纳米SiO_2引起肝细胞自噬功能紊乱的研究

目的研究纳米二氧化硅(Si O2)对肝细胞自噬功能的影响。方法以人肝癌细胞Hep G2为模型,分为对照组和Si O2处理组。用透射电子显微镜观察Si O2粒子的大小、形貌和分散性。细胞处理24 h后,透射电子显微镜观察自噬体的超微结构;激光共聚焦显微镜观察LC3B蛋白在细胞内的分布;Western blot检测Si O2不同剂量处理组中自噬标志蛋白LC3B和p62的表达水平。用自噬抑制剂氯喹预处理,检测Si O2对自噬流的影响。结果透射电子显微镜结果显示Si NPs粒子大小均匀,形貌良好,分散性好,未发生聚集,平均粒径为58.25±7.4 nm。透射电子显微镜下观察到Si O2处理组的细胞内有大量自噬体;激光共聚焦显微镜下观察到Si O2处理组的细胞内出现LC3B的点状聚集;Hep G2细胞中LC3B和p62的蛋白表达水平随Si O2处理剂量的增加而升高,并且高剂量Si O2阻断了细胞自噬流。结论 Si O2诱导Hep G2细胞发生自噬,促进自噬体的产生;Si O2阻断自噬流,抑制自噬体的降解;从而导致自噬体的积累,引起肝细胞自噬功能紊乱。     

不同粒径SiO_2颗粒诱导细胞自噬的研究北大核心CSCD

目的探讨不同粒径二氧化硅(Si O_2)颗粒诱导的细胞自噬,进一步阐明其机制。方法以体外培养的支气管上皮细胞(BEAS-2B)为模型,随机分为对照组和Si O_2(Si200,Nano-Si60,Nano-Si40)颗粒暴露组,暴露浓度为25μg/ml。采用透射电子显微镜(TEM)观察Si O_2粒径、形貌及分散性。细胞处理24 h后,MTT法测定细胞活力;透射电子显微镜观察Si O_2颗粒摄取及细胞自噬超微结构;Western blot检测3-MA预处理后自噬标志蛋白LC3的表达。结果电镜显示3种Si O_2颗粒分布均匀,大小一致,颗粒呈球形,分散性好,未发生聚集。用Image J软件计算得到颗粒平均粒径分别为46.26±5.68 nm、61.51±7.82 nm和206.31±6.35 nm。与对照组相比,Si O_2颗粒作用于BEAS-2B细胞后,细胞活力下降(P<0.05);电子显微镜观察显示Nano-Si60和Nano-Si40处理组细胞内呈现出自噬泡累积,自噬泡内含有明显的高电子密度Si O_2颗粒及被部分降解的细胞内物质并伴有不同程度的线粒体损伤;Western blot显示LC3蛋白水平在Nano-Si60和Nano-Si40处理组有明显变化,加入3-MA预处理后LC3表达受到抑制。结论 Si O_2颗粒可降低支气管上皮细胞存活率,并具有剂量和粒径依赖趋势;纳米级Si O_2颗能够诱导细胞发生自噬而微米级Si O_2颗粒则不诱导细胞自噬;3-MA能够在一定程度上抑制Si O_2颗粒诱导细胞自噬发生。     

自噬对肝癌HepG2细胞增殖及对细胞周期影响的研究

目的研究用诱导肝癌HepG2细胞自噬与抑制肝癌HepG2细胞自噬的方法检测自噬对肝癌HepG2细胞增殖的影响,阐明细胞自噬的发生与细胞周期的关系。方法常规培养肝癌HepG2细胞,应用MTT比色法和流式细胞仪检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化。结果自噬诱导剂雷帕霉素组的肝癌HepG2细胞抑制率明显高于对照组（P〈0.05）,对照组的肝癌HepG2细胞抑制率明显高于自噬抑制剂3-MA组（P〈0.05）;流式细胞仪分析示自噬诱导剂雷帕霉素组细胞周期中G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多（P〈0.05）。自噬抑制剂3-MA组细胞周期中G1期细胞减少,S期细胞增多,G2/M期细胞相对减少（P〈0.05）。结论自噬对肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,自噬不利于肝癌HepG2细胞成活。肝癌HepG2细胞自噬的发生多停留在细胞周期的G1期。     

