结核分枝杆菌逃逸免疫杀伤机制的研究进展

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)是典型的胞内致病菌,感染机体后主要寄居于宿主巨噬细胞内。巨噬细胞作为机体防御系统的第一道防线,可通过介导和调控自身及其他细胞凋亡而实现其免疫调节、免疫杀伤及清除病原菌的作用。MTB感染机体后可通过多种途径使巨噬细胞不能正常凋亡,借以逃避巨噬细胞的免疫监视及清除,继而在体内衍生繁殖。进一步探讨结核分枝杆菌逃逸宿主细胞的免疫杀伤机制,对宿主细胞抗结核免疫及人们更好地防治结核病具有深远影响。     

耐药结核分枝杆菌快速检测方法的研究进展

传统的耐药结核分枝杆菌的诊断依赖药物敏感试验.近年来,随着技术的进步,出现了大量的先进检测手段,在敏感性、特异性、检测周期方面皆优于传统方法.基于核酸扩增的分子生物学技术为临床耐药结核分枝杆菌的快速检测打开了一个广阔的前景.在自动测序分析的帮助下,耐药结核的确诊越来越简便、准确,对结核菌基因中耐药突变位点的快速检测还能够为临床诊疗提供早期的帮助信息,甚至能识别潜在的感染.本文对目前已有的快速检测方法的研究进展进行综述.     

耐药结核分枝杆菌快速检测方法的研究进展

传统的耐药结核分枝杆菌的诊断依赖药物敏感试验.近年来,随着技术的进步,出现了大量的先进检测手段,在敏感性、特异性、检测周期方面皆优于传统方法.基于核酸扩增的分子生物学技术为临床耐药结核分枝杆菌的快速检测打开了一个广阔的前景.在自动测序分析的帮助下,耐药结核的确诊越来越简便、准确,对结核菌基因中耐药突变位点的快速检测还能够为临床诊疗提供早期的帮助信息,甚至能识别潜在的感染.本文对目前已有的快速检测方法的研究进展进行综述.     

结核分枝杆菌分子生物学检测方法新进展

应用分子生物学技术检测结核分枝杆菌,克服了传统检测方法的诸多不足,能够对难以培养、生长缓慢的结核分枝杆菌进行更加敏感、特异、准确、快速的鉴定和药物敏感性评价。本文概述了目前国内外几种结核分枝杆菌分子生物学检测方法的原理、应用现状及评价。     

结核分枝杆菌和牛分枝杆菌TaqMan荧光PCR检测的建立

目的对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌分别建立荧光PCR快速检测方法。结核分枝杆菌荧光PCR对H37Rv标准菌株、结核分枝杆菌临床分离株的检测结果呈典型阳性反应，牛分枝杆菌荧光PCR对牛分枝杆菌标准菌株、BCG菌株的检测结果呈典型阳性反应，对其它分枝杆菌菌株以及常见微生物样品为阴性反应。两种荧光PCR对对应阳性重组质粒模板的检测灵敏度可达单个基因拷贝，对结核分枝杆菌或BCG标准菌株的检测灵敏度可达单个菌细胞。对临床样品的检测结果显示，荧光PCR对模拟感染奶样、血样的检测灵敏度可达单个菌细胞。所建立的方法，全过程包括血样、奶样、痰液等临床样品的前处理、核酸提取和荧光PCR检测，可在5～6h内完成。采用上述荧光PCR方法从临床采集的疑似病人痰液中检出多份结核分枝杆菌阳性样品。     

耐药结核分枝杆菌快速检测方法的研究进展

传统的耐药结核分枝杆菌的诊断依赖药物敏感试验.近年来,随着技术的进步,出现了大量的先进检测手段,在敏感性、特异性、检测周期方面皆优于传统方法.基于核酸扩增的分子生物学技术为临床耐药结核分枝杆菌的快速检测打开了一个广阔的前景.在自动测序分析的帮助下,耐药结核的确诊越来越简便、准确,对结核菌基因中耐药突变位点的快速检测还能够为临床诊疗提供早期的帮助信息,甚至能识别潜在的感染.本文对目前已有的快速检测方法的研究进展进行综述.     

