急性脑梗死患者血清中可溶性白细胞分化抗原40配体和低氧诱导因子-1α的表达

目的观察可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)和低氧诱导因子(HIF)-1α在急性脑梗死患者血清中的表达特征,分析二者在不同临床特中的表达差异。方法急性脑梗死患者血清标本75例为观察组,同期体检证实为无明显器质性疾病,且无神经功能障碍的正常成人血清标本18例为对照组,应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测两组血清中sCD40L和HIF-1α的表达。结果观察组s CD40L和HIF-1α表达明显高于对照组,观察组中sCD40L和HIF-1α表达与脑梗死体积和预后相关,线性相关分析显示观察组中sCD40L和HIF-1α之间呈正相关。结论 sCD40L和HIF-1α在急性脑梗死患者血清中表达升高,二者具有正向协同作用,共同促进病变的进展。     

高浓度葡萄糖对视网膜Müller细胞超微结构和低氧诱导因子-1α表达的影响

目的 探讨高浓度葡萄糖对大鼠视网膜Müller细胞超微结构和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 体外传代培养大鼠视网膜Müller细胞,分正常对照组、葡萄糖25 mmol/L组和50 mmol/L组,电镜观察不同组Müller细胞超微结构的改变,Western印迹检测不同组Müller细胞中HIF-1α的表达.结果 葡萄糖25 mmol/L组Müller细胞超微结构发生了明显的改变:细胞核缩小、不规则,核內染色质呈凝集边聚;胞质浓染,线粒体肿胀,可见空泡结构.葡萄糖50 mmol/L组,胞质内可见残余体,细胞表面绒毛减少变钝.Western印迹结果示正常对照组无HIF-1α蛋白的表达,葡萄糖25 mmol/L组和50 mmol/L组均有低氧诱导因子-1α蛋白的表达,50 mmol/L组蛋白表达量低于25 mmol/L组.结论 高浓度葡萄糖可以引起Müller细胞超微结构的改变,并引起HIF-1α的表达.     

不同时间点脑出血大鼠脑组织中缺氧诱导因子1α和线粒体细胞色素C的表达

目的探讨不同时间点脑出血大鼠脑组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α和线粒体细胞色素(Cyt)-C的表达。方法 120只健康Wistar老年雄性大鼠随机分为假手术组和脑出血模型组。应用自体血尾状核定位注射方法建立大鼠自体血脑出血模型。均于术后12、24、48、72 h、5和7 d处死。采用酶联免疫法和实时多聚酶链反应(RT-PCR)检测脑组织HIF-1α、Cyt-C蛋白及mRNA水平。结果与假手术组比较,脑出血模型组在不同时间点脑组织中HIF-1α、Cyt-C蛋白和mRNA水平均明显升高(P<0.001),72 h达高峰,随后逐渐下调。脑出血模型组术后12、24、48 h、5、7 d与72 h HIF-1α、Cyt-C的蛋白及mRNA表达有统计学差异(P<0.01),48 h与5 d无统计学差异(P>0.05)。结论脑出血后脑组织中HIF-1α、Cyt-C的蛋白及mRNA水平增高可促进神经细胞凋亡、导致神经功能障碍及加重继发性脑损伤,阻断二者的表达为脑出血的治疗提供新的靶点。     

HIF-1α与Glut-1在大肠癌中表达及与脉管侵犯的关系

目的 探讨缺氧诱导因子(HIF)-1α 和葡萄糖转运蛋白(Glut)-1在大肠癌中表达及其临床意义.方法 选取原发性大肠癌患者32例,在进行根治术后收集病理标本及癌旁组织,通过使用免疫组化的方法检测HIF-1α和Glut-1的表达.分析HIF-1α 和Glut-1的表达与临床病理特征的相关性.结果 HIF-1α 在大肠...     

