检测血吸虫循环抗原的多价单克隆抗体诊断试剂盒的研制和应用

用杂交瘤技术生产抗血吸虫肠相关循环阳极抗原（ＣＡＡ）单克隆抗体与血吸虫卵糖蛋白单克隆抗体经混合后标记辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），制成Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清中循环抗原，阳性率分别为８４．３％、８７．２％和９１．５％。累计阳性率为８９．２％（６１９／６９４）。对健康人、肝吸虫、肺吸虫病人血清均未出现阳性反应，显示有较高的敏感性和特异性。ＥＰＧ＞８０的病人循环抗原检出率高干ＥＰＧ／８０的病人。说明循环抗原检出率与感染度有关。血吸虫病人经吡喹酮治疗后半年和１年循环抗原转阴率分别为７１．４％和８８．６％。结果表明．该试剂盒可用于确诊病人和考核疗效。试剂盒质量稳定，操作简便快速，整个试验可在１小时内完成，且不需特殊仪器，适于现场大规模查病应用。     

检测日本血吸虫感染兔尿中循环抗原的研究

目的：建立检测尿液中血吸虫循环抗原的方法。方法：从感染家兔尿中提取血吸虫循环抗原,并用所提取的抗原制备和筛选抗该抗原的特异性单克隆抗体。用单抗二抗一步法酶联免疫试验检测感染家兔中的日本血吸虫循环抗原。结果：２２只家兔感染前尿液中的循环抗原全部阴性;感染后尿液中循环抗原的阳性率与感染度及感染时间有关。感染２５条尾蚴的家兔在感染后３ｗｋ未能测到循环抗原,而感染２００条尾蚴的家兔在感染３ｗｋ和６ｗｋ的尿循环抗原阳性率分别为４０％和１００％。结论：用感染兔尿中提取的循环抗原所制备的单抗作为探针,可用于检测感染动物尿液中血吸虫循环抗原     

血吸虫病单克隆抗体反向血凝试验的建立及应用初报

血吸虫病单克隆抗体反向血凝试验的建立及应用初报四川省寄生虫病防治研究所成都６１００４１黄民贵，朱瑞淑，李莉，周蕊，毛勇，黄■华，肖永富国内外学者利用杂交瘤技术，纷纷制备了各种抗血吸虫抗原的单克隆抗体（ＭＣＡｂ）．并建立了应用ＭＣＡｂ检测血吸虫循环抗原...     

单克隆抗体双抗体夹心ELISA检测日本血吸虫病人循环抗原

本文用抗日本血吸虫肠相关抗原的单克隆抗体Ｓｊ１１６和Ｓｊ１０ｃ作双夹心ＥＬＩＳＡ检测粪检阳性的血吸虫病人血清中的循环抗原，阳性率达９３．４％。正常人假阳性率为６．７％。与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫及囊虫病的交叉反应分别为３．２％、０、１３．３％和１３．３％。     

单克隆抗体74D11,SJA111检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和血卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数〈５只／２０克粪）、中度（－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、     

单克隆抗体双抗体夹心ELISA检测日本血吸虫病人循环抗原

本文用抗日本血吸虫肠相关抗原的单克隆抗体Ｓｊ１１６和Ｓｊ１０ｃ作双夹心ＥＬＩＳＡ检测粪检阳性的血吸虫病人血清中的循环抗原，阳性率达９３．４％。正常人假阳性率为６．７％。与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫及囊虫病的交叉反应分另伪３．２％、０、１３．３％和１３．３％。     

Dot—ELISA早期鉴别阳性钉螺的实验研究

应用抗血吸虫单克隆抗体的Dot－ELISA检测早期感染钉螺体内血吸虫抗原，并以镜检为对照。钉螺感染后，逐周取样30只进行检测，结果显示感染3wk后，钉螺血吸虫抗原的阳性率为70％。以后逐周增加，5wk为83．33％，8wk为96．67％。提示该法似有早期鉴别阳性钉螺的效能。     

