高果糖、高脂饲料喂养小鼠肝脏脂质合成酶类与内质网应激相关因子蛋白表达变化

目的 探讨和比较高果糖、高脂饮食诱导的小鼠肝脏三酰甘油(TG)的发生机制及其与内质网应激的关系.方法 成年雄性C57BL/J6小鼠45只,质量25～30 g,按随机数字表随机均分为对照组、高脂组及高果糖组,每组15只.对照组予以普通饲料,高果糖组予以高糖饮食,高脂组予以高脂饮食,3组每日进食热量基本相等,经喂养8周后对小鼠行葡萄糖耐量(ipGTT)实验,处死小鼠后测定各组肝脏三酰甘油含量,并测定肝脏脂质合成酶类和内质网应激相关因子的蛋白表达.结果 不同饲料喂养8周后,高果糖组和高脂组的附睾脂肪含量均为(2.0±0.1)g/100 g(质量),明显高于对照组[(1.2±0.1)g/100 g(质量)P＜0.01].高果糖组和高脂组ipGTT实验后的血糖曲线下面积明显高于对照组(P＜0.01).与对照组相比,高果糖组和高脂组的肝脏TG水平显著增高(P＜0.01),其中高果糖组肝脏TG升高更明显,高果糖组肝脏TG水平显著高于高脂组(P＜0.01).与对照组相比,高果糖组的乙酰辅酶A羧化酶( ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD-1)表达增加(P＜0.01),而高脂组的FAS、ACC、SCD-1的表达减少(P＜0.05);反应内质网应激的磷酸化胰腺内质网激酶(p-PERK)、山梨醇要求激酶-1(p-IRE-1/t-IRE-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达在高果糖组和高脂组均增加(P值均＜0.01).结论 高果糖饮食和高脂饮食均可引起脂肪肝,二者通过不同机制引起脂肪肝,高果糖饮食促进内源性脂质生成,高脂喂养抑制肝内源性脂质生成,两种饮食均可诱发内质网应激,提示内质网应激与饮食因子诱导的脂肪肝的发生发展有关.     

内质网应激抑制剂4-苯基丁酸对高果糖喂养诱导小鼠脂肪肝的干预作用及机制

目的探讨内质网应激(ERS)抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)对高果糖饮食诱导小鼠肝脏脂质沉积及脂质从头合成通路的影响。方法雄性Wistar小鼠分为对照组、高果糖组和4-PBA组(自高果糖喂养第4周后给予4-PBA 1 g·kg-1·d-1),8 w后处死小鼠并测定各组小鼠空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(FINS),测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量及肝脏甘油三酯(TG)含量;测定ERS标志物葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94的基因表达;并测定脂质合成标志物固醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1c和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的基因表达。结果与对照组相比,高果糖组的FBG、FINS、肝TG均显著增加(均P0.01);与高果糖组比较,4-PBA组的上述指标均显著降低(均P0.01)。与对照组相比,高果糖组小鼠的肝内GRP78、GRP94基因表达显著增加(均P0.01),而4-PBA组上述基因表达均低于高果糖组(均P0.01)。高果糖组小鼠的肝内SREBP-1c和ACC基因表达显著增加(均P0.01),而4-PBA组上述因子基因表达均显著低于高果糖组(P均0.01)。结论长期高果糖喂养引起小鼠肝脏脂质沉积、ERS和脂质从头合成增加,ERS抑制剂4-PBA可改善高果糖饮食诱导的脂肪肝,其机制可能与ERS调控脂质从头合成有关。     