三氧化二砷对胃癌细胞凋亡与自噬的影响北大核心CSCD

目的探讨三氧化二砷对HGC-27胃癌细胞凋亡与自噬的影响,联用自噬抑制剂氯喹后进一步观察三氧化二砷的抗癌作用。方法取对数生长期的HGC-27胃癌细胞,分为对照组(正常培养的细胞)、不同浓度实验组(三氧化二砷浓度为2,4,8,16μmol·L-1)、氯喹组(氯喹6.25μg·ml-1)、联合用药组(三氧化二砷4μmol·L-1+氯喹6.25μg·mL-1)。以噻唑蓝(MTT)法检测三氧化二砷对HGC-27胃癌细胞的影响,以Annexin V-FITC/PI双染法检测药物对胃癌细胞凋亡的影响,以透视电镜观察胃癌细胞的结构,以Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力,以蛋白质印迹(Western Blot)法检测凋亡与自噬相关蛋白。结果药物干预48 h, 2,4,8,16μmol·L-1实验组HGC-27胃癌细胞抑制率分别为(68.40±0.18)%,(61.33±0.39)%,(29.35±1.28)%,(6.00±0.72)%,氯喹组与联合用药组细胞抑制率分别为(87.57±4.22)%,(31.13±1.39)%;药物干预48 h,对照组和2,4,8,16μmol·L-1实验组细胞凋亡率分别为(6.23±1.45)%,(8.97±1.44)%,(14.50±1.39)%,(34.23±2.85)%,(69.07±1.27)%,氯喹组与联合用药组细胞凋亡率为(5.43±1.33)%,(28.33±0.50)%;药物干预48 h,对照组、氯喹组、4μmol·L-1实验组与联合用药组穿过Transwell小室的细胞数分别为60.00±8.04,33.25±3.86,24.00±1.83,6.00±2.16。药物干预48 h,与对照组相比,三氧化二砷能增加细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ的表达量,降低p62蛋白的表达量;增加细胞中凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP及Bax的表达,减少PARP及Bcl-2蛋白表达;与对照组和4μmol·L-1实验组相比,联用自噬抑制剂氯喹后,胃癌细胞中自噬相关蛋白p62及LC3B-Ⅱ表达量显著增加,凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3、Cleaved-PARP及Bax表达明显增加,而PARP及Bcl-2蛋白表达显著减少(均P<0.05)。结论三氧化二砷通过降低胃癌细胞的增殖活性,增加胃癌细胞的凋亡率,抑制胃癌侵袭力来发挥抗肿瘤作用,同时三氧化二砷能诱导胃癌细胞产生自噬,而抑制自噬能进一步增强三氧化二砷对胃癌细胞的抗癌作用。     

苦参碱对肝癌细胞增殖及其细胞自噬的影响

目的探索苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖及其细胞自噬的影响,为临床探索有效的肝癌综合治疗方案提供实验依据。方法采用MTF法和流式细胞仪检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率及其细胞周期的变化;荧光显微镜定性观察肝癌细胞自噬情况。结果苦参碱抑制肝癌HepG2细胞的增殖,且随苦参碱浓度的增加和时间的延长,肝癌HepG2细胞的抑制率增加（P〈0．05）。流式细胞仪检测示：苦参碱组细胞周期中G1期细胞增多,S期细胞减少（P〈0．05）。荧光显微镜检测：肝癌HepG2细胞质中有自噬体形成,且随苦参碱浓度的增加,自噬体越来越多。结论苦参碱对肝癌HepG2细胞增殖有一定的抑制作用,苦参碱抑制肝癌细胞的同时诱导了自噬的产生。苦参碱诱导肝癌HepG2细胞自噬多发生在细胞周期的G1期。     

对乙酰氨基酚对肝细胞自噬行为的研究

目的研究对乙酰氨基酚对肝细胞自噬行为的影响。方法采用肝细胞模型,对乙酰氨基酚浓度1~8 mmol·L~(-1),检测肝细胞活力指标、肝细胞形态指标以及肝细胞自噬指标。结果对乙酰氨基酚在浓度1~8 mmol·L~(-1)范围内,浓度依赖的抑制肝细胞活力,改变肝细胞的形态结构;MDC观察自噬体结果提示在浓度0.5~8 mmol·L~(-1)范围内,能使肝细胞自噬明显升高,上调基因Beclin~(-1)的表达,自噬升高幅度呈现上升后下降的趋势,转折点为1 mmol·L~(-1)。结论本研究结果得出,对乙酰氨基酚能影响肝细胞的自噬行为,在0.5~1 mmol·L~(-1)浓度范围内,促进自噬;在2~8 mmol·L~(-1)浓度范围内,对自噬的促进作用逐渐减弱。     

