系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Foxp3的表达及意义

摘要 目的：探讨转录因子Foxp3在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平及其在SLE发病中的作用及意义。方法：选择SLE活动性、SLE非活动性患者和正常对照，运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测SLE患者和正常对照组外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平。结果：活动期SLE组Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照（P<0.05），SLE非活动性患者Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常对照（P<0.05）。结论：SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平显著低于正常对照，随着SLE患者病情的好转，Foxp3mRNA和蛋白的表达水平逐渐增高。提示Foxp3与SLE疾病的活动性呈一定的线性相关关系。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的表达。方法用密度梯度离心法分离COPD患者和健康人外周血单个核细胞后,提取总RNA并逆转录为cDNA,用实时定量PCR检测TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的拷贝数。结果COPD患者外周血单个核细胞的TLR3和TLR9mRNA表达较正常健康人明显增高(P<0.05),而TLR7和TLR8mRNA的表达在COPD患者和正常健康人之间却无显著差异(P>0.05)。在COPD患者中,急性期和稳定期患者的TLR3、TLR7、TLR8和TLR9无显著差异(P>0.05)。结论TLR3和TLR9的升高可能是COPD患者对病毒敏感性增高的一个重要机制。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中论著TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达.方法 用密度梯度离心法分离COPD患者和健康人外周血单个核细胞后,提取总RNA并逆转录为cDNA,用实时定量PCR检测TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的拷贝数.结果 COPD患者外周血单个核细胞的TLR3和TLR9 mRNA表达较正常健康人明显增高(P＜0.05),而TLR7和TLR8 mRNA的表达在COPD患者和正常健康人之间却无显著差异(P＞0.05).在COPD患者中,急性期和稳定期患者的TLR3、TLR7、TLR8和TLR9无显著差异(P＞0.05). 结论TLR3和TLR9的升高可能是COPD患者对病毒敏感性增高的一个重要机制.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Brn-3a mRNA表达水平的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中Brn-3a mRNA 表达及其与疾病活动性的关系.方法 以β-actin为内参照,建立逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法,在Light Cycler Real time PCR检测仪上检测92例SLE患者(活动期46例,缓解期46例)、其他结缔组织病(CTD)患者30例(疾病对照组)、健康体检者30例(正常对照组)外周血单个核细胞(PBMCs)中Brn-3a mRNA 的表达水平和含量.以ΔCt=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)来比较基因表达水平的高低.结果 活动期SLE患者Brn-3a mRNA表达水平明显高于缓解期SLE患者(P<0.01);活动期SLE患者Brn-3a mRNA表达水平明显高于正常对照组与疾病对照组(P<0.01);缓解期SLE患者Brn-3a mRNA表达水平与正常人及疾病对照组差异无统计学显著性意义(P>0.05).结论 活动期SLE患者Brn-3a mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组和疾病缓解期,提示Brn-3a的表达与SLE的发生发展存在一定关联性,可能参与了SLE的发病过程并与疾病的活动性有关.     

环磷酰胺和环孢素A在体外对系统性红斑狼疮患者PBMC产生IP-10的作用

目的探讨环磷酰胺(CTX)和环孢素A(CsA)在体外对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)干扰素-γ诱生蛋白-10(IP-10)分泌水平的影响。方法12名正常对照和20例不同SLE活动性评分(SLEDAI)的SLE患者其PBMC在体外与CTX和CsA共温48 h后,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IP-10和干扰素-γ(IFN-γ)水平。同时还检测了36例SLE和12名正常对照的血清IP-10水平。结果随着SLE-DAI增大,IP-10和IFN-γ浓度相应升高,且两者之间的CsA 植物血凝素(PHA)、PHA及无药对照具有相关性(P<0.05)。在SLEDAI≤10分时,CsA抑制PBMC分泌IP-10,而CTX促进PBMC合成和分泌IP-10。在SLEDAI>10分时,与CTX明显促进SLE患者PBMC分泌IP-10不同,CsA仅轻度刺激PBMC分泌IP-10。SLE组与正常对照组血清IP-10水平分别为(179.46±14.40)pg/m l和(53.37±9.58)pg/m l,两组差异有显著性(P<0.05)。结论CsA抑制SLE患者PBMC合成和分泌IP-10的作用明显优于CTX。SLE患者血清IP-10的浓度与SLEDAI无显著相关性。     