二甲双胍对高脂喂养诱导小鼠脂肪肝和肝脏内质网应激的干预作用

目的 观察高脂饮食诱导小鼠肝脏脂质沉积及对肝脏内质网应激的影响,探讨二甲双胍对其的干预作用.方法 雄性C57BL/J6小鼠分为健康对照组、高脂组和二甲双胍组,每组14～15只.健康对照组小鼠常规喂养.高脂组及二甲双胍组均给予高脂饮食喂养,二甲双胍组于高脂喂养4周后给予二甲双胍干预,喂养8周后对小鼠行葡萄糖耐量实验,处死小鼠后测定各组肝脏TG含量,并测定内质网应激相关因子的基因和蛋白表达水平.组间数据进行单因素方差分析.结果 与健康对照组相比,高脂组的葡萄糖耐量曲线下面积(AUC)、肝组织TG均显著增加[998±87比1409±106,(10.05±0.29) umol/g比(27.11±4.76) μmol/g],而二甲双胍组的葡萄糖耐量和肝脏脂质沉积均显著改善,AUC和TG均显著低于高脂组[1178±90和(15.12±2.11) μmol/g],三组间比较差异均有统计学意义(F=55.328和89.212,P均＜0.01).与健康对照组相比,高脂组的肝脏内质网伴侣分子葡萄糖调节蛋白94(GRP94)的mRNA表达水平显著增加,反映内质网应激的磷酸化真核翻译起始因子2α(eIF2α)的蛋白表达水平(磷酸化eIF2α/总eIF2α)亦显著增加,而二甲双胍组GRP94 mRNA和eIF2α蛋白表达水平均显著低于高脂组,三组间比较差异均有统计学意义(F=84.002和137.321,P均＜0.05).结论 高脂饮食可引起小鼠肝脏脂质沉积,并伴肝细胞内质网应激;二甲双胍治疗可显著改善高脂饮食喂养小鼠的脂肪肝,其机制可能与二甲双胍改善肝脏内质网应激有关.     

长期高果糖饮食喂养对大鼠肝脏脂质沉积和炎症通路的影响

目的 探讨长期(8w)高果糖饮食对大鼠肝脏脂质沉积及肝脏炎症通路的影响.方法 雄性C57BL/J6大鼠分为对照组及高果糖组,经喂养8 w后处死大鼠测定各组肝脏甘油三酯(TG)含量和谷丙转氨酶(ACT)含量,并测定大鼠肝脏内JNK途径(p-JNK/t-JNK)和IκBα途径(p-IKKα/β/t-IKKα/β)的蛋白表达变化.结果 喂养8 w后,与对照组相比,高果糖组肝脏甘油三酯和谷丙转氨酶含量较对照组显著增加(P均＜0.01);与对照组相比,高果糖组的p-JNK/t-JNK、p-IKKα/β/t-IKKα/β和t-IκB的蛋白表达均显著增加(P均＜0.01).结论 8w高果糖喂养引起大鼠肝脏脂质沉积,同时伴有JNK和IKKα/β-NF-κB通路激活,提示肝脏两条炎症通路均介导了高果糖喂养诱导脂肪肝和肝胰岛素抵抗的发生发展.     

氧化苦参碱对高果糖饮食诱导小鼠脂肪肝和肝胰岛素抵抗的影响

目的 观察氧化苦参碱对高果糖饮食诱导小鼠肝脏脂质沉积和肝胰岛素敏感性的影响.方法 雄性C57BL/J6小鼠分为对照组、高果糖组和氧化苦参碱组(自高果糖喂养第4周后给予氧化苦参碱40 mg/kg),喂养8 w后对小鼠行腹膜下葡萄糖耐量试验(ipGTT),处死小鼠后测定各组空腹血糖、血胰岛素及肝脏甘油三酯(TG)含量,通过比较各组小鼠注射胰岛素后肝脏的磷酸化Akt/总Akt (p-Akt/t-Akt)和磷酸化GSK-3α/β/总GSK-3 α/β(p-GSK-3 α/β/t-GSK-3α/β)表达的比值变化评估肝脏胰岛素敏感性.结果 与对照组相比,高果糖组的血葡萄糖、血胰岛素、ipGTT曲线下面积及肝TG均显著增加(均P＜0.01);氧化苦参碱干预组的血葡萄糖、血胰岛素、葡萄糖耐量试验曲线下面积及肝TG均较高果糖组减低(均P＜0.01);与对照组相比,高果糖组胰岛素注射肝内的p-Akt/t-Akt及p-GSK-3 α/β/t-GSK-3 α/β均显著降低(均P＜0.01),而氧化苦参碱组胰岛素注射后肝内的p-Akt/t-Akt及p-GSK-3β/t-GSK-3β较高果糖组显著升高(均P＜0.01).结论 慢性高果糖喂养可引起小鼠肝脏脂质沉积和肝胰岛素抵抗,氧化苦参碱治疗可改善高果糖喂养诱导的脂肪肝和肝胰岛素敏感性.     

