香烟烟雾提取物致Th17/Treg的失衡在慢性阻塞性肺疾病发生发展中的作用与意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例及香烟烟雾提取物(CSE)对其的影响,探讨CSE对Th17细胞、Treg细胞的影响及Th17/Treg的平衡关系在COPD发生发展中的作用。方法随机收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者20例(A组),COPD稳定期患者20例(B组),吸烟肺功能正常者20例(C组),不吸烟肺功能正常者20例(D组)。抽取空腹静脉血制备单个核细胞悬液(PBMC),将每个试验对象的PBMC分为空白对照组和CSE干预组,采用流式细胞术检测所有试验对象对照组和干预组CD4+Th17细胞及CD4+Treg细胞各占CD4+T细胞的比例;ELISA法检测各组血浆中IL-17的浓度。结果 Th17/CD4+T细胞百分比对照组A组(5.33±0.66)高于B组(2.99±0.50)、C组(2.09±0.68)、D组(1.19±0.48)(P<0.001),CSE干预组较对照组升高(P<0.001);Treg/CD4+T细胞百分比对照组C组(5.88±0.52)高于D组(3.35±0.30)、B组(2.25±0.30)、A组(1.58±0.39)(P<0.001),CSE干预组较对照组升高(P<0.001);CD4+Th17细胞百分比对照组与CSE干预组差值A、B组高于C、D组(P<0.001),A组与B组之间差异无统计学意义(P=0.866),C组与D组之间差异无统计学意义(P=0.793);CD4+Treg细胞百分比对照组与CSE干预组差值C、D组高于B组、A组(P<0.001),C组与D组之间差异无统计学意义(P=0.756);外周血IL-17水平A组(145.22±5.50)高于B组(94.99±3.19)、C组(59.77±5.09)、D组(50.84±5.85)(P<0.001);COPD组血浆中IL-17的水平与外周血Th17细胞比例呈正相关(rA=0.524,rB=0.462);与FEV1/FVC值呈负相关(rA=-0.456,rB=-0.567);与FEV1/预计值%呈负相关(rA=-0.503,rB=-0.445)。结论 Th17与Treg比例的失衡可能是COPD的其中一个重要的发病机制;外周血IL-17水平与FEV1/FVC值、FEV1/预计值%呈负相关。     

维持性血液透析患者外周血Th17细胞与Treg表达水平的研究

目的 探讨维持性血液透析患者外周血CD4+T淋巴细胞、Th17细胞及CD4+CD25+CD127-调节T细胞(Treg)变化及意义.方法 采用流式细胞术检测23例血液透析患者(透析组)和25例健康志愿者(健康对照组)外周血中CD4+T细胞比例及Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例.结果 透析组的CD4+T细胞的比例为(43.89±7.72)%,明显高于对照组(31.14±4.89)%(P<0.01);透析组的Th17/CD4+T细胞的比例为(1.23±0.84)%,明显低于对照组(1.99±1.22)%(P<0.05);透析组的Treg/CD4+T细胞的比例为(4.79±1.39)%,明显低于对照组(8.90±2.30)%(P<0.01);透析组的Th17/Treg细胞的比值为(0.29±0.22)%,明显高于对照组(0.21±0.10)%(P<0.05).结论 维持性血液透析患者外周血中存在Th17/Treg失衡,Th17/Treg失衡可能参与了患者的免疫异常从而导致透析患者的并发症发生和发展.     

