蛋白激酶C活性与电离辐射诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的关系

目的探讨蛋白激酶C(PKC)活性与X线电离辐射诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的关系.方法PKC调节剂PMA和SP预处理HepG2细胞,分辐射组、PMA0.5h组、PMA24h组、SP组;32P掺入法检测细胞的PKC活性,Varian2100直线加速器辐射细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果6Gy X线辐射诱导HepG2细胞凋亡率是21.9%,辐射后细胞PKC活性是辐射前的2.79倍.辐射组、PMA0.5h组、PMA24h组、SP组的PKC活性分别为1.07、3.86、051、0.48 pmol/(min·μg),细胞凋亡率分别为21.9%、5.73%、31.70%和32.83%.结论辐射可以引起HepG2细胞凋亡,PKC活性增加/降低对辐射诱导的凋亡起抑制/促进作用,提示PKC可能参与了细胞凋亡保护机制.     

电离辐射对人HepG2肝癌细胞caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察电离辐射对人HepG2肝癌细胞Caspase-3蛋白表达的影响.方法:采用6MV-X射线照射人HepG2肝癌细胞,Western blotting蛋白印迹法检测细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达.结果:6MV-X照射后48小时,2Gy、4Gy、6Gy剂量组HepG2细胞Caspase-3蛋白的表达明显高于假照射对照组(0Gy)(P＜0.05,P＜0.01).结论:电离辐射可诱导HepG2细胞Caspase-3蛋白表达增高.     

姜黄素对人肝癌细胞株HepG2凋亡和细胞周期的影响

目的 本实验拟研究姜黄素对人肝癌细胞株HepG2凋亡与细胞周期的影响.方法 不同浓度姜黄素DMEM稀释液培养HepG2细胞,分别作用24、48、72h后,流式细胞术检测凋亡和细胞周期分布变化,并以正常培养细胞作为对照.结果 对照组正常生长HepG2细胞24、72h凋亡率分别为3.1%、4.2%、5.2%,加入姜黄素后凋亡率明显增加,并呈现时间和剂量依赖性.10μmol/L浓度组24、48、72h凋亡率分别为13.6%、22.9%、41.1%.细胞周期分布测定中.姜黄素药物组HepG2细胞出现明显的G2/M期阻滞,相比对照组有统计学意义(P<0.05).结论 姜黄素能抑制HipG2细胞生长,并且诱导其凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期,其抗肿瘤活性具有广阔的应用前景,值得进一步研究.     

重复加热对肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期蛋白D1的影响

目的探讨多次热疗后残存下来的HepG2细胞增殖速度的变化及与此相关的可能原因。方法HepG2细胞43℃加热，每次80分钟，每天两次，共10个循环后，分析细胞倍增时间，检测细胞周期及细胞周期素D1的表达。结果热处理后的HepG2细胞增殖加快，细胞周期中S期和G2期的比率增高，细胞周期素D1的表达增强。结论热处理后的HepG2细胞增殖加快与其完成DNA复制而进入分裂的细胞比率高、细胞周期素D1的表达增强有关。     

电离辐射对胸腺细胞周期进程的影响

本文采用流式细胞仪对小鼠Ｘ射线全照射后胸腺细胞周期进程与Ｘ射线剂量效应关系进行了研究，４．０ＧｙＸ射线全身照射后４ｈ胸腺细胞便出现明显的ＤＮＡ合成抑制和Ｇ２阻滞，８ｈＧ２阻滞达最高点，不同剂量全身照射的结果表明，低剂量（５０～１００ｍＧｙ）全身照射后胸腺细胞ＤＮＡ合成了能力增强，而高剂量全身照射后则出现明显的ＤＮＡ合成抑制，Ｇ２阻滞和有丝分裂延迟。     

