肺鳞癌中磷脂酶Cε和核因子-κBp65的表达及意义

目的应用免疫组化方法检测肺鳞癌术后组织中磷脂酶Cε1(PLCE1)、核因子(NF)-κB p65的表达,探讨其临床价值。方法 63例行肺鳞癌根治手术患者的临床资料及术后蜡块组织作为研究组,无肿瘤的支气管断端22例作为对照组。应用免疫组化方法检测两组中PLCE1和NF-κB p65的表达。结果研究组PLCE1和NF-κB p65表达的阳性率明显高于对照组。研究组PLCE1和NF-κB p65的表达均与分化程度、肿瘤最大径和增殖细胞核抗原(PCNA)标记的增殖指数密切相关。研究组NF-κB p65的表达与淋巴结转移明显相关性,而PLCE1与淋巴结转移无明显相关性。相关分析显示研究组PLCE1和NF-κB p65的表达无相关性。结论肺鳞癌术后组织中PLCE1和NF-κB p65高表达,二者对肿瘤的形成和进展可能具有一定作用。PLCE1和NF-κB p65之间无明显协同作用。     

高血压大鼠心脏钙调蛋白磷酸酶与核因子κBp65的表达

目的探讨钙调蛋白磷酸酶(caicineurin)、核因子κBp65(NFκBp65)在高血压心血管重构信号转导通路的作用。方法建立腹主动脉缩窄高血压大鼠模型,以尾动脉测压法观察大鼠血压变化,用免疫组织化学和形态计量学方法,观察calcineurin、NFκBp65在心脏原位蛋白表达和心脏重量及其系数的变化。结果与假手术组比较,高血压大鼠血压明显升高[(144.70±4.85)vs(110.00±4.00)mmHg,P<0.01;(151.40±14.86)vs(114.36±5.5)mmHg,P<0.01]、心脏重量及其系数显著增加[(1.87±0.07)vs(1.51±0.13)g,P<0.01,(0.43±0.02)vs(0.33±0.01)g/100g,P<0.01]、心脏重构,钙调蛋白磷酸酶与NFκBp65在心脏过表达,而且阳性表达面积和阳性表达面积百分比增大[(107380.36±9268.64)vs.(14537.64±12169.42)μm2,P<0.01;(54797.00±17483.46)vs(3501.43±2919.18)μm2,P<0.01]。结论calcineurin与NFκBp65过表达参与了腹主动脉缩窄性高血压心血管重构的发生。     

核转录因子-κBp65在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中的表达水平

目的探讨核转录因子(NF)-κBp65在口腔扁平苔藓及口腔鳞癌中的表达水平。方法采用免疫组化与Western印迹两种蛋白检测技术相结合的研究方法,检测NF-κBp65在口腔扁平苔藓、口腔鳞癌及口腔正常黏膜组织中的表达水平。结果 1NF-κBp65在口腔正常黏膜组、口腔扁平苔藓组、口腔鳞癌组中的表达存在显著差异且逐渐增强(P0.01)。2NF-κBp65在口腔扁平苔藓组织及口腔鳞癌组织中均存在过度表达,且无显著差异(P=1.00)。结论 NF-κBp65在口腔扁平苔藓组织及口腔鳞癌组织中均过度表达,NF-κBp65可能参与介导了癌前状态——口腔扁平苔藓组织转化成口腔鳞癌的过程。     

游离脂肪酸刺激核因子NF-κBp65核转位诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的分子机制

目的:研究游离脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞核因子NF-κBp65表达及转位的影响,探讨游离脂肪酸诱导胰岛素抵抗的分子机制.方法:诱导成熟的3T3-L1脂肪细胞与0.3,0.5,1.0 mmol/L的软脂酸(PA)培养6-24 h,用葡萄糖氧化酶法检测培液中的葡萄糖消耗量,以2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄入法观察葡萄糖的转运率,用Western blot检测总NF-κBp65蛋白及核NF-κBp65蛋白的表达,用激光扫描共聚焦(CLSM)对NF-κBp65进行定位显示.结果:0.3-1.0 mmol/L软脂酸作用6-24 h后,3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗明显减少(3.03±0.34,2.71±0.36,2.64±0.25 mmol/L),呈时间剂量依赖效应,其作用不需要胰岛素的存在;0.3-1.0 mmol/L软脂酸作用6-24 h显著减少3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运率(64%,33%,32%),呈时间剂量依赖效应;核NF-κBp65蛋白表达明显增加,CLSM显示NF-κBp65核转位增加,但软脂酸对3T3-L1脂肪细胞总NF-κBp65蛋白的表达无明显影响.结论:游离脂肪酸可以诱导胰岛素抵抗,其分子机制可能与FFAs刺激NF-κB的活化转位调节相关基因的表达有关.     