系统性红斑狼疮患者外周血滤泡辅助性T细胞与CXCR5及其配体CXCL13基因表达水平的研究

目的检测滤泡辅助性T细胞(Tfh)的CXCR5、CXCL13在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达,探讨其与SLE的发生及病情活动性的关系。方法 90例SLE患者和60例健康对照者,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR5+PD-1+/CD4+T细胞(Tfh)比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中CXCR5、CXCL13浓度,实时荧光定量RT-PCR检测PBMC中CXCR5 mRNA、CXCL13 mRNA的表达。结果活动组SLE患者外周血Tfh比例(11.01%±1.31%)、血清中CXCR5、CXCL13浓度[分别为(368.21±171.56)pg/ml、(387.59±213.54)pg/ml]和CXCR5 mRNA、CXCL13 mRNA(分别为2.15±0.63、1.71±0.37)的表达均高于健康对照组[分别为1.78%±0.11%,(210.6±100.17)pg/ml,(149.45±104.52)pg/ml,0.53±0.22,0.46±0.13;均P<0.05];SLE患者外周血Tfh比例与CXCR5 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.68,P<0.01),与SLEDAI亦呈正相关(r=0.67,P<0.01),其中CXCR5 mRNA的表达水平与SLEDAI呈高度正相关(r=0.82,P<0.01)。SLE患者外周血Tfh比例与CXCL13 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.73,P<0.01),与SLEDAI亦呈正相关(r=0.87,P<0.01)。结论 SLE患者外周血中Tfh细胞比例、CXCR5、CXCL13明显升高,可能在其发病过程中起了一定的作用。     

γδT细胞对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞凋亡和CD69表达的影响

目的:研究γδT细胞对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞凋亡和CD69表达的影响,探索其在SLE发病中的调控作用。方法:采用单克隆抗体固相法,对8例正常人外周血γδT细胞进行体外扩增建系,并进行细胞纯度和表型鉴定;利用不同数量比的γδT细胞与15例SLE患者外周血单个核细胞进行体外共同培养3d,流式细胞仪检测单个核细胞凋亡和CD69表达的情况。结果:建立了正常人外周血γδT细胞系,其平均纯度为(80.3±9.2)%,细胞表型以γδ2[(86.1±8.0)%]和γγ9[(83.3±6.3)%]为主;SLE患者外周血单个核细胞的凋亡率在1∶100组[(2.48±3.86)%]和1∶50组[(1.17±1.38)%]均低于对照组[(3.77±3.96)%](P<0.05、P<0.01);γδT细胞对活动组和稳定组SLE患者外周血单个核细胞的凋亡均有明显的抑制作用(均P<0.05),但对两组之间的抑制强度无明显差异(P>0.05);CD69阳性率对照组、1∶100组和1∶50组之间差异无统计学意义(P<0.05)。结论:γδT细胞体外能够抑制SLE患者外周血单个核细胞的凋亡,且这种抑制作用与狼疮的活动性无关,与外周血细胞的活化无关。     

急性髓系白血病患者外周血单个核细胞Toll样受体9以及血清肿瘤坏死因子和凋亡基因FAS的表达

背景:Toll样受体9(TLR9)、肿瘤坏死因子a、Fas可能共同参与白血病的发生发展过程.目的:测定TLR9在急性髓系白血病患者外周血单个核细胞中的表达及血清肿瘤坏死因子α、Fas水平.方法:从急性髓系白血病患者与正常对照组中分离出外周血单个核细胞,采用反转录-聚合酶链反应法检测外周血单个核细胞中TLR9 mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附试验法检测血清肿瘤坏死因子α、Fas水平.结果与结论:在急性髓系白血病患者初治组和难治复发组中,外周血单个核细胞中TLR9 mRNA表达高于正常对照组(P < 0.01),化疗后完全缓解组与正常对照组差异无显著性意义(P > 0.05);各病例组血清肿瘤坏死因子α、Fas水平显著高于正常对照组(P < 0.01).TLR9 mRNA的表达与血清肿瘤坏死因子α、Fas水平均呈正相关.     