日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究

探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。感染日本血吸虫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴结Ｂ细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探讨针，检测日本血吸虫病患者和健康人血清；晚期血吸虫病患者脾血和外周血；感染日本血吸虫兔和小鼠的门脉血和外周血。     

Dot-ELISA检测血吸虫病人循环抗原的应用

日本血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体,用于斑点酶联免疫试验(Dot-ELISA)检测循环抗原,是近几年应用的新方法,在实验研究方面获得十分满意的结果,并研制出检测循环抗原的试剂盒,使用更为方便.本文应用中国预防医学科学院寄生虫病研究所提供的单克隆抗体检测血吸虫循环抗原Dot-ELISA试剂盒,对其检测血吸虫病的应用价值进行了观察,结果如下.     

血吸虫病多价单克隆抗体诊断试剂盒的应用

单克隆抗体技术的发展为检测血吸虫循环抗原提供了特异的探针工具,展示了良好的应用前景。我们用杂交瘤技术制备了2株抗日本血吸虫肠相关循环阳极抗原(CAA)的单抗和1株抗虫卵糖蛋白的单抗。经混合后标记HRP,制成Dot-ELISA诊断试剂盒,经检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清694份,循环抗原阳性率分别为84.3％(86/102)、87.2％(177/203)和91.5％(365/389)。对照Kato-Katz粪便虫卵计数结果,EPG>80的病人组检     

单克隆抗体74D_(11)、SJA_(111)检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和虫卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数＜５只／２０克粪）、中度（６－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、９２．８％，检测６５例健康献血员，２０例肺吸虫病人，１２例华支睾吸虫病人，１０倒包虫病人，交叉反应率依次为１．５％、５％、０％、０％，４２例经吡喹酮治疗后的血吸虫病人用该方法复查，治后３月和６月随访粪孵毛蚴阴转者中，循环抗原阴转率分别为７８．０％和９２．１％，考核疗效明显优于检测循环抗体。用单抗ＳＪＡ１１１检测感染家兔循环抗原动态变化，循环抗原于感染后３—４周可检出，７周达高峰，以后逐渐消退，而循环抗体（ＩｇＧ）推迟１周出现，８－９周达高峰。实验结果表明，血吸虫病血清ＣＡｇ阳性率与感染度有关，可在早期检出，检测方法具有较高敏感性和特异性，可用于早期诊断和疗效考核。     

单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原的研究Ⅱ

将血吸虫肠相关阳极抗原单克隆抗体1B10A标记过氧化物酶后用于Dot-ELISA检测了急、慢性血吸虫病人血清中循环抗原,阳性率分别为90％、80.8％,除肺吸虫外,对其他主要的寄生虫病感染、非寄生虫感染性疾病及正常人无阳性反应。检测EPG>80病人血清中的抗原水平高于EPG<80者;病人经有效药物治疗后,粪检阳性者,大部分抗原检测转为阴性,其余抗原滴度呈不同程度下降。将该单克隆抗体与肠相关阴极抗原的单克隆抗体,分别检测同批血清,结果基本一致。将肠相关阳极抗原与阴极抗原的单克隆抗体联合应用,能增强某些弱反应。     

McAb-JPG3采用R-IHA检测血吸虫循环抗原的实验研究

自80年代后期Feldmeier用单克隆抗体放射免疫法检测血吸虫循环抗原以来, 国内外学者对单克隆抗体用于血吸虫病诊断进行了大量研究,先后报道了双抗体夹心ELISA、斑点ELISA、竞争性ELISA等各种方法.本文试将我们自制的抗日本血吸虫肠相关抗原的单克隆抗体JPG3(McAb-JPG3),采用反向间接血凝(R-IHA)方法检测日本血吸虫病人循环抗原,以期寻找一种简便、经济适用于现场的查病方法.     

