异丙酚加小剂量氯胺酮用于人工流产的临床对照

目的：比较异丙酚加不同剂量氯胺酮用于人工流产的麻醉效果。方法：80例患者随机分为对照组、K1组、K2组、K3组4组,分别作全麻诱导,对照组采用1%异丙酚2.0mg/kg,其余3组分别采用1%氯胺酮0.1mg/kg+1%异丙酚1.9mg/kg,1%氯胺酮0.2mg/kg+1%异丙酚1.8mg/kg,1%氯胺酮0.3mg/kg+1%异丙酚1.7mg/kg。比较各组诱导前后的BP、完全苏醒时间及麻醉优良率。结果：K2,K3组诱导后BP与对照组比较差异有显著意义(P＜0.05),K3组麻醉优良率与对照组比较差异有显著意义(P＜0.05)。结论：异丙酚麻醉时加入0.2～0.3mg/kg氯胺酮可以有效防止异丙酚的降压作用,且能提高人工流产的麻醉效果。     

异氟烷麻醉对老龄大鼠4种蛋白表达及术后认知功能的影响

目的探讨异氟烷麻醉对老龄大鼠血清与海马组织葡萄糖调节蛋白8(glucose regulated protein 8, GRP8)、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β)、S100-β、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)及术后认知功能的影响。方法老龄SD大鼠30只,随机分为异氟烷组、七氟烷组、对照组各10只。异氟烷、七氟烷组分别吸入1.5%最低肺泡有效浓度异氟烷、七氟烷全身麻醉2 h,对照组吸入体积分数30%氧气。6、12、24 h后测定3组大鼠动脉血氧饱和度(pulse oxygen saturation, SpO_2)、p(CO_2)、逃避潜伏期及神经功能缺损Longa评分;ELISA法测定3组麻醉24 h血清GRP8、GSK-3β、S100-β、NSE水平,Western blot法检测3组麻醉24 h海马组织GRP8、GSK-3β、S100-β、NSE蛋白相对表达量。结果麻醉后6 h逃避潜伏期、Longa评分在异氟烷组[(21.98±1.47)s、(0.57±0.09)分]、七氟烷组[(22.11±2.72)s、(0.58±0.06)分]与对照组[(20.22±2.48)s、(0.56±0.08)分]比较差异无统计学意义(P0.05);麻醉后12、24 h逃避潜伏期在异氟烷组[(38.67±3.10)、(45.77±2.33)s]、七氟烷组[(44.76±3.11)、(58.76±2.77)s]较对照组[(20.22±2.29)、(20.29±1.42)s]延长,Longa评分在异氟烷组[(1.87±0.12)、(3.02±0.14)分]、七氟烷组[(1.98±0.13)、(3.24±0.18)分]较对照组[(0.52±0.09)、(0.53±0.07)分]增高(P0.05);异氟烷组麻醉后12、24 h逃避潜伏期较七氟烷组缩短,Longa评分较七氟烷组降低(P0.05)。3组麻醉6、12、24 h时SpO_2、p(CO_2)比较差异均无统计学意义(P0.05)。麻醉后24 h,异氟烷组、七氟烷组血清GRP8[(4.78±0.31)、(2.20±0.55)ng/L]、GSK-3β[(10.10±1.30)、(8.48±1.66)ng/L]、S100-β[(0.13±0.01)、(0.09±0.03)ng/L]、NSE[(6.98±0.41)、(4.21±0.32)ng/L]水平均低于对照组[(6.10±0.40)、(12.49±1.49)、(0.18±0.02)、(9.13±0.44)ng/L](P0.05),异氟烷组高于七氟烷组(P0.05)。麻醉后24 h,异氟烷组、七氟烷组海马组织GRP8相对表达量(1.98±0.28、0.97±0.23)、GSK-3β相对表达量(3.62±0.45、2.01±0.44)、S100-β相对表达量(3.24±0.22、1.82±0.34)、NSE相对表达量(1.93±0.27、4.10±0.38)均低于对照组(6.36±1.44、5.87±0.33、8.37±0.42、6.24±0.32)(P0.05),异氟烷组高于七氟烷组(P0.05)。结论与七氟烷吸入麻醉比较,异氟烷吸入麻醉对老龄大鼠海马组织及血清GRP8、GSK-3β、S100-β、NSE表达的抑制作用较弱,有利于术后认知功能的恢复。     

