玻璃化冷冻对胚胎体内外发育潜能的影响

目的观察新鲜8-细胞胚胎和玻璃化冷冻复苏8-细胞胚胎在囊胚形成率、囊胚孵出率及胚胎种植率、小鼠出生率的差异,探讨玻璃化冷冻对胚胎体内外发育潜能的影响。方法性成熟期雌鼠（〉6～7周龄）106只,取2-细胞胚胎,培养至6～8细胞胚胎时分为新鲜胚胎进行移植（新鲜移植组）和玻璃化冷冻（玻璃化冷冻组）,2周后复苏移植。2组各取50枚移植前胚胎,体外培养48～72h,观察2组胚胎体外培养发育至囊胚及囊胚孵出情况。新鲜胚胎及复苏后的8-细胞胚胎经1～3h培养,选择外形正常胚胎移植于假孕63～67h的受体母鼠的两侧子宫中,妊娠17～20d自然分娩后记录产仔数,比较2组妊娠率、小鼠出生率。结果新鲜移植组囊胚形成率、孵出率、妊娠率、出生率分别为92%,84%,48.93%,13.16%,玻璃化冷冻组囊胚形成率、孵出率、妊娠率、出生率分别为90%,86%,47.06%,12.62%,2组差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论玻璃化冷冻复苏对小鼠胚胎体内外发育潜能无明显影响。     

不同玻璃化冷冻保护剂对早卵裂期小鼠胚胎生存发育的影响

目的评价四种玻璃化冷冻保护剂冷冻早卵裂期胚胎效果,以及复苏后胚胎的存活率及体外继续发育能力。方法以小鼠为实验动物,采用玻璃化冷冻方法,比较观察EFS30,EFS40,EDFS30和EDFS40四种玻璃化冷冻溶液对小鼠4-细胞胚胎冷冻解冻后胚胎的存活率和囊胚形成率的影响。结果 EDFS30溶液冷冻小鼠4-细胞胚胎,解冻后胚胎存活率为82.9%,囊胚形成率为48.3%,而其它三种玻璃化冷冻溶液的胚胎存活率和囊胚形成率分别是:EFS30为65.8%和34.3%;EFS40为64.7%和31.2%;EDFS40为68.3%和37.8%。EDFS30的冷冻效果显著高于其它三种玻璃化冷冻溶液(P<0.05)。结论 EDFS30是一种冷冻早卵裂期小鼠胚胎有效的玻璃化冷冻保护剂。     

冷冻载体对扩张期囊胚解冻结局的影响

背景：囊胚的冷冻复苏对人类辅助生殖技术的发展具有重要意义,合适的冷冻载体可以降低冷冻毒性提高冷冻效率,是改善囊胚冷冻复苏结局的研究热点之一。目的：观察不同冷冻载体对昆明小鼠扩张期囊胚玻璃化冷冻解冻结局的影响。方法：以新鲜昆明小鼠扩张期囊胚作为对照组,随机选取同期小鼠胚进行玻璃化冷冻解冻,冷冻前使用激光仪行人工皱缩,使用玻璃化法进行冷冻和解冻,按实验载体不同分为冷冻环组、闭合拉细麦管组和自制麦管叶片组;冷冻环组和自制麦管叶片组投入液氮前与冷冻保护剂接触时间〈40s,40-60s和60-90s;解冻后囊胚使用胚胎囊期培养基添加10%血清替代品进行微滴培养。比较解冻后组间囊胚丢失率、囊胚复苏率和培养24h囊胚孵出率。结果与结论：相比闭合拉细麦管组,冷冻环组和自制麦管叶片组的囊胚丢失率降低,胚胎复苏率增高（P〈0.05）,各冷冻组复苏囊胚培养24h孵出率均低于对照组（P〈0.05）。使用冷冻环载体和自制麦管叶片载体冷冻解冻囊胚,投入液氮前与冷冻保护剂接触时间90s内不同时间胚胎复苏率和孵出率的比较差异无显著性意义。结果说明冷冻环载体和自制麦管叶片载体用于昆明小鼠扩张期囊胚玻璃化解冻复苏的效果较好。     