内质网应激相关基因在2型糖尿病合并脂肪肝小鼠肝脏中的表达变化

目的探讨内质网应激(ERS)在高脂饮食2型糖尿病转基因MKR小鼠脂肪肝发生中的作用。方法高脂饲料诱发MKR鼠形成脂肪肝,观察肝脏形态变化,检测肝脏甘油三酯和脂肪酸水平,RT-PCR检测小鼠肝脏内质网应激相关基因mRNA表达变化。结果与正常小鼠比较,MKR组小鼠肝脏GRP78、XBP1、FAS、ACC-α、GSK3βmRNA表达水平升高(P0.05);与MKR小鼠比较,高脂饮食MKR小鼠肝脏甘油三酯(TG)和脂肪酸(FFA)水平显著升高(P0.01),肝脏GRP78、XBP1、CHOP、SREBP1c、FAS、ACC-α、GSK3β和EDEM1基因mRNA表达水平均增加(P0.01),而Apo B100 mRNA表达水平降低(P0.01)。结论 ERS参与调节肝脏脂质及Apo B100的代谢过程,在转基因2型糖尿病MKR鼠脂肪肝形成中发挥重要作用。     

果糖联合高脂饮食对金黄地鼠糖脂代谢的影响

目的通过果糖或葡萄糖联合高脂饮食喂养叙利亚金黄地鼠,比较不同饮食成分喂养对地鼠糖脂代谢的不同影响。方法将金黄地鼠随机分成正常对照组（NC）、高脂组（HF）、果糖高脂组（FRU＋HF）、葡萄糖高脂组（Glu＋HF）,喂养12周,测定体重、血脂、血糖、胰岛素、肝指数,观察肝脏及胰腺形态及组织学变化。结果各高脂喂养组地鼠与对照组比较TC、TG、血糖、LDL-C、HDL-C、肝指数升高,胰岛素水平降低,肝脂肪样变,胰岛增生,其中FRU＋HF组TG、胰岛素敏感性降低,肝指数升高,肝及胰岛病理变化更明显（P〈0．05）。结论果糖高脂喂养的金黄地鼠模型特点为TG显著增高、糖耐量减低、胰岛素抵抗及脂肪肝,更适合作为现代人高果糖高脂饮食导致糖脂代谢紊乱的研究模型。     

有氧运动联合KGM对高脂膳食大鼠胰岛素抵抗形成中肝脏Adiponectin/PPARα通路的影响

目的探讨胰岛素抵抗(IR)形成及其运动和KGM干预的机制。方法将6周龄50只雄性SD大鼠随机分为五组:对照组(C组)、高脂饮食组(HF组)、高脂饮食+运动组(HE组)、高脂饮食+葡甘聚糖组(HK组)、高脂饮食+运动训练+葡甘聚糖组(HEK级)。同时将HE、HK、HEK分别进行11 w无负重游泳训练。11 w后测定大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、肝脏胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、脂联素(APN)、APN受体2(AdipoR2)、过氧化物增殖物激活受体α(PPARα)的蛋白含量。结果①HF组大鼠与C组相比,FPG、FINS含量以及胰岛素抵抗指数(HOMAIR)显著升高。②有氧运动和(或)KGM可以降低高脂膳食大鼠FPG水平、FINS以及HOMA-IR,并能显著降低肝脏中TG和TC含量。③与C组相比,HF组大鼠肝脏APN、PPARa含量显著降低,而HF组肝脏AdipoR2含量却升高,而通过双因素方差分析可知,有氧运动和(或)KGM可以显著增加肝脏APN含量和PPARα含量,降低肝脏AdipoR2含量。结论①11 w的高脂饮食可以诱导大鼠IR的形成,而高脂膳食引起的血脂代谢紊乱可能是引起IR产生的重要原因。②有氧运动或补充KGM可能通过改善高脂膳食大鼠肝脏Adiponectin/PPARα信号通路来调节血脂代谢,从而有效预防高脂膳食大鼠IR的形成。同时,有氧运动联合补充KGM对改善高脂大鼠肝脏Adiponectin/PPARα具有交互作用。     