四川省丹棱县飞龙、严沟村血吸虫病流行现状调查

目的 了解飞龙、严沟两个村血吸虫病的流行现状。方法 4－65岁村民均采用粪孵法和EIA检测血吸虫循环抗原及ELISA检测血吸虫抗体三种方法检查，在两个村的钉螺易孳生场所进行了钉螺调查。结果 粪孵共计1312人，阳性率8．92％，飞龙感染率15．45％明显高于严沟。EIA检测血吸虫循环抗原，共计1526人，阳性率37．09％，ELISA检测共计1523人，阳性率39．66％。压检17416只钉螺，未查到阳性钉螺。结论 该地区血吸虫人群感染率仍然较高。     

小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体

目的： 探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法： 将日本血吸虫病患者尿液用１５％ 三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ小鼠制备单克隆抗体。结果： 建立了 ２ 株分泌抗人尿日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株２ Ｅ６ 及２ Ｂ１１,两者免疫球蛋白鉴定均属 Ｉｇ Ｍ 类, Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ测得单抗对尿液循环抗原（ Ｉ Ｈ Ｕ Ｃ Ａｇ）,效价分别为２．５６×１０５ 和６．４×１０４ 。琼脂双扩散试验显示２ 株单抗与正常人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线,而２ Ｅ６ 与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用２ Ｂ１１ 和２ Ｅ６ 腹水为捕捉抗体, Ｈ Ｒ Ｐ Ｈ１１ 为酶标抗体检测 １２ 例急性血吸虫病患者尿液,依次为６ 例和３ 例阳性,８ 例正常人尿液均为阴性。结论： 用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠制备单克隆抗体用于检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。     

应用Dot-ELISA进行日本血吸虫循环抗原检测时其滴度与感染度关系的动态观察

以２０条／只和１００条／只剂量的尾蚴感染家兔，并于第９ｗｋ用吡喹酮对约半数家兔进行一次性灌胃治疗，依此建立日本血吸虫感染模型。用分别定位于日本血吸虫表皮膜、肠道上皮和虫卵的单克隆抗体建立直接斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）并应用该法分别检测感染家兔血中３类循环抗原、膜相关抗原（ＭＡＡ），肠相关抗原（ＧＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ），观察循环抗原滴度水平和日本血吸虫感染度之间的关系。结果发现，当用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测３类循环抗原时，２０条尾蚴感染组与１００条尾蚴感染组家兔不论治疗与否，血中３类循环坑原滴度水平无显著性差异。因此Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测循环抗原不适宜于作为日本血吸虫感染度的判断方法     

联合检测循环抗原和抗体在血吸虫病基本控制地区应用价值的研究

血吸虫病基本控制地区７岁以上的人群共８４７名为检测对象，应用抗日本血吸虫ＣＣＡ单克隆抗体ⅢＤ１０建立的Ｄｅｔ－ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原（ＣＡｇ），ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测循环抗体（ＣＡｂ）。结果ＣＡｇ的阳性检出率为３．１９％，ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测ＣＡｂ的阳性检出率分别为６．２６％和９．４５％，两者的检出车间差异有显著性（Ｐ＜０．０１），ＣＡｇ与ＣＡｂ（ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ检测）的联合检出率分别为６．８５％和１０．５１％，两者联合检测能提高检出率。     

日本血吸虫三类循环抗原和循环抗体对感染家兔疗效考核价…

采用三株分别定位于日本血吸虫表皮膜，肠道上皮和虫卵的单克隆抗体Ａ６，ＳＪ３１／３２和ＳＥ９作为捕获抗体建立检测三类循环抗原的斑点酶联免疫吸附实验方法，并利用该方法和普通ＥＬＩＳＡ分别观察了血吸虫感染家兔血清中三类循环抗原和ＩｇＧ抗体的动态变化情况。     

二种血吸虫循环抗原平行检测的效果观察

单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和快速检测血吸虫循环抗原酶法单独检测血吸虫循环抗原的效果已有报道,但未见其平行检测结果.为此,我们于1993年在云南省血吸虫病流行区进行了此项观察.     

单克隆抗体Dot－ELISA直接法检测血吸虫病循环抗原的现场应用

单克隆抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ直接法检测血吸虫病循环抗原的现场应用湖北医科大学血吸虫病研究室（武汉４３００７１）倪永晖，陈静卿，蒋明森沙市市血吸虫病防治所黄盘兴近年来应用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）检测血吸虫肠相关循环抗原取得了较好的结果￣［１～３］。作者曾...