冷冻载体对扩张期囊胚解冻结局的影响

背景:囊胚的冷冻复苏对人类辅助生殖技术的发展具有重要意义,合适的冷冻载体可以降低冷冻毒性提高冷冻效率,是改善囊胚冷冻复苏结局的研究热点之一。目的:观察不同冷冻载体对昆明小鼠扩张期囊胚玻璃化冷冻解冻结局的影响。方法:以新鲜昆明小鼠扩张期囊胚作为对照组,随机选取同期小鼠胚进行玻璃化冷冻解冻,冷冻前使用激光仪行人工皱缩,使用玻璃化法进行冷冻和解冻,按实验载体不同分为冷冻环组、闭合拉细麦管组和自制麦管叶片组;冷冻环组和自制麦管叶片组投入液氮前与冷冻保护剂接触时间<40s,40-60s和60-90s;解冻后囊胚使用胚胎囊期培养基添加10%血清替代品进行微滴培养。比较解冻后组间囊胚丢失率、囊胚复苏率和培养24h囊胚孵出率。结果与结论:相比闭合拉细麦管组,冷冻环组和自制麦管叶片组的囊胚丢失率降低,胚胎复苏率增高(P<0.05),各冷冻组复苏囊胚培养24h孵出率均低于对照组(P<0.05)。使用冷冻环载体和自制麦管叶片载体冷冻解冻囊胚,投入液氮前与冷冻保护剂接触时间90s内不同时间胚胎复苏率和孵出率的比较差异无显著性意义。结果说明冷冻环载体和自制麦管叶片载体用于昆明小鼠扩张期囊胚玻璃化解冻复苏的效果较好。     

不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠胚胎发育的影响

目的 评价不同冷冻保护剂和不同冷冻方法对小鼠2-细胞胚胎发育的影响。方法 采用丙二醇（PROH）、乙烯乙二醇（EG）、二甲基亚砜（DMSO）和甘油（G）4种不同冷冻保护剂,慢速冷冻、Vit-Master玻璃化冷冻两种冷冻方式冷冻小鼠2-细胞胚胎,观察胚胎的成活率。结果 采用慢速冷冻方式冷冻小鼠2-细胞胚胎时,以PROH为冷冻保护剂的胚胎成活率、囊胚形成率、囊胚孵出率显著高于以DMSO、G为冷冻保护剂的结果（P〈0.05）,而以DMSO、G、EG为冷冻保护剂的结果比较差异无显著性意义（P〉0.05）;采用Vit-Master玻璃化冷冻方式冷冻小鼠2-细胞胚胎时,以EG为冷冻保护剂的胚胎成活率、囊胚形成率、囊胚孵出率显著高于以PROH、DMSO、G为冷冻保护剂的结果（P〈0.05）,而以PROH、DMSO、G为冷冻保护剂的结果比较差异无显著性意义（P〉0.05）。结论 PROH是慢速冷冻小鼠2-细胞胚胎理想的冷冻保护剂;EG是Vit-Master玻璃化冷冻小鼠2-细胞理想的冷冻保护剂,有可能替代慢速冷冻法。     

玻璃化冷冻对卵裂期胚胎发育潜能的影响

目的探讨玻璃化冷冻对卵裂期胚胎发育潜能的影响。方法对40例经徐州市妇幼保健院生殖中心实施玻璃化冷冻卵裂期胚胎（玻璃化冷冻组）和41例程序冷冻卵裂期胚胎（对照组）行复苏移植术作为对照,比较两组的复苏胚胎存活率、种植率、临床妊娠率。结果在玻璃化冷冻组的40例中,共复苏胚胎81个,存活胚胎77个,复苏率95.1%,共移植79个胚胎,种植率为30.4%,临床妊娠率为50%;对照组共41例,解冻135个胚胎,复苏后存活87个胚胎,存活率64.4%,种植率为17.9%,临床妊娠率为26.8%。玻璃化冷冻组的胚胎存活率、种植率、妊娠率均显著高于对照组（P〈0.05）。结论玻璃化冷冻和程序冷冻均适于人卵裂期胚胎的冷冻,但玻璃化冷冻法更好的保存了胚胎的发育潜能,能够获得更好的冷冻效率。     

蔗糖浓度对分裂期冷冻胚胎移植结局的影响

目的:采用不同的解冻流程解冻同一玻璃化法冷冻的分裂期胚胎,比较两种解冻方法对FET治疗结局的影响.方法:玻璃化冷冻的107个周期,解冻液以蔗糖为解冻溶质,其中51例采用商品化试剂解冻,蔗糖浓度为1.0、0.5、0 mol/L(组1);56例采用自配的溶液,5个蔗糖浓度梯度,浓度为0.8、0.6、0.33、0.2、0 mol/L(组2).比较胚胎存活率,全胚胎存活率,解冻胚胎发育率,妊娠率及植入率等情况.结果:在胚胎解冻存活率,全胚胎存活率及妊娠率方面,组2显著高于组1(87.0vs.98.6％,P=0.000; 71.0 vs.82.0％,P=0.043; 27.5 vs.46.4％,P=0.048),但是在植入率方面没有差异(17.7 vs.25.6％,P=0.138).结论:玻璃化冷冻分裂期胚胎,适当增加解冻溶质浓度梯度,有助于胚胎解冻存活率,妊娠等临床治疗结局.     