异丙酚对全脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用及其机制

背景静脉麻醉药异丙酚可能通过抗凋亡作用保护脑缺血神经元 ,但是,异丙酚抗凋亡作用的研究还很少,机制尚不明确. 目的观察异丙酚对大鼠全脑缺血再灌注损伤神经元凋亡率、坏死率和凋亡相关基因蛋白表达的影响,探讨异丙酚的脑保护作用及其机制. 设计随机对照的实验研究. 地点和对象在首都医科大学附属北京神经外科研究所进行研究.成年雄性 Wistar 大鼠 19只,随机分为缺血组( n=7)、异丙酚组( n=7)和假手术对照组( n=5). 干预制备大鼠全脑缺血再灌注模型.异丙酚组再灌注开始后立即静脉输注异丙酚 1.5 mL/h,持续 30 min.于再灌注 24 h取脑,用流式细胞仪检测凋亡率,坏死率, bcl-2, Bax和 p53蛋白在大鼠海马神经元中的表达情况. 主要观察指标凋亡率,坏死率, bcl-2, Bax和 p53蛋白在大鼠海马神经元中的表达情况. 结果异丙酚组海马神经元的凋亡率和坏死率 [(7.01± 0.79)%和 (12.80± 0.92)% ]较缺血组 [(10.89± 0.80)%和 (16.67± 1.04)% ]明显降低 (P< 0.01).异丙酚组 Bax和 p53蛋白表达 [(49.93± 5.41)%和 (10.34± 1.65)% ]较缺血组 [(57.05± 1.91)%和 (13.84± 0.97)% ]明显降低 (P分别 < 0.05和 0.01),而异丙酚组 bcl 2蛋白表达( 9.45± 1.16)%较缺血组( 9.69± 0.94)%未见显著性差异 (P >0.05). 结论异丙酚能够降低大鼠全脑缺血再灌注神经元的凋亡率和坏死率,起到脑保护作用,其机制可能与降低促凋亡基因 Bax和 p53蛋白的表达有关.     

雷公藤红素提高人白血病细胞化疗敏感性的实验研究

目的探讨雷公藤红素提高人白血病多药耐药细胞株(K562/A02)化疗敏感性的作用及其机制。方法白血病细胞株K562和多药耐药细胞株K562/A02,培养至对数生长期分成6组,分别为K562/A02阴性组、K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562/A02+125μmol/L雷公藤红素组以及K562阴性组、K562+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562+125μmol/L雷公藤红素组;设置K562+硼替佐米4nmol/L为阳性对照组。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;采用反转录PCR法检测各组细胞中核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、survivin、死亡受体5(death receptor 5,DR5)mRNA表达水平;应用流式细胞术检测DR5蛋白阳性表达率。结果K562阴性组与K562+62.5μmol/L雷公藤红素组细胞凋亡率[(5.110±0.803)%、(6.283±0.889)%]以及K562/A02阴性组与K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组细胞凋亡率[(7.203±0.275)%、(8.753±0.951)%]比较差异均无统计学意义(P0.05);K562/A02阴性组NF-κB mRNA(0.863±0.073)、survivin mRNA(0.989±0.018)、DR5 mRNA(0.114±0.037)表达水平高于K562阴性组(0.262±0.074、0.267±0.056、0.050±0.011)(P0.05);K562+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562+125μmol/L雷公藤红素组NF-κB mRNA(0.210±0.053、0.128±0.076)、survivin mRNA(0.199±0.064、0.228±0.030)表达水平均低于K562阴性组,DR5mRNA表达水平(0.312±0.075、0.464±0.073)表达水平高于K562阴性组(P0.05);K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562/A02+125μmol/L雷公藤红素组NF-κB mRNA(0.492±0.040、0.359±0.069)、survivin mRNA(0.516±0.042、0.348±0.047)表达水平均低于K562/A02阴性组,DR5mRNA表达水平(0.470±0.034、0.519±0.048)均高于K562/A02阴性组(P0.05);K562+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562+125μmol/L雷公藤红素组DR5蛋白阳性表达率[(5.438±0.517)%、(6.250±0.897)%]高于K562阴性组[(0.093±0.015)%](P0.05),K562/A02+62.5μmol/L雷公藤红素组、K562/A02+125μmol/L雷公藤红素组DR5蛋白阳性表达率[(19.900±0.526)%、(20.703±1.045)%]高于K562/A02阴性组[(6.980±0.925)%](P0.05)。结论雷公藤红素提高K562/A02耐药细胞株化疗敏感性的作用可能与下调NF-κB、survivin表达,上调DR5表达有关。     

