亚低温对脑缺血再灌注损伤后神经功能的保护作用及机制研究

目的：验证亚低温对脑缺血后神经功能的保护作用．方法：将４６只ＳＤ大鼠随机分为对照组、缺血组和亚低温治疗组（肛温维持在３２～３３℃之间），分别在急性和慢性条件下进行．参照Ｐｕｌｓｉｎｅｌｉ和Ｂｒｉｅｒｌｅｙ的方法建立脑缺血动物模型，并观察神经行为学、病理学及Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性与脑组织含水量的改变．结果：与对照组和缺血组相比，亚低温能显著缓解Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的降低（Ｐ＜０．０１），改善神经行为学异常并降低脑组织含水量（Ｐ＜０．０５）．结论：亚低温能明显减轻缺血后脑组织病理形态学的损害程度，对神经功能的恢复起促进作用．其机制与恢复能量供给，保护血脑屏障，减轻脑水肿等有关．     

高压氧对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的 探讨高压氧对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响.方法 成年健康雄性Wistar大鼠32只,分为模型对照组、高压氧暴露组,2组再各分4小组,分别为脑缺血1 h冉灌注后12、24 h,3、5 d组,每组4只.应用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO),并进行高压氧暴露,应用HE染色和细胞凋亡检测,观察神经细胞病理变化和细胞凋亡分布.结果 脑缺血再灌注后12 h即出现神经细胞凋亡表达,随着时间的延长凋亡细胞的数量逐渐增加,至24 h达高峰,以后逐渐减弱,至5 d仍有表达;高压氧暴露组凋亡细胞的数量相对较少,其变化规律与对照组相似,但是同一时间点比较均明显低于对照组.结论 高压氧可以抑制脑神经元细胞凋亡,保护脑神经细胞,有利于促进神经功能恢复.     

业低温对脑缺血再灌注损伤后神经功能的保护作用及机制研究

目的；验证亚低温对脑缺血后神经功能的保护作用。方法；将４６只ＳＤ大鼠随机分为对照组，缺血组和亚低温治疗组，分别在生和慢性条件下进行。参照Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｌｉ和Ｂｒｉｅｒｌｅｙ的方法建立脑缺血动物模型，并观察神经行为学、１病理学及ＮａＫ－ＡＴＰ酶活性与脑组织含水量的改变。结果；与对照组和缺血级箱比，业低温能显著缓解Ｎａａ－Ｋ－ＡＴＰ酶活性的降低（Ｐ〈０．０１），改善神经行为学异常并降低脑组织含水量     

脑缺血再灌注后细胞凋亡基因的研究进展

急性脑血管病以高发病率、高死亡率、高致残率给社会、家庭和患者带来沉重的经济和精神负担。其治疗原则是及时恢复缺血区的血液灌注。然而在某些情况下缺血后再灌注不仅没有使组织功能恢复,反而使缺血所致的功能障碍和结构破坏进一步加重,这种现象即缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury）。许多研究表明,脑缺血再灌注损伤过程包括坏死和凋亡。脑缺血再灌注可诱导多种基因表达,包括促凋亡基因和抑制凋亡基因。这些基因编码的蛋白质产物可直接或间接参与凋亡的调控。     

天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的研究天麻素注射液对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡、脑组织梗死体积的影响。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,TUNEL及TTC染色法分别检测凋亡细胞数目及脑梗死体积。结果天麻素注射液组再灌注后24h凋亡细胞数目明显低于对照组(P<0.05),主要出现于大脑皮质及尾壳核病变中心区的周围,且脑梗死体积较对照组明显缩小(P<0.05)。结论天麻素注射液能显著抑制缺血半暗带细胞凋亡的发生,阻止脑梗死范围进一步扩大,对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,可能的作用机制是通过拮抗谷氨酸而阻断缺血再灌注后细胞凋亡。     

脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的研究

 目的通过大鼠脑缺血再灌注模型,观察缺血1.5 h后,再灌注12、24、48和72h皮层、尾壳核和海马细胞凋亡的变化.方法采用线栓法制成大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型(n=21),应用末端转移酶介导的dUTP-DIG缺口末端标记法(TUNEL),标记凋亡细胞断裂的DNA.结果脑缺血再灌注后12 h,左侧大脑中动脉缺血区皮层和尾壳核出现大量凋亡细胞,于再灌注后24～48 h达高峰.结论缺血再灌注早期可诱发细胞凋亡.     