不同成熟阶段、不同来源的人类卵子冷冻后发育潜能的比较

目的:探索卵子冷冻的成熟阶段及来源。方法:将153个不同来源的生发卵泡期(GV期)人类卵子分为3组,未冷冻组,体外培养至成熟阶段(MⅡ期),行单精子胞浆内注射(intracytoplasmicsperminjection,ICSI);MⅡ期冷冻组,体外成熟至MⅡ期,然后将MⅡ期卵子进行冷冻,解冻后将存活的卵子行ICSI;GV期冷冻组,将GV期卵子进行冷冻,解冻后体外培养至MⅡ期,然后再行ICSI。观察解冻后卵子存活情况、体外成熟情况、受精情况及胚胎发育情况。结果:(1)冷冻对卵子具有一定程度的损伤,但GV期冷冻组的存活率、受精率显著高于MⅡ期冷冻组。(2)促排周期来源的卵子的体外成熟率高于孕期及自然周期来源的卵子,孕期来源的未成熟卵子冷冻后具有一定的发育潜能。结论:在GV期进行冷冻可降低冷冻对卵子的伤害;孕期来源的未成熟卵子冷冻后具有一定的发育潜能。     

卵子玻璃化冷冻在体外受精-胚胎移植取精失败周期中的应用

目的探讨卵子玻璃化冷冻在体外受精一胚胎移植（IVF—ET）取精失败周期中的应用。方法2010年8月至2012年8月,在解放军第174医院生殖医学中心进行IVF—ET治疗的5例患者,取卵日因男方因素无法进行受精者,在知情同意后对部分卵子进行玻璃化冷冻保存。结果5例患者均解冻了取卵日实施全部冷冻保存的卵子。共复苏卵子35枚,存活24枚,复苏率68．57％;有24枚MⅡ卵子行显微授精（ICSI）,受精22枚,受精率91．67％;形成19枚胚胎,卵裂率86．36％,获可用有效胚胎16枚。5个移植周期移植胚胎13枚,临床妊娠2例,分娩2个健康婴儿,胚胎种植率15．38％,活产率40％。剩余3枚胚胎冷冻保存。结论卵子的玻璃化冷冻保存可以获得一定的临床妊娠率,对IVF—ET治疗中取精失败患者可作为临床治疗的一个供选择的方法。     

种属和发育期及不同实验条件对卵裂期胚胎冷冻复苏结局的影响

背景:人卵裂期胚胎冷冻复苏的研究中,不同的实验条件及实验动物模型是否与人类胚胎具有相同的敏感性从而反映出实验方案的优劣值得探讨.目的:观察胚胎种属和发育期及不同冷冻条件对卵裂期胚胎冷冻复苏结局的影响.方法:将人卵裂期胚胎作为对照组,将KM小鼠胚分为2细胞,4细胞,8细胞组.各组胚胎随机采用以下实验方案:①冷冻操作环境温度18～20 ℃、24～26 ℃和37 ℃.②慢速程序化方案、自制straw叶片玻璃化方案和CPS玻璃化方案.③与玻璃化液接触时间< 40 s、40～60 s和60～90 s.各组胚胎比较不同实验条件下胚胎复苏率和培养24 h发育率.结果与结论:①对照组24～26 ℃冷冻操作环境温度复苏率高于37 ℃冷冻操作环境(P < 0.05).②对照组和4细胞鼠胚组采用自制straw叶片玻璃化方案复苏率高于慢速程序化方案(P < 0.05),培养24 h胚胎发育率差异无显著性意义(P > 0.05).③各组胚胎与冷冻保护剂接触不同时间胚胎复苏率差异无显著性意义(P > 0.05).表明卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏效果优于慢速程序化,24～26 ℃操作环境、减少冷冻保护剂剂量和缩短接触时间可改善玻璃化冷冻复苏结局;相同冷冻条件下,胚胎种属和发育阶段对冷冻复苏结局有影响,4细胞鼠胚更适合作为研究人类卵裂期胚胎冷冻复苏的实验模型.     