异丙酚和尼莫地平在婴幼儿体外循环心脏手术中脑保护作用

目的探讨异丙酚和尼莫地平预处理在婴幼儿体外循环心脏手术中脑保护作用。方法 90例先天性心脏病行体外循环心脏手术婴幼儿,分为异丙酚组30例、尼莫地平组30例和手术对照组30例,30例体检健康婴幼儿为健康对照组。异丙酚组患儿麻醉诱导时给予质量分数1%异丙酚6mg/(kg·h)持续泵入至手术结束;尼莫地平组患儿麻醉诱导前给予质量分数0.2%尼莫地平7.5μg/(kg·h)持续泵注至气管导管拔出;手术对照组患儿麻醉诱导前给予等容生理盐水持续泵注至气管导管拔出。异丙酚组、尼莫地平组、手术对照组于手术前(T_0)、体外循环开始30min(T_1)、停体外循环即刻(T_2)、停体外循环6h(T_3)、停体外循环12h(T_4)、停体外循环24h(T_5)、停体外循环48h(T_6)采血,健康对照组于体检时采血,各组检测不同时间点血红蛋白和红细胞压积,采用ELISA法检测各时间点血清星形胶质细胞S-100β蛋白(astroglial cell S-100βprotein,S-100β)、神经原特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)水平,并进行比较。结果异丙酚组、尼莫地平组和手术对照组患儿T_1时血红蛋白[(7.65±0.87)、(7.72±0.82)、(7.14±0.78)g/L]和红细胞压积[(20.02±1.93)%、(19.89±1.87)%、(18.32±1.69)%]明显低于健康对照组[(12.41±2.01)g/L、(32.82±2.63)%]和各组T_0时(P0.05);异丙酚组和尼莫地平组患儿T_2时血清S-100β[(0.62±0.11)、(0.59±0.12)μg/L)和NSE蛋白[(5.79±1.14)、(5.82±1.23)μg/L]水平明显高于健康对照组[(0.43±0.07)、(4.58±0.32)μg/L]和各组T_0时(P0.05),手术对照组T_1~T_4时血清S-100β和NSE蛋白水平明显高于异丙酚组和尼莫地平组T_0~T_4时及本组T_0时(P0.05);异丙酚组各时间点各指标与尼莫地平组比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论异丙酚和尼莫地平在婴幼儿体外循环心脏手术中均具有脑保护,二者脑保护效果相当。     

重复异丙酚麻醉通过mTOR通路诱导新生大鼠海马细胞凋亡及自噬的研究

目的 研究重复异丙酚麻醉对新生大鼠海马细胞凋亡及自噬的影响及分子机制。方法 选择7日龄的雄性SD大鼠,以随机数字表法随机分为对照组(0. 9%氯化钠溶液7. 5 m L/kg腹腔注射)、异丙酚组(异丙酚75 mg/kg腹腔注射)、异丙酚+雷帕霉素组(异丙酚75 mg/kg及雷帕霉素3. 0 mg/kg腹腔注射),均每天1次、连续给药7 d。分离海马组织,检测细胞凋亡率及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)通路分子、凋亡基因、自噬基因的表达水平。结果 对照组、异丙酚组、异丙酚+雷帕霉素组海马组织中的细胞凋亡率分别为(3. 27±0. 93)%、(14. 27±3. 12)%、(6. 58±1. 21)%,磷酸化-m TOR/总-m TOR水平分别为0. 42±0. 09、0. 89±0. 15、0. 61±0. 12,磷酸化-S6K/总-S6K水平分别为0. 34±0. 07、0. 83±0. 15、0. 49±0. 09,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的mRNA表达量分别为0. 73±0. 14、1. 94±0. 31、1. 05±0. 20,Beclin-1的mRNA表达量分别为0. 91±0. 12、0. 47±0. 09、1. 83±0. 15。异丙酚组海马组织中的细胞凋亡率、磷酸化-m TOR/总-m TOR、磷酸化-S6K/总-S6K、Caspase-3的mRNA表达量分均明显高于对照组,Beclin-1的mRNA表达量均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05);异丙酚+雷帕霉素组海马组织中的细胞凋亡率、磷酸化-m TOR/总-m TOR、磷酸化-S6K/总-S6K、Caspase-3的mRNA表达量均明显低于对照组,Beclin-1的mRNA表达量均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论 重复异丙酚麻醉能够通过增强m TOR通路使新生大鼠海马细胞的凋亡加剧、自噬受阻。     