Anicequol抑制HepG2细胞自噬的抗肿瘤作用研究

目的 探讨从海洋真菌Penicillium dipodomyicola分离的anicequol抑制肝肿瘤细胞株HepG2增殖与自噬的关系。方法 HepG2分别用 0、2.5、5或10μmol·L?1 的anicequol处理,CCK-8法检测对HepG2的增殖作用,透射电镜观察对自噬囊泡的影响,Western blot检测对LC3II/I表达的影响,mRFP-GFP-LC3腺病毒转染观察对自噬流的影响,吖啶橙(AO)染色检测对溶酶体膜通透性的影响,。结果 Anicequol显著抑制HepG2细胞增殖,透射电镜观察到典型的自噬囊泡,mRFP-GFP-LC3腺病毒转染显示绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白同步呈现荧光点状聚集,表明anicequol阻断HepG2的自噬流(P < 0.05)。AO染色表明anicequol引起HepG2溶酶体膜通透性增加,溶酶体膜的完整性被破坏(P < 0.05)。结论 Anicequol可通过调控肿瘤细胞自噬过程,阻断自噬流抑制HepG2细胞增殖。     

新型精胺氧化酶抑制药对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡和自噬的影响北大核心CSCD

目的研究新型精胺氧化酶抑制药SI-4650对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法将SGC-7901细胞分为空白组(正常培养)、低、高剂量实验组(40、80μmol·L^(-1)SI-4650)、自噬抑制药3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(2.5 mmol·L^(-1)3-MA)、3-MA+低、高剂量实验组(2.5 mmol·L^(-1)3-MA+40、80μmol·L^(-1)SI-4650),均处理48 h。用化学发光法检测细胞中精胺氧化酶(SMO)活性,用细胞计数8(CCK8)法和流式细胞术检测细胞增殖和周期,用碘化丙啶(PI)/异硫氰酸荧光素(FITC)-Annexin V双染法检测凋亡细胞情况,用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白微管结合蛋白轻链-3Ⅰ/Ⅱ(LC3-Ⅰ/Ⅱ)表达水平。结果空白组与低、高剂量实验组中人胃癌SGC-7901细胞中相对SMO酶活性分别为(7293±195)、(4506±195)、(989±115)RLU·(mg·s)^(-1),S期细胞比例分别为(28.83±1.17)%、(32.23±1.21)%、(36.50±0.73)%,低、高剂量实验组与空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。空白组与低、高剂量实验组以及3-MA组与3-MA+低剂量实验组、3-MA+高剂量实验组中可见,细胞生长抑制率分别为(0.00±2.09)%、(43.61±2.29)%、(52.16±2.49)%、(1.81±4.43)%、(27.50±1.88)%、(34.22±1.07)%,细胞凋亡率分别为(7.01±2.09)%、(13.16±1.59)%、(25.35±2.32)%、(7.13±2.09)%、(8.61±1.59)%、(11.35±2.32)%,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值分别为0.01±0.03、0.58±0.04、2.73±0.03、0.03±0.01、0.06±0.02、0.23±0.03。低、高剂量实验组与空白组相比,低、高剂量实验组与对应浓度3-MA+低、高剂量实验组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论SI-4650能高效抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,机制可能与干扰多胺代谢、阻滞细胞周期S期和诱导细胞自噬、凋亡相关。     

黄连素通过B细胞淋巴瘤-2/自噬相关基因复合体抑制自噬减轻脑缺血再灌注损伤的研究

目的 探讨黄连素保护脑缺血再灌注损伤的可能作用机制.方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,并随机分为模型组、对照组、实验组和联合组,每组12只;另取12只正常大鼠仅分离颈总、颈外、颈内动脉,作为假手术组.对照组给予腹腔注射100 mg·kg-1黄连素(10 mg·mL-1);实验组给予腹腔注射25 mg·kg-1 ...     