三种方法检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性的比较

目的 探讨绝对浓度法、液体培养基最低抑菌浓度（MIC）法和噬菌体生物扩增（PhaB）法检测结核分枝杆菌（MTB）吡嗪酰胺（PZA）耐药性的临床应用价值。方法 应用3种方法同时检测90株MTB临床分离株PZA耐药性，并比较检测结果的敏感度、特异度、阳性和阴性预测值及准确度。结果 90株MTB临床分离株用绝对浓度法、液体培养基MIC法和PhaB法3种方法分别测得21株、33株、22株敏感株和69株、57株、68株耐药株。若以绝对浓度法测定结果为判断标准，则PhaB法检测PZA耐药性的敏感度、特异度、阳性和阴性预测值及准确度分别为94．2％、85，7％、95．6％、81．8％、92．2％；若以液体培养基MIC法测定结果为判断标准，则PhaB法检测的敏感度、特异度、阳性和阴性预测值及准确度分别为98．2％、63．6％、82．4％、95．5％、85．6％；若以绝对浓度法和液体培养基MIC法测定结果为判断标准，则PhaB法检测的敏感度、特异度、阳性和阴性预测值及准确度分别为96．4％、90．0％、96．4％、90．0％、94．7％。结论 绝对浓度法尽管是目前国内常用的方法，但影响因素较多；液体培养基MIC法测定虽能提早报告药物敏感结果，但检测条件尚需优化；PhaB法检测快速、简便、安全，有一定的应用价值。     

淋巴细胞部分结核分枝杆菌DNA检测的临床意义

目的 判别淋巴细胞部分ＴＢ－ＤＮＡ检测的临床意义。方法 将淋巴细胞分离液血细胞方法与ＰＣＲ方法结合，对１５０例活动性结果、５０例非结核、３０例结核病已于三年前治愈者，３０例健康对照者同步检测外周血淋巴细胞部分和血浆部分的ＴＢ－ＤＮＡ１２３ｂｐ和２４５ｂｐ；并３０例初治肺结核病人外周血淋巴细胞部分ＴＢ－ＤＮＡ转阴时间。整个研究采取双盲法。结果 确立有ＴＢ－ＤＮＡ存在于活动性肺结核病人淋巴细胞部分而不     

淋巴细胞部份结核分枝杆菌DNA检测的临床意义

目的 判别淋巴细胞部份ＴＢ－ＤＮＡ检测的临床意义。方法 将淋巴细胞分离液分离血细胞方法与ＰＣＲ方法结合，对１５０例活动性结核、５０例非结核、３０例结核病已于三年前治愈率、３０例健康对照者同步检测外周血淋巴细胞部分和血浆部份的ＴＢ－ＤＮＡ１２３ｂｐ和２４５ｂｐ；并观察３０例初治肺结核病人外周血淋巴细胞部份ＴＢ－ＤＮＡ转阴时间。整个研究采取双盲法。结果 确实有ＴＢ－ＤＮＡ存在于活动性肺结核病人淋巴细胞     

结核/非结核分枝杆菌核酸快速检测方法临床应用价值

目的 评价结核/非结核分枝杆菌核酸快速检测方法的临床应用价值。 方法 应用实时荧光PCR技术对420例标本进行临床试验研究,并与抗酸杆菌涂片和分枝杆菌培养方法对照比较。 结果 结核分枝杆菌核酸检测灵敏度为48.5%（其中菌阳标本灵敏度为95.8%,菌阴标本灵敏度为14.5%）,特异度99.3%,阳性预测值为99.1%,阴性预测值为55.5%;临床试验388例痰标本中检测出1例非结核分枝杆菌核酸阳性,经测序确认,准确率100%;同时对32例非结核分枝杆菌临床分离株进行核酸检测,并经测序确认,准确率100%。 结论 应用实时荧光PCR技术,能实现在1支管内同时进行结核分枝杆菌/非结核分枝杆菌的核酸检测。该方法具有简单快速、特异性好污染性少的特点。可作为实验室辅助检测结核/非结核分枝杆菌核酸方法之一。     