亚低温对完全性脑缺血再灌注后丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性…

目的；观察完全性脑缺血再灌注后全及亚低温对脑组织丙二醛（ＭＤＡ）含理和超氧化物歧估酶（ＳＯＤ）活性的影响。方法；将１７只犬随机分为三组；非缺血对照组，缺血对照组和亚低温治疗组，采用谭秀娟等建立的心脏停跳 苏动物模型，于心肺后４小时取 组织测定ＭＤＡ含量和ＳＯＤ活性。结果；全脑缺血１０分钟后再灌流４小时，脑组织ＭＤＡ一明显上升（Ｐ〈０．０１），ＳＯＤ活性下降（Ｐ〈０．０１）；再３４℃亚低温治疗组与缺     

AKT信号通路通过亚低温对大鼠局脑缺血再灌注损伤神经元的保护作用

目的通过检测AKT及Bcl-2蛋白的表达,探讨亚低温对局脑缺血再灌注后神经元存活的影响。方法用线拴法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）局脑缺血再灌注模型,将36只SD大鼠随机分成假手术组、常温缺血再灌注组和亚低温缺血再灌注组,缺血组分别缺血6h再灌注4h、24h、72h、1w（n=4）后处死,亚低温组于缺血后13~14min实施病灶侧亚低温持续4h。免疫组织化学法检测AKT、Bcl-2蛋白的表达,电镜检测自噬小体。结果不同缺血时间再灌注4h,亚低温组比常温组缺血侧半暗带AKT表达水平显著增高（P〈0.05）,Bcl-2表达明显降低（P〈0.01）;亚低温组自噬小体明显减少。结论病灶侧亚低温通过促进缺血半暗带脑组织AKT表达,抑制Bcl-2表达,从而抑制神经元凋亡,抑制自噬的产生,从而对神经元起保护作用,促进脑缺血后神经功能恢复。     

心肌细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤

1概述 持续的心肌缺血必然导致大量的心肌细胞死亡，虽然在早期进行再灌注治疗尽快恢复缺血区心肌的血供是拯救濒临死亡的心肌细胞的较好方法，但是有充足的实验证据证实再灌注过程可以对心肌细胞造成损害，导致心肌细胞的非缺血性功能障碍甚或死亡，有研究者证实在再灌注的起始阶段采取一些干预措施可以削弱这种再灌注损伤。     

α-硫辛酸对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激影响

目的探讨α-硫辛酸对大鼠脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响。方法将90只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组(模型组)和α-硫辛酸干预组,每组各30只。应用线栓法制备大脑中动脉闭塞2 h后再灌注模型,分别于再灌注6 h、24 h、3 d、7 d采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑梗死灶大小,对其神经功能障碍进行评分,检测脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)含量及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性。结果与模型组比较,α-硫辛酸干预组大鼠脑梗面积缩小,脑组织中的MDA、NO含量及i NOS活性均显著降低,SOD活性显著升高(P<0.05)。结论α-硫辛酸对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能是α-硫辛酸清除自由基抗氧化作用。     

高压氧对大鼠脑缺血再灌注后碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响

目的 探讨高压氧对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体(FGFR)表达的影响.方法 成年健康雄性Wistar大鼠80只,随机分为模型对照组和高压氧暴露组.2组再各分5组,分别为腩缺血1 h再灌注后1、3、5、7、14 d组,每组8只.应用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),进行高压氧暴露,免疫组化检测bFGF和FGFR的表达.结果 脑缺血再灌注后1 d,神经细胞即出现bFGF和FGFR的表达,3 d达高峰,后逐渐减弱,至14 d时仍有表达;高压氧暴露组神经细胞bFGF和FGFR表达的变化趋势与对照组相似,但是同一时间点均明显高于对照组.结论 高压氧通过促进bFGF和FGFR表达,可能激活内源性神经保护机制.     

