结核分枝杆菌γ-干扰素酶联免疫斑点试验在菌阴肺结核中的诊断价值

目的通过检测结核分枝杆菌γ-干扰素酶联免疫斑点试验的结果,探讨其在菌阴肺结核诊断及鉴别诊断中的意义。方法将研究对象分为菌阳肺结核、菌阴肺结核、肺部肿瘤、肺炎4组。所有患者分别进行结核分枝杆菌γ-干扰素酶联免疫斑点试验、结核抗体三项测定及结核菌素试验。结果菌阳肺结核、菌阴肺结核、肺部肿瘤、肺炎4组患者PPD试验阳性率为84.8%、83.3%、28.6%、33.3%;结核抗体试验的阳性率为84.8%、66.6%、28.6%、33.3%;ELISPOT试验阳性率为93.9%、93.3%、7.1%、3.3%。结论结核杆菌感染T细胞酶联免疫斑点试验在肺结核诊断,可能优于结核菌素试验及结核抗体测定,对于菌阴肺结核的诊断与鉴别诊断具有临床意义。     

结核感染T细胞酶联免疫斑点试验与结核抗体检测在骨关节结核辅助诊断中的价值

目的 探讨与评价结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与结核抗体检测在骨关节结核中的辅助诊断价值.方法 将2011年7月至2013年10月在北京胸科医院骨科住院并手术诊治的骨关节疾病患者156例,经细菌学和组织病理学确诊后分为骨关节结核患者92例和非结核骨关节疾病患者64例,对所有患者应用T-SPOT.TB试剂盒检测结核分枝杆菌特异性抗原早期分泌抗原靶-6(ESAT-6)和培养滤液蛋白-10 (CFP-10)刺激后外周血中分泌γ干扰素的特异性T细胞的数量,同时对两组患者行血清结核分枝杆菌特异性抗体检测.采用SPSS 17.0进行统计学分析,x2检验比较两种检测方法诊断骨关节结核的敏感度和特异度,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 T-SPOT.TB检测在诊断骨关节结核中的敏感度为93.5％ (86/92),特异度为78.1％(50/60);结核抗体检测的敏感度、特异度分别为64.1％(59/92)、81.3％(52/64).T-SPOT.TB检测的敏感度高于结核抗体检测(x2=23.72,P＜0.01).结论 T-SPOT.TB检测方法在辅助骨关节结核快速诊断方面具有重要的应用价值.     

酶联免疫斑点法诊断结核性脑膜炎临床研究

目的探讨酶联免疫斑点法（enzyme linked immune spot assay,ELISpot）对结核性脑膜炎的诊断价值。方法选取我院根据临床表现疑为结核性脑膜炎的患者26例,以ELISpot检测分泌IFN—γ的结核分枝杆菌ESAT-6及CFP-10抗原特异性T细胞水平。结果在所有入组患者中,根据诊断标准,明确诊断为结核性脑膜炎者15例,诊断为非结核性中枢神经系统感染者11例,ELISpot检测的敏感度为80．00％[95％可信区间（confidence interval,CI）51．9％-95．7％1,特异度为100％（95％CI71．5％-100．0％）;阳性预测值为100％（95％CI73．5％～100．0％）,阴性预测值为78．6％（95％CI49．2％～95．3％）。结论EHSpot对结核性脑膜炎有较高的诊断价值。     

酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值

目的比较酶联免疫斑点检测（ELISPOT）和结核菌素试验（TST）,探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值。方法选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6kD早期分泌靶向抗原／10kD培养滤过蛋白融合蛋白（ESAT-6／CFP－10）作为抗原对受试者外周血单个核细胞进行ELISPOT（即ESAT．6／CFP－10-ELISPOT）,检测斑点形成细胞（SFCs）的数量f同时对受试者行TST。结果结核组ESAT,6／CFP-10-ELISPOT形成的SFCs数显著高于对照组（P=0．000）。结核组中ESAT-6／CFP-10-ELISPOT的敏感度91．1％（111／123）、特异度80．4％（82／102）、阳性似然比4．60、阴性似然比0．12、阳性预测值0．85、阴性预测值0．87,TST的敏感度65．6％（59／90）、特异度45．1％（46／102）、阳性似然比1．31、阴性似然比O．76、阳性预测值0．51、阴性预测值0．60。ESAT．6／CFP-10．ELISPOT的敏感度和特异度显著高于TST（均尸=0．000）。菌阳肺结核组和菌阴肺结核组间ESAT-6／CFP-10-ELISPOT形成SFCs数量差异无显著性（P=0．166）,两组ESAT-6／CFP-10-ELISPOT的敏感度分别为91．8％（67／73）和88．0％（44／50）,二者比较差异无显著性（P=0．448）。结论ESAT-6／CFP-10-ELISPOT有可能作为辅助诊断初治肺结核的较为准确方法,并为菌阴肺结核提供一定的诊断依据,但诊断的特异度可能受结核潜伏感染影响。TST对初治肺结核的诊断价值较小。     

结核γ-干扰素酶联免疫斑点检测在结核性心包积液诊断中的应用

目的 探讨结核菌特异性γ-干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）酶联免疫斑点（enzyme-linked immunosorbent spot,ELISPOT）检测对结核性心包积液的诊断价值.方法 采用结核菌特异性IFN-γ ELISPOT技术同时检测20例结核性心包积液患者（TP组）和14例非结核性心包积液患者（Non-TP组）外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）及心包积液单核细胞（pleural effusion mononuclear cells,PEMC）中结核菌特异性IFN-γ水平.结果 TP组PBMC和PEMC结核菌特异性IFN-γ水平均显著高于Non-TP组,差异有统计学意义（P＜0.01,P＜0.01）.TP组心包积液中结核菌特异性IFN-y水平显著高于外周血IFN-γ水平,差异有统计学意义（P＜0.01,P＜0.01）.PBMC ELISPOT检测结核性心包积液的敏感性和特异性分别为80.0％和85.7％;而PEMC ELISPOT敏感性和特异性为90.0％和85.7％.结论 结核菌特异性IFN-γELISPOT技术对结核性心包积液诊断和鉴别诊断具有很好的辅助价值.     

酶联免疫斑点技术及其在结核诊断中的研究进展

结核病已经成为一个严重的公共卫生问题，我国已有1／3人口感染了结核菌，受感染人数超过了4亿，据研究受感染人口中有10％的人发生结核病。因此，提高早期诊断结核病和结核潜伏感染（latent tuberculosis infection，LTBI）的水平对于结核病的控制具有极为重要的价值。结核病的诊断主要依靠影像学检查、结核菌素试验（tuberculin skin test，TST）及痰结核菌培养等方法。     

酶免疫斑点法检测心肌抗体结合吸附试验对风湿性心脏病的诊断意义

心肌抗体(ｈｅａｒｔｒｅａｃｔｉｖｅａｎｔｉｂｏｄｙ,ＨＲＡ)的检测对风湿性心脏病具有一定的诊断意义。但是,由于其他心脏疾病(如原发性心肌病、病毒性心肌炎等)患者血清中也可检测到ＨＲＡ,因此,ＨＲＡ诊断风心病的特异性意义尚有争议。本文作者应用酶免疫斑点法检测117例各种心脏病患者血清的ＨＲＡ,并将测得的阳性血清用Ａ组链球菌膜抗原进行吸附试验,以进一步探讨其特异性价值。1　资料与方法11　病例选择111　心脏病组:①风心病35例,男21例,女14例,平均年龄(38±8)岁,均符合1992年修订的Ｊｏｎｅ′ｓ标准。②原发性心肌病19例,男11…     

