沃尔巴克氏体与淡色库蚊溴氰菊酯抗性关系初步研究

目的 目的 探讨沃尔巴克氏体与淡色库蚊溴氰菊酯抗性间的相关性。 方法 方法 以PCR鉴定本实验室饲养的淡色库 蚊体内的沃尔巴克氏体, 采用实时定量PCR技术 （qRT?PCR） 测定并比较淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中沃尔巴克 氏体表达差异。 结果 结果 本实验室饲养的淡色库蚊体内含有沃尔巴克氏体。淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系卵、 一龄蚊、 二 龄蚊、 三龄蚊、 四龄蚊、 雌蚊、 雄蚊体内沃尔巴克氏体表达水平分别是敏感品系的18.42、 3.69、 4.43、 3.96、 6.31、 1.55、 3.76 倍, 差异均有统计学意义 （P均< 0.05）, 而抗性品系和敏感品系蛹中沃尔巴克氏体表达水平差异无统计学意义 （P > 0.05）。南京江心洲溴氰菊酯抗性雌蚊体内沃尔巴克氏体表达水平是敏感雌蚊的2.64倍。 结论 结论 沃尔巴克氏体可能与 淡色库蚊对溴氰菊酯产生抗性有关。     

淡色库蚊对溴氰菊酯抗性的遗传分析

目的：对室内选育的淡色库蚊抗溴氰菊酯品系（抗性系数５１８）进行遗传分析。方法：采用ＬＣ－Ｐ值分析法研究淡色库蚊溴氰菊酯抗性的形式遗传。采用抑制剂增效试验探讨抗性机制。结果：正交和反交Ｆ１代的抗性系数分别为１５４．８和１５９．２。Ｆ１代的ＬＣ－Ｐ线靠近抗性亲本一方，Ｄ＝０．６２５；ＢＣ代在死亡率５０％处、Ｆ２代在死亡率２５％和７５％处未出现明显平坡，ＢＣ和Ｆ２的实测曲线和理论曲线均存在较大差异，Ｐ均＜０．０１；ＰＢ、ＤＥＦ和ＴＰＰ对抗性品系的增效比分别为２７．１３、１．２２和１．０５。结论：淡色库蚊对溴氰菊酯的抗性为多基因遗传，其主要基因为不完全显性，多功能氧化酶是抗性的主要因子。     

淡色库蚊抗性品系生态习性的探讨

实验观察淡色库蚊敏感品系的化蛹率显著高于抗DDVP品系及抗氯氰菊酯系 (χ2值为25.98和20.64,P＜0.05),而抗性品系幼虫历期略短于敏感品系;亚致死剂量氯氰菊酯对抗氯氰菊酯品系及敏感品系的Ⅲ～Ⅳ龄淡色库蚊幼虫化蛹有显著影响,抗性品系蚊虫寿命略有延长.表明长期使用单一的杀虫剂蚊虫易产生抗性.     

淡色库蚊抗DDVP品系抗性发展及交互抗性

目的探讨淡色库蚊DDVP抗性品系对4种化学杀虫剂的抗性发展及交互抗性，为合理使用杀虫剂提供依据。方法采用WHO标准生物测试法。结果经过43代的选育，抗DDVP品系的抗性达12．17倍，在21代时，对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗性倍数分别是6．55、4．16、43．27、0．70倍；到第30代时，分别是8．17、4．74、52．48、0．75倍；到39代时，对DDVP的抗性为10．37倍，对残杀威、氯氰菊酯的抗性分别为6．96倍、160．43倍。结论长期使用一种杀虫剂易产生抗性，亦对其他杀虫剂产生交互抗性，用药时应注意种类的选择。     

用核酸探针检测淡色库蚊溴氰菊酯抗性

目的　用淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关胰蛋白酶核酸探针检测淡色库蚊溴氰菊酯抗性。方法　用逆Northern鉴定抗药性品系和敏感品系中胰蛋白酶的表达差异 ,用随机引物法标记鉴定后的胰蛋白酶cDNA片段为探针Northernblot检测淡色库蚊的抗药性。结果　逆Northern显示胰蛋白酶在抗药性品系中的表达量是敏感品系的 4 33倍。以其为探针Northernblot检测显示 ,胰蛋白酶基因在抗药性品系中高表达 ,抗药性品系中胰蛋白酶的表达量是敏感品系的 3 90倍。结论　作为一种新的抗药性检测的分子生物学方法 ,胰蛋白酶核酸探针可用于区分抗药性品系和敏感品系     