贵州优良地域种斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞周期的影响

目的研究贵州罗甸县城区及茂井镇地区南方大斑蝥（Mylabris phalerata Pallas）和黄黑小斑蝥（Mylabris cichorii Linnaeus）体内结合斑蝥素对人肝癌Hep G₂细胞周期的影响。方法斑蝥三氯甲烷提取物的水浸液获取结合斑蝥素;应用倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化;采用PI标记结合流式细胞术检测细胞周期的变化。结果罗甸县城区及茂井镇斑蝥的结合斑蝥素均能使细胞数量明显减少,出现固缩、体积变小等现象;茂井镇南方大斑蝥和黄黑小斑蝥可使S期细胞比率下降,G₂/M期细胞比率明显增加,出现G₂/M期阻滞;罗甸城区南方大斑蝥和黄黑小斑蝥可使G₀/G₁期细胞比率明显增加,S期细胞比率下降。结论贵州罗甸县城区南方大斑蝥、黄黑小斑蝥及茂井镇地区南方大斑蝥、黄黑小斑蝥4种来源斑蝥体内结合斑蝥素可能是通过阻滞人肝癌Hep G₂细胞周期而抑制其生长。     

上调miRNA-101表达对人肝癌HepG2细胞系增殖的影响

目的通过上调人肝癌HepG2细胞株中miRNA-101表达,探讨miRNA-101抑制靶基因EZH2对肝癌细胞增殖的影响。方法人工合成miRNA-101模拟体并转染至HepG2肝癌细胞株中,利用MTT法检测细胞增殖抑制、流式细胞仪检测细胞周期、实时荧光定量PCR检测EZH2 mRNA表达。结果 miRNA-101模拟体转染组HepG2细胞增殖活性明显低于阴性对照组及空白对照组(P<0.05),miRNA-101模拟体组G0/G1期细胞明显增多,为(74.71±4.6)%,S期细胞减少,为(14.57±1.1)%(P均<0.05);miRNA-101模拟体组EZH2 mRNA较阴性对照组和空白对照组表达下降(P<0.05)。结论上调miRNA-101可抑制EZH2基因表达,对人肝癌细胞增殖活性具有负调控作用。     

肉苁蓉苯乙醇苷对HepG2肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨肉苁蓉苯乙醇苷(Cistache deserticola phenylethanoid glycosides,CPhGs)对HepG2细胞增殖、凋亡的影响.方法 实验以HepG2细胞为研究对象,采用MTT及平板克隆实验检测细胞增殖情况、Annexin V-FITC/PI、Hochest33258和线粒体染色法...     

姜黄素诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡及对细胞生长周期的影响

目的研究中药姜黄素在体外诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡的机制及对细胞生长周期的影响。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,用不同浓度的姜黄素（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0μmol/L）刺激人肝癌HepG2细胞24、36和48h,MTT法及台盼蓝拒染法检测姜黄素对人肝癌HepG2细胞生长增值的影响并绘制生长曲线图,流式细胞术（FCM）检测其对细胞生长周期的影响。结果MTT法结果表明姜黄素对人肝癌细胞HepG2的生长具有抑制作用,2.0μmol/L浓度组在24h与对照组比较便具有统计学意义（P〈0.05）,16μmol/L浓度组与HepG2细胞作用48h后对HepG2细胞的生长抑制作用最强（54.78±2.35）%,台盼蓝拒染法发现细胞存活率与姜黄素浓度间具有剂量和时间效应;流式细胞仪检测结果表明8.0μmol/L姜黄素诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡,并对细胞生长的S期有明显的阻滞作用。结论姜黄素在体外能阻滞HepG2细胞的生长增值,诱导了人肝癌HepG2细胞发生凋亡。     

热疗对人肝癌细胞株HepG2生长影响的体外研究

目的:探讨热疗对人肝癌细胞株HepG2生长的影响.方法:人肝癌细胞株HepG2细胞常规方法培养,采用水浴加热法(43.0℃)分别加热0.5h、1h和1.5h.处理后继续培养48h、72h、96h、120h和144h,绘制生长曲线;处理后分别培养0h、3h、6h、12h和24h,倒置显微镜观察细胞的形态变化.结果:随着加热时间的延长HepG2细胞数明显减少(P＜0.05,P＜0.01),细胞的形态也发生明显病理变化.结论:热疗对人肝癌细胞株具有细胞毒性作用,加热时间对癌细胞的生长有重要影响,热疗作为治疗肝癌的一种辅助疗法,值得进一步研究.     

索拉菲尼对人肝癌细胞株HepG2抑制作用的研究

目的:探讨分子靶向药物索拉菲尼(Sorafenib)在体外对人肝癌细胞株HepG2的抑制作用.方法:采用MTT法检测Sorafenib对HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率.结果:Sorafenib能明显抑制HepG2细胞增殖,呈时间-剂量依赖效应;6μmol/L的Sorafenib理HepG2细胞72d,时,HepG2 细胞周期中的S期比例明显升高,G0-G1期、G2-M期比例明显下降,凋亡率明显上升(P<0.05,P<0.01).结论:Sorafenib对体外人肝癌HepG2细胞具有明显的抑制作用,主要表现为抑制其增殖和促进其凋亡.     

