组Bcl-2 mR NA和蛋白质的表达明显增加(P0.01),Bax m RNA和蛋白质的表达明显降低(P0.01),Bcl-2/Bax比值明显增加(P0.01).结论:蓝莓对NAFLD有较好的预防作用,其机制可能是上调肝脏Bcl-2表达,下调Bax表达,纠正两者平衡失调,提高机体抗氧化能力从而抑制肝细胞凋亡有关.     

非酒精性脂肪肝自噬基因Beclin-1与核因子NF-κBp65表达研究

目的探讨自噬基因Beclin-1在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型的表达及对NAFLD发病机制的影响。方法(1)选取24只成年雄性SD大鼠随机分为两组:NAFLD模型组(高脂饲料饲养)12只,正常组12只(普通饲料饲养)。连续饲养12周后处死两组大鼠,采取心脏取血法,检测血清生化学指标ALT、AST、TG、CHOL及低密度脂蛋白(LDL-C)。(2)将大鼠肝脏组织取出,取少许行病理切片,采用HE染色,光镜下观察肝脏组织病理变化,进一步评估肝脏脂肪变性程度及造模是否成功;免疫组化染色,确定NF-κBp65表达。(3)应用Western blot方法检测NAFLD造模成功后的大鼠肝组织中自噬基因(Beclin-1)蛋白的表达水平。结果(1)成功建立了大鼠NAFLD模型,血生化指标ALT、AST、CHOL、TG及LDL-C水平与对照组同期相比均明显升高(P=0.0422,0.0336,0.0405,0.0411,0.0433)。(2)Western blot图像结果显示,与对照组比较,模型组肝组织Beclin-1蛋白表达明显升高(P=0.0411)。(3)正常组大鼠肝小叶结构清晰完整,肝索呈放射状分布于中央静脉周围;模型组大鼠肝细胞内可见脂滴,NF-κBp65阳性,评分为44.01±0.22;免疫组化结果显示,NF-κB集中沉积在汇管区肝细胞胞浆,低倍镜视野下平均占细胞总数55.1 5±1.01%。结论自噬基因Beclin-1与NF-κBp65在NAFLD模型肝组织中表达水平升高并可能促进NAFLD发生发展过程。     

大鼠非酒精性脂肪性肝病转化生长因子β1/Smad4信号通路表达的研究

目的 观察转化生长因子(TGF)β1、转化生长因子β受体(TβR)-Ⅰ、TβR-Ⅲ和胞内Smad4信号通道蛋白以及转录因子激活剂蛋白-1(AP-1)家族中Jun蛋白质因子在大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的表达.探讨NAFLD发生肝纤维化的可能机制.方法 将18只大鼠分为对照组与模型组,每组9只.对照组喂饲普通饲料,模型组喂饲高脂饲料(88%标准普通饲料+10%猪油+2%胆固醇)造模.在20周处死所有大鼠,免疫组化法检测TGFβ1、Smad4的表达;RT-PCR检测肝组织TGFβ1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ的表达;Western印迹法测定磷酸化C-Jun蛋白的表达.结果 成功建立NAFLD动物模型,免疫组化法检测结果显示,TGFβ1和Smad4在对照组大鼠肝实质细胞的胞质内均有少量表达.TGFβ1在模型组大鼠肝实质细胞胞质、肝血窦周围的表达明显增强,尤其在汇管区更为明显.Smad4在模型组大鼠肝实质细胞胞质表达亦明显增强,而在汇管区的表达更为明显.RT-PCR检测结果显示,模型组大鼠肝组织TGFβ1、TβR-Ⅰ、TβR-ⅡmRNA的A值分别为0.46±0.12、5.24±2.70和3.35±1.95,明显高于对照组(0.21±0.09、1.36±0.77和0.52±0.19,P值均＜0.01).Western印迹检测显示,模型组磷酸化C-Jun蛋白表达同内参灰度值比为0.93±0.41,较对照组显著增高(0.32±0.25,P=0.001).结论 TGFβ1/Smad4信号通路可能参与了NAFLD进展为肝纤维化的过程.阻断TGFβ/Smad4信号传导通路,可开辟治疗NAFLD新的思路.     

