放疗对人肝癌HepG2细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨放疗对人肝癌HepG2细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:采用6MV-X射线照射细胞,提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳,观察细胞发生凋亡的情况,并采用免疫组织化学染色观察人肝癌细胞株中Bax和Bcl-2蛋白的表达。同时观察细胞周期改变情况。结果:照射后48h,2Gy、4Gy和6Gy出现明显DNA降解("梯形结构"),但对照组及8Gy和10Gy无"梯形结构"出现。Bax和Bcl-2蛋白的表达在时间和剂量之间存在交互作用(F=1.733,P=0.042;F=1.700,P=0.048)。4Gy照射剂量作用细胞48h后,HepG2细胞中Bax表达显著上调,而Bcl-2表达明显降低。4GyX线照射后培养6h,即可观察到G2/M期、S期阻滞,G2/M期阻滞峰值为正常的56倍,在6~48h阻滞"崩溃",细胞被释放,再度进入细胞周期或死亡。结论:6MV-X射线照射HepG2细胞,可诱使其产生凋亡,其机制可能通过促进Bax蛋白表达和抑制Bcl-2蛋白的表达来诱导肝癌细胞凋亡。4Gy照射引起的G2期阻滞释放可能与凋亡水平上调有关。     

电离辐射对人HepG2肝癌细胞caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察电离辐射对人HepG2肝癌细胞Caspase-3蛋白表达的影响.方法:采用6MV-X射线照射人HepG2肝癌细胞,Western blotting蛋白印迹法检测细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达.结果:6MV-X照射后48小时,2Gy、4Gy、6Gy剂量组HepG2细胞Caspase-3蛋白的表达明显高于假照射对照组(0Gy)(P＜0.05,P＜0.01).结论:电离辐射可诱导HepG2细胞Caspase-3蛋白表达增高.     

放射线对体外培养鼻咽癌细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57kip2表达的影响

目的研究放射线对鼻咽癌CNE细胞细胞周期阻滞、凋亡和抑癌基因p57^kip2蛋白表达的影响。方法运用流式细胞术检测放射线诱导的细胞周期阻滞、凋亡；运用免疫组织化学法检测抑癌基因p57^kip2蛋白的表达。结果CNE细胞经照射后，G1期无明显阻滞，S期出现短暂堆积，G2／M期阻滞程度具剂量和时间依赖性，G2／M期阻滞在12h与24h时与照射剂量呈正相关（P〈0．01），随照射后时间延长而增强，峰值出现于12Gy24h；细胞凋亡发生率与照射剂量和照射后时间均呈正相关（P〈0．01）。照射后p57^kip2蛋白表达随照射剂量增加和照射后时间延长而上调（均P〈0．01）。结论G2／M期阻滞、细胞凋亡率和p57^kip2蛋白均能反映及预测鼻咽癌细胞的放射敏感性。     

姜黄素对人肝癌细胞株HepG2凋亡和细胞周期的影响

目的 本实验拟研究姜黄素对人肝癌细胞株HepG2凋亡与细胞周期的影响.方法 不同浓度姜黄素DMEM稀释液培养HepG2细胞,分别作用24、48、72h后,流式细胞术检测凋亡和细胞周期分布变化,并以正常培养细胞作为对照.结果 对照组正常生长HepG2细胞24、72h凋亡率分别为3.1%、4.2%、5.2%,加入姜黄素后凋亡率明显增加,并呈现时间和剂量依赖性.10μmol/L浓度组24、48、72h凋亡率分别为13.6%、22.9%、41.1%.细胞周期分布测定中.姜黄素药物组HepG2细胞出现明显的G2/M期阻滞,相比对照组有统计学意义(P<0.05).结论 姜黄素能抑制HipG2细胞生长,并且诱导其凋亡,阻滞细胞周期于G2/M期,其抗肿瘤活性具有广阔的应用前景,值得进一步研究.     