核因子-κB及抑制因子I-κB在类阿尔茨海默病模型大鼠脑组织中的表达

为探讨核因子 κB(NF κB)及抑制因子I κB在阿尔茨海默病 (AD)发病机制中的作用 ,我们于 2 0 0 0年 12月至2 0 0 1年 12月用免疫组化法检测了两者在类AD模型大鼠脑组织中的表达。　　一、材料与方法　　 1.动物及分组 :健康雄性Wister大鼠 ,3～ 5个月龄 ,体重 2 5 0～ 30 0g(由中国医科大学实验动物中心提供 ) ,共 6 0只 ,随机分成实验组 30只 ,对照组 30只。　　 2 .类AD模型大鼠制备及确定 :参照何蕴绍等〔1〕 报道的方法 ,即采用单侧 (左侧 )穹隆 海马伞切断制成类AD模型。大鼠术后 2周 ,经Morris水迷宫测试平均逃避潜伏期大于…     

三氧化二砷对MRL/lpr狼疮小鼠肾脏病理和组织转化生长因子-β1核因子-κBp65异常表达的影响

目的 研究MRL/lpr狼疮小鼠肾脏病理转化生长因了(TGF)-β1、核因子(NF)-κBp65的异常表达及三氧化二砷(ATO)的干预作用.方法 将MRL/lpr狼疮鼠45只随机分为ATO组、环磷酰胺(CTX)组和对照组.观察各组MRL/lpr狼疮小鼠治疗前后尿蛋内(半定量)的变化;给药2个月后处死,经苏木素-伊红(HE)染色、PAS染色后观察肾组织病变程度;用免疫荧光方法检测肾组织IgG、C3的表达;用免疫组织化学方法检测肾组织TGF-β1、NF-κBp65的表达.结果 ①尿蛋白分析:给药后ATO组较对照组有明显减少(P=0.004)、CTX组较对照组也有减少(P=0.005).②免疫荧光检测IgG、C3的表达:在对照组可见IgG沿肾小球系膜区,毛细血管袢弥漫沉积(+～+++),而ATO组、CTX组则明显减少(-～+),经统计发现ATO组、CTX组较对照组明显减少(P＜0.05);C3的表达差异无统计学意义.③肾小球细胞数及肾组织活动积分在ATO组及CTX组中均较对照组明显减少(P＜0.05).④免疫组织化学:TGF-β1、NF-κBp65在对照组肾小管上皮细胞可见明显表达,经ATO及CTX组表达明显减少,肾小球表达各组均不明显.结论 TGF-B1、NF-κBp65主要表达在MRL/lpr狼疮小鼠肾小管上皮细胞,ATO通过下调TGF-β1、NF-Kκp65的表达改善小管病变达到改善狼疮肾炎的进展.     

微小RNA-146a转染的H9c2心肌细胞高糖培养下核因子-κBp65和Ⅰ型胶原的表达

目的观察微小RNA(miRNA)-146a转染H9c2心肌细胞高糖培养下核因子-κBp65(NF-κBp65)和Ⅰ型胶原表达。方法高糖培养H9c2细胞系,分为增强组(EC)、阴性对照组(NC)、空白对照组(BC)。采用Lipofectamine 2000Transfection Reagent分别转染miRNA-146a增敏剂(50nmol/L)、错义链(50nmol/L)、PBS,于48h后Real-time PCR测定miRNA-146a水平,Western blot测定NF-κBp65和Ⅰ型胶原水平。结果转染后,EC组H9c2细胞miRNA-146a水平高于NC组和BC组(P0.05),NF-κBp65和Ⅰ型胶原蛋白表达量低于NC组和BC组(P0.05)。结论 miRNA-146a参与了高糖培养H9c2心肌细胞纤维化,其机制与NF-κBp65和Ⅰ型胶原表达有关。     