华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠脂质代谢和组织形态学的影响

目的:观察华夏小葱制剂对脂肪肝大鼠防治作用及其对组织形态学影响.方法:60只SD大鼠随机分为空白对照组(n= 10),模型对照组(n=10),华夏小葱制剂低剂量组(n=10),中剂量组(n=10),高剂量组(n =10)以及东宝肝泰片组(n=10)。空白对照组用普通饲料及普通水喂养;其他组用高脂饮食及酒精水喂养,并结合每周一次行后肢sc小剂量四氯化碳色拉油溶液的方法建立大鼠脂肪肝模型.用光镜及电镜观察肝脏的形态学改变情况,采用全自动生化分析仪测定总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇fLDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),ALT(丙氨酸氨基转移酶),AST(天门冬酸氨基转移酶),TP(总蛋白),ALB(清蛋白)、GLO(球蛋白)及A/G(清蛋白/球蛋白)的含量.结果:光镜和电镜观察均见模型对照组有严重脂肪变性,脂滴增多;华夏小葱低、中、高剂量组及东宝肝泰片组脂肪变性程度有所减轻,脂滴不同程度的有所减少.和空白对照组的TC,TG,HDL-C,LDL-C,ALT,AST,TP,ALB相比,模型对照组大鼠血浆TC,TG,LDL-C,ALY,AST值均显著升高(P<0.01),HDL-C,TP,ALB值均显著降低(P<0.01);和模型对照组的TC,TG,HDL-C,LDL-C,ALT,AST TP,ALB相比,华夏小葱低,中,高剂量组及东宝肝泰片组TC,TG,LDL-C值均显著降低(TC:低,中,高剂量组P<0.05,东方肝泰片组P<0.01;TG:低,中剂量组和东方肝泰片平P<0.05,高剂量细P<0.01:LDL-C:均P<0.05),HDL-C值与模型对照组相比显著升高(均P<0.05),ALY,AST值与模型对照组相比无统计学差异,华夏小葱高剂量组与模型对照组相比ALB值显著升高(P<0.05).结论:华夏小葱制剂能改善脂肪肝大鼠体内的脂质代谢,对脂肪肝有一定的防治作用.     

蓝莓对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝细胞核因子相关因子2表达的影响

目的:研究蓝莓对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的保护作用及相关机制。方法:40只健康C57BL/6J小鼠随机分为4组:正常组、蓝莓组、姜黄素组、模型组。正常组饲喂正常饲料,其余各组饲喂高脂饲料。蓝莓组每日灌胃蓝莓原浆(15 ml·kg-1·d-1);姜黄素组每日灌胃姜黄素溶液(200mg·kg-1·d-1);其余组小鼠灌胃等体积生理盐水,12周后处死。油红染色观察各组肝脏形态变化;全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)含量;酶联免疫法检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及三酰甘油(TG)含量;Western blot检测小鼠肝组织中核因子相关因子2(Nrf2)蛋白的表达。结果:与模型组小鼠相比,蓝莓组、姜黄素组油红染色肝组织中脂肪沉积明显减少,血清AST、ALT、TG、TC含量明显降低(P0.05),肝组织中TG、MDA含量明显下降(P0.05),而SOD活性、GSH含量及Nrf2蛋白表达明显增高(P0.05)。结论:蓝莓对NAFLD有较好的防治作用,其机制可能与上调肝组织中Nrf2的表达,提高机体抗氧化能力相关。     

大麻素受体1在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

目的动态观察内源性大麻素受体l（CB1）在大鼠非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）中的表达,初步探讨CB1在NAFLD发病中的作用。方法雄性SD大鼠48只,随机分3组：对照组（普通饲料）、模型组（高糖高脂饲料）、干预组（高糖高脂饲料＋利莫那班）,分别于实验第4、8周末每组各取8只处死,测体重、计算肝指数,检测血清ALT、AST、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）;ELISA法检测血清瘦素（Leptin）、肿瘤坏死因子（TNF）α含量,肝组织HE染色,观察其病理形态变化,免疫组化染色法观察NAFLD不同阶段肝组织CB1表达。采用单因素方差分析对各组间进行比较,组间两两比较采用SNK-q检验,组内比较采用两独立样本t检验,两指标间的相关性采用Pearson直线相关分析法。结果 （1）模型组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、Leptin及TNFα水平均较对照组及利莫那班组高（P〈0.05）;（2）肝组织学改变：模型组第4周呈单纯性脂肪肝改变,第8周呈弥漫性肝脂肪变伴炎细胞浸润,干预组较同期模型组肝病变减轻;（3）肝脏CB1免疫组织化学检测：对照组表达阴性;模型组和干预组表达呈阳性。通过积分光密度值比较,模型组高于同期干预组（P〈0.05）。结论 CB1在NAFLD患者中表达增强,并可能与TNFα和Leptin共同作用促进NAFLD进展。     