噬菌体生物扩增法检测痰结核分枝杆菌的临床研究

目的评价噬菌体生物扩增(PhaB)法检测痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法分别应用PhaB法、直接涂片法、集菌涂片法和BACTECMGIT960快速培养法检测2005年8月至10月沈阳市胸科医院53例疑诊肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌,并对检测结果进行比较。结果PhaB法、直接涂片法、集菌涂片法、BACTECMGIT960快速培养法检出阳性标本数分别为24,11,17和22份;以培养结果为评价标准,PhaB法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为86.4%,83.9%,79.2%和89.7%;集菌涂片法和PhaB法联合检测的敏感性为90.9%,特异性为83.9%,阳性、阴性预测值分别为80.0%和92.9%。结论PhaB法检测痰中结核菌操作简便,具有较高的敏感性和特异性,可作为临床结核分枝杆菌的快速检测方法;PhaB法联合集菌涂片法进行检测可进一步提高敏感性,减少漏诊率。     

结核相关的抗中性粒细胞胞浆抗体血管炎致肾功能衰竭一例

结核分枝杆菌（Mycobaterium tuberculosis，MTB）感染引起的肾脏损伤，目前尚未引起人们的充分关注，由于其临床表现多样，所以误诊误治率较高。临床肾结核不典型病例占30％左右，误诊率高达60％左右，80％的病例误诊时间达1年以上，最长者达20年以上；而结核分枝杆菌感染引起的结核性自身免疫性疾病，误诊率可高达70％～94％。为了提高对该病的警惕，     

结核分枝杆菌基因突变检测方法研究进展

结核分枝杆菌全基因组测序工作的完成,为开展结核病基因研究提供了理论基础,对结核分枝杆菌基因突变的研究也成为当前结核病研究领域的热点之一。高分辨率熔解（high resolution melting, HRM）、基因芯片、DNA直接测序等分子生物学新技术的发展和应用,为结核分枝杆菌基因突变研究提供了更有效的方法。现综合国内外近年来的文献,分类介绍应用于结核分枝杆菌基因突变检测的各种方法的原理、应用情况等,同时也对GeneXpert、结核分枝杆菌线性探针（line probe assay,LiPA）、基因芯片等当前比较成熟并有望得到广泛应用的商品化基因突变检测技术进行介绍。     

结核分枝杆菌脂多糖的提取及其检测血清结核抗体的研究

目的 提取结核分枝杆菌（MTB）脂多糖抗原,检测结核血清参考品,评价其在血清学诊断中的价值.方法 将MTB菌体冰浴超声破碎,用酚/氯仿、氯仿/甲醇抽提除去蛋白和脂质,再用DNase I酶和RNase 酶作用除去DNA和RNA,得到初步纯化的脂多糖即LPS-1, LPS-1在去污剂Triton-X114作用后,分成含有阿拉伯甘露糖（AM）的水相即LPS-2和含有脂阿拉伯甘露糖（LAM）和脂甘露糖（LM）的有机相即LPS-3,以三种多糖作为抗原,通过ELISA方法检测结核阳性和阴性血清参考品.结果 LPS-1对结核血清参考品检测的敏感性为71.7%,特异性为96%,LPS-3的敏感性为43.9%（18/41）,而特异性达到100%.结论 脂多糖抗原检测血清结核抗体显示出较强的特异性,可望成为结核病血清学的诊断组合抗原之一.     

骨关节结核脓液结核分枝杆菌培养结果分析

７５例骨关节结核患者脓液用改良罗氏法及ＢＡＣＴＥＣ法行结核杆菌培养,并将培养结果与抗结核化疗时间及临床特征进行对比,结果：２阳性者２３例（３０．７％）,其中改良罗氏法阳性１０例（１３．３％）,ＢＡＣＴＥＣ法阳性２１例（２８．０％）,涂片阳性１６例（２１．３％）,涂阳培阴８例（１０．７％）,化疗时间越长,培养阳性率越低。涂阳培阴现象可能与疾病预后有关。     