脐血间充质干细胞分化为神经样细胞的诱导因素的比较及优化

目的探讨诱导人脐血间充质干细胞(h UCB-MSCs)向神经样细胞分化的最优条件。方法采用密度梯度离心法获得MSCs;流式细胞术分析h UCB-MSCs CD34、CD29、CD44等免疫表型;用5种不同诱导因子进行诱导:(1)表皮生长因子(EGF)+碱性成纤维细胞生长因子(b FGF);(2)维甲酸(RA)+EGF+b FGF;(3)RA+脑源性神经营养因子(BDNF)+b FGF;(4)丹参素+EGF+b FGF;(5)β-巯基乙醇(β-ME)+二甲基亚砜(DMSO)+丁羟基茴香醚(BHA);并用免疫荧光法检测诱导前后h UCB-MSCs神经元核抗原(Neu N)、β-微管蛋白-Ⅲ(β-Tubulin-Ⅲ)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达水平。结果h UCB-MSCs中CD29[(96.2±3.2)%]、CD44[(97.1±2.4)%]呈强阳性,CD34呈弱阳性[(4.1±2.1)%]。h UCB-MSCs经5种方法诱导后均表现出类似神经元样细胞的形态改变。免疫荧光化学法结果显示,诱导后的细胞高表达Neu N和β-Tubulin-Ⅲ,低表达GFAP。EGF+b FGF诱导组Neu N、β-Tubulin-Ⅲ阳性细胞[(42.7±3.1)%,(55.4±2.2)%]在5个诱导组中表达最低(P0.05);丹参素+EGF+b FGF诱导组(78.9±4.4%,79.6±3.3%)表达水平最高(P0.05)。结论 h UCB-MSCs经不同诱导条件均能够向神经元和神经胶质细胞分化,丹参素+EGF+b FGF诱导法诱导效果最好。     

CFTR激动剂forskolin对脑缺血再灌注诱导的神经元凋亡的影响

目的探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, CFTR)激动剂forskolin(FSK)对脑缺血再灌注(ischemia reperfusion, IR)诱导的神经元凋亡的影响。方法将48只小鼠随机分为对照组(假手术)、FSK组(假手术+腹腔注射FSK)、IR组(建立IR模型)、FSK+IR组(建立IR模型+腹腔注射FSK),每组12只。采用HE染色观察小鼠海马和皮质组织细胞形态学变化,采用TUNEL染色观察小鼠海马组织神经元凋亡情况,采用比色法测定小鼠神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性。结果对照组和FSK组小鼠海马及皮质神经元染色均匀,胞质透明,细胞核大而圆,核仁清晰;IR组小鼠海马及皮质神经元结构破坏,细胞核浓染、固缩,呈神经元凋亡改变;FSK+IR组海马和皮质神经元细胞核浓染、固缩较IR组轻。生物素化-dUTP TUNEL染色中细胞核中出现棕黄色颗粒的神经元为凋亡神经元,荧光四甲基罗丹明-dUTP TUNEL染色细胞核中出现粉红色荧光的神经元为凋亡神经元;IR组和FSK+IR组小鼠海马神经元凋亡数量[(57.64±12.68)、(26.49±6.37)个/视野]高于对照组[(5.61±1.14)个/视野]和FSK组[(5.72±1.24)个/视野](P0.05)。IR组和FSK+IR组小鼠海马神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性(2.86±0.55、1.97±0.62、2.38±0.64,1.84±0.37、1.32±0.41、1.41±0.53)高于对照组(1.14±0.17、0.84±0.15、0.95±0.21)和FSK组(1.23±0.22、0.81±0.13、0.97±0.20)(P0.05),FSK+IR组小鼠海马神经元凋亡数量和caspase-3、caspase-8、caspase-9活性低于IR组(P0.05),对照组小鼠海马神经元凋亡数量及caspase-3、caspase-8、caspase-9活性与FSK组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论激活CFTR氯离子通道可降低IR小鼠脑组织神经元细胞凋亡,对IR小鼠脑组织神经元细胞具有保护作用。     