人参皂甙Rh2诱导人喉癌细胞株Hep-2凋亡的研究

目的:研究人参皂甙Rh-2(G-Rh2)诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的作用。方法:应用流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳检测G-Rh2处理前后Hep-2细胞的凋亡情况,并应用SP免疫组化法检测药物处理前后相关基因产物Bax、Bcl-2蛋白的表达,观察G-Rh2对喉癌Hep-2细胞的诱导凋亡作用及其对细胞周期的影响。结果:(1)G-Rh2具有诱导凋亡作用,且呈量效、时效关系,细胞凋亡率随G-RH2浓度及作用时间的增加而升高,并可将细胞周期阻滞于G0/G1期。(2)G-Rh2处理Hep-2后,Bax表达上调,Bcl-2在G-Rh2处理前后无明显变化。结论:G-Rh2对体外培养的Hep-2细胞具有诱导凋亡的作用,其机制可能与上调Bax的表达及细胞周期阻滞有关。     

古抑菌素A对肝癌细胞HepG2中抑癌基因FHIT表达的影响

目的：探讨去乙酰化转移酶抑制剂古抑菌素A（trichostatin A,TSA）对人肝癌HepG2细胞生长的作用以及FHIT表达的影响。方法：体外培养人肝癌细胞株HepG2,分为对照组和不同浓度（5、50、250、500、1000nmol/L）TSA组,作用24h和48h后在倒置显微镜下观察细胞形态改变,CCK-8法检测TSA对HepG2细胞增殖的影响,实时荧光定量RT-PCR法检测FHIT基因的表达。结果：倒置显微镜下,经TSA处理的细胞增殖速度显著减慢,出现凋亡早期改变,与对照组相比,TSA可明显抑制HepG2的增殖,且呈时效和剂量依赖关系（P〈0.01）,荧光定量PCR结果显示TSA可以使FHIT表达上调（P〈0.01）。结论：TSA对肝癌HepG2细胞体外生长有明显抑制作用,可能与促进FHIT表达有一定关系。     

5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人肝癌细胞株SMMC7721增殖及DAPK mRNA表达的影响

目的:探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖以及对死亡相关蛋白激酶(Death-associated protein kinase,DAPK)基因mRNA表达水平的影响。方法:用不同浓度(0.5,5.0,50.0μmol/L)的5-Aza-CdR对SMMC7721细胞处理后,采用MTT法检测细胞的增殖情况;半定量RT-PCR法检测各组细胞DAPK mRNA的表达水平。结果:5-Aza-CdR对肝癌细胞株SMMC7721生长有明显抑制作用,并且存在剂量依赖性反应关系(F=242.40,P<0.01);半定量RT-PCR结果显示,MMC7721细胞中DAPK mRNA表达水平很弱,采用不同浓度5-Aza-CdR处理SMMC7721细胞72h后,SMMC7721细胞中DAPK mRNA表达水平呈剂量依赖性逐渐升高(F=360.41,P<0.01)。结论:5-Aza-CdR可诱导MMC7721细胞DAPK mRNA表达,并抑制SMMC7721细胞增殖。     