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞TLR6表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答相关性研究

目的探讨TLR6在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)的表达及其与Th1、Th2和Th17细胞免疫应答的相关性,探讨TLR6与HSP发病机制的关系。方法选取我院住院的急性期HSP患儿42例为研究对象,另选取健康儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR6蛋白表达,实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞MyD88mRNA的基因相对表达量,ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-17水平。结果 (1)HSP患儿外周血单个核细胞TLR6蛋白表达(TLR6阳性细胞百分率及平均荧光强度)显著高于正常对照组(t'=9.40,P<0.01;t'=10.49,P<0.01),HSP组外周血单个核细胞MyD88 mRNA相对表达量显著明显高于正常对照组(t'=2.46,P<0.01)。(2)HSP组血浆IL-4水平显著高于对照组(t'=3.44,P<0.01),IFN-γ水平高于对照组(t'=2.44,P<0.05),IFN-γ/IL-4比值低于对照组(t'=2.27,P<0.05),IL-17水平显著高于对照组(t'=2.64,P<0.01)。(3)HSP组单个核细胞TLR6蛋白表达与MyD88 mRNA呈显著正相关(r=0.79;P<0.01);与血浆IL-4水平呈显著正相关(r=0.69,P<0.01);与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(r=-0.38,P<0.05);与IL-17水平呈正相关(r=0.36,P<0.05);与血浆IFN-γ水平不存在相关性(P>0.05)。结论 TLR6活化可能参与了HSP的免疫发病机制;HSP患儿体内存在Th1/Th2失衡,Th17异常活化,活化的TLR6可能通过上调Th2、Th17免疫应答介导HSP的免疫发病机制。     

系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞toll样受体7mRNA及α干扰素mRNA表达的水平及意义

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者与正常人外周血单一核细胞toll样受体7(TLR7) mRNA及α干扰素(IFN-α)mRNA表达的水平及其意义.方法:运用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量方法检测35例SLE患者(其中活动期21例,稳定期14例)外周血单一核细胞TLR7、IFN-αmRNA表达水平,并与正常人20例作对照.结果:SLE患者外周血单一核细胞 TLR7 mRNA及IFN-α mRNA表达水平活动期较正常人和稳定期均有显著升高(均P＜0.01),但稳定期与正常人相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:SLE患者活动期TLR7及IFN-α mRNA表达水平升高,两者成正相关;TLR7及IFN-α在SLE的发病中可能起一定的作用.     

系统性红斑狼疮患者干扰素诱导基因IFITM1、IFITM2和IFITM3表达的研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中3个干扰素(IFN)诱导基因(IFITM1,IF-ITM2和IFITM3)的表达及其与SLE疾病活动度的相关性。方法运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测30例SLE患者与25名健康对照者的IFITM1、IFITM2、IFITM3mRNA表达水平,并且分析它们与补体C3、C4、抗dsDNA抗体及SLE疾病活动指数(SLEDAI)积分的相关性。结果 (1)SLE组与正常对照组相比,IFITM1、IFITM2、IFITM3mRNA表达显著增高(分别为P<0.0001,P=0.003,P=0.002);(2)IFITM1、IFITM2、IFITM3mRNA表达水平之间呈显著正相关;(3)SLE组IFITMl、IF-ITM3mRNA表达水平均与补体C3、C4呈显著负相关(r<-0.5,P<0.05),与dsDNA、SLEDAI积分不相关。IFITM2与补体C3、C4、dsDNA及SLEDAI积分均无相关性。结论 SLE患者IFITM1、IFITM2、IFITM3的表达水平在SLE患者中显著增高,并且IFITMl、IFITM3与补体C3、C4呈显著负相关,对SLE患者的诊断和病情评估可能有一定价值。     

系统性红斑狼疮患者巨细胞病毒抗体的检测及临床意义

目的 探讨中国南方系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中巨细胞病毒(CMV)LgG和IgM抗体的表达及CMV与SLE的相关性.方法 SLE患者106例,92名正常对照人群来源于我院体检门诊,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测其CMV-IgG和CMV-IgM抗体,CMV-IgM抗体阳性者再利用实时定量PCR法检测外周血单个核细胞中的CMV载量.同时分析CMV抗体与SLE患者的实验室指标如抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗心磷脂抗体、补体C_3及疾病活动指数(SLEDAI)的相关性.结果 106例SLE患者中,105例CMV-IgG抗体阳性,21例(19.81%)CMV-IgM抗体阳性;92名健康对照者中91名CMV-IgG抗体阳性,1名(1.09%)CMV-IgM抗体阳性;SLE患者CMV-IgM抗体阳性率明显高于对照组(χ~2=17.484,P<0.01);CMV-IgM抗体阳性SLE患者外周血单个核细胞未检测到CMV载量.CMV-IgM抗体阳性与阴性患者抗dsD-NA抗体、抗心磷脂抗体、补体C_3阳性率[66.67%(14/21)与41.18%(35/85)、33.33%(7/21)与10.59%(9/85)、66.67%(14/21)与34.12%(29/85)]差异有统计学意义(χ~2值分别为4.402、6.798、7.400,P均<0.05);活动性SLE患者的CMV-IgM抗体阳性率高于非活动性SLE患者[27.12%(16/59)与10.64%(5/47),χ~2=4.472,P<0.05].结论 中国南方人群普遍感染CMV,但CMV的重新活化与SLE活动有关,控制CMV重新活化有可能达到稳定SLE病情的作用.     