高脂喂养的胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B mRNA表达的改变

目的研究高脂饮食喂养的胰岛素抵抗(IR)大鼠胰岛素敏感性及骨骼肌中蛋白激酶B(PKB)mRNA表达改变。方法 70只大鼠随机分为正常对照组和高脂饮食组,高脂饮食组采用高脂喂养的方法建立IR大鼠模型,用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验测定葡萄糖输注率(GIR),同时测定各组大鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标的水平,实时荧光定量RT-PCR测定大鼠骨骼肌PKB mRNA表达。结果①高脂喂养4 w后,高脂组FPG、FINS、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较正常对照组显著升高,而胰岛素敏感指数(ISI)下降(P<0.05),GIR显著低于正常对照组(P<0.01),说明高脂组存在IR,IR模型制造成功。②与正常对照组相比高脂组PKB mRNA表达明显减弱(P<0.05)。结论高脂饮食喂养的IR大鼠IR的产生与骨骼肌胰岛素刺激PKB表达明显降低有关。     

左归降糖清肝方对小鼠糖尿病合并脂肪肝脂代谢相关基因mRNA表达的影响

目的 探讨以滋阴益气、清热利湿、化痰消瘀组方的左归降糖清肝方对高脂饮食2型糖尿病(T2DM)转基因MKR小鼠脂肪肝发生中脂代谢相关基因mRNA表达的影响.方法 30只MKR小鼠随机分为MKR组、MKR高脂组和左归降糖清肝方组,左归降糖清肝方干预治疗高脂饮食诱发脂肪肝的MKR鼠4w;观察各组小鼠肝脏形态,RT-PCR检测小鼠肝脏脂代谢相关基因mRNA表达变化.结果 ①MKR高脂组较MKR组小鼠肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC-α)、脂肪酸合酶(FAS)和内质网甘露糖苷酶样蛋白1(EDEM1)的mRNA表达增加,apoB100 mRNA表达降低;②左归降糖清肝方降低高脂饮食MKR小鼠肝脏ACC-α、FAS和EDEMl的mRNA表达,增加apoB100mRNA的表达.结论 左归降糖清肝方能通过调节肝脏脂代谢相关基因mRNA表达,缓解肝脏脂肪性变.     

Vaspin对高脂喂养小鼠肝脏脂质聚集的影响

目的探究脂肪细胞因子Vaspin表达上调对高脂喂养小鼠肝脏脂肪聚集的影响。方法 48只鼠龄7 w的雄性小鼠随机分为普食对照组(NC),普食Vaspin组(NV),高脂对照组(HC)和高脂Vaspin组(HV)各12只。各组均喂养16 w。NV、HV组于14 w末腹腔注射小鼠源性Vaspin重组蛋白(2 mg·kg~(-1)·d~(-1)),共2 w;NC、HC组腹腔注射等剂量无菌生理盐水。16 w后取小鼠血浆和肝脏样本,测定空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(FIns)、血脂水平及血浆Vaspin浓度变化;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测各组肝脏组织脂肪含量、Vaspin mRNA及蛋白、三酰甘油(TG)、代谢相关基因脂肪酸合成酶(FAS)、肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT)~(-1)及激素敏感性脂肪酶(HSL)的mRNA水平的变化。结果与NC组相比,HC组体质量、FBG、PIns、TG、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、血浆Vaspin、TC水平及肝脏组织脂肪合成关键基因FAS及ACC mRNA表达均显著升高(均P0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及脂肪氧化分解关键基因CPT~(-1)及HSL的mRNA水平均显著下降(P0.05或P0.01)。NV组与HV组相比,肝脏Vaspin的mRNA水平均显著升高(均P0.01)。与HC组相比,HV组体质量、FBG、FIns、TG、TC、LDL-C水平、肝脏脂肪含量及肝脏组织脂肪合成关键关键基因FAS及ACC mRNA表达均明显下降;而血浆Vaspin、肝脏Vaspin水平、血浆HDL-C、脂肪氧化分解关键基因CPT~(-1)及HSL的mRNA水平均显著升高(P0.05或P0.01)。结论Vaspin能够抑制高脂喂养小鼠肝脏脂肪聚集,其调控机制可能与抑制肝脏脂肪合成而促进脂肪氧化分解相关。     