四种方法检测结核分枝杆菌耐药性结果的比较及方法评价

目的：比较噬菌体生物扩增法（PhaB）及分枝杆菌快速侦测系统（BacT—ALERT）测定结核杆菌（MTB）药物敏感度结果，研究其临床应用价值。方法：应用PhaB、BacT-ALERT检测200株MTB对异烟肼（INH）、链霉素（SM）、乙胺丁醇（EMB）和利福平（RFP）的耐药性，并以传统的耐药性测定方法作为金标准，评价其敏感度、特异度和准确度。结果：以绝对浓度法结果为判断标准：PhaB检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为95．2％、88．3％和89．0％，检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为95．1％、97．5％和98．0％，检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100．0％、94、4％和94．5％，检测RFP的敏感度、特异度和准确度分别为95．7％、97．4％和97．0％；BacT—ALERT检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为100．0％、97．2％和97．5％，检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为92．7％、94．3％和94．0％，检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100．0％、99．4％和99．5％，检测RFP敏感度、特异度和准确度分别为87．0％、93．5％和92．5％。以比例法结果为判断标准：PhaB检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为58．3％、99．4％和94．5％，检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为88．1％、96．8％和95．0％，检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100．0％、94．4％和94．5％，检测RFP敏感度、特异度和准确度分别为88．0％、96．7％和94．5％。BacT—ALERT检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为83．3％、97．7％和95．5％，检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为88．1％、94．9％和93．5％，检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100．0％、98．8％和99．0％，检测RFP敏感度、特异度和准确度分别为78．0％、96．0％和91．5％。结论：PhaB法和BacT—ALERT法检测MTB耐药性均具有较高的敏感度、特异度和准确度，可作为MTB耐药性的快速检测方法。     

结核分枝杆菌的潜伏感染与检测方法

结核分枝杆菌是一种复杂的病原微生物。人感染结核分枝杆菌后，大约有10％的初始感染者发生结核病，对于那些没有临床表现的感染者，有相当数量的一部分人体内存在潜伏感染的结核分枝杆菌，即机体的免疫系统能够控制结核分枝杆菌的复制而不表现出临床症状但又不能彻底清除感染的结核分枝杆菌。     

非结核分枝杆菌肺病的研究进展

近年来,全球非结核分枝杆菌肺病的患病率呈上升趋势,已成为常见病,且对人类健康造成了威胁.非结核分枝杆菌(NTM)主要累及肺脏,NTM肺病缺乏特异性临床表现和体征,与其他疾病鉴别困难.很多临床医师常忽略NTM肺病的存在,常出现误诊或者漏诊.该文从NTM肺病的定义、流行病学特征及危险因素、发病机制及病理变化、诊治及预防等方...     

结核分枝杆菌药敏试验方法改进的探讨

目的 探讨改进结核分枝杆菌药敏试验方法。方法 以ＢＡＣＴＥＣ法７Ｈ１２Ｂ液体培基分离５０例临床结核分枝杆菌菌株，经不同稀释后，直接接种于改良罗氏药敏培基上，与ＢＡＣＴＥＣ法药敏结果对比，观察其耐药性。结果 １．７Ｈ１２Ｂ液体培基中结核分枝杆菌菌液ＧＩ值５００～９００时，１ｍｌ相当于１ｍｇ结核分枝杆菌湿重的活菌（菌数１０＾６～７）。２．取７Ｈ１２Ｂ液体培基的菌液直接接种于罗氏药敏培养基，其耐药结果与     

结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重PCR快速检测

目的建立一种鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重PCR快速检测方法。方法根据已发表的结核分枝杆菌23SrRNA和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计并合成了两对可扩增结核分枝杆菌和牛分枝杆菌特异性基因片段的引物,建立二重PCR快速检测结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,测定其特异性和敏感性,并对238份牛临床样品的DNA分别进行了检测。结果该方法对牛分枝杆菌能扩增出838bp和631bp的特异性基因片段,结核分枝杆菌只扩增出838bp基因片段而扩增不出631bp的特异性基因片段,对参试的其它牛菌株的DNA扩增结果均为阴性。敏感度检测可达到50pg的DNA含量。临床样品检测结核分枝杆菌阳性有21份,牛分枝杆菌阳性有1份,其它临床样品扩增结果全部为阴性。结论本方法可作为牛分枝杆菌的快速检测和流行病学调查的工具。