淡色库蚊DDVP抗性与酯酶活性的相关性

目的检测抗DDVP品系各世代的抗性指数及蚊体内酯酶(esterase)的活性,探讨蚊虫抗性与酯酶的关系。方法生物测定法,微滴定板法。结果淡色库蚊经过43代选育,抗性指数达12.17倍,蚊体内非特异性酯酶(nonpecificesterase,NSE)的活力随世代增加抗性增高而增强。OD≥0.9的个体频率逐渐增高,与生物测试法基本一致。乙酰胆碱酯酶(AChE)的平均抑制率随世代的增加、抗性增高而变低,而抑制率<30％的个体频率随世代增加而增加,呈相关关系。结论DDVP抗性与酯酶NSE和AChE的活性呈一定的相关关系。     

对溴氰菊酯抗性和敏感淡色库蚊不同发育阶段的抗性水平

对室内选育的淡色库蚊（对溴氰菊酯抗性品系和敏感品系）用浸渍法测定了Ⅱ龄、Ⅲ龄和Ⅳ龄幼虫，用接触筒法测定了早期、中期和晚期成虫；并观察了增效醚（ＰＢ）、磷酸三苯酯（ＴＰＰ）和杀虫脒与溴氰菊酯混用后的增效效果。结果表明：（１）淡色库蚊各发育阶段对溴氰菊酯的抗性水平，在敏感品系由高至低依次为中期、晚期、早期成虫、Ⅳ龄、Ⅲ龄和Ⅱ龄幼虫；在抗性品系则为早期、中期、晚期成虫、Ⅳ龄、Ⅲ龄和Ⅱ龄幼虫。（２）ＰＢ和杀虫脒均有明显增效作用，提示抗性可能与氧化代谢增强和靶标部位不敏感有关。其中似乎幼虫阶段以氧化代谢增强为主要抗性机制；在成虫阶段，氧化代谢增强和靶标部位不敏感性均在抗性中起重要作用     

淡色库蚊对常用杀虫剂长期选育的抗性水平及交互抗性

目的了解淡色库蚊对3种常用化学杀虫剂长期选育的抗性状况及5种杀虫剂的交互抗性,为合理有效地进行蚊虫化学防治提供依据。方法采用WHO生物测定方法,测定淡色库蚊对3种杀虫剂长期选育的抗性水平。结果经过42代选育,淡色库蚊对敌敌畏（DDVP）、残杀威和氯氰菊酯的抗性指数分别最高达12．17、11．78和534．31倍。结论经过长期选育,发现淡色库蚊对3种常用化学杀虫剂均产生不同程度的抗药性及交互抗性,提示应采取适当措施克服或延缓蚊虫抗药性的产生和发展。     

淡色库蚊对3种化学杀虫剂交互抗性的实验研究

目的 目的 了解淡色库蚊对常用化学杀虫剂的交互抗性, 为合理使用化学杀虫剂提供依据。方法 方法 采用WHO生物 测定方法, 检测淡色库蚊敏感品系和抗敌敌畏、 抗残杀威、 抗氯氰菊酯3种抗性品系IV龄幼虫分别对敌敌畏、 残杀威和氯 氰菊酯3种化学杀虫剂的抗性。 结果 结果 淡色库蚊抗敌敌畏品系对敌敌畏、 残杀威和氯氰菊酯3种化学杀虫剂的抗性系 数分别为14.47、 8.96和207.27, 抗残杀威品系对上述3种杀虫剂的抗性系数分别为3.27、 6.93和8.65, 抗氯氰菊酯品系对 3种杀虫剂的抗性系数分别为2.93、 1.61和501.11。 结论 结论 长期使用一种化学杀虫剂易产生抗性, 并对其他化学杀虫剂 产生不同程度的交互抗性。使用杀虫剂时应注意选择药物品种和剂量, 以避免和延缓蚊虫抗药性的产生。     

用核酸探针检测淡色库蚊溴氰酯抗性

目的：用淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关胰蛋白酶核针检测淡色库蚊溴氰菊抗性。方法：用逆Northern鉴定抗药性品系和敏感品系中中胰蛋白酶的表达差异，用随机引物法标记鉴定后的胰蛋白酶cDNA片段为探针Northern blot检测淡色库蚊的抗药性。结果：逆Northern显示胰蛋白酶在抗药性品系中的表达量是敏感品系的4．33倍。以其为探针Northern blot检测显示，胰蛋白酶基因在抗药性品系中高表达，抗药性品系中胰蛋白酶的表达量是敏感品系的3．90倍。结论：作为一种新的抗药性检测的分子生物学方法，胰蛋白酶核酸探针可用于区分抗药性品系和敏感品系。     