B细胞成熟抗原在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的检测B细胞成熟抗原（BCMA）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达水平,探讨BCMA在SLE发病中的意义。方法纳入2006年1-11月收治的36例SLE患者,同期17例健康志愿者作为对照组,采用半定量RT-PCR法检测外周血单个核细胞中BCMA mRNA的表达,并与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关性分析。结果 SLE患者组BCMA mRNA表达水平（0.598±0.230）均明显高于正常对照组（0.411±0.309）（P〈0.05）。SLE患者BCMA mRNA表达水平与SLEDAI评分无相关性（P=0.590）。结论 SLE患者BCMA mRNA表达水平的增高,可能在SLE的发病机制中具有一定的作用。     

急性髓系白血病患者外周血单个核细胞Toll样受体9以及血清肿瘤坏死因子和凋亡基因FAS的表达

背景：Toll样受体9（TLR9）、肿瘤坏死因子a、Fas可能共同参与白血病的发生发展过程。目的：测定TLR9在急性髓系白血病患者外周血单个核细胞中的表达及血清肿瘤坏死因子α、Fas水平。方法：从急性髓系白血病患者与正常对照组中分离出外周血单个核细胞,采用反转录-聚合酶链反应法检测外周血单个核细胞中TLR9mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附试验法检测血清肿瘤坏死因子α、Fas水平。结果与结论：在急性髓系白血病患者初治组和难治复发组中,外周血单个核细胞中TLR9mRNA表达高于正常对照组（P〈0.01）,化疗后完全缓解组与正常对照组差异无显著性意义（P〉0.05）;各病例组血清肿瘤坏死因子α、Fas水平显著高于正常对照组（P〈0.01）。TLR9mRNA的表达与血清肿瘤坏死因子α、Fas水平均呈正相关。     

ST段抬高型心肌梗死患者入院血糖与外周血单个核细胞TLR4表达和活性的关系

目的研究ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者入院血糖与外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体4(TLR4)表达和活性的关系,探讨入院血糖影响STEMI患者住院临床预后的可能机制。方法 142例STEMI患者纳入本研究,检测入院血糖、PBMCs TLR4及白细胞介素-6(IL-6)m RNA表达、血IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。根据入院血糖水平分为高血糖组(入院血糖≥7.8 mmol/L)和正常血糖组(入院血糖<7.8 mmol/L)。比较两组患者临床特征、主要心脏不良事件、PBMCs TLR4表达和活性的差异,分析入院血糖与PBMCs TLR4表达和活性的相关性。结果高血糖组年龄、糖尿病史、体质指数、心率、白细胞计数、入院血糖、肌钙蛋白I、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、血IL-6和TNF-α显著高于正常血糖组(P<0.05),舒张压和左心室射血分数显著低于正常血糖组(P<0.05)。高血糖组住院期间恶性心律失常、心力衰竭和死亡等主要心脏不良事件的发生率显著高于正常血糖组(P<0.05)。高血糖组PBMCs TLR4 m RNA及IL-6 m RNA表达水平显著高于正常血糖组(3.34±0.68 vs.1.68±0.55,P<0.05;2.89±0.47 vs.1.62±0.57,P<0.05)。Logistic回归分析显示,在所有入选的STEMI患者中,入院血糖是恶性心律失常、心力衰竭和死亡等主要心脏不良事件的独立危险因素(OR=1.976,95%CI:1.445~2.703,P<0.05;OR=2.117,95%CI:1.483~3.023,P<0.05;OR=2.317,95%CI:1.421~3.778,P<0.05)。Pearson相关性分析显示,入院血糖与PBMCs TLR4 m RNA、IL-6 m RNA表达水平呈正相关(r=0.577,0.527,P均<0.05)。结论急性STEMI入院高血糖患者住院期间主要心脏不良事件的发生率显著增加,急性STEMI患者入院血糖与PBMCs TLR4表达和活性显著正相关,急性STEMI患者入院高血糖可能通过增加单核细胞TLR4表达和活性导致心脏不良事件的发生。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17和CD4+CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子的检测及意义