麦冬皂苷B诱导人肝癌HepG2细胞自噬的分子机制研究

目的:研究麦冬皂苷B诱导人肝癌HepG2细胞自噬的分子机制.为临床抗肿瘤治疗提供理论依据.方法:MTT比色法检测人肝癌HepG2细胞增殖;流式细胞仪检测HepG2细胞的凋亡及细胞周期变化;吖啶橙、Lyso-Tracker Red(溶酶体红色荧光探针)染色、HepG2-GFP-LC3转染细胞等检测细胞自噬;Western blotting(蛋白质印迹法)检测人肝癌HepG2细胞自噬信号通路中关键蛋白的变化.结果:人肝癌HepG2细胞的增殖被麦冬皂苷B抑制,而且麦冬皂苷B可诱导人肝癌HepG2细胞发生自噬,但不诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,可导致LC3I转变为LC3II和Beclin-1(自噬标志性蛋白)表达增加,自噬抑制剂3-MA几乎完全逆转其抗增殖作用.Western blotting检测结果表明,AKT、mTOR和p70S6K的磷酸化及PTEN上调是被麦冬皂苷B抑制的结果.结论:麦冬皂苷B通过抑制Akt/mTOR信号通路诱导人肝癌HepG2细胞发生自噬.     

细胞自噬与肝癌中自噬的研究

肝癌目前是全世界常见肿瘤之一,并且随着人们生活习惯与环境的改变呈逐年增高趋势.肝癌的治疗目前仍以手术为主,并加以化疗或放疗,但对于中、晚期失去手术指征的患者只有选择化疗或放疗.但无论是手术或放、化疗仍然显示出极大的局限性,目前,探索及需求的是一种既具有高度的组织特异性,又有明确疗效的治疗手段,所以生物治疗成为肿瘤治疗的热点[1].国外研究者设想用甲种胎儿球蛋白(AFP)作为抗原来诱发宿主树突细胞(DCs)介导的免疫反应,以期筛选出有效抗肝癌DNA疫苗,解释DCs疫苗介导肝癌细胞死亡的具体途径,为肝癌的治疗拓展新思路.自从1962年自噬的发现,近十年来,随着对自噬研究的深入,其在疾病尤其是在肿瘤中的作用受到重视[2].在对肝癌治疗的探讨中,自噬与其发生及治疗耐药也逐渐引起关注.     

线粒体自噬在纳米氧化锌致心肌细胞毒性中的作用

目的 探讨纳米氧化锌(Zinc Oxide Nanoparticles,ZnO NPs)对人源心肌细胞(A human cardiomyocytes,AC16)的毒性作用特征,并从线粒体自噬角度探讨其作用机制.方法 利用透射电镜(Transmission electron microscope,TEM)和动态光散射法(...     

肝脏细胞自噬在肝纤维化中的作用研究进展

肝纤维化是由于各种致病因子引起的肝脏结缔组织的异常增生。肝星状细胞的活化被普遍认为肝纤维化的中心环节,在肝纤维化过程中,自噬在不同的肝脏细胞中发挥着不同作用。一方面,在肝巨噬细胞、肝内皮细胞和肝实质细胞中,自噬可影响肝细胞炎症损伤反应抑制肝纤维化的发生;另一方面,在肝星状细胞中,自噬可影响氧化应激、内质网应激和脂质代谢等促进肝纤维化的发生。本文对肝脏不同细胞自噬在肝纤维化中的作用进行综述,为开发延缓和逆转肝纤维化的药物提供更完善的理论基础。     

谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对耐药小细胞肺癌细胞H69AR的杀伤作用研究北大核心CSCD

目的研究谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对耐药小细胞肺癌细胞H69AR的细胞毒性作用。方法培养耐药小细胞肺癌细胞H69AR,将对数生长期耐药小细胞肺癌细胞H69AR随机分为8组:对照组仅加等量的培养液,其余7组实验组以倍比稀释的方式分别给予质量浓度为1.6×10^(-2),3.2×10^(-2),6.3×10^(-2),1.25×10^(-1),0.25,0.5,1μmol·L^(-1)的谷氨酰胺酶抑制剂CB-839。用噻唑蓝(MTT)法检测各组H69AR细胞活力的变化;用倒置显微镜观察H69AR细胞经CB-839作用后的形态学变化;用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3及细胞自噬标志蛋白LC3的表达。CB-839处理耐药小细胞肺癌细胞H69AR,分为CB-839组、氯喹组和CB-839联合自噬抑制剂氯喹组,用MTT法检测H69AR细胞活力的变化。结果不同质量浓度的CB-839作用H69AR细胞72 h后,H69AR细胞的活力均降低且呈明显的剂量依赖性,其中6.3×10^(-2),1.25×10^(-1),0.5,1μmol·L^(-1)实验组的细胞活力分别为74.3%,58.7%,41.7%,29.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。通过倒置显微镜观察,CB-839作用H69AR细胞72 h后,0.25,0.5,1μmol·L^(-1)实验组的细胞密度随着药物质量浓度升高而显著降低,且形态发生皱缩和坏死。Western blotting实验结果表明,CB-839诱导H69AR细胞发生细胞凋亡,并激活细胞自噬活动。当使用自噬抑制剂氯喹抑制细胞自噬时,CB-839对H69AR细胞的杀伤作用显著增强。结论谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对耐药小细胞肺癌细胞H69AR具有显著杀伤作用,在该过程中,H69AR细胞自噬活动增强,抑制自噬能进一步提高CB-839的抗肿瘤效应。     