电针肝俞穴、梁丘穴对抑郁型胃溃疡大鼠SS及海马BDNFmRNA的影响

目的:研究电针肝俞穴、梁丘穴对抑郁型胃溃疡大鼠模型生长抑素(somatostatin,SS)及海马脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的影响,探讨电针肝俞穴、梁丘穴对抑郁型胃溃疡的治疗机制.方法:所有大鼠旷场试验后选择合格大鼠60只,按照随机数字表法分为4组:空白组(n=15)、模型组(n=15)、西药组(n=15)、电针组(n=15).除正常组外,剩下的3组建立慢性不可预见性刺激抑郁症合并醋酸烧灼胃溃疡大鼠模型.电针组采用电针肝俞穴、梁丘穴,西药组采用奥美拉唑灌胃4.2 mg/(kg?d).肝俞穴位直刺6 mm,梁丘穴直刺4-5 mm,电针治疗仪给予疏密波型,疏波4 Hz,密波20 Hz,强度以局部皮肤肌肉轻微颤动为度,留针20 min,1次/d,连续6 d,中间休息1 d,2 wk为1个疗程,共13 d.观察大鼠一般情况变化、旷场试验结果、溃疡指数结果,运用免疫组织化学法检测下丘脑、胃窦黏膜组织中SS的表达,RT-PCR法检测海马组织中BDNF的表达.结果:造模后和治疗后模型组旷场试验水平和垂直运动均较空白组明显降低(23.28±4.13 vs 38.35±6.65,9.89±3.31 vs 19.34±2.56;27.19±3.72 vs 38.87±4.89,10.58±2.47vs 20.68±3.54;均P0.01),而治疗后电针组和西药组水平和垂直运动较模型组显著增高(34.78±6.54 vs 27.19±3.72,33.24±4.54vs 27.19±3.72;17.78±2.09 vs 10.58±2.47,16.32±3.01 vs 10.58±2.47;均P0.01).电针组和西药组溃疡指数比模型组有显著降低(2.14±0.75 vs 4.75±0.46;2.10±0.32 vs 4.75±0.46;均P0.01).模型组胃黏膜和下丘脑中SS表达较空白组降低(0.09887±0.0073 vs0.16675±0.0046;0.09500±0.0063 vs 0.14462±0.0050;均P0.05),电针组和西药组SS表达较模型组均增高(0.12562±0.0031 vs 0.09887±0.0073,0.12538±0.0043 vs 0.09887±0.0073;0.11312±0.0054 vs 0.09500±0.0063,0.11900±0.0056 v s 0.09500±0.0063;均P0.05).模型组海马BDNF mRNA含量较空白组显著降低(0.2775±0.00712 vs 0.6899±0.03245;P0.01),电针组海马BDNF mRNA含量比模型组显著增高(0.6547±0.01907 vs0.2775±0.00712;P0.01),西药组与模型组比较含量增高(0.4162±0.0088 vs 0.2775±0.00712;P0.05).以上指标电针组与西药组比较除BDNF mRNA差异有统计学意义(0.6547±0.01907 vs 0.4162±0.0088;P0.01)外余者均无统计学意义(P0.05).结论:电针肝俞穴、梁丘穴可以通过调节脑肠肽SS及海马BDNF的表达水平,对抑郁型胃溃疡起到治疗作用.     

电针对鱼藤酮诱导的帕金森病模型大鼠黑质内ERK1/2及TNF-α的影响

目的探讨电针对帕金森病(PD)模型大鼠黑质内ERK1/2信号通路及炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α的作用及机制。方法雄性健康SD大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组,每组8只。模型组和电针组经颈背部注射鱼藤酮造模14 d,造模后进行行为学评价,电针组给予电针"风府"和"太冲"两穴治疗,连续治疗14 d;其余各组不做治疗,假手术组给予相同剂量的DMSO和生理盐水混合液。采用免疫组化法检测大鼠黑质区磷酸化的ERK1/2、酪氨酸羟化酶(TH)、TNF-α阳性细胞表达情况。结果各组大鼠神经行为学表现存在差异,与正常组、假手术组相比,模型组大鼠黑质区TH阳性细胞数减少(P<0.05),磷酸化的ERK1/2、TNF-α阳性细胞数增加(P<0.05);与模型组相比,电针组大鼠黑质区TH阳性细胞数增加(P<0.05),磷酸化的ERK1/2、TNF-α阳性细胞数减少(P<0.05)。结论电针可以通过调节PD模型大鼠体内MAPK/ERK1/2通路,降低p-ERK1/2在PD模型大鼠黑质区的表达,进而减少TNF-α的表达,对PD病的发生发展起到一定的调节作用。     

柴苓调肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织肿瘤坏死因子-α及瘦素基因表达的影响

目的:通过实验研究观察柴苓调肝颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、瘦素(LP)基因表达的影响,探讨其治疗作用机制。方法:以喂高脂饲料的方法制备大鼠NAFLD模型,造模成功后,随机分为8组,柴苓调肝颗粒高、中、低剂量组,甘乐对照组、三七脂肝丸对照组、模型对照组、饮食控制组和正常对照组。观察实验大鼠治疗前后一般状态及病理改变;采用免疫组化二步法检测肝组织中的TNF-α,CYP2E1蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(Real Time-PCR,RT-PCR)法检测肝组织中的TNF-αmRNA和LPmRNA表达水平。结果:柴苓调肝颗粒高剂量组大鼠各项指标与模型对照组和饮食控制组比较差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论:柴苓调肝颗粒可以减轻大鼠体重,降低肝组织中TNF-α、CYP2E1含量及蛋白表达量,降低肝组织中的TNF-α和LP mRNA表达水平,使肝组织病理学改变减轻并且趋于正常。其作用机制可能与柴苓调肝颗粒能够调节脂代谢相关的TNF-α和LP有关。