丹参酮ⅡA对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及HIF-1α表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及HIF-1α表达的影响.方法:用氯化钴(CoCl2)创建低氧模型,设常氧对照组、低氧对照组和低氧加不同浓度Tan ⅡA组.分别取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的Tan ⅡA干预低氧胃癌SGC7901细胞24、48、72 h后,MTT法检测细胞活力:用上述同样浓度的Tan ⅡA干预低氧胃癌细胞48 h和72h后.HOECHST染色法检测细胞凋亡.Tan ⅡA(0.5、2.0、10.0 mg/L)干预低氧胃癌细胞48h后,免疫细胞化学二步法检测HIF-1α蛋白表达的变化.结果:MTT法证实,低氧条件下,Tan ⅡA呈时间、剂量依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞增殖(P＜0.01),10.0 mg/L Tan ⅡA作用细胞72 h后,其抑制率达71.2%.HOECHST染色法发现,低氧条件下,分别用0.5-1 0.0 mg/L浓度的Tan ⅡA作用胃癌细胞24、48 h,Tan ⅡA可呈时间、剂量依赖性地诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡(F=60354.00,187922.10,均P＜0.05),10.0mg/L Tan ⅡA作用细胞72 h后,凋亡率达40.70%±1.55%.免疫细胞化学法显示,Tan Ⅱ A呈剂量依赖性地抑制低氧诱导的HIF-1α蛋白表达(F=712.326,P＜0.01).结论:低氧条件下,Tan ⅡA抑制胃癌细胞增殖并诱导其凋亡,这种作用可能与其抑制HIF-1α蛋白表达有关.     

“手十二井穴”放血预处理对大鼠急性低氧肺组织损伤模型血气、HIF-1α及VEGF水平的影响

目的 观察“手十二井穴”放血预处理对大鼠急性低氧肺组织损伤模型血气相关指标、低氧诱导因子(HIF)-1α及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响,探讨“手十二井穴”放血预处理对急性低氧肺组织损伤的影响。方法 将72只雄性SD大鼠随机分为对照组8只、低氧(模型)组32只、井穴放血预处理(放血)组32只,模型组和放血组又分为6、24、48、72 h 4个时间段亚组,每组各8只。采用实验动物低氧模拟舱模拟15%O₂浓度,制备大鼠急性低氧肺组织损伤模型。放血组按“少商”“商阳”“中冲”“关冲”“少冲”“少泽”的顺序,每天1次,共5 d。用手持式血气分析仪检测肺动脉血气氧分压(PaO₂)、血氧饱和度(SaO₂)、酸碱度(pH)、二氧化碳分压(PaCO₂)等相关指标,采用Western印迹法检测HIF-1α表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测VEGF含量。结果 与对照组比较,模型组各时间段PaO₂、SaO₂明显降低,HIF-1α和VEGF表达水平显著升高(P...     

低氧诱导因子-1α与骨质疏松

1992年,Semenza等〔1〕首先发现低氧诱导因子(HIF),它作为组织细胞低氧状态下调节氧稳态的核转录因子,在低氧信号转导过程中起重要作用。HIF包括三种亚型(HIF-1,HIF-2和HIF-3),哺乳动物对低氧的适应性反应主要表达为HIF-1。HIF-1是由HIF-1α和HIF-1β两个亚基组成的异源二聚体,其     

HIF-1α在小鼠ACTH垂体腺瘤细胞AtT-20的抗凋亡作用

目的 观察缺氧诱导因子(HIF)-1α在小鼠垂体促肾上腺皮质激素腺瘤细胞AtT-20生长增殖中的作用,验证HIF-1α能否保护AtT-20细胞免于低氧诱导的细胞凋亡.方法 不同浓度的CoCl2诱导AtT-20细胞发生低氧,MTT方法观察CoCl2促进细胞生长增殖的作用,实时定量PCR和Western印迹检测常氧和低氧环境下HIF-1α mRNA和蛋白水平的改变;细胞转染HIF-1α-siRNA后,CoCl2低氧诱导,实时定量PCR和Western印迹验证siRNA下调HIF-1α的效率,凋亡检测系统Annexin V-FITC和TUNEL法检验细胞凋亡情况.结果 在一定浓度(≤100 μmoL/L)和时间(≤48 h)范围内,CoCl2可以促进AtT-20细胞的生长增殖,并呈浓度和时间正相关性;HIF-1α-siRNA转染后,CoCl2低氧诱导处理的细胞发生凋亡的比率大幅度上升(P＜0.05).结论 HIF-1α在AtT-20细胞生长增殖中发挥抗凋亡的作用.     