淡色库蚊敌敌畏抗性和氯氰菊酯抗性品系对常用化学杀虫剂的交互抗性

目的了解淡色库蚊对6种常用化学杀虫剂的交互抗性,为科学使用化学杀虫剂提供依据。方法采用WHO生物测定方法检测淡色库蚊敏感品系、敌敌畏抗性品系和氯氰菊酯抗性品系Ⅳ龄幼虫对三氯杀虫酯、敌敌畏、马拉硫磷、残杀威、氯氰菊酯和溴氰菊酯等6种常用化学杀虫剂的敏感性,每次测定设置7个浓度,每个浓度设2组,每组25个幼虫,24h后统计幼虫死亡数据,计算致死中浓度(median lethal concentration,LC_(50))、回归方程和抗性指数。结果淡色库蚊敌敌畏抗性品系对三氯杀虫酯、敌敌畏、马拉硫磷、残杀威、氯氰菊酯和溴氰菊醑的LC_(50)分别为1.9623mg/L、1.1607mg/L、0.7359mmg/L、0.9002mg/L、0.0220mg/L和0.000 1 mg/L,回归方程分别为Y=3.5287+5.0254X、Y=4.6962+4.693 7X、Y=5.5051+3.853 6X、Y=5.2350+5.1476X、Y=10.4995+3.3184X和Y=13.2977+2.1683X,抗性指数分别为9.25、12.17、9.14、7.93、183.47和0.71;淡色库蚊氯氰菊酯抗性品系对三氯杀虫酯、敌敌畏、马拉硫磷、残杀威、氯氰菊酯和溴氰菊酯的LC_(50)分别为5.572 8mg/L、0.2464mg/L、0.0892mg/L、0.202 7mg/L、0.064 1 mg/L和0.008 5mg/L,回归方程分别为Y=2.7728+2.9852X、Y=7.2054+3.6260X、Y=9.475 1+4.2635X、Y=6.8106+2.6125X、Y=8.7404+3.1352X和Y=14.6951+4.6853X,抗性指数分别为26.27、2.58、1.10、1.79、534.31和40.60。结论长期使用一种化学杀虫剂会导致蚊虫产生抗药性,并对其他化学杀虫剂产生不同的交互抗性,应采取合理选择杀虫剂品种和确定使用剂量等有效措施以避免蚊虫抗药性的产生。     

安徽省中北部淡色库蚊对多种杀虫剂抗性及其kdr基因突变研究

目的 目的 了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 方法 2014年 6-9月在淮北市、 蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫, 带回实验室饲养至成虫, 采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触 法对其进行0.05%溴氰菊酯、 5%马拉硫磷、 0.1%噁虫威、 4%DDT抗性生物测定。以PCR扩增经溴氰菊酯抗性测定的库蚊 抗性相关kdr基因并进行测序, 统计L1014位点突变情况。结果 结果 上述3个地区淡色库蚊对溴氰菊酯、 马拉硫磷、 噁虫 威、 DDT 4种杀虫剂都产生了不同程度的抗药性, 对DDT产生的抗性较高; 虽然3地淡色库蚊接触DDT后的死亡率差异 无统计学意义 （F = 1.027,P > 0.05）; 但接触溴氰菊酯、 马拉硫磷、 噁虫威后的死亡率差异均有统计学意义 （F = 23.823、 33.955、 128.841, P均< 0.01）。3地淡色库蚊种群的kdr基因1014位点均存在L1014F、 L1014S 这2种非同义突变; L1014F 突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关 （r 2 = 0.718, P < 0.01）。结论 结论 安徽省中北部地区淡色库蚊对溴氰菊酯、 马拉硫 磷、 噁虫威、 DDT均产生了较强的抗性, kdr基因L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关; 各地区卫生部门需加强 对媒介蚊虫抗性的动态监测。     