siRNA抑制NF-κBp65对Bcl-2及肝癌细胞凋亡的影响

目的:研究siRNA抑制NF-κBp65后Bcl-2在肝癌细胞中的变化及对肝癌细胞凋亡的影响.方法:选择肝癌细胞HepG2、SMMC7721和人胚胎肝细胞LO2细胞株,应用Westernblot法分别检测NF-κBp65、Bcl-2在不同细胞中的表达;应用siRNA方法抑制NF-κBp65在肝癌细胞中的表达,观察NF-κBp65、Bcl-2在肝癌细胞中的变化及应用流式细胞仪观察肝癌细胞的凋亡情况.结果:Westernblot法检测显示NF-κBp65、Bcl-2在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达明显高于人胚胎肝细胞LO2(2.14±0.19,2.09±0.27vs0.54±0.11;1.42±0.15,1.47±0.14vs0.60±0.08,均P<0.05),而NF-κBp65、Bcl-2在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达差异无统计学意义;应用siRNA抑制NF-κBp65的表达后,应用Westernblot法检测显示NF-κBp65在肝癌细胞HepG2、SMMC7721中的表达较未转染组明显下降(2.08±0.19vs0.99±0.12;2.03±0.17vs0.94±0.14,均...     

西黄丸对大鼠乳腺癌癌前病变的阻断作用及对NF-κB蛋白表达的影响

目的 探讨西黄丸对大鼠乳腺癌癌前病变的阻断作用及对核转录因子(NF)-κB蛋白表达的影响.方法 6周龄SPF级健康未育SD雌性大鼠60只,随机分为正常对照组10只,疾病模型组50只,正常对照组正常饲养,疾病模型组采用7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)协同雌孕激素序贯建立SD大鼠乳腺癌癌前病变模型,10 w造模成功后,疾...     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆和海马核因子-κB表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力和海马核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 15只SD雄性大鼠等分成对照组、模型组、用药组.模型组大鼠给予双侧海马各一次性注射凝聚态β淀粉样蛋白(Aβ)1～40,对照组大鼠海马注射等量生理盐水;用药组大鼠在海马注射凝聚态Aβ1～40后腹腔注射雷公藤内酯醇,Morris水迷宫试验检测大鼠的学习记忆能力.免疫组织化学方法观察NF-κB表达的变化.结果 行为学试验显示,在定位航行试验中,模型组大鼠平均逃避潜伏期较对照组明显延长,用药组大鼠平均逃避潜伏期较模型组明显缩短;在空间探索试验中,模型组大鼠跨越原平台位置的次数较对照组明显减少,用药组大鼠跨越原平台位置的次数较模型组明显增多.免疫组织化学染色显示,模型组胞核表达NF-κB的细胞数明显高于对照组,用药组胞核表达NF-κB的细胞数明显减少.结论 雷公藤内酯醇对AD模型大鼠海马NF-κB的活化有抑制作用,并以此改善AD模型大鼠学习记忆能力.     

双参通脉颗粒对大鼠心肌缺血NF-κBp65蛋白表达的影响

目的研究双参通脉颗粒(GSG)对大鼠心肌缺血的干预作用,并探讨其相关机制。方法40只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MIRI组)、合心爽组(DH组)、中药组(GSG组),每组10只。结扎左冠状动脉前降支造模,成功后Sham组、MIRI组应用生理盐水灌胃,DH组、GSG组药物灌胃,4周后,测定各组心功能、病理改变、血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),Western检测NF-κBp65蛋白表达。结果DH组、GSG组与MIRI组比较,心功能明显改善(P<0.05);DH组、GSG组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显低于MIRI组(P<0.05),且GSG组低于DH组(P<0.05);DH组、GSG组心肌NF-κBp65蛋白表达明显低于MIRI组(P<0.05),且GSG组低于DH组(P<0.05)。结论GSG可抑制大鼠心肌缺血氧化损伤,其机制可能与IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子释放减少,NF-κBp65蛋白表达抑制有关。     