酶联免疫斑点试验检测技术（Elispot）在诊断结核性脑膜炎中的应用

目的评价酶联免疫斑点技术（Elispot）检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素（IFN-r）水平在结核性脑膜脑炎中的应用价值。方法回顾性分析本院73例结核性脑膜脑炎患者及16例非结核性脑膜脑炎患者外周血Elispot结果,同时分析脑脊液腺苷脱氨酶（ADA）水平、TB-DNA（PCR）结果,比较三种技术在诊断结核性脑膜炎的作用。结果 Elispot在诊断结核性脑膜脑炎中的敏感性及准确性高于脑脊液ADA、TB-DNA（PCR）检测,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而特异性比较三者无明显差异（P〉0.05）。结论 Elispot技术在结核性脑膜脑炎中具有良好的辅助诊断价值,其诊断价值优于脑脊液ADA、TB-DNA（PCR）检测。     

酶联免疫斑点法检测肺结核患者特异性结核抗原多肽T细胞的应答

目的 评价我国酶联免疫斑点法(ELISPOT)用于诊断肺结核患者的应用价值.方法 结核特异性ELISPOT法检测76例诊断明确的肺结核患者外周血单核细胞.同时选择30例无结核接触史、胸部X线片无异常且PPI)皮试阴性的成年人作为对照.数据采用卡方检验和非参数Mann-Whitney检验.结果 76例患者总体阳性率为71.0%,健康对照组阳性率为6.7%.按照患者抗结核疗程分为治疗1个月内、治疗6个月内、治疗6个月以卜3组,阳性率分别为87.5%、74.1%和52.0%(X2=35.63,P=0.000).该技术在初治结核患者中的灵敏度为87.5%,特异度为93.3%,阳性预测值为91.3%,阴性预测值为90.3%.结论 结核特异性ELISPOT技术在我国初治(抗结核化疗疗程1个月内)的结核病患者中具有较高诊断价值.     

不同抗原的酶联免疫斑点检测技术对结核病的辅助诊断价值比较

目的比较不同MTB抗原的酶联免疫斑点检测技术（ELISPOT）,探索其对活动性结核病的辅助诊断价值。方法对结核组132例和对照组90例观察对象应用PPD、克隆表达的早期分泌抗原靶6000（ESAT-6）和ESAT-6／培养滤液蛋白10000（CFP-10）融合蛋白（简称E／C）进行酶联免疫斑点检测（ELISPOT）,检测外周血单个核细胞（PBMC）中经3种抗原刺激后斑点形成细胞（SFC）的数量;对照组同时进行PPD试验。计量资料用中位数（四分位间距）表示,计量资料的比较采用Mann-Whitney u检验,计数资料的比较采用X^2检验。结果结核组PPD—ELISPOT、E／C—ELISPOT、ESAT-6-ELISPOT形成的SFC数分别为255（93～526）、148（40～354）和28（10～116）,均明显高于对照组的10（5～41）、10（0～20）和5（0～15）,差异均有统计学意义（U值为1390．5～2510．5,均（P〈0．01）;E／C—ELISPOT和PPD-ELISPOT的敏感度分别为90．3％和84．8％,均明显高于ESAT-6-ELISPOT（62．1％）,差异均有统计学意义（X^2值分别为17．496和28．541,均P〈0．01）;E／C—ELISPOT和ESAT-6-ELISPOT的特异度分别为8414％和88．9％,均明显高于PPD—ELISPOT（68．9％）,差异均有统计学意义（膏值分别为6087和10．808,P〈0．05和P〈0．01）。结论E／C-ELISPOT有可能作为辅助诊断结核病的方法,但其特异度易受MTB潜伏感染的影响。     