乙酰唑胺对食管癌细胞系E9706的放射增敏作用

目的 研究碳酸酐酶IX抑制剂乙酰唑胺对食管癌细胞系E9706的放射增敏作用及相关机制。方法 MTT实验确定1 μM浓度乙酰唑胺为放射增敏研究中的药物浓度。1 μM乙酰唑胺处理E9706细胞24 h后,给以不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)6MV-X线照射,克隆形成实验检测乙酰唑胺放射增敏作用。流式细胞仪进行细胞周期分析,蛋白印迹实验检测凋亡相关蛋白的表达情况。结果 乙酰唑胺对E9706细胞有浓度时间依赖性抑制作用,1 μM 乙酰唑胺有放射增敏作用,增敏比为1.40。细胞周期分析显示乙酰唑胺增加E9706细胞G2/M期细胞比例。蛋白印迹实验发现乙酰唑胺上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。结论 碳酸酐酶IX抑制剂乙酰唑胺在食管癌细胞系E9706中有放射增敏作用,增加G2/M期细胞比例及诱导凋亡参与了其放射增敏作用。     

IL-21基因对肝癌细胞抑瘤效应的辐射增敏作用

目的：探讨外源性IL-21基因联合放射对肝癌HepG2细胞抑瘤效应的辐射增敏作用。方法：将Ad—IL-21腺病毒颗粒转染HepG2细胞系,进行6Gy”’Cs7射线照射,将细胞分为4组,包括空白对照组、Ad—IL-21组、照射组以及联合组,观察HepG2细胞的生长、细胞周期和细胞凋亡的变化。结果：与Ad—IL-21组和照射组比较,联合组HepG2细胞的抑制效应最显著,转染48h的抑制率明显高于转染24h和72h的抑制率。联合组HepG2细胞阻滞在G2期最多,凋亡细胞所占比例最高,转染24h和48h的凋亡率分别达到29．1％和33．1％。结论：IL-21基因联合放射对肝癌细胞的抑瘤效应具有辐射增敏作用,明显地抑制肝癌细胞的生长。     

^32P照射对HL-60细胞增殖周期的影响

目的 观察^32P照射对HL-60细胞周期的影响。方法 不同剂量^32P体外照射HL-60细胞24、48和72h，流式细胞法检测细胞周期。结果 不同剂量^32P照射HL-60细胞对细胞周期有明显影响，首先发生G2/M期阻滞；随剂量增大，G2/M期和S期均发生阻滞，以G2/M期阻滞为主。结论 ^32P体外照射HL-60细胞对细胞周期有明显的干扰作用。     

大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究

目的研究大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖抑制、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法用不同浓度的大蒜素作用于体外培养的HepG2细胞,采用MTT法检测大蒜素对HepG2细胞增殖抑制能力,荧光显微镜观察HepG2细胞的形态学变化,流式细胞术检测大蒜素对HepG2细胞周期和凋亡率的影响。结果大蒜素可抑制人肝癌HepG2细胞增殖,且具有明显剂量和时间依赖性,24h、48h和72h大蒜素抑制HepG2细胞的IC50分别为(48.26±1.66)μg/mL、(31.89±1.51)μg/mL和(23.79±1.32)μg/mL。32μg/mL大蒜素作用HepG2细胞48h,可诱导其产生明显的细胞凋亡特征。流式细胞术检测表明大蒜素作用HepG2细胞后,可将细胞阻滞在G2/M期。结论大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖具有抑制作用,可能与诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期有关。     

放疗对人肝癌细胞株HepG_2凋亡的诱导作用

目的:探讨放疗对人肝癌细胞株HepG2细胞凋亡的影响,为放疗的临床应用提供依据。方法:不同剂量的X射线分别照射体外培养的HepG2细胞,照射后48h收集细胞,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和透射电镜分别检测各组细胞的凋亡情况。结果:TUNEL染色显示,2Gy、4Gy、6Gy、8Gy剂量组AI高于假照射组,细胞经4GyX射线照射后具有细胞凋亡的形态学特征。结论:X射线可诱导肝癌细胞HepG2细胞凋亡。     