右美托咪定对七氟醚麻醉下老年大鼠海马神经元自噬的影响

目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine, DEX)对七氟醚麻醉下老年大鼠海马神经元自噬的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组、七氟醚组、DEX预处理组,每组20只,对照组大鼠吸入体积分数60%O_2 6 h,七氟醚组大鼠吸入体积分数3.4%～3.6%七氟醚6 h,DEX预处理组大鼠在吸入七氟醚前1 h腹腔注射15μg/kg DEX。分别于麻醉前(T_1)、麻醉后12 h(T_2)、24 h(T_3)、48 h(T_4)每组各处死大鼠5只并取出其海马,HE染色进行组织病理学观察,采用荧光双标法检测LC-3与NeuN、mTOR共定位表达。采用免疫组织化学法检测海马组织自噬蛋白Beclin-1相对表达量,采用Western blot法检测海马组织自噬蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及p-Akt、p-mTOR通路蛋白相对表达量。于麻醉后48 h处死大鼠前进行神经功能评分,记录各组Morris水迷宫实验结果。结果七氟醚组海马组织神经细胞胞质染色变浅、细胞核染色增深,DEX预处理组神经细胞形态改善和胞核染色较七氟醚组明显减轻;七氟醚组、DEX预处理组大鼠神经运动功能评分[(7.69±2.79)、(13.38±2.36)分]低于对照组[(22.15±1.47)分](P0.05),七氟醚组低于DEX预处理组(P0.05);七氟醚组、DEX预处理组、对照组大鼠逃避潜伏期依次缩短(P0.05),平台象限停留时间、穿越平台象限次数依次增加(P0.05);T_1～T_4时,对照组大鼠海马组织LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1及p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P0.05);T_2～T_4时,七氟醚组、DEX预处理组海马组织LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及Beclin-1蛋白相对表达量较T_1时增高(P0.05),p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量较T_1时降低(P0.05),DEX预处理组LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin蛋白相对表达量低于七氟醚组(P0.05),p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量高于七氟醚组(P0.05)。结论右美托咪定可明显改善七氟醚麻醉下老年大鼠的神经运动和认知功能,可能与激活PI3K/Akt/mTOR通路、抑制海马神经元自噬,从而减轻脑损伤有关。     

老年患者不同麻醉方式下腹部良性肿瘤切除术后肺部感染情况分析

目的探讨不同麻醉方式下行腹部良性肿瘤切除术老年患者术后肺部感染情况。方法择期行腹部良性肿瘤切除术老年患者45例,其中20例采用全凭静脉麻醉(全凭静脉麻醉组),25例采用硬脊膜外阻滞复合全身麻醉(硬脊膜外麻醉组),分别于麻醉前、术后6、24、72h检测2组白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8、CD4~+/CD8~+水平,比较2组术后14d内肺部感染发生率。结果术后14d内,全凭静脉麻醉组肺部感染率(20.0%)高于硬脊膜外麻醉组(4.0%)(P0.05);术后6、24h,全凭静脉麻醉组IL-6[(34.23±5.11)、(33.12±5.12)μg/L]、IL-8[(56.72±9.68)、(50.11±7.83)μg/L]高于麻醉前[(29.71±4.52)、(33.87±6.72)μg/L],CD4~+/CD8~+(1.58±0.22、1.51±0.18)低于麻醉前(1.63±0.23)(P0.05);硬脊膜外麻醉组术后6hIL-6[(31.11±4.49)μg/L]、IL-8[(47.23±8.23)μg/L]高于麻醉前[(29.72±4.56)、(33.91±6.74)μg/L](P0.05);全凭静脉麻醉组术后6、24h的IL-6、IL-8水平高于硬脊膜外麻醉组,CD4~+/CD8~+水平低于硬脊膜外麻醉组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与全凭静脉麻醉相比,老年患者腹部良性肿瘤切除手术采用硬脊膜外阻滞复合全身麻醉可降低术后肺部感染发生率,对患者免疫功能影响较小。