2种冻融方法对人类早期胚胎质量的影响

目的:探讨2种冷冻方法对人类早期胚胎冷冻复苏后胚胎质量的影响.方法:回顾性分析本院胚胎实验室胚胎冷冻复苏资料,依据胚胎冷冻方法不同分为玻璃化冷冻组(130枚)和程序化冷冻组(120枚),分析比较2组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、优质胚胎率、临床妊娠率等数据.结果:玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻组胚胎复苏率分别为100.0%与83.3%,复苏胚胎完整率为96.2%与63.5%.优质胚胎率为76.7%与50.0%,临床妊娠率为54.6%与33.3%,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:玻璃化冷冻技术可简化胚胎冷冻程序,冷冻复苏效果显著.可提高临床妊娠率.     

2种冷冻方法对人早期胚胎冷冻复苏效果比较

目的:比较栽杆玻璃化冷冻法与程序冷冻法对人早期胚胎冷冻复苏的效果.方法:将接受体外受精-胚胎移植患者剩余的Ⅰ～Ⅲ级胚胎进行程序冷冻或栽杆玻璃化冷冻,比较胚胎复苏后的复苏率、优胚率、临床妊娠率、种植率等指标.结果:载杆玻璃化冷冻复苏66个周期,253个胚胎、存活192个(75.89%),复苏后优胚173个(90.10%),移植66个周期,临床妊娠26个周期(39.39%).种植率19.25%,流产2个周期.程序冷冻复苏105个周期,589个胚胎、存活327个(55.52%),复苏后优胚268个(81.96%),移植105个周期,临床妊娠32个周期(30.47%),种植率15.18%,流产4个周期.载杆玻璃化法冷冻后的胚胎复苏率和优胚率明显高于程序冷冻法(P<0.01,P<0.05),临床妊娠率、种植率略高于程序冷冻法(P>0.05).结论:栽杆玻璃化冷冻法是一种有效的胚胎冷冻方法,其复苏率和复苏后优胚率均明显高于传统的程序冷冻法,可以提高胚胎的有效使用.     

联合使用1-磷酸鞘氨醇和溶血磷脂酸对小鼠卵母细胞体外成熟和受精后胚胎发育的影响

目的通过在成熟培养液中联合添加或单独添加1-磷酸鞘氨醇(S1P)和溶血磷脂酸(LPA)研究对小鼠卵母细胞体外成熟和受精后胚胎发育的影响,以期为优化人卵母细胞的体外成熟系统和提高体外胚胎发育率奠定实验基础。方法 (1)成熟培养液中单独添加50~2 000 nmol/L S1P或1~100μmol/L LPA,体外成熟后的卵母细胞体外受精,得到的胚胎观察并统计卵裂率、8-细胞率、囊胚率。(2)成熟培养液中联合添加不同浓度组合S1P和LPA,体外成熟后的卵母细胞体外受精,得到的胚胎观察并统计卵裂率、8-细胞率、囊胚率。(3)对各组体外成熟得到的卵母细胞进行免疫荧光法染色,以评估MⅡ期卵母细胞纺锤体的完整性。(4)对各组得到的数据应用卡方检验进行分析。结果添加100 nmol/L S1P组的成熟率(81.0%)和8-细胞率(81.9%)显著高于0 nmol/L和2 000 nmol/L组;添加30μmol/L LPA的成熟率(81.8%)和8-细胞率(81.5%)显著高于0μmol/L和100μmol/L组;500 nmol/L S1P+30μmol/L LPA组的成熟率(90.7%)显著高于100 nmol/L S1P组、30μmol/L LPA组合和不添加组;500 nmol/L S1P+30μmol/L LPA组的囊胚率(77.6%)显著高于100 nmol/L S1P组和不添加组。结论联合添加S1P和LPA可能要比单独添加更能促进小鼠卵母细胞成熟,虽然在正常纺锤体百分率方面没有显示出优势,但通过体外受精得到的胚胎得到了较高的囊胚发育率。     