低氧诱导因子-1α对老年骨关节炎软骨细胞活性的影响

目的探讨低氧诱导因子(HIF)-1α与老年骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的关系。方法选择老年OA患者84例,另选健康人群80例作为对照。免疫组织化学方法检测HIF-1α、bcl-2蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)在OA和正常软骨细胞中的表达,分析其对OA软骨细胞增殖和凋亡的影响。结果 OA组HIF-1α阳性表达率为83.9%,明显高于正常对照组(χ2=30.312,P=0.000)。正常软骨细胞中bcl-2蛋白表达量明显高于OA软骨细胞。TUNEL法检测细胞凋亡结果显示,OA软骨组中细胞凋亡碎片明显多于正常软骨细胞,正常组软骨细胞凋亡指数为7.16±9.01,而OA组软骨细胞凋亡指数为39.7±7.23,两者差异显著(P0.05)。PCNA计数,OA组中软骨细胞增殖活性明显低于正常组。结论 HIF-1α表达与OA软骨细胞活性密切相关,可能通过调控bcl-2蛋白及PCNA影响软骨细胞的增殖与凋亡。     

子宫内膜样腺癌中低氧诱导因子-1α、-2α和Survivin的表达

目的检测子宫内膜样腺癌术后组织中低氧诱导因子(HIF)-1α、2α和生存素(Survivin)的表达特征。方法 64例子宫内膜样腺癌患者的临床资料和术后蜡块组织作为观察组,56例子宫脱垂行子宫全切术后的子宫内膜组织作为对照组。应用免疫组化SP法检测两组中HIF-1α、-2α和Survivin的表达。结果两组中HIF-1α、-2α和Survivin表达的阳性率差别显著。观察组中HIF-1α、-2α和Survivin的阳性率均与肿瘤最大径及肌层浸润深度密切相关,HIF-1α、-2α的表达与肿瘤的分化程度密切相关。线性相关分析显示观察组中HIF-1α和Survivin、HIF-2α和Survivin的表达具有正相关性。结论子宫内膜样腺癌术后组织中HIF-1α、-2α和Survivin高表达,三者对促进肿瘤的形成和进展均有重要作用。HIF-1α、-2α均与Survivin有协同正向作用。     

蕨麻对缺氧诱导心肌细胞凋亡的影响

目的观察蕨麻(Potentilla anserina L.)对缺氧诱发乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法采用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立缺氧损伤实验模型,分为正常对照组、缺氧模型组、蕨麻醇提物干预组,通过HE染色、双苯并咪唑-碘化丙锭荧光染色及透射电镜技术,观察细胞镜下结构的改变,并通过免疫组织化学染色观察细胞内P53蛋白表达水平。结果与缺氧模型组和正常对照组比较,蕨麻醇提物干预组可有效减轻缺氧导致的心肌细胞肿胀变形、细胞质空泡化及DNA凝集等损伤变化,并可显著降低P53蛋白的表达(P<0.01)。结论蕨麻能有效抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡损伤,其机制之一可能是通过调节P53蛋白的表达实现的。     

2-甲氧基雌二醇对缺血缺氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨2-甲氧基雌二醇(2ME2)对缺血缺氧诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响,以及可能的机制。方法:清洁级健康雄性,成年,SD大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、溶媒组和2ME两组,每组10只,构建大鼠急性心肌梗死模型,2ME两组在大鼠苏醒3 h内按24 mg/kg剂量腹腔注射2ME2,溶媒组和模型组则给予等量的二甲基亚砜或0.9%氯化钠溶液,1次/d,连续7 d,建模后第8天时,检测各组大鼠心脏功能,TUNEL法检测各组大鼠心脏梗死区心肌细胞凋亡情况,Western blot法检测各组大鼠心脏梗死区心肌组织中HIP-1α和BNIP3蛋白表达。结果:模型组和溶媒组大鼠LVEDD和LVESD均高于假手术组,而LVEF和FS均低于假手术组(P<0.05),2ME两组大鼠LVEDD和LVESD均低于模型组和溶媒组,而LVEF和FS均高于模型组和溶媒组(P<0.05);模型组和溶媒组大鼠心脏梗死区心肌细胞凋亡率均高于假手术组(P<0.05),2ME两组大鼠心脏梗死区心肌细胞凋亡率低于模型组和溶媒组(P<0.05);模型组和溶媒组大鼠心脏梗死区心肌组织中HIP-1α和BNIP3蛋白相对表达量高于假手术组(P<0.05),2ME两组大鼠心脏梗死区心肌组织中HIP-1α和BNIP3蛋白相对表达量低于模型组和溶媒组(P<0.05)。结论:2ME2可减少缺血-再灌注损伤大鼠梗死区心肌细胞凋亡,改善心脏功能,其机制可能与抑制HIP-1α及其靶基因BNIP3表达有关。     