脓毒症患者辅助性T细胞17和CD4+CD25+调节性T细胞表达及血必净注射液的干预作用

目的 观察脓毒症患者外周血辅助性T细胞17(Th17)及CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的水平,并探讨其意义及血必净注射液的干预作用.方法 ①将64例重症监护病房(ICU)脓毒症患者按疾病严重程度分为脓毒症组(26例)、严重脓毒症组(21例)、脓毒性休克组(17例),同时选取18例健康体检者作为对照组.观察不同严重程度脓毒症患者外周血Th17和CD4+CD25+Treg的表达及其与病情严重程度的关系.②按随机原则将64例患者分为常规治疗组(25例,给予常规集束化治疗)和血必净治疗组(39例,在常规治疗基础上加用血必净注射液50 ml静脉滴注,每日2次),两组均以7 d为1个疗程.入ICU当日和治疗7 d用流式细胞术检测外周血Th17及CD4+CD25+Treg表达,观察血必净注射液的干预作用.结果 ①健康对照组Th17表达率为(0.84±0.29)%,CD4+CD25+Treg表达率为(0.43±0.20)%;脓毒症患者细胞表达均较健康对照组明显升高(均P<0.05),其中Th17表达以严重脓毒症组最高[(3.18±0.84)%],CD4+CD25+Treg 表达以脓毒性休克组最高[(3.28±0.76)%].脓毒症患者CD4+CD25+Treg与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅰ(APACHE Ⅰ)评分和血乳酸均呈正相关(r1=0.519,r2=0.451,均P=0.01).②与常规治疗组比较,血必净注射液能更有效降低脓毒症患者Th17和CD4+CD25+Treg的异常表达[Th17:(1.72±0.69)%比(2.35±0.81)%,CD4+CD25+Treg:(1.78±1.00)%比(2.30±0.85)%,均P<0.05],纠正免疫平衡紊乱,缩短住ICU时间[(4.7±2.6)d比(7.5±4.3)d,P=0.0023,使脓毒症患者28 d病死率有降低趋势(20.5%比28.0%,P>0.05).结论 脓毒症患者外周血Th17和CD4+CD25+Treg表达增加,且与病情严重程度呈正相关,提示Th17和CD4+CD25+Treg在脓毒症发生发展的免疫机制中可能起着重要作用.血必净注射液能有效降低脓毒症患者Th17和CD4+CD25+Treg的异常表达,有降低脓毒症患者病死率的趋势.

Abstract：

Objective To study the level and significance of T helper 17(Th17)and CD4+CD25+regulatory T cells(Treg)in peripheral blood of patients with sepsis and to evaluate the effects of Xuebijing of Anhui Provincial Hospital were divided into three groups:sepsis group(n=26),severe sepsis group (n=21),and septic shock group(n=17).Eighteen healthy individuals served as controls.The comparison in the expression of Th17 and CD4+CD25+Treg within groups and the correlation between their levels and group(n=25,received routine bundle treatment)and Xuebijing treatment group(n=39,received bundle treatment+Xuebijing treatment).Patients in Xuebijing treated group were given 50 ml Xuebijing injection two times per day in addition to routine bundle treatment.Seven days constituted one course of treatment.The expressions of Th17 and CD4+CD25+Treg of 64 patients on the 1 day and 7 days after treatment were detected by flow cytometry.The effects of Xuebijing injection on the patients were evaluated.Results in control group,and they were lower than that of patients with sepsis(P<0.05).The expression rate of Th17 was higher in severe sepsis group [(3.18±0.84)%]than that of other two groups(P<0.05).Moreover,The expression rate of CD4+CD25+Treg was highest [(3.28±0.76)%]in septic shock group (P<0.05),and it was positive correlated with acute physiology and chronic health evaluation Ⅰ(APACHE routine group,our study indicated that Xuebijing injection could reduce the abnormal expression of Th17[(1.72±0.69)%vs.(2.35±0.81)%,P<0.05] and CD4+CD25+Treg[(1.78±1.00)% vs.(2.30±0.85)%,P<0.05] and decrease length of stay in ICU[(4.7±2.6)days vs.(7.5±4.3)days,P=0.002].It also lowered 28-day mortality of patients with sepsis,but the difference between two groups was not significant(20.5%vs.28.0%,P>0.05).Conclusion The expression of Th17 and CD4+CD25+Treg was increased in sepsis patients and was positively correlated with severity of sepsis,suggesting that they may play an important role in pathogenesis of sepsis.Xuebijing injection could decrease the abnormal expression of Th17 and CD4+CD25+Treg and tend to decrease the fatality rate of sepsis.     

脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对辅助性T细胞漂移的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨脓毒症大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡对辅助性T细胞(Th)漂移的影响及血必净注射液的干预作用.方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血必净组,每组8只.行盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.于第3日采用免疫磁珠法分选各组CD4+CD25+Treg并培养12 h,用流式细胞仪检测Treg凋亡率及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)的分泌量;再将CD4+CD25+ Treg与CD4+CD25-T细胞1∶1共培养,刀豆素A刺激68 h,ELISA检测Th1、Th2、Th17分泌的γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-17水平.结果 正常组Treg凋亡率[(12.03±0.89)%]与假手术组[(9.48±2.17)%]比较差异无统计学意义;模型组Treg凋亡率[(5.87±0.44)%]明显低于正常组和假手术组;而血必净组的Treg凋亡率[(27.29±2.48)%]显著高于其他各组(P均<0.01).Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌量随Treg凋亡率增加而减少,相关系数(r)分别为-0.878(P=0.042)、-0.877(P=0.042)、-0.743(P=0.010).与正常组比较,模型组IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显升高[IFN-γ:(254.70±44.88)ng/L比(0.68±0.78)ng/L,IL-4:(8.82±0.61)ng/L比(3.48±0.98)ng/L,IFN-γ/IL-4比值:30.28±4.87比0.23±0.30,P均<0.01];而血必净组IFN-γ[(491.54±84.28)ng/L]和IFN-γ/IL-4比值(45.31±8.01)均显著高于模型组(P<0.01和P<0.05);各组间IL-17水平无明显差异(P均>0.05).结论 脓毒症时Treg凋亡率增加可减轻对效应T细胞的抑制功能,血必净注射液能有效促进脓毒症Treg凋亡,介导Th2向Th1漂移.     

大剂量地塞米松对特发性血小板减少性紫癜患者B细胞活化因子及调节性T细胞的影响

目的 研究大剂量地塞米松治疗前后特发性血小板减少性紫瘕(ITP)患者B细胞活化因子(BAFF)和调节性T(Treg)细胞的变化.以及BAFF对Treg细胞的作用.方法 用ELISA方法 检测21例慢性活动性ITP患者治疗前后血浆BAFF水平;用流式细胞术检测患者治疗前后及外周血单个核细胞培养体系中Treg细胞的比例.结果 治疗前ITP患者的BAFF水平[(599.70±199.40)pg/ml]较正常对照[(454.50±132.50)pg/ml]明显升高(P<0.05),Treg细胞比例明显降低[(1.56±6.73)%](P<0.01);大剂量地塞米松治疗后,ITP患者的BAFF水平[(296.9±119.7)pg/ml]较治疗前明显下降(P<0.01),且低于正常对照组(P<0.01);Treg细胞比例明显升高[(5.94±2.22)%](P<0.01),且高于正常对照[(4.08±1.08)%](P<0.01).ITP患者BAFF水平和Treg比例与血小板计数无相关性(P>0.05).体外实验显示,rhBAFFO组和rhBAFF20组Treg数量无明显改变(P>0.05).结论 慢性ITP患者的BAFF水平增高,Treg细胞数量减少.大剂量地塞米松可降低患者的BAFF水平,增加Treg细胞的数量.BAFF对Treg细胞无明显影响.     

2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者外周血T淋巴细胞和相关细胞因子的变化及研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)合并颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis, CAS)患者外周血T淋巴细胞比率、相关细胞因子表达及其与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness, IMT)和糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA_1c)的相关性。方法 80例T2DM患者,其中有CAS斑块者40例为CAS组,无CAS斑块者40例为无CAS组;体检健康者40例为对照组。3组采用流式细胞仪测定外周血Th1、Th2、Th17及Treg细胞比例,采用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin, IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素(interferon, IFN)-γ水平,并测量IMT和HbA_1c水平,分析外周血T淋巴细胞与IMT和HbA_1c的相关性。结果 CAS组Th1细胞和Th17细胞百分率[(19.47±2.45)%、(2.34±0.33)%]及IL-2[(211.24±31.49)ng/L]、IL-17[(19.54±3.27)ng/L]、IFN-γ[(19.72±3.21)ng/L]水平、HbA_1c[(11.28±1.56)%]、IMT[(1.45±0.40)mm]明显高于无CAS组[(15.24±1.62)%、(1.50±0.28)%、(184.32±25.74)ng/L、(15.76±2.08)ng/L、(15.68±2.07)ng/L、(8.92±1.09)%、(1.01±0.27)mm]和对照组[(10.02±1.14)%、(0.96±0.25)%、(128.46±17.49)ng/L、(7.32±0.99)ng/L、(10.43±1.21)ng/L、(5.22±0.84)%、(0.76±0.13)mm](P0.05),无CAS组高于对照组(P0.05);CAS组Th2细胞和Treg细胞百分率[(2.25±0.49)%、(4.03±0.75)%]及IL-4[(4.72±0.32)ng/L]、IL-6[(11.21±1.04)ng/L]、IL-10[(11.07±1.27)ng/L]水平低于无CAS组[(2.97±0.67)%、(5.67±1.33)%、(5.36±0.61)ng/L、(13.24±1.96)ng/L、(14.77±1.93)ng/L]和对照组[(3.36±0.83)%、(6.57±1.52)%、(7.32±0.95)ng/L、(17.75±2.36)ng/L、(22.72±2.59)ng/L](P0.05),无CAS组低于对照组(P0.05);CAS组患者IMT与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.809,P0.001;r=0.648,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.580,P0.001;r=-0.643,P0.001),HbA_1c与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.601,P0.001;r=0.528,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.844,P0.001;r=-0.602,P0.001)。结论糖尿病合并CAS患者存在Th1、Th17细胞比率上调,Th2、Treg细胞比率下调,IL-2、IL-17、IFN-γ分泌增多,IL-4、-6、-10分泌减少,且与患者疾病进展程度相关。     