激光人工皱缩对单囊胚解冻后移植结局的影响

目的探讨激光人工皱缩对单囊胚解冻后移植结局的影响。方法对2011年12月至2018年12月广东省江门市中心医院生殖医学诊疗中心接受经阴道超声引导下穿刺取卵术及助孕治疗,且行单囊胚移植的不孕症患者进行回顾性队列研究。将508例研究对象分为皱缩组(n=222,囊胚采用激光打孔皱缩后再玻璃化冷冻)和对照组(n=286,囊胚未行皱缩直接玻璃化冷冻),分析冷冻复苏后单个囊胚的发育情况及妊娠结局。结果两组优质囊胚率、临床妊娠率、生化妊娠率、种植率、流产率、异位妊娠率等指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在单囊胚玻璃化冷冻中,不论是否行激光人工皱缩均能够获得比较理想的妊娠结局;未行激光人工皱缩的玻璃化冷冻从经济性、安全性上优势更大,建议在单囊胚冻融移植中将其作为首选方案。     

利用冷冻胚胎建立人类胚胎干细胞系

背景：目前人胚胎干细胞建系的技术路线主要有囊胚法、核移植法和胚胎单卵裂球法，但由于破坏胚胎，涉及诸多伦理问题。目的：探讨利用冷冻胚胎建立人类胚胎干细胞系的可行性。设计、时间及地点：细胞学体内外实验，于200501／200608在沈阳市妇婴医院生殖中心完成。材料：妊娠13．5d的ICR鼠20只用于制各小鼠胚胎成纤维细胞饲养层，10周龄SICD鼠2只用于人胚胎干细胞体内分化实验。行IVF／ICSI助孕患者自愿捐献的冷冻胚胎，由沈阳市妇婴医院生殖中心提供。方法：复苏冷冻的胚胎，采用序贯培养法进行囊胚培养，用免疫外科方法去除滋养细胞，将得到的胚胎内细胞团接种于丝裂霉素C灭活的小鼠胚胎成纤维细胞上培养并传代。主要观察指标：取不同代次的培养细胞，分别进行生长特性、碱性磷酸酶染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、SSEA-1、肿瘤排斥抗原TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内分化全能性鉴定。结果：20个解冻卵裂期胚胎，获得9个囊胚，分离完整的内细胞团共7个，从7个内细胞团培养出2个人胚胎干细咆系，其中一个细胞系连续培养76代（20个月）。所培养的细胞具有人胚胎干细胞的共同生物学特性，即细胞呈扁平或圆形，可见1—3个核仁：碱性磷酸酶以及SSEA．3，SSEA．4，TRA-1．81，TRA-1-60，OCT-4均呈阳性表达，而SSEA-1呈阴性：核型正常，为46，XX核型；将细胞注射入SCID鼠皮下形成肿瘤，病理切片显示为成熟畸胎瘤：短串联重复分型结果显示所形成的畸胎瘤与人胚胎干细胞为相同的遗传背景。结论：实施体外受精-胚胎移植的夫妇怀孕后，多余的冷冻保存胚胎所分离培养的细胞具备人胚胎干细胞的所有特性，是建立人胚胎干细胞系很好的材料来源。     

自然周期冷冻胚胎移植79例分析

目的：观察自然周期行冷冻胚胎移植的效果,探讨影响其成功的因素。方法：79例患者胚胎玻璃化冷冻后在自然周期行胚胎解冻移植,按新鲜周期不同受精方式及患者年龄进行分组,比较组间胚胎复苏率、临床妊娠率、种植率等指标。结果：卵胞浆内单精子显微注射助孕组临床妊娠率、胚胎种植率高于常规体外受精助孕组,但差异无统计学意义(P＞0.05);年龄≥35岁组临床妊娠率及胚胎种植率有所下降,但与年龄＜35岁组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：年龄和受精方式不影响自然周期冷冻胚胎移植的妊娠率。     

不同的胚胎密度、培养液体积及微孔培养对小鼠早期胚胎发育的影响

目的通过比较不同胚胎密度和培养液体积及微孔(WOW)培养系统对小鼠早期胚胎发育的影响,以期优化早期胚胎发育的培养条件和环境,提高胚胎的发育率和质量。方法 (1)在液状石蜡覆盖的20μl的发育液小滴中培养5、10、20和40枚2-细胞胚胎,观察并统计8-细胞率、囊胚率和孵化囊胚率。(2)15枚2-细胞胚胎放入在5、10、20、50、100μl的发育液小滴和500μl WOW系统(每个WOW中放一枚胚胎)中,观察并统计8-细胞率、囊胚率和孵化囊胚率。(3)对各组得到的囊胚进行差异染色并计数。结果在不同胚胎密度的比较中,20μl的培养液小滴中培养10枚2-细胞胚胎得到了较高的8-细胞胚胎率、囊胚率和孵化囊胚率,而且得到囊胚的ICM、TE和ICM+TE的平均细胞数显著高于5枚和40枚胚胎组。在不同培养液体积和WOW培养系统中,5μl培养液组在各阶段胚胎发育率和得到囊胚的ICM、TE和ICM+TE的平均细胞数方面显著低于其他各组。500μl WOW培养系统组在各阶段胚胎发育率方面与得到较高发育率的20μl和50μl培养组均没有统计学差异,同时500μl WOW培养系统和20μl培养液组在孵化囊胚率和得到囊胚的ICM、TE和ICM+TE平均细胞数方面显著高于100μl培养液组。结论 20μl的培养液小滴培养10枚胚胎可以得到较高的胚胎发育率,且得到的胚胎质量较好。较少的培养液体积不利于胚胎发育,较适宜的培养液小滴体积为20⁵0μl。同时,WOW培养系统在本实验条件下取得了较好的胚胎发育效果。     