吡咯烷二硫氨基甲酸脂对缺氧再给氧冠状动脉内皮细胞凋亡的影响

目的:探讨缺氧再给氧(H/R)时冠状动脉内皮细胞(CAEC)氧自由基清除功能和细胞凋亡率的变化及抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸脂(PDTC)对它的影响。方法:将体外培养的猪CAEC分为3组。对照组:未经处理;H/R组:作H/R处理;PDTC组:在H/R前于培养液中加入PDTC。分别检测各组细胞谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量、核转录因子(NF-κB)表达及细胞凋亡率。结果:实验期对照组GSH、MDA含量、NF-κB的表达及细胞凋亡率无明显改变;H/R及PDTC组GSH含量明显低于对照组同期,而MDA含量、NF-κB表达及细胞凋亡率明显高于对照组同期;但PDTC组GSH含量明显高于H/R组同期,MDA含量、NF-κB的表达及细胞凋亡率明显低于H/R组同期。结论:H/R使细胞GSH含量明显减少,MDA含量、NF-κB的表达及细胞凋亡率明显增加;PDTC能有效降低NF-κB的表达,改善细胞氧自由基清除功能,降低细胞凋亡率,减轻H/R损伤。     

醒脑启智胶囊药物血清对缺氧诱导的PC12细胞凋亡及凋亡基因的影响

目的 探讨醒脑启智（XNQZ）胶囊药物血清对缺氧诱导的PCI2细胞凋亡及其相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法 采用血清药理学方法，体外培养PCI2细胞，以药物血清孵化后用连二亚硫酸钠（Na2S2O4）缺氧诱导，观察PCI2细胞凋亡及bcl-2、bax表达的变化。结果 缺氧诱导后，PC12细胞的bax蛋白表达上调，使细胞凋亡趋势增强。XNQZ药物血清可使bcl-2基因表达量增加，bax基因表达量降低，细胞凋亡率下降。结论 XNQZ可通过调节bcl-2、bax表达，抑制细胞凋亡，提高细胞抗损伤和修复能力，以达到对抗神经元迟发性死亡，抑制智力减退的作用，并呈现一定的剂量依赖关系。     

过表达肌浆网钙三磷酸腺苷酶抑制缺氧诱导心肌细胞凋亡的研究

目的研究过表达肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)能否提高心肌细胞对缺氧的耐受性,评价其对心肌细胞凋亡的影响。方法体外培养的SD乳鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧组、过表达SERCA2a组和SERCA2a+缺氧组,以携带SERCA2a基因的重组腺病毒转染心肌细胞48 h后对其进行缺氧处理。Western blot法检测细胞质内SERCA2a蛋白及Caspase-3表达的变化;膜联蛋白V/碘化丙啶双染色法及流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜检测细胞质内Ca~(2+)浓度变化。结果与对照组比较,缺氧组SERCA2a蛋白表达水平显著降低,过表达SERCA2a组蛋白含量升高2.5倍(P<0.05),缺氧组Caspase-3蛋白表达升高53.1%,过表达SERCA2a后给予缺氧处理,Caspase-3蛋白表达降低39.7%(P<0.05)。与对照组比较,缺氧组心肌细胞凋亡率显著升高,与缺氧组比较,SERCA2a+缺氧组细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。与对照组比较,缺氧组细胞质内Ca~(2+)荧光强度显著升高;与缺氧组比较,SERCA2a+缺氧组细胞质内Ca~(2+)荧光强度显著降低(P<0.05)。结论过表达SERCA2a可减轻细胞内Ca~(2+)超载和抑制Caspase-3激活,进而减少缺氧诱导的心肌细胞凋亡。     