卵巢子宫内膜异位症女性AMH与免疫水平的研究

目的探究子宫内膜异位症(EMT)女性抗苗勒管激素(AMH)水平与免疫水平。方法选择2015年12月至2017年6月该院收治的EMT患者49例作为观察组,其中Ⅰ~Ⅱ期20例,Ⅲ~Ⅳ期29例,对照组为同期住院因输卵管因素不孕行腹腔镜手术患者48例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组患者血清AMH水平,利用流式细胞仪检测外周血免疫调节细胞Th17、Treg占CD4~+ T细胞比例;ELISA法检测血清及腹腔液的白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果观察组AMH水平低于对照组,且随年龄增长,AMH呈下降趋势;观察组患者Th17所占CD4~+ T细胞比例水平明显高于对照组[(2.18±0.67)%],且Ⅲ~Ⅳ期患者[(6.74±2.32)%]高于Ⅰ~Ⅱ期[(4.61±0.79)%]、Treg所占CD4~+ T细胞比例低于对照组[(6.28±1.25)%],且Ⅲ~Ⅳ期患者[(3.09±1.13)%]低于Ⅰ~Ⅱ期[(5.64±1.02)%],观察组Th17/Treg高于对照组(P0.05);血清及腹腔液炎性因子IL-6、TNF-α高于对照组(P0.05)。结论 EMT患者体内AMH水平随年龄增长逐渐下降,免疫调节细胞Th17及Treg存在紊乱现象。     

维生素D对Graves病Th17/Treg细胞失衡的调节作用

目的 探讨维生素D对Graves病（Graves’ disease,GD）患者Th17/Treg失衡的调节作用。方法 收集2020年1月至12月复旦大学附属金山医院收治的30例GD患者和30例健康体检者。采用电化学发光免疫法测定2组人群25-羟维生素D水平,将GD患者外周血平均分为2份,根据是否予以维生素D干预分为GD未干预组和GD干预组。比较GD未干预组、GD干预组及对照组外周血中Th17、Treg细胞的占比及Th17/Treg比值。结果 GD患者血清25-羟维生素D[(20.55±6.69)ng/mL]明显低于对照组[（25.48±6.12）ng/mL,P=0.004]。GD未干预组、GD干预组及对照组外周血的Th17细胞占比分别为（0.299±0.191）%、（0.263±0.176）%、（0.054±0.017）%,两GD组外周血Th17细胞占比均高于对照组（P<0.001）,两GD组外周血Th17细胞水平差异无统计学意义。3组外周血Treg细胞占比分别为（0.029±0.013）%、（0.040±0.019）%、（0.037±0.017）%;两GD组外周血Treg细胞占...     