不同抗原的酶联免疫斑点检测技术对结核病的辅助诊断价值比较

目的 比较不同MTB抗原的酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT),探索其对活动性结核病的辅助诊断价值.方法 对结核组132例和对照组90例观察对象应用PPD、克隆表达的早期分泌抗原靶6000(ESAT-6)和ESAT-6/培养滤液蛋白10 000(CFP-10)融合蛋白(简称E/C)进行酶联免疫斑点检测(ELISPOT),检测外周血单个核细胞(PBMC)中经3种抗原刺激后斑点形成细胞(SFC)的数量;对照组同时进行PPD试验.计量资料用中位数(四分位间距)表示,计量资料的比较采用Mann-Whitney μ检验,计数资料的比较采用χ~2检验.结果 结核组PPD-ELISPOT、E/C-ELISPOT、ESAT-6-ELISPOT形成的SFC数分别为255(93～526)、148(40～354)和28(10～116),均明显高于对照组的10(5～41)、10(0～20)和5(0～15),差异均有统计学意义(μ值为1390.5～2510.5,均P＜0.01);E/C-ELISPOT和PPD-ELISPOT的敏感度分别为90.3%和84.8%,均明显高于ESAT-6-ELISPOT(62.1%),差异均有统计学意义(χ~2值分别为17.496和28.541,均P＜0.01);E/C-ELISPOT和ESAT-6-ELISPOT的特异度分别为84.4%和88.9%,均明显高于PPD-ELISPOT(68.9%),差异均有统计学意义(χ~2值分别为6.087和10.808,P＜0.05和P＜0.01).结论 E/C-ELISPOT有可能作为辅助诊断结核病的方法,但其特异度易受MTB潜伏感染的影响.     

T细胞酶联免疫斑点法对风湿性疾病患者潜伏性结核感染诊断价值的初步研究

目的 探讨T细胞酶联免疫斑点法(TSPOT)对风湿性疾病患者潜伏结核感染的诊断价值.方法 应用TSPOT-TB试剂盒对126例明确诊断的风湿性疾病患者血液标本进行结核分枝杆菌(Mtb)特异性T细胞应答的检测,同时对所有病例做结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)试验进行联合分析.结果 TSPOT检测阳性率23.8%,PPD试验阳性率为34.9%,两者一致率为71.4%.其中PPD(-)者中11例TSPOT(+),占13.4%;PPD(+)中有25例TSPOT(-),占56.8%.有卡介苗接种史的患者PPD试验的阳性率显著高于无卡介苗接种史的患者(4l%与19%,P＜0.05),但有无卡介苗接种史的两组患者在TSPOT检测的阳性率上差异无统计学意义(22%与27%,P＞0.05).结论 卡介苗接种影响风湿性疾病患者PPD试验的结果,但对TSPOT检测结果未造成影响.TSPOT技术检测显示本研究风湿性疾病患者中的结核潜伏感染率为23.8%.     

脑脊液结核抗原与抗结核抗体的临床诊断价值

EL ISA测脑脊液 TB- Ag和 TB- Ab在结脑的免疫学诊断中具有重要意义 ,但儿童结脑未见报道。本文拟就 2 9例患儿脑脊液的 TB- Ag和 TB- Ab的平行观察 ,以六项临床评价指标对二法在儿童结脑的临床诊断价值进行比较和探讨 ,报道如下 :1　材料和方法1.1　材料1实验对象 :2 9例脑膜炎患儿。其中男 19例 ,女 10例 ;年龄最大 13岁、最小 6个月 ,平均 5 .2岁。 2实验标本 :脑脊液。由重庆医科大学附属儿童医院提供。其中结脑 13份 ,病脑 10份 ,其他脑膜炎 6份。1.2　方法及分组1EL ISA测结核抗原及抗结核抗体。[2、3 ] 2单向免疫扩散法测免…     