代谢综合征小鼠肝脏改变及肝脏清道夫受体B1的表达

目的　探讨代谢综合征小鼠肝脏改变及肝脏清道夫受体B1 (SR B1 )表达。方法　正常饮食C57BL/ 6J小鼠 1 0只 (对照组 ) ;进高脂高糖食 8w 5只 (实验组 )和 1 6w 1 0只 (实验组 )。测定血脂、血清胰岛素 (INS)及空腹血糖、肝功、肝脏重量、腹部瘦肉及瘦肉含量 ,肝脏脂质含量及SR B1蛋白表达。并做肝脏病理检查。结果　①实验B组小鼠腹部脂肪量显著高于对照组 (P <0 0 1 )。②实验B组的小鼠血清甘油三酯 (TG)、空腹血糖 (FBG)明显高于对照组 (P <0 0 5) ,胰岛素高于对照组 ,但无显著性 (P >0 0 5)。③实验组小鼠血清TP、ALB及A/G低于对照组 ,其中实验B组小鼠ALB及A/G有显著差异 (P <0 0 5)。血清ALT、ALP及AST高于对照组 ,其中实验B组小鼠ALP有显著差异 (P <0 0 5)。④实验组小鼠肝脏有明显脂肪变性 ,B组重于A组。实验组小鼠肝脏的TC和TG含量显著高于对照组 ,实验B组小鼠达到正常的 2倍以上。⑤实验组小鼠肝脏SB B1表达高于对照组 ,B组强于A组。结论　高脂高糖食C57BL/ 6J小鼠可作为代谢综合征动物模型 ,其存在脂肪肝 ,肝脏的SR B1蛋白表达量高于正常饮食小鼠 ,可能其参与脂肪肝的形成。     

高脂、高果糖饲料喂养大鼠骨骼肌脂质转运酶类的表达变化

目的观察高脂、高果糖喂养大鼠骨骼肌内甘油三酯含量及脂质转运相关酶类表达变化,探讨两种不同饮食导致肌内脂质沉积的机制。方法 Wistar雄性大鼠分为对照组、高脂组及高果糖组,测定各组大鼠空腹血糖、血胰岛素、血甘油三酯(TG)、骨骼肌TG及肌细胞内长链脂酰辅酶A(LCACoAs)的含量,正常葡萄糖高胰岛素钳夹技术测定葡萄糖输注率(G IR),并测定骨骼肌脂蛋白酯酶(LPL)、脂肪酸转位酶(FAT/CD36)的蛋白表达。结果与对照组相比,高脂组、高果糖组的血葡萄糖、血胰岛素浓度、HOMA指数及GIR明显增高,高脂组骨骼肌TG含量明显增高,高脂组、高果糖组骨骼肌LCACoAs均明显增高,且与HOMA指数呈正相关,高脂组、高果糖组LPL、FAT/CD36表达均增加。结论高脂饮食和高果糖饮食均可引起机体的胰岛素抵抗及骨骼肌内脂质堆积,肌内脂肪堆积与脂质转运相关酶类LPL、FAT/CD36表达增加有关。     

高脂喂养对ApoE-/-小鼠脂肪细胞因子的影响

目的 探讨高脂诱导胰岛素抵抗(IR)对ApoE-/-小鼠内脂素(Visfatin)和脂联素的影响.方法 健康雄性ApoE-/-小鼠,随机分为普食组(NF)和高脂喂养组(HF),共喂养16 w.采用以3-H3葡萄糖为示踪剂的高胰岛素-正糖钳夹评价糖代谢变化.用实时荧光定量PCR测定肝和脂肪组织细胞因子Visfatin和脂联素mRNA表达水平,采用Western印迹法测定肝、脂肪组织及血浆Visfatin蛋白水平.结果 HF组小鼠空腹血糖、血浆胰岛素、胆固醇、游离脂肪酸、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高(均P<0.01).胰岛素钳夹术中,HF组葡萄糖输注率(GIR)明显低于NF组,肝糖生成率(HGP)明显高于NF组(均P<0.01).HF组小鼠肝脏Visfatin和脂联素mRNA表达水平以及脂肪组织Visfatin mRNA表达水平明显低于NF组(P<0.01和P<0.05);HF组血浆、肝脏和脂肪组织Visfatin蛋白表达也显著降低均(均P<0.01).结论 高脂喂养的ApoE-/-小鼠具备明显的IR基本特征,可能与脂肪细胞因子的改变有关.     