目的 探讨SLE患者外周血Th17及CD4+ CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10的水平变化及意义.方法 选取2009-2010年河南省人民医院56例SLE患者(非活动期26例、活动期30例)及28名健康对照者.采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+ CDhigh25 Treg细胞水平;采用QRT-PCR检测RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10水平,并分析其与SLE的相关性.结果 SLE患者组外周血Th17细胞水平为(3.44±0.96)％,显著高于健康对照组的(2.42±0.52)％,差异有统计学意义(t=5.38,P=0.000).SLE患者组外周血CD4+CDhigh25Treg细胞水平为(1.32±0.57)％,显著低于健康对照组的(2.07±0.67)％,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.034).SLE患者的RORγt mRNA表达水平为(0.219±0.063),高于健康对照组的(0.087±0.045),差异有统计学意义(t=6.41,P=0.000);而SLE患者的Foxp3+ mRNA表达水平为(0.063±0.045),低于健康对照组的(0.128±0.056),差异有统计学意义(t=5.28,P=0.000).SLE患者组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为122.4(60.5～188.3)、167.2(128.7 ～871.4)、51.3(20.9 ～123.7)ng/L,高于健康对照组的27.1(18.1 ～86.2)、31.0(31.0～424.5)、33.5(16.4～54.1) ng/L,差异有统计学意义(Z值分别为3.83、4.54、1.87,P均＜0.05),TGF-β水平为31.0(31.0 ～168.6) ng/L,低于健康对照组的159.8(63.4～389.7)ng/L,差异有统计学意义(Z=4.87,P＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平与Th17细胞水平、SLEDAI积分、抗dsDNA抗体水平呈显著正相关(r=0.621、0.581、0.512,P＜0.05),与补体C3水平呈负相关(r=-0.543,P＜0.05).CD4+ CDhigh25Treg细胞与SLEDAI积分呈负相关(r=- 0.423,P＜0.05),与补体C3水平呈正相关(r=0.511,P＜0.05).结论 SLE患者Th17细胞数量增高,CD4+ CDhigh25 Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在SLE的发病机制中可能起到重要作用.     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中ISG15 mRNA表达水平的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中ISG15 mRNA表达及其与疾病活动性的关系.方法 采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方法,在Light Cycler Real time PCR检测仪上检测89例SLE患者(活动期50例、缓解期39例)、结缔组织病(CTD)患者34例(疾病对照组)、健康体检者35名(健康对照组)外周血PBMCs中ISG15 mRNA 的表达水平和含量.以ΔCt=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)来比较基因表达水平的变化.结果 活动期SLE患者ISG15 mRNA表达水平(ΔCt=2.04±1.07)明显高于缓解期SLE患者(ΔCt=5.48±1.72,t=11.572,P＜0.01);活动期SLE患者ISG15 mRNA表达水平(ΔCt=2.04±1.07)明显高于疾病对照组(ΔCt=5.90±1.72,t=12.69,P＜0.01)和正常对照组(ΔCt=5.66±1.63,t=12.359,P＜0.01);缓解期SLE患者ISG15 mRNA表达水平与正常人及疾病对照组的差异无显著性(P＞0.05).SLE患者PBMCs中 ISG15 mRNA的表达水平与SLE疾病活动评分指数(SLEDAI)评分及抗双链DNA抗体呈显著正相关(均P＜0.01),与补体C3、C4呈显著负相关(均P＜0.01).结论 活动期SLE患者ISG15 mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组和疾病缓解期,提示ISG15的表达可能参与了SLE的发病过程并与疾病的活动性显著相关.     