不同受精方式在微刺激周期中的应用

目的:探讨助孕周期行微刺激治疗患者采用不同体外受精方式对胚胎实验室指标的影响。方法回顾性分析我院行微刺激治疗的718例患者资料,根据受精方式分为体外受精(in vitro fertilization,IVF)和单精子卵母细胞内注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI),其中ICSI组根据精液情况分为正常精液ICSI组和少弱精ICSI组。分别比较各组的实验室指标,包括受精率、两原核(pronucleus,PN)率、多PN率、卵裂率、完全受精失败率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、囊胚形成率。结果:正常精液ICSI组的2PN率显著高于IVF组(P<0.05),多PN率显著低于IVF组(P<0.05),但卵裂率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、囊胚形成率与IVF组差异无统计学意义;正常精液ICSI组的完全受精失败率显著低于少弱精ICSI组(P<0.05),受精率、优质胚胎率、冷冻胚胎率、囊胚形成率无明显差异。结论:采用微刺激促排的IVF治疗中,男方精液正常者单精子卵母细胞内注射并不能改善胚胎质量。     

慢速冷冻法冷冻人类卵子技术初步研究

【目的】探讨不同的冷冻方法对卵子复苏币口发育潜能的影响。【方法】将获得的未受精卵分为两组，Ⅰ组消化去除冠-丘细胞及粘液团冷冻，Ⅱ组带冠-丘细胞冷冻。Ⅰ组按照冷冻保护剂中蔗糖浓度的不同分为A组（0.1M）和B组（0.2M），再根据冷冻时植冰的温度分为A1、B1组（-6℃植冰）和A2、B2组（-8℃植冰）。对复苏后不同成熟期的卵子进行体外培养、受精，比较存活率、受精率等各项指标，观察发育潜能。【结果】Ⅰ组与Ⅱ组的存活率分别是48．61％和27．59％（P〈O．01）。A组与B组的存活率分别为36．92％和58．23％（P〈0.05）。B1组与B2组的存活率分别为44．44％和69．77％（P〈0．05）。冷冻复苏后卵子与同期不孕症患者的新鲜卵子分别行ICSI体外受精后，正常受精率分别为60．47％和94．48％（P〈o．01）。【结论】①去除冠一丘细胞冷冻可提高卵子冷冻后的存活率。②0．2M较0．1M的蔗糖有利于卵子的冷冻。⑧0．2M的蔗糖中，-8℃较-6℃植冰更适合卵子的冷冻。④冷冻可以引起卵子正常受精率的降低。     

冷冻胚胎移植周期妊娠结局的影响因素分析

目的探讨影响冷冻胚胎移植周期妊娠的危险因素。方法回顾性分析15 848个冷冻胚胎移植周期(15 848例冷冻胚胎移植患者)的资料,追踪妊娠结局,根据妊娠结局的不同分为妊娠组9 459例和未妊娠组6 389例,收集患者年龄、不孕年限、不孕类型、雌激素水平、内膜准备方式、移植日内膜厚度等临床资料。采用多因素Logistic回归分析影响冷冻胚胎移植周期妊娠的因素。结果本组最终完成胚胎/囊胚移植27 104个,临床妊娠率59. 69%(9 459/15 848)。单因素分析显示年龄、胚龄、移植胚胎/囊胚数、移植日内膜厚度与临床妊娠率有关(P 0. 01)。Logistic回归分析显示年龄、移植日内膜厚度、移植胚胎/囊胚数、胚龄是临床妊娠结局的影响因素(P 0. 05或P 0. 01)。结论患者年龄、移植日内膜厚度、移植胚胎/囊胚数、胚龄是冷冻胚胎移植临床结局的影响因素。