酶联免疫斑点试验在菌阴肺结核诊断中的价值

目的探讨酶联免疫斑点检测技术(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)(T-SPOT.TB)在菌阴肺结核诊断中的应用价值。方法应用T-SPOT.TB试剂盒对55例菌阴肺结核(A组)和36例其他肺部疾病(B组)患者的外周血中Mtb特异性T淋巴细胞进行检测,同时对两组患者进行PPD试验、血清结核抗体(Mtb-AB)检测。结果A组T-SPOT.TB的阳性率为89.1%(49/55),要明显高于B组的19.4%(7/36)(χ2=44.59,P<0.001)。在A组,T-SPOT.TB的阳性率要明显高于PPD试验[36.4%(20/55)]、Mtb-AB[52.7%(29/55)]及PPD试验+Mtb-AB的阳性率[23.6%(13/55)],(χ2=12.13,χ2=7.08,χ2=21.54,P值均<0.01)。T-SPOT.TB在B组中的阴性率为80.6%(29/36),较PPD试验[86.1%(31/36)]及Mtb-AB阴性(63.9%,23/36)和PPD+Mtb-AB检测方法的阴性率[88.9%(32/36)]经检验,差异无统计学意义(χ2=0.39,χ2=2.69,χ2=0.41,P值均>0.05)。结论T-SPOT.TB检测特异度和敏感度要优于PPD试验及Mtb-AB的检测,可用于菌阴肺结核的辅助诊断,具有一定的临床推广使用的价值。     

结核病治愈后抗结核抗体在体内持续时间的临床观察

目的　探讨结核病治愈后抗结核抗体在体内持续的时间。方法 ELISA法以PPD为包被抗原,每隔3个月检测治愈时血清抗结核抗体呈阳性的肺结核病人血清抗结核抗体1次,连续18个月。结果 每隔3个月抗结核抗体阳性人数逐渐下降,12个月时下降最明显,从9个月时的109人(63.0%)下降到21人(12.1%),与健康对照组间差异显著(P<0.05);15个月时阳性人数11人(6.4%),与健康对照组间差异不显著(P>0.05)。结论 肺结核病治愈后抗结核抗体呈阳性的病人其特异性抗体阳性持续时间一般为12～15个月,Ⅳ型结核治疗前病灶范围广,治愈后以增殖性病灶为主的患者持续的时间较长。     

酶联免疫斑点法在结核性脑膜炎诊断中的应用

近年来发展起来的酶联免疫斑点法（ELISPOT）作为一种新型的免疫酶技术为早期发现结核病（TB）提供了新的方向。ELISPOT法是全球首次利用探测结核感染者的特异性T细胞，而不是利用抗体来诊断TB的一种新方法，比皮肤试验更可靠，比培养方法更敏感。在TB患者中，尤以结核性脑膜炎诊断最为困难，如果用这种新型的ELISPOT法诊断可能会给防治结核性脑膜炎带来较大的进展，在欧美已经被批准用于临床，国内尚未见报道。我们首次尝试将该技术用于诊断结核性脑膜炎病例，现报道如下。     

酶联免疫斑点技术在结核病诊断中的应用现状

酶联免疫斑点技术（ELISPOT）由Czerkinsky等[1]于1983年根据酶联免疫吸附实验（ELISA）而建立的一种体外检测单细胞水平特异性抗体分泌细胞功能的免疫学新技术.起初用于检测B淋巴细胞分泌抗体的数量来推断B淋巴细胞的功能,后来用于检测T淋巴细胞分泌细胞因子的数量来推断T淋巴细胞功能.Lalvani等首先将ELISPOT用于结核病的诊断后,相关报道日益增多.现将ELISPOT在结核病诊断中的进展综述如下.     

结核杆菌特异性酶联免疫斑点技术在HIV感染人群中的应用

我国艾滋病病毒(HIV)感染人群中结核病的发病率高,造成了严重的疾病负担。提高潜伏结核和活动性结核的诊断准确性,对控制HIV病人中结核病的治疗和控制至关重要。该文总结了近年来出现、发展并完善的一种新的结核诊断技术,即结核杆菌特异性酶联免疫斑点技术,及其在HIV人群中的相关研究结果,并着重对该技术在潜伏结核和活动性结核的诊断、治疗效果监测以及结核相关性免疫重建炎症反应综合征中的应用进行了评价。