环磷酰胺和环孢素A在体外对系统性红斑狼疮患者PBMC产生IP-10的作用

目的探讨环磷酰胺(CTX)和环孢素A(CsA)在体外对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)干扰素-γ诱生蛋白-10(IP-10)分泌水平的影响.方法 12名正常对照和20例不同SLE活动性评分(SLEDAI)的SLE患者其PBMC在体外与CTX和CsA共温48 h后,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IP-10和干扰素-γ(IFN-γ)水平.同时还检测了36例SLE和12名正常对照的血清IP-10水平.结果随着SLEDAI增大,IP-10和IFN-γ浓度相应升高,且两者之间的CsA+植物血凝素(PHA)、PHA及无药对照具有相关性(P<0.05).在SLEDAI≤10分时,CsA抑制PBMC分泌IP-10,而CTX促进PBMC合成和分泌IP-10.在SLEDAI>10分时,与CTX明显促进SLE患者PBMC分泌IP-10不同,CsA仅轻度刺激PBMC分泌IP-10.SLE组与正常对照组血清IP-10水平分别为(179.46±14.40) pg/ml和(53.37±9.58) pg/ml,两组差异有显著性(P<0.05).结论 CsA抑制SLE患者PBMC合成和分泌IP-10的作用明显优于CTX.SLE患者血清IP-10的浓度与SLEDAI无显著相关性.     

狼疮性肾炎患者外周血OX40 mRNA/OX40L mRNA及抗C1q抗体的检测及其诊断效能评价

目的探讨狼疮性肾炎(LN)患者外周血OX40 m RNA/OX40L m RNA表达水平及抗C1q抗体水平,并对3项指标诊断LN的效能进行评价。方法选择40例LN患者、40例非LN患者和40名正常对照者,采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)测定外周血单个核细胞(PBMC)中OX40 m RNA、OX40L m RNA的表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗C1q抗体。同时,评估系统性红斑狼疮疾病活动度评分(SLEDAI)并检测抗ds DNA抗体、肌酐、补体等。结果 LN组PBMC中OX40 m RNA、OX40L m RNA的表达水平分别为(8±4)×106拷贝/μL和(4±3)×103拷贝/μL,显著高于非LN组[(4±3)×106拷贝/μL和(2±2)×103拷贝/μL]及正常对照组[(4±2)×106拷贝/μL和(2±1)×103拷贝/μL](P0.05)。LN组抗C1q抗体水平为(9.11±2.46)ng/m L,显著高于非LN组[(3.12±0.97)ng/m L]及正常对照组[(1.12±0.33)ng/m L](P0.05)。LN患者OX40 m RNA的表达水平与抗C1q抗体、肌酐及SLEDAI显著相关(r值分别为0.69、0.75、0.67,P0.01),OX40L m RNA的表达水平与抗C1q抗体显著相关(r=0.58,P0.01)。受试者工作特征(ROC)曲线分析表明,OX40 m RNA诊断LN的敏感性、特异性及曲线下面积(AUC)分别为0.933、0.733、0.918,均优于其他指标。结论外周血OX40 m RNA及抗C1q抗体水平与LN活动度相关,这2项指标在LN的发生、发展中可能起着一定作用。OX40 m RNA有望成为诊断和监测LN的良好指标。     

糖皮质激素对ITP初治患者T辅助细胞相关细胞因子基因表达的影响

本研究旨在探讨免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者中T辅助细胞(helper T cell,Th)细胞免疫状态以及其与治疗反应的关系。应用实时荧光定量RT-PCR方法检测20例初发ITP患者(男性8例,女性12例,中位年龄41.0岁)接受糖皮质激素治疗[泼尼松1mg/(kg.d)]前后以及20例正常对照者外周血单个核细胞中Th细胞相关基因(T-bet、IFN-γ、GATA-3、TGF-β、Foxp3、IL-2、IL-4)表达水平的变化。结果表明:治疗前ITP患者外周血单个核细胞中T-bet、IFN-γ、IL-2表达较正常对照明显升高,差异有显著统计学意义(p<0.01),治疗后患者T-bet、IFN-γ、IL-2表达较治疗前降低(p<0.05);治疗前Foxp3表达较正常无明显变化,治疗后Foxp3表达较治疗前升高(p<0.05)。治疗前患者TGF-β的表达与正常对照相比无明显差别,治疗后老年患者与年轻患者中呈现不同的变化模式,年龄<60岁患者治疗后TGF-β表达水平较治疗前降低(p<0.05),而年龄≥60岁患者TGF-β较治疗前升高。结论:ITP患者存在Th细胞亚群失衡,常规糖皮质激素治疗仍是针对初治IT...