氧化苦参碱对实验性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子和核因子-κB p65表达的影响

目的:观察氧化苦参碱注射液对大鼠实验性结肠炎的治疗效果,探讨其作用机制.方法:将40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、美沙拉嗪组和氧化苦参碱(OMT)组,每组10只.正常对照组未行造模,其余3组大鼠均采用TNBS造模.模型组给予生理盐水肌注,美沙拉嗪组给予美沙拉嗪混悬液灌胃,氧化苦参碱组给予氧化苦参碱注射液肌注.治疗15 d后观察大鼠的腹泻、便血症状和结肠病理组织学改变,用ELISA法检测结肠黏膜组织IL-2、IL-10的变化,并用免疫组化技术检测大鼠结肠黏膜核因子(NF)-κB p65的表达.结果:OMT组大鼠腹泻、黏液脓血便症状得到较快控制.大鼠黏膜组织损伤显著改善.与模型组比较,OMT组IL-2减少(102.93±21.10ng/L vs 23 1.48±40.78 ng/L,P<0.05),IL-10增多(50.13±1.40 ng/L vs 18.64±0.65 ng/L,P<0.05),NF-κB p65显著降低(16.02%±7.27% vs 43.05%±13.80%,P<0.01).与正常组相比,模型组结肠黏膜IL-2升高,IL-10减少,NF-κBp65表达增多,差异均有显著性意义(102.93±21.10 ng/L vs 30.44±12.03 ng/L,50.13±1.40nK/L vs 58.92±3.70 ng/L,16.02%±7.27% vs 9.57%±4.31%,均P<0.01).OMT组与美沙拉嗪组比较,IL-2、IL-10和NF-κB p65的表达无显著性差异.结论:氧化苦参碱注射液治疗大鼠实验性结肠炎有明显效果,其作用机制可能是通过减少IL-2的生成、促进IL-10分泌和抑制NF-κB p65的激活发挥治疗作用.     

丹皮酚对大鼠急性心肌梗死后核因子-κB p65通路的影响

目的探讨丹皮酚对大鼠急性心肌梗死后(AMI)心肌组织核因子(NF)-κB p65通路的影响。方法大鼠结扎左冠状动脉前降支建立AMI模型,分为模型组和丹皮酚低、中、高剂量组4、6、8 mg·kg~(-1)·d~(-1)及卡托普利组10 mg·kg~(-1)·d~(-1);另设假手术组只穿线不结扎。连续给药4 w后处死大鼠,Masson染色法分析心肌组织胶原沉积变化;免疫组化法检测p-IκB及NF-κB p65蛋白的表达。结果 4、6、8 mg·kg~(-1)·d~(-1)丹皮酚给药4 w后,大鼠心肌组织的胶原沉积量较模型组显著减少。丹皮酚还可下调心肌组织中NF-κB p65、p-IκB的蛋白表达。结论丹皮酚对大鼠AMI后心室重构有明显的治疗和改善作用,抑制NF-κB p65的表达和活化是其作用机制之一。     

葛根素对卡那霉素耳中毒小鼠耳蜗核因子-κB p50活性的影响

目的观察葛根素对卡那霉素(KM)耳中毒小鼠耳蜗核因子(NF)-κB p50活性的影响,探讨葛根素对KM耳毒性发挥防护作用的机制。方法 BALB/c小鼠随机分成四组:正常对照组,KM组,KM+葛根素组,葛根素组,各组小鼠于用药前及停药后分别测试听脑干反应(ABR)以进行正常BALB/c小鼠的筛选及听力损伤后听阈的测定。停药后测试完ABR通过Western印迹检测各组NF-κB p50的表达水平。结果 KM组连续用药14 d后,不同频率的ABR阈值和NF-κB p50的表达水平明显提高,而且与正常对照组比较差异显著(P0.01);KM+葛根素组虽然用药后不同频率的ABR阈值和NF-κB p50的表达水平也比正常对照组高,但较KM组明显降低;正常对照组和葛根素组在整个用药期间不同频率的ABR阈值和NF-κB p50的表达水平无统计学意义(P0.05)。结论 NF-κB p50参与了KM的耳毒性,葛根素通过下调NF-κB p50进而拮抗了KM的耳毒性。     

老年骨肉瘤患者术后组织中星形胶质细胞升高基因-1、核因子-κBP65对血管生成的作用

目的检测老年骨肉瘤患者术后组织中星形胶质细胞升高基因(AEG)-1和核因子(NF)-κBP65表达,观察二者与白细胞分化抗原(CD)31阳性的微血管密度(MVD)的关系。方法 79例老年骨肉瘤术后组织作为观察组,50例骨瘤脱钙后组织作为对照组。应用免疫组化二步法检测二组中AEG-1、NF-κBP65和CD31的表达。结果观察组中AEG-1、NF-κBP65蛋白表达的阳性率明显高于对照组,观察组中MVD值明显高于对照组,观察组中AEG-1、NF-κBP65表达、MVD值均与肿瘤的最大径、是否伴有坏死、脉管浸润、Ki67增殖指数及转移相关。相关分析显示AEG-1和MVD、NF-κBP65和MVD、AEG-1和NF-κBP65均具有正相关性。结论老年骨肉瘤患者术后组织中AEG-1、NF-κBP65高表达对促进肿瘤的发生和进展有重要作用,AEG-1、NF-κBP65均与肿瘤间质MVD有协同作用。     