非酒精性脂肪性肝病大鼠内生性乙醇和肝组织乙醇代谢相关酶的变化

目的观察高脂饮食和高果糖饮食对大鼠肝脏病理、内生性乙醇、乙醇代谢酶的影响。方法将SD大鼠18只随机分为正常组(n=6),予以普通饲料喂养,高果糖组(n=6)接受普通饲料和含20%果糖水喂养,高脂组(n=6)接受高脂饲料喂养。造模16 w后,取肝组织进行非酒精性脂肪性肝病活动性评分(NAS);采用Biovison试剂盒检测门静脉血乙醇水平;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠肝组织乙醇脱氢酶(ADH1)和乙醛脱氢酶(ALDH2)m RNA水平;采用Western blot法测定肝组织ADH1和ALDH2蛋白表达水平;使用乙醇脱氢酶活性试剂盒测定肝组织匀浆乙醇脱氢酶活性。结果在16 w末,高果糖组大鼠肝组织表现为脂肪变性,高脂组大鼠肝组织主要表现为NASH;高脂组大鼠NAS评分为5.40±0.32,显著高于对照组【(1.10±0.25),P0.05】和高果糖组【(2.94±0.40),P0.05】;高脂组大鼠血清内生性乙醇水平【(1.30±0.15)nmol/μL】显著高于正常组【(1.00±0.10)nmol/μL,P0.05)】和高果糖组【(1.04±0.23)nmol/μL,P0.05)】;高脂组大鼠ADH1 m RNA水平显著高于正常组((1.30倍,P0.05)和高果糖组(1.36倍,P0.05);高脂组大鼠ALDH2m RNA水平显著高于正常组(1.55倍,P0.05)和高果糖组(1.44倍,P0.05);高脂组大鼠ADH1蛋白表达显著高于正常组(2.56倍,P0.05)和高果糖组(2.52倍,P0.05);高脂组大鼠ALDH2蛋白表达显著高于正常组(1.41倍,P0.05)和高果糖组(1.57倍,P0.05);高脂组大鼠肝脏乙醇脱氢酶活性为(175±28)μ/L,显著高于正常组【(72±13)μ/L,P0.05)】和高果糖组【(78±9)μ/L,P0.05)】。结论高脂饮食造模大鼠内生性乙醇浓度显著升高,乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶蛋白水平升高,乙醇脱氢酶活性显著升高。     

高脂饮食对老年大鼠氧化应激及脂质代谢的影响

目的探讨高脂饮食对老年大鼠氧化应激及其脂质代谢的影响。方法将4～5月龄(青年)和20～22月龄(老年)大鼠随机分为老年对照组(NC2)和老年高脂组(HF2);青年对照组(NC1)和青年高脂组(HF1),分别用不同饮食喂养大鼠8w,测定大鼠血清空腹血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA),血清及肝组织内超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSM)含量。结果老年对照组与青年对照组相比体重(BM)、TC、TG、FFA、FPG、FINS、MDA升高(P≤0.05或P≤0.01),SOD、GSM、ISI降低;不论是老年大鼠还是青年大鼠,高脂组胰岛素敏感指数低于对照组(P≤0.01),TG、TC、FFA升高,血清及肝组织中SOD的活力减低,GSM含量降低,而MDA的含量升高(P≤0.05或P≤0.01)。结论健康大鼠随月龄增加血脂水平升高,氧化应激反应性降低;相同的高脂饮食情况下老年大鼠对脂代谢的调节能力下降,出现血脂紊乱。     