硬膜外注射吗啡对兔急性缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

 目的 探讨硬膜外注射吗啡对兔心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用.方法 采取开胸结扎左前降支(LAD)的急性心肌梗死模型.新西兰兔22只随机分成2组:①硬膜外吗啡组:经硬膜外注入吗啡(0.25 mg/kg,配成0.5 ml溶液);②对照组:经硬膜外注入生理盐水0.5 ml.再灌注4 h后取缺血部分心肌,用TUNEL法检测每200个心肌细胞细胞凋亡数.结果 硬膜外吗啡组凋亡细胞数明显低于对照组(60.6±7.5 vs 85.7±9.2),差异有统计学意义(P＜0.05).硬膜外吗啡组和对照组细胞凋亡百分比分别为30.3%和42.5%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硬膜外注射吗啡能减少缺血再灌注心肌细胞凋亡的数量,对缺血再灌注心肌有明显的保护作用.     

大剂量氨溴索对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的 评价大剂量盐酸氨溴索(沐舒坦)对肺缺血再灌注损伤(Lung ischemia reper-fusion injury,LIRI)的保护作用及对EphrinA1、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)基因及蛋白表达的影响.方法 大鼠左侧开胸,阻断左肺门根部60 min,再灌注6 h.实验分为缺血再灌注损伤组、沐舒坦干预组及手术对照组和空白对照组.沐舒坦干预组再灌注开始时,经股静脉持续6 h输入沐舒坦溶液(3.75 mg·kg~(-1)·h~(-1)).分别检测大鼠动脉血氧分压、肺组织湿/干重比值,IL-1β、TNF-α含量,髓过氧化物酶(MPO)活力,EphrinAl、HIF-1α和VEGF基因及蛋白的表达水平,光镜下观察病理组织学改变.结果 (1)大剂量沐舒坦干预后,肺泡间隔水肿、肺泡内出血、渗出等较再灌注损伤组明显改善,肺组织湿/干重比值显著降低,动脉血氧分压明显改善;(2)肺组织IL-1β和TNF-α含量在大剂量沐舒坦干预后,基本降至正常水平,MPO活力降至手术对照组水平,均明显低于缺血再灌注实验组;(3)沐舒坦干预组的EphrinA1、HIF-1α和VEGF基因及蛋白表达水平在药物干预后并未恢复至正常水平,但是较缺血再灌注损伤组明显下降.结论 (1)大剂量沐舒坦干预下调肺组织的IL-1β、TNF-α含量和MPO活力,减轻LIRI的损伤程度;(2)大剂量沐舒坦可通过下调EphrinA1、HIF-1α和VEGF基因及其蛋白产物的表达来减轻LIRI.这一观察结果可能提示LIRI形成过程中基因调控的作用以及沐舒坦新的药理效应.     

SP600125对大鼠脑缺血再灌注神经元的保护作用

目的探讨SP600125-JNK特异性抑制剂对大鼠脑缺血再灌注神经元损伤的保护性作用及其作用机制。方法雄性SD大鼠54只,体重230～250g,随机分成假手术组（SH组）,缺血再灌注组（IR组）和JNK抑制剂SP600125组（SP组）,每组根据再灌注时间分为30min、24h和72h3个亚组,每亚组6只动物。采用4-VO法建立SD大鼠脑缺血模型,三组于缺血前30min侧脑室注射DMSO,DMSO及JNK抑制剂SP600125（溶媒采用DMSO）,容积均为10μl;脑缺血再灌注后30min、24h、72h免疫组织化学方法测定各时间点海马CA1区Bcl-2和Bax蛋白表达阳性细胞数量,TUNEL法检测CA1区凋亡细胞。结果缺血再灌注使海马CA1区Bcl-2和Bax阳性锥体细胞数目表达增加,再灌注24h阳性锥体细胞数目表达至高峰（P〈0.01）,再灌注24～72h可见阳性锥体细胞数目表达减少（P〈0.05）。其中SP组Bcl-2阳性锥体细胞数目显著多于IR组（P〈0.05）,而Bax阳性锥体细胞数目显著小于IR组（P〈0.05）。脑缺血再灌注后海马CA1区神经元存活数目SP组高于IR组（P〈0.01）,凋亡细胞数目低于IR组（P〈0.01）。结论 SP600125对大鼠脑缺血再灌注神经元损伤具有保护作用。     