Anti-Foxp3dsFv-IL-6融合蛋白干预Treg/Th17失衡抑制结肠癌细胞分化的初步研究

目的观察anti-Foxp3dsFv-IL-6融合蛋白干预Treg/Th17失衡从而抑制结肠癌细胞分化的效果。方法清洁级雌性BALB/c小鼠分为3组,每组12只。均于小鼠后背皮下接种结肠癌细胞株CT26。1周后A组小鼠给予注射anti-Foxp3ds Fv-IL-6融合蛋白,B组小鼠给予注射PBS,C组小鼠不做处理。检测各组小鼠在接种结肠癌细胞株CT26初期、注射anti-Foxp3ds Fv-IL-6融合蛋白或PBS时、注射后1周3个时间点体内Treg/Th17的状态;并观察各组小鼠的生存期。结果 A组小鼠给予注射anti-Foxp3ds Fv-IL-6融合蛋白后,Treg下降而Th17上升,Treg/Th17比值降低(由3.77降至0.92);而B组小鼠和C组小鼠的Treg/Th17比值升高(分别由3.69升至3.96、由3.80升至3.88)。A组、B组和C组小鼠的存活时间分别为(24.9±2.7)d、(16.4±1.8)d、(16.8±1.5)d。单向方差分析提示组间差异有统计学意义(P<0.05);LSD检验提示A组与B组、A组与C组之间的差异均有统计学意义(P<0.05),B组与C组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 anti-Foxp3ds Fv-IL-6融合蛋白通过干预Treg/Th17失衡进而抑制结肠癌细胞的分化。     

HBV感染者外周血Th17细胞和Treg细胞的检测及意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血中辅助性T细胞17(Th17)细胞和调节性T细胞(Treg)的比例变化及其与HBV感染后肝脏损伤的关系。方法采用流式细胞术检测34例乙型肝炎病毒携带者(ASC)、50例慢性乙型肝炎(CHB)患者、32例肝细胞癌(HCC)伴活动性肝炎(简称HCC)患者及30名健康对照者(正常对照组)外周全血Th17细胞和Treg细胞,同时采用西门子1650全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果与正常对照组的Th17细胞比例(1.13%±0.37%)比较,ASC组略有升高(1.30%±0.28%),但差异无统计学意义(P0.05);CHB组(2.06%±1.15%)和HCC组(5.89%±3.31%)均明显升高(P0.01),且HCC组高于CHB组(P0.05)。Th17细胞比例与ALT、AST呈正相关[相关系数(r)分别为0.682、0.637,P均0.01]。与正常对照组CD4+CD25+CD127lowTreg细胞(7.18%±2.28%)比较,ASC组(7.72%±2.05%)略有升高,但差异无统计学意义(P0.05);CHB组(9.01%±2.92%)和HCC组(10.86%±1.77%)均明显升高(P0.01),且HCC组高于CHB组(P0.05)。Treg细胞与ALT、AST均呈正相关[r值分别为0.452(P0.01)、0.307(P0.05)]。外周血Th17细胞比例与Treg细胞比例呈正相关(r=0.327,P0.01)。正常对照组Th17/Treg最低,为0.17±0.16,ASC组略有上升(0.18±0.13),但差异无统计学意义(P0.05);CHB组(0.23±0.19)和HCC组(0.52±0.54)明显升高(P0.05、P0.01)。结论 HBV感染后随着疾病的发生、发展,外周血Th17细胞和Treg细胞的比例增加。由于Th17细胞和Treg细胞构成的平衡被打破,趋向Th17细胞所介导的炎症反应,引起肝细胞损伤。     

临床护士心理压力源与工作满意度调查分析

目的了解临床护士面临的主要心理压力源,为护理管理者有效地帮助护士减轻和消除心理压力提供依据。方法采用自评式问卷调查的方法 ,对内江市2所三级乙等医院287名从事临床护理工作的护士进行问卷调查。结果临床护士的心理压力源依次来源于工作强度、职业需求、工作环境、人际关系、家庭经济收入等方面。其中来源于工作强度、人际关系及家庭方面的压力源,不同年龄组护理人员在其压力程度上差异有统计学意义(P0.05)。结论从事临床护理工作的护士存在着多种心理压力源,这些压力源是导致护士工作不满意的主要原因,也是护理的安全隐患之一,护理管理者应予以足够的重视,并定期针对不同的人群进行心理健康知识培训,建立有效的支持系统,及时帮助他们调整心理状态,减轻和消除压力,从而提高护士对本职工作的满意度和患者对护理服务的满意度。     

精神疾病患者家属教育的情况分析

目的：通过对精神疾病患者家属教育的调查，探讨家属教育的内容和教育方式。方法：采用自拟问卷对参加系列教育的家属进行调查分析。结果：患者和家属接受教育次数越多，对疾病知识了解越多；在患者的亲属中患者的父母参加教育比率较大。结论：家属教育对治疗疾病起着积极的作用，应更具有针对性，同时还应该注意教育方式。