流式细胞术分析不同剂量X射线对HL-60细胞周期的影响及其诱导的细胞凋亡

比较不同剂量X射线对HL-60细胞的影响,建立X射线诱导HL-60细胞凋亡的生物研究模型,探索细胞周期检测点对放射剂量的耐受性.采用对数生长期的HL-60细胞经2,5,10,15,20Gy的X射线照射后培养4h,用流式细胞仪分析HL-60细胞周期的改变.结果发现,不同剂量X射线照射均可诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率有随照射剂量增大而增高的趋势.经2,5Gy剂量照射的HL-60细胞主要表现为S期细胞的比例减少,G2/M期细胞的比例增多,经15,20Gy剂量照射的HL-60细胞主要表现为S期细胞和G2/M期细胞的比例均减少.结果显示,以X射线照射HL-60细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型,小剂量照射和大剂量照射可能引起不同时相的细胞发生凋亡,提示细胞对放射剂量的反应性与细胞周期检测点之间存在一定的关系.     

T细胞亚群与非小细胞肺癌预后的关系

研究细胞免疫功能与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ唯手术综合治疗预后的关系。从１９９２年１月至１９９４年１２月，对２６６例接受放疗和化疗综合治疗的非小细胞肺癌患者检测周围血Ｔ淋巴细胞亚群，经４年随访，采用Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ生存曲线经Ｌｏｇ—ｒａｎｋ检验，比较细胞免疫功能尚好组（Ｔ４／Ｔ８≥１）与较差组（Ｔ４／Ｔ８＜１）患者的 １年、２年和３年肿瘤局部控制率、无远处转移率和生存率。结果：非小细胞肺癌患者的细胞免疫功能较正常人明显低下（＜０．０１）；Ｔ４／Ｔ８≥ｌ和Ｔ４／Ｔ８＜ｌ两组的肿瘤局控率无明显差异（Ｐ＝０．２４５）；但前者的肿瘤无远处转移率和生存率显著优于后者（Ｐ＝０．００９和Ｐ＝０．００５）。结论：细胞免疫状态对非小细胞肺癌的治疗效果密切相关，良好的免疫功能可能通过抑制肿瘤的远处转移而提高患者的生存率。     

EFFECT OF SOMATOSTATIN ON THE CELL CYCLE OF HUMAN GALLBLADDER CANCER CELL

In the last decades, incidence rate of gallblad-der cancer was increasing in China, but the survivorrate was not satisfying even if the radical operationswere performed[1]. Since gallbladder cancer wasnon-sensitive to either chemotherapy or radiothera-py[2,3], many researches had been done to find somenew effective adjuvant approaches to improve the sur-vival of patient who suffered from this malignant dis-ease , especially the patients who lost the chance ofresection.Recent evidences showed t…     

肺鳞癌间质内肥大细胞计数的意义

①目的探讨间质内的肥大细胞与肺鳞癌生物学行为的关系。②方法采用甲苯胺蓝染色检测８９例经手术切除的肺鳞癌标本间质内每１０个高倍视野的肥大细胞数。③结果Ⅰ，Ⅱ级鳞癌中肥大细胞数明显多于Ⅲ级（ｔ＝２．９４，２．７４，Ｐ均＜０．０１），肿瘤直径＞５ｃｍ组的肥大细胞数明显少于３～５ｃｍ组和＜３ｃｍ组（ｔ＝３．１３，２．４２，Ｐ＜０．０１，０．０５），０．５年内死亡组肥大细胞数明显少于５年以上生存组和０．５～５．０年内死亡组（ｔ＝３．６８，２．７５，Ｐ＜０．０１），肥大细胞计数在有无淋巴结转移两组病人间差异无显著性（ｔ＝１．８５，Ｐ＞０．０５）。④结论肥大细胞与肺鳞癌细胞的分化、生长和病人预后有关，且具有一定的抗肿瘤作用。     