低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响及其机制探讨

目的 观察低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 将体外培养的人喉鳞癌细胞分为常氧组、低氧组.流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法分别检测各组细胞低氧诱导因子α（HIF-1α）、赖氨酰氧化酶（LOX）mRNA及蛋白.结果 常氧组细胞凋亡率13.86％±0.12％、低氧组5.13％±0.67％,P≤0.05.与常氧组比较,低氧组细胞中HIF-1 α、LOX蛋白及其mRNA表达增加（P均≤0.05）,且二者表达呈正相关（r均为0.862,P均≤0.05）.结论 低氧可抑制Hep-2细胞凋亡,该作用可能与其上调细胞中HIF-1α、LOX表达有关.     

黄连素对缺氧／复氧诱导的大鼠心肌细胞损伤的拮抗作用

目的探讨黄连素（BR）对大鼠H9e2心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤后凋亡的影响及其作用机制。方法：将培养的H9c2心肌细胞随机分为：正常对照（NC）组、单纯BR组、H／R组、药物低剂量BR（1．5×10-6moVL）组及高剂量BR（1．5×10-4moL／L）组。处理结束后,用MrITr比色法检测H9c2心肌细胞的活力,用Hoechst33258染色检测细胞核形态的变化,用Western blot法检测Cytochrome-C（Cyt-C）,Caspase-9蛋白的表达。结果：与NC组比较,单纯BR组对H9c2心肌细胞无影响。与H／R组比较,低、高剂量BR组细胞的活力分别为（60．8±1．9）％和（81．2±1．9）％明显上升（P〈0．01）,心肌细胞的凋亡率明显减少,Western blot的结果显示,BR可抑制凋亡相关蛋白Cyto-chrome-C、Caspase-9的表达。结论：BR对H9c2心肌细胞H／R损伤后的凋亡具有显著的抑制作用,其可能的机制与抑制的Cyt-C的释放和抑制Caspase-9的表达有关。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征模式间歇低氧对大鼠淋巴细胞亚群凋亡的研究

目的 探讨睡眠呼吸暂停模式间歇低氧（IH）对大鼠外周血淋巴细胞亚群凋亡的影响.方法 将16只雄性Wistar大鼠随机分为常氧对照组（NC,n=8）和间歇低氧（IH）4周组（IH4,n=8）,IH暴露环境最低氧浓度为5％,IH频率为30次/h.暴露完成后取外周血分离淋巴细胞,流式细胞术检测淋巴细胞亚群凋亡情况.结果 和NC组比较,IH组CD4 T细胞凋亡率（15.17±1.43）％低于NC组（17.97±1.76）％,CD8 T细胞凋亡率（17.23±1.07）％低于NC组（19.7l±1.93）％,NK细胞凋亡率（22.07±1.45）％高于NC组（17.33±1.04）％,B细胞凋亡率（17.88±1.85）％高于NC组（13.94±1.76）％（P均＜0.01）.结论 IH暴露改变大鼠外周血淋巴细胞亚群的凋亡状态,导致免疫功能异常,可能加重内皮细胞功能障碍.     

西红花苷对急性高海拔低氧条件大鼠脑海马P53表达及凋亡的影响

目的探讨西红花苷提前用药对急性高海拔低氧条件下大鼠脑海马神经细胞凋亡及P53表达的影响。方法 SD大鼠随机分为低氧对照组和低氧用药组,用药组每天肌肉注射西红花苷(50 mg/kg),对照组每天肌肉注射相同剂量的0.9%Na Cl,连续给药3 d后运至海拔4 200 m,在第1、3、5、7天取材。TUNEL法检测大鼠脑海马CA1区细胞凋亡,通过RT-PCR方法检测脑海马P53 mRNA水平,通过Western印迹法检测P53蛋白水平。结果与低氧对照组相比,用药组大鼠脑海马细胞凋亡率在第1、3、5、7天明显降低(P<0.05);P53 mRNA及蛋白相对表达量明显降低(P<0.05)。结论西红花苷能通过下调急性高海拔低氧条件下大鼠脑海马P53的表达、降低脑海马细胞的凋亡率达到保护脑海马神经元的作用。