淡色库蚊抗敌敌畏和抗氯氰菊酯品系的抗性演变

本研究采用敌敌畏和氯氰菊酯对淡色库蚊敏感品系进行选育,至第42代,抗敌敌畏和抗氯氰菊酯品系的抗性指数分别为亲代的12.2倍和534.3倍。选育停止后经20代常规饲养,抗敌敌畏和抗氯氰菊酯品系的抗性指数分别降至6.1倍和83.3倍。表明淡色库蚊对敌敌畏和氯氰菊酯抗性形成和下降速度均不相同。     

淡色库蚊酯酶活性频率与有机磷酯剂抗性关系

本文报告了采用生物测定法（ＬＣ５０）和改进的Ｐａｓｔｅｕｒ＆Ｇｅｏｒｇｈｉｏｕ（１９８１）滤纸片法测定的淡色库蚊对有机磷酯剂的抗药性．结果证实：１．我国淡色库蚊对有机磷醋剂的抗药性，酯酶Ａ和酯酶Ｂ都在其中起了重要作用．２．α－醋酸萘酯为酯酶Ａ和Ｂ的共同底物．因此，用α－醋酸萘酯为底物的方法检测单个蚊虫对有机磷酯的抗药性是成功的．３．从全国１１个城市检测结果分析，淡色库蚊对有机磷酯的抗药性同酯酶的聚集频率是一致的，而与生物测定法检出的ＬＣ５０与酯酶活性频率的聚集度不完全平行，特别是在中低度抗性时如此。因此，淡色库蚊对有机磷酯的抗性在高抗性区可用测定酯酶的频率来代替毒效生物测定法，而在低抗性区则不能。     

淡色库蚊对残杀威抗性机制的研究--酯酶与抗性的关系

为探讨酯酶与抗性的关系，采用生物测定法和微滴定板法，检测淡色库蚊抗残杀威品系各世代的抗性指数及蚊体现人酯酶的活性。淡色库蚊经过43代的汰选，抗性指数达到11.26倍；蚊体内的乙酰胆碱酯酶（AchE)活性的平均抑制率随世代的增加而变低，低于30%的个体频率随世代的增加而增加，呈正相关关系；非特异性酯酶（NSE）的活力随世代的增加而增强，而高于或等于0.9的个体频率逐渐增高，与生物测试法基本一致。抗残杀威品系AchE的不敏感性与抗性呈正相关关系，NSE的活力与抗性亦呈相关关系。     

非特异性酯酶在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用研究

目的　探讨非特异性酯酶（Non-specific esterase,NSE）在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用。方法　以β-乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定室内5个品系淡色库蚊的NSE活力。结果　5个品系淡色库蚊中以抗DDVP品系NSE活力水平最高,其次为抗DDVP降解品系和抗残杀威品系。抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近。结论　NSE在淡色库蚊对有机磷类杀虫剂的抗性中起重要作用,也是对氨基甲酸酯类杀虫剂产生抗性的机制之一,与对拟除虫菊酯类杀虫剂的抗性关系不大。     

非特异性酯酶在淡色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用研究

目的：探讨非特异性酯酶（Non-specific esterase,NSE)在谈色库蚊对不同杀虫剂抗性中的作用。方法：以β－乙酸萘酯为底物,坚固蓝B盐为显色剂,测定室内5个品系淡色库蚊的NSE活力。结果：5个品系淡色库蚊中以抗DDVP品系NSE活力水平最高,其次为抗DDVP降解品系和抗残杀威品系,抗氯氰菊酯品系较低,与敏感品系相近。结论：NSE在淡色库蚊对有机磷类杀虫剂的抗性中起重要作用,也是对氨基甲酸酯类杀虫剂产生的机制之一,与对拟除虫菊类杀虫剂的抗性关系不大。     

对溴氰菊酯抗性和敏感淡色库蚊不同发育阶段的抗生水平

对室内选育的淡色库蚊用浸渍法测定了Ⅱ龄，Ⅲ龄和Ⅳ龄和幼虫，用接触筒法了早期，中期和晚期成虫。并观察了增效醚，磷酸三苯酯和杀虫脒与溴氰菊酯混用后的增效效果。结果表明：１．淡色库蚊各发育阶段对溴氰菊酯的抗性水平，在敏感品系由高至低依次为中期，晚期，早期成虫，Ⅳ龄，Ⅲ龄和Ⅱ龄幼龄，在抗性品系为早期，中期，晚期成虫，Ⅳ龄，Ⅲ龄和Ⅱ龄幼。２．ＰＢ和杀虫脒均有明显增效作用，提示抗性可能与氧化代谢增强和靶标部位