高压氧联合亚低温对大鼠脑创伤细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的 探讨高压氧(HBO)联合亚低温(MHT)治疗对创伤性脑损伤(TBI)细胞凋亡及Bcl-2表达的影响.方法 制作大鼠自由落体脑挫伤动物模型,设立TBI常规治疗组(TBI组)、常规治疗+ HBO组、常规治疗+MHT组和常规治疗+HBO+ MHT组,应用原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术对各组大鼠脑挫伤病灶旁的细胞凋亡情况进行检测;使用免疫组化方法检测Bcl-2蛋白在脑组织中的表达情况.结果 常规治疗+ HBO组(16.3±5.0)、常规治疗+MHT组(18.7±6.9)和常规治疗+HBO+ MHT组(24.7±7.2) Bcl-2的表达均高于常规治疗组(8.9±4.2)(P＜0.05),其中常规治疗+HBO+MHT组表达最高.结论 HBO联合亚低温治疗脑创伤可有效减少细胞凋亡及增加Bcl-2的表达.     

异丙酚对大鼠肝缺血再灌注时肾脏的保护作用

 目的探讨异丙酚在肝缺血/再灌注(I/R)后对肾脏的保护作用.方法SD大鼠72只随机分为3组,(1)正常对照组(2)I/R组(3)异丙酚保护组.于肝I/R后2 h,4 h分别检测血清BUN、Cr及肾组织病理学变化.结果与正常对照组比较,I/R组血中BUN、Cr水平显著增加,4 h组高于2 h组(P＜0.05),而异丙酚保护组BUN、Cr水平则低于I/R组.结论异丙酚能减少肝I/R对肾脏的损伤作用.     

神经生长因子和脑源性神经营养因子在氧化应激诱导细胞凋亡中的作用

目的 探讨神经生长因子（NGF）和脑源性神经营养因子（BDNF）在氧化应激诱导细胞凋亡的作用。方法 脂质体介导入NGF和BDNF基因转染鼠成纤维细胞NIH3T3,使目的基因在细胞中表达,过氧化氢（H2O2）处理转染细胞,吖啶橙荧光染色法和流式细胞检测细胞凋亡。结果 50μmol/LH2O2能诱导NIH3T3细胞凋亡,处理后24h凋亡率为16．7％,而NIH3T3细胞分别经NGF、BDNF和NGF／BDNF转染表达目的基因后,能对抗H2O2诱导的细胞凋亡,其24h凋亡率分别为8．21％、9．51％和6．26％。结论 氧化应激能诱导细胞凋亡,NGF和BDNF能抑制氧化应激诱导的细胞凋亡,两者具有协同作用。     

大鼠心肌缺血再灌注损伤中的心肌细胞凋亡

 目的 观察MIRI时心肌细胞凋亡现象及其病理组织学改变,探讨细胞凋亡在MIRI中的意义.方法 采用SD大鼠MIRI模型,用原位末端标记染色检测心肌细胞凋亡和HE染色法检测心肌病理组织学改变.结果 假手术组及MIRI大鼠左室非缺血心肌组织中均末发现凋亡细胞出现,MIRI60 min、90 min和120 min大鼠缺血心肌中均可见凋亡细胞,且凋亡细胞的个数随再灌注时间的延长而增多,分别为36.3±8.76个/视野,38.41±14.21个/视野和48.01±23.87个/视野..结论 缺血后再灌注损伤可诱发心肌细胞凋亡.     

沙土鼠全脑缺血控制性低流量灌注的促神经功能康复研究

目的动态研究严重脑外伤时不同灌注时间和灌注量对全脑组织缺血损害的恢复程度和凋亡基因的表达，以探明控制性再灌注的神经功能康复作用。方法沙土鼠随机分5组，实验组夹闭两侧颈总动脉，造成沙土鼠全脑缺血模型，夹闭10min后，开放10min，开放不同脑血流量(1／4，1／2，1／1)和单纯血液稀释后分别观察缺血海马CA区凋亡基因的表达及缺血区大脑半球的改善状况，梯度灌注后行全脑缺血后神经功能评分对比。结果开放10min，1／2脑血流量时Bel—x／1基因明显上调，海马CA区缺血损害改善最明显，凋亡细胞减少，神经功能评分最高。开放10min，全脑血流量一次性开放时海马CA区损害最严重，凋亡明显，神经功能评分最低。结论(1)控制性再灌注有较好的抗神经元细胞凋亡和神经恢复功能作用；(2)低流量灌注有明显改善脑缺血的作用。