依达拉奉对帕金森病小鼠模型中脑细胞自噬相关蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的研究依达拉奉对帕金森病(PD)小鼠模型中脑细胞自噬相关蛋白表达的影响。方法将42只C57BL/6雄性小鼠被随机分为对照组、模型组及实验组,各14只。模型组及实验组小鼠均腹腔注射25 mg·kg^(-1)1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立PD小鼠模型,对照组则腹腔注射等量生理盐水;建模成功后实验组腹腔注射3 mg·kg^(-1)依达拉奉,对照组及模型组则腹腔注射等量生理盐水,连续干预2周。以爬杆实验及悬挂实验对比小鼠行为学变化;用免疫组化法检测中脑黑质脑组织自噬相关蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠干预后1,2周爬杆时间均延长,悬挂实验评分降低(P<0.01);与模型组比较,实验组小鼠干预后1,2周爬杆时间均缩短,悬挂实验评分升高(P<0.01)。免疫组化显示,干预后2周,对照组、模型组及实验组小鼠中脑黑质脑组织Beclin1阳性细胞比例分别为(7.04±1.98)%,(27.05±2.01)%,(16.46±1.87)%;微管相关蛋白轻链3(LC3)阳性细胞比例分别为(5.41±1.67)%,(21.26±1.51)%,(14.86±1.49)%。与对照组比较,干预后1,2周模型组小鼠中脑黑质脑组织Beclin1及LC3阳性细胞比例明显增多(P<0.01);而实验组Beclin1及LC3阳性细胞比例较模型组明显降低(P<0.01)。结论依达拉奉可有效抑制PD小鼠中脑黑质脑组织细胞自噬相关蛋白Beclin1及LC3表达,改善PD小鼠异常行为。     

褪黑素对缺血再灌注损伤的人肝细胞的自噬影响及功能研究

目的：探讨褪黑素对缺血再灌注的人正常肝细胞LO2自噬的影响以及褪黑素的功能机制。方法：采用MTT法检测细胞的活性;采用Western blot检测LO2细胞中自噬相关蛋白LC-3Ⅱ、Beclin1的表达情况。结果：MTT结果显示：褪黑素对缺血再灌注损伤的肝细胞有一定的保护作用,促进细胞的存活。 Western blot结果显示：缺血再灌注能够上调LO2细胞的自噬活性,增强细胞内的自噬,缺血再灌注6 h后LC-3Ⅱ和Beclin1的表达迅速上升,并且维持在高自噬水平状态;褪黑素能够在缺血再灌注3 h后显著下调LO2细胞的自噬活性,降低细胞内的自噬水平,细胞内LC-3Ⅱ和Beclin1在3 h后逐渐下降表达,从而有效降低过度自噬的发生;褪黑素预处理后的缺血再灌注组的自噬活性在24 h较褪黑素治疗组低,预处理对缺血再灌注细胞后期能够起到更好的保护作用。结论：褪黑素能够抑制因缺血再灌注导致的肝细胞内自噬的发生,并且可以防止细胞发生过度自噬,提示褪黑素可以对各种因缺血再灌注导致损伤的肝细胞起到保护作用,以维持细胞内环境的稳态。     

硒纳米颗粒的合成、安全性、作用及其机制的研究进展北大核心CSCD

As an essential trace element, selenium plays a very important role in antioxidation and maintaining redox homeostasis in various metabolic processes. With the development of nano-technology, selenium nanoparticles ( SeNPs) have become potential biomedical drugs because of their low toxicity, degrad-ability and high bioavailability. With the ability to activate apop-tosis or autophagy by regulating the production of reactive oxygen species ( ROS) , SeNPs are widely used in anticancer therapy and pathogens killing/clearance. In addition, with excellent stability and drug encapsulation capacity, SeNPs are serving as a kind of effective nano-carriers for anti-cancer and anti-infection treatments. Interestingly, the important role of SeNPs in immune regulation ( such as the activation of macrophages and T effector cells) provides a new possibilities to achieve nano-immune syn-ergetic treatment strategy for anti-cancer and anti-infection thera¬pies. In this paper, we review the latest progress of the prepara¬tion methods and safety for SeNPs, followed by the advances of anti-infection, anti-cancer effects and its mechanisms, which would be helpful for promoting the pace of clinical research and application. In addition, we also summarize the functions of SeNPs in other aspects, so as to provide beneficial assistance for facilitating its scientific and clinical research. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