脂联素通过LKB1途径激活腺苷酸活化蛋白激酶

目的 探讨脂联素是否通过LKB1途径激活骨骼肌及肝脏中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK).方法 将28只6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠分为普通饮食组(NC组,n=15)和高脂饮食组(HF组,n=13).喂养16 周后,取空腹静脉血测定血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及脂联素.采用Western印迹法测定各组大鼠骨骼肌及肝脏组织中AMPKα、磷酸化的AMPKcα和LKB1蛋白的表达.将原代培养的骨骼肌细胞及肝细胞分别予以脂联素和根赤壳菌素干预,免疫荧光技术测定各组细胞中AMPKα、磷酸化AMPKα和LKB1蛋白的表达.结果 与NC组比较,HF组大鼠体重、FFA、TG、FPG、FINS均升高(均P＜0.05),脂联素水平降低(P＜0.05).骨骼肌及肝组织巾AMPKα磷酸化和LKB1蛋白表达水平降低(均P＜0.05).原代培养大鼠骨骼肌细胞及肝细胞中脂联素显著增加AMPKα磷酸化及LKB1表达水平(均P＜0.05).加入根赤壳菌素表达明显降低(均P＜0.05).结论 脂联素在大鼠骨骼肌和肝脏组织可能通过LKB1途径激活AMPK.     

二甲双胍对糖尿病大鼠血糖、血脂水平及骨骼肌GLUT4表达的影响

雄性SD大鼠55只,分别予普通饲料和高糖高脂饲料(二甲双胍组)喂养。高糖高脂饲料饲养联合STZ(40 mg/kg)构建糖尿病大鼠模型。二甲双胍组予灌胃4周后检测血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂的水平变化,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。留取各组大鼠骨骼肌,RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达,免疫组化法检测GLUT4蛋白表达。结果与正常对照组比较,糖尿病大鼠模型FPG、FINS、TG、HOMA-IR显著增高(P 0. 05),骨骼肌GLUT4表达显著减少(P0. 05);与模型组比较,二甲双胍组FPG、FINS、HOMA-IR显著降低(P 0. 05),骨骼肌GLUT4表达显著增加(P 0. 05)。结论二甲双胍可降低糖尿病模型大鼠血糖。     

电针对高脂喂养大鼠主动脉内皮细胞JNK蛋白的影响

目的观察电针对高脂喂养大鼠主动脉内皮细胞c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组8只。空白组予普通饲料喂养,模型组与电针组予高脂饲料喂养。造模8 w后,空白组、模型组继续如前喂养不进行干预,电针组予针刺双侧内关、三阴交、足三里及肾俞,双侧足三里及三阴交加电。干预4 w后,用葡萄糖氧化酶法、ELISA及Western印迹检测并比较各组大鼠空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FPG)、稳态模型评价的胰岛素抵抗(IR)指数(HOMA-IR)以及主动脉内皮细胞JNK蛋白的表达及其磷酸化水平。结果与模型组比较,电针组FPG、FINS、HOMA-IR均显著降低(P0.01),而与空白组比较差异不显著(P0.01);与模型组相比较,电针组的JNK蛋白表达及其磷酸化水平显著降低(P0.01),与空白组比较差异不显著(P0.01)。结论电针治疗能调节血管内皮细胞JNK蛋白表达及其磷酸化水平,使其降至正常水平,从而改善IR大鼠的IR状态,增强IR大鼠胰岛素的敏感性。     

桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α和腺苷酸活化蛋白激酶α2蛋白表达的影响

目的探讨桑叶总黄酮对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α2蛋白表达的影响及机制。方法建立高脂饲料喂养且用链脲佐菌素诱导T2DM雄性Wistar大鼠模型,将模型大鼠随机分为5组:模型组、二甲双胍组(100 mg/kg灌胃)、桑叶总黄酮组(200,100,50 mg/kg灌胃),同时设立正常对照组。4 w后检测大鼠空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)水平,Western印迹检测肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达。结果桑叶总黄酮能降低T2DM大鼠的FPG、FINS水平,Western印迹显示模型组大鼠肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达较正常对照组均明显下降(P<0.01)。经桑叶总黄酮干预治疗后,AMPKα2蛋白表达较模型组显著增加(P<0.01),PPARα蛋白水平改变不明显(P>0.05)。结论桑叶总黄酮对T2DM大鼠有一定的治疗作用,可能与其增加大鼠肝脏AMPKα2蛋白表达有关。