体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化的实验研究

目的:体外分离培养骨髓间充质干细胞(MSC),并诱导其向神经元细胞分化.方法:分离大鼠骨髓间充质干细胞,并于体外扩增、培养,并通过诱导培养基进行体外诱导培养,比较对照组及实验组间细胞形态和神经丝蛋白(NFP)表达率的不同.结果:诱导后,实验组中80%的细胞表现出神经元样形态,且NFP阳性表达率明显高于对照组.结论:MSC在体外可以被诱导为神经元样细胞.     

LAK细胞免疫活性研究

本文用~(51)Cr-铬酸钠释放法分析了由PBL、SPC和THC制备的LAK细胞免疫活性变化规律。证明LAK细胞的NK活性和LAK活性与IL-2有非常明显的正向依赖关系,与培养细胞密度有明显的负向依赖关系。无IL-2诱导,不表现LAK活性,在低细胞密度条件下少量的IL-2即可激活LAK细胞,细胞密度增大,IL-2剂量需要相应增加,用2×10~6/ml细胞密度制备LAK细胞,诱导LAK细胞活性的最佳IL-2剂量为1000 IU/ml。单用IL-2激活LAK细胞,NK活性高峰时相在48h左右;LAK活性高峰时相在60h前后。LAK细胞杀伤活性可以在培养液中维持1～2天时间,要在较长时间内维持LAK细胞活性,须定期更换培养基,添加IL-2。LAK细胞杀伤活性与细胞形态学变化不完全同步。     

肾癌细胞的增殖和凋亡状态

目的：探讨肾癌的发生和发展机制。方法：采用免疫组织化学和原位缺口末端标记方法对４８例肾癌和３０例癌旁正常肾组织进行细胞增殖和凋亡状态的研究。结果：４８例肾癌组织增殖指数为３５．７９，对照组为２．２３，两组间经统计学分析差异非常显著（Ｐ＜０．００１）。４８例肾癌组织凋亡指数为１．２１，对照组为０．１６，两组间统计学分析差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。并且增殖指数和凋亡指数均随肿瘤分级的增加而增高。４８例肾癌组织凋亡指数与增殖指数比值（０．０３５）明显低于对照组（０．１３），统计学分析差异显著（Ｐ＜０．０１），并随肿瘤分级的增加，凋亡指数与增殖指数比值逐渐减小。结论：肾癌组织中细胞凋亡处于抑制状态，细胞增殖的增加和凋亡的相对减少在肾癌的发生和发展中均起重要作用。     

EB病毒感染套细胞淋巴瘤细胞株的表型研究

目的：建立EBV潜伏感染的体外理想模型。方法：我们利用新霉素耐性的重组遗传基因EBV（NeoR EBV）对套细胞的细胞株SP53进行感染,用G418筛选,选出100％EBV阳性的MCL细胞株SP53／EBV。结果：此细胞株表达EBER1、EB．NAs、LMP1,表现出LCL型的EBV潜伏感染的免疫表型．结论：这次我们建立的SP53／EBV细胞株,具有低增殖功能,没有诱导出活性指标等特点,可考虑为机体内EBV休眠期B细胞具有的特征,期待此细胞株可成为研究体内EBV潜伏感染的良好模型。     

卵巢颗粒细胞瘤增殖细胞核抗原的表达及其与预后的关系

用免疫组化方法检测１６例卵巢颗粒细胞瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达水平，作组织学分型和核分裂计数，并进行随访。结果发现；弥漫型ＰＣＮＡ表达水平高，核分裂数多，患者预后差；幼年型和圆柱型ＰＣＮＡ表达水平低，核分裂数少，患者预后好。提示ＰＣＮＡ表达水平、卵巢颗粒细胞的组织学类型及核分裂计数与患者预后有关。