胃癌、癌前病变中核因子-κB/P65、c-myc的表达

核因子кB(nuclear factor-kappa B,NF-кB)是一种转录因子,调节许多基因的表达,因其调节细胞因子、粘附分子、炎症介质等表达,在炎症、免疫紊乱等疾病发病机制中已有很多研究。近来发现它还调节某些抗凋亡基因及细胞增殖基因的表达,因此NF-кB在肿瘤发病机制中的作用日益受到人们的关注,正在成为肿瘤研究的热点。本实验运用免疫组织化学方法(免疫组化)检测癌前病变胃镜活检标本及胃癌手术标本中NF-кB及靶基因c-myc的表达,分析其与胃癌分期、分型与淋巴结转移之间的关系,了解两者在胃癌发生、发展中的作用及相互关系。     

胃腺癌中CD44v6和核因子-κB的表达及相关性

目的应用免疫组化方法检测胃腺癌中CD44v6和细胞核因子(NF)-κB的表达特征,探讨二者与临床病理特征的关系及相关性。方法经病理医师确诊的69例胃腺癌患者作为观察组,胃高级别上皮内瘤变患者16例作为对照组1,胃低级别上皮内瘤变患者16例作为对照组2,未见明显异常的胃黏膜组织16例作为对照组3,均留取术后或钳检后的组织,经石蜡包埋后应用免疫组化方法检测CD44v6和NF-κB的表达。结果观察组中CD44v6和NF-κB的阳性率均明显高于对照组1、2和3。观察组中CD44v6和NF-κB的阳性率与淋巴结转移、脉管累犯相关,NF-κB的表达与浸润深度相关。二者均与肿瘤的分化程度无相关性。线性相关分析显示观察组中CD44v6和NF-κB之间无明显相关性。结论胃腺癌中CD44v6和NF-κB表达升高,其可能有利于肿瘤的播散,二者高表达可能预示着不良的生物学行为。     

狼疮清颗粒对AHN模型大鼠肾功能和MRL/lpr小鼠肾组织NF-κBp65蛋白表达的影响

目的观察狼疮清颗粒对主动型Heymann肾炎(AHN)模型大鼠肾功能的作用及其对MRL/lpr小鼠肾组织NF-κBp65蛋白表达的影响。方法大鼠肾皮质加弗氏完全佐剂腹腔注射建立AHN大鼠模型,应用狼疮清颗粒、泼尼松、狼疮清颗粒联合泼尼松,对AHN模型大鼠进行干预治疗4 w,检测其24 h尿蛋白、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及肾脏病理学变化,同时对MRL/lpr小鼠干预治疗4 w,Western印迹检测肾组织NF-κBp65蛋白表达。结果与模型组相比,各治疗组均降低AHN模型大鼠尿蛋白、BUN、Cr的水平,不同程度的改善AHN模型大鼠肾组织病理变化;显著降低MRL/lpr小鼠NF-κBp65蛋白的表达,其中以狼疮清颗粒联合泼尼松组(中西医结合治疗组)最为明显。结论狼疮清颗粒对狼疮性肾炎具有一定的治疗作用,其机制可能与抑制肾组织NF-κBp65蛋白表达有关。     

眼针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织核因子-κBp65、血管细胞黏附分子-1表达细胞黏附分子影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织核因子(NF)-κB p65、血管细胞黏附分子(VCAM)-1表达的影响,探讨眼针对急性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、眼针治疗组,采用改良线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)再灌模型,于再灌注后24 h进行神经功能缺损评分,运用免疫组化检测法,检测海马组织NF-κB p65、VCAM-1。结果与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降;海马组织NF-κB p65、VCAM-1蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论眼针能通过下调脑缺血再灌注损伤的NF-κB p65、VCAM-1蛋白水平,发挥神经保护作用。     

核转录因子-κB和三叶因子3与胃癌关系的研究进展

核转录因子-κB(NF-κB)是一种多功能转录因子,参与体内免疫应答、炎症反应、细胞增殖、凋亡调节和肿瘤形成等过程。三叶因子3(TFF3)作为胃肠黏膜的一个重要的黏膜保护因子,对维持其黏膜的完整性和促进肠黏膜损伤后重建和修复具有重要作用。在胃癌形成过程中TFF3和NF-κB可能相互影响、相互调节、共同发挥作用。TFF3和NF-κB对胃癌早期诊断和判断预后可能具有重要的提示作用,可为指导临床上胃癌的诊断及治疗提供新的潜在靶点。