自噬在人肝癌细胞Huh7对仑伐替尼耐药中的调节作用

目的 研究自噬在人肝癌细胞Huh7对仑伐替尼耐药中的调节作用。方法 以人肝癌细胞Huh7为对象,采用低浓度逐渐递增联合长期给药的方式构建仑伐替尼耐药细胞模型Huh7-LR,以CCK-8实验和流式细胞术检测亲本细胞Huh7及耐药细胞Huh7-LR对仑伐替尼的敏感性,以Western blot实验和GFP-mCherry-LC3质粒转染实验分别检测细胞中自噬效应蛋白Beclin-1、自噬接头蛋白sequestosome 1（又名p62）、微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达水平和细胞自噬水平。通过饥饿诱导构建自噬激活细胞模型,以Western blot实验和GFP-mCherry-LC3质粒转染实验分别检测细胞中p62蛋白表达水平和细胞自噬水平,以流式细胞术检测自噬激活对仑伐替尼敏感性的影响。结果 与亲本细胞相比,Huh7-LR细胞的耐药指数为6.2,其p62蛋白的表达水平显著升高,凋亡率、Beclin-1蛋白的表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均显著降低（P<0.05或P<0.01）,自噬水平有所下降。自噬激活可显著升高Huh7-LR细胞中p62蛋白的表达水平（P<0.0...     

2型糖尿病与自噬相关性研究进展

随着人们生活水平的提高、人口老化、生活方式的改变,糖尿病患病率急剧升高,已是严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。近年来国内外都有研究发现,2型糖尿病患者的恶性肿瘤发病率明显高于普通人群日．而且2型糖尿病患者使用胰岛素治疗过程中,发生肿瘤的风险也有所增加。因此,全面而深入地了解2型糖尿病与恶性肿瘤发生的关系是临床上亟待解决的科学问题;尽管目前已有多种学说试图对此进行解释,但仍没有一致意见。细胞自噬是将细胞内受损、变性或衰老的蛋白质以及细胞器运输到溶酶体进行消化降解的过程,正常生理情况下,     

活血定眩胶囊对椎动脉型颈椎病大鼠椎动脉自噬相关蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的观察活血定眩胶囊对椎动脉型颈椎病(CSA)大鼠椎动脉自噬相关蛋白表达的影响。方法按照体重将Wistar雄性大鼠随机分为8组:正常组、假手术组、模型组、氟桂利嗪组、颈复康组和高、中、低3个剂量实验组,每组10只。用植骨压迫联合力学失衡法建立大鼠CSA模型。高、中、低3个剂量实验组给予活血定眩胶囊1.26,0.63,0.32 g·kg^(-1),氟桂利嗪组给予氟桂利嗪1.5 mg·kg^(-1),颈复康组给予颈复康颗粒1.5g·kg^(-1),其他3组灌胃等量生理盐水。均制成混悬液,按照等效剂量折算稀释后灌胃,连续给药6周。动物麻醉心脏釆血,颈部剥离取出椎动脉。用分光光度法测定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫组化检测椎动脉血管内皮组织酵母自噬基因(Beclin-1)蛋白表达水平(灰度值面积比),蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平(灰度值)。结果正常组、模型组、高剂量实验组、氟桂利嗪组和颈复康组的SOD活性分别为(88.11±5.39),(70.12±6.35),(81.34±4.98),(77.24±5.98)和(80.35±4.12)×10^(3)U·g^(-1);这5组的Beclin-1表达分别是(0.85±0.12)×10^(-3),(14.81±1.32)×10^(-3),(1.29±0.45)×10^(-3),(2.97±0.69)×10^(-3)和(3.01±0.25)×10^(-3);这5组的的LC3-Ⅱ蛋白表达分别为2.57±0.43,5.39±1.01,3.20±0.61,3.28±0.71和4.07±0.92。模型组与正常组相比,或高剂量实验组与模型相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);氟桂利嗪组、颈复康组与高剂量实验组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论活血定眩胶囊可抑制血管内皮细胞自噬相关蛋白表达,这可能是其防治CSA的机制之一。