低剂量辐射联合环磷酰胺对肿瘤细胞凋亡、细胞周期及骨髓增殖影响

目的 探讨低剂量辐射联合环磷酰胺对小鼠移植肿瘤细胞的凋亡、细胞周期以及骨髓增殖的影响.方法 昆明种雄性小鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组(假照组)、低剂量照射组(LDR组)、CTX化疗组(CTX组)和低剂量照射联合化疗组(LDR CTX组),小鼠左后肢腹股沟皮下接种S180肉瘤细胞(空白组除外),接种后第5、8天LDR组和LDR CTX组小鼠给予γ射线全身照射75 mGy,照射36 h后CTX组和LDR CTX组小鼠采用环磷酰胺(CTX)化疗,测量肿瘤大小变化,并取肿瘤组织采用流式细胞仪分析凋亡、细胞周期,取冲洗骨髓组织分析骨髓增殖情况.结果 与假照组相比,各处理组肿瘤生长缓慢;LDR组肿瘤细胞凋亡增加;CTX组、LDR CTX组G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少,后者较前者为著(t=2.52,P<0.05).与空白对照组相比,假照组、LDR组骨髓细胞浓度未见明显变化,化疗组(CTX组、LDR CTX组)明显减少,后者较前者有明显提高(t= 4.71,P<0.05);CTX组、LDR CTX组的增殖指数(PI)明显增加,LDR CTX组较CTX组进一步升高(t=3.41,P<0.05).结论 低剂量辐射联合环磷酰胺可使机体肿瘤细胞G1期阻滞加剧,对肿瘤增殖细胞杀伤作用增强,明显提高机体抗肿瘤的作用,同时保护机体的骨髓造血机能,具有辅助肿瘤化疗的实际临床意义.     

重组人生长激素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期作用的实验研究

目的 :探讨重组人生长激素 (r- h GH )对人乳腺癌细胞株 MCF- 7(MCF- 7)增殖和分化的影响。方法 :以不同浓度 r- h GH分别加入处于对数生长期的 MCF- 7进行体外培养 ,4 8h后用流式细胞仪检测细胞周期的百分比构成变化 ,并与对照组进行比较。结果 :不同浓度的 r- h GH作用于 MCF- 7后 ,其细胞周期的 G0 ～ G1 期、S期、G2 ～ M期的细胞百分比变化 ,差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :r- h GH对 MCF- 7的细胞周期无明显影响 ,既无促进 MCF- 7细胞增殖作用 ,也无抑制 MCF- 7细胞的作用。     

CDK2干扰RNA对人肝癌细胞HepG_2细胞周期和增殖的影响

目的:探讨CDK2 siRNA对人肝癌细胞株HepG2细胞CDK2 mRNA表达及其对HepG2细胞周期和增殖的影响.方法:利用脂质体转染法将特异性的携带绿色荧光蛋白的CDK2干扰RNA的重组质粒PGenesil-1-CDK2导入HepG2细胞,同时设立阴性对照空载体转染组PGenesil-1-HK.G418筛选稳定表达细胞株扩增培养.并用倒置荧光显微镜观察转染细胞的绿色荧光蛋白.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM),分别检测转染后的HepG2细胞CDK2 mRNA和细胞周期的变化,噻唑蓝(MTT)法检测癌细胞生长增殖率.结果:经1mo的G418筛选得到稳定表达细胞株,与阴性对照组及空白对照组相比,转染组CDK2 mRNA 水平明显下降,细胞周期明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞.结论:RNA干扰技术可明显抑制CDK2基因的表达,引起 HepG2细胞周期阻滞及肿瘤细胞生长抑制作用,为CDK2介导的肿瘤基因沉默疗法提供实验依据.     

骆驼蓬碱、氟尿嘧啶对视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50生物学效应

在体外检测了骆驼蓬总碱,氟尿嘧啶(fluorouracilum,5-Fu)对人视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50的生物学效应。两种药物对该细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别是1.437μg/ml与5.321μg/ml,提示Rb细胞在体外对化疗敏感。临床Rb化疗效果欠佳可能与血-视网膜屏障有关。     

铁蛋白对卵巢癌细胞生长和细胞周期动力学的影响

检测Ｈ铁蛋白及Ｌ铁蛋白对人上皮性卵巢癌细胞株ＡＯ及３ＡＯ的生长情况及细胞周期分布的影响。采用３Ｈ标记胸腺嘧啶校苷摄入细胞ＤＮＡ的放射测定法及流式细胞仪进行测定。结果：Ｈ及Ｌ铁蛋白均能抑制 ＡＯ及 ３ＡＯ细胞的生长，此作用在加入铁蛋白后的 ７２ ｈ较 ３６ ｈ显著，且随铁蛋白浓度的增加而增强０．０１＜Ｐ＜０．０５）。在７２时Ｈ铁蛋白的抑制作用较强，有显著差异（Ｐ＜０．０１）。同时发现，加入铁蛋白可使Ｇ１期细胞百分比增加，而Ｓ期细胞明显减少，也有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结论：初步认为铁蛋白，特别是Ｈ铁蛋白可抑制卵巢癌细胞生长，并阻止其从 Ｇ０／ Ｇ１；期进入 Ｓ期。