miR-491通过下调Xklp2靶蛋白(TPX2)表达抑制肝癌细胞增殖、侵袭及迁移

目的探讨miR-491在肝癌组织中的表达、临床意义及可能的分子机制。方法实时定量PCR检测miR-491在肝癌及癌旁组织中的表达,MTT法检测MHCC-97H细胞的增殖,TranswellTM实验检测MHCC-97H细胞的侵袭及迁移,Western blot法及免疫组织化学染色检测miR-491下游潜在靶点Xklp2靶蛋白(TPX2)的表达。结果 miR-491在肝癌组织中表达水平显著低于相应癌旁组织;肝癌组织中miR-491低表达与肿瘤大小、TNM分期、门静脉侵犯及Edmondson分级显著相关;低表达miR-491患者3年生存率明显低于高表达组;miR-491可显著抑制MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移,并下调TPX2的蛋白水平;miR-491低表达组TPX2蛋白水平明显高于miR-491高表达组,相关性分析显示肝癌组织中miR-491与TPX2蛋白表达呈显著负相关。结论 miR-491在肝癌组织中表达下调并与肝癌恶性临床病理特征有关,miR-491抑制肝癌细胞增殖、侵袭及迁移的作用可能与下调TPX2表达有关。     

敲低转移黏附蛋白(MTDH)基因抑制SGC7901细胞增殖及迁移北大核心CSCD

目的通过小干扰RNA技术(RNAi)敲低胃癌SGC7901细胞转移黏附蛋白(MTDH)即星形细胞上调基因1(AEG-1),并探讨其对SGC7901细胞增殖和迁移的影响。方法构建MDTH短发夹RNA(MTDH-sh RNA)质粒并转染SGC7901细胞,Western blot法检测SGC7901细胞MTDH蛋白水平。敲低SGC7901细胞MTDH水平后,MTT法检测细胞增殖情况,TranswellTM小室检测SGC7901细胞迁移能力。结果 MTDH-sh RNA转染SGC-7901胃癌细胞后,可明显敲低细胞中MTDH蛋白水平。敲低SGC7901细胞MTDH水平后,细胞的增殖和迁移能力均显著降低。结论敲低SGC7901细胞MTDH水平可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖和迁移。     

骨形态发生蛋白9抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外侵袭和迁移

目的 探讨骨形态发生蛋白9(BMP9)对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭、迁移能力的影响.方法 RT-PCR法检测MDA-MB-231细胞系中BMP9的表达;扩增高滴度的BMP9表达腺病毒,感染MDA-MB-231细胞,制备高表达BMP9的重组MDA-MB-231/BMP9细胞,以此作为实验组;同时以含GFP的窄载腺病毒感染该细胞为MDA-MB-231/GFP,联合空白MDA-MB-231共同作为对照组;通过平板集落形成实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测重组MDA-MB-231/BMP9细胞侵袭及迁移能力.结果 与对照组细胞相比,实验组细胞中BMP9 mRNA表达水平明显增高;实验组细胞集落形成率由对照的90.6%±2.5%与85.6%±3.5%显著下降至57.3%±4.5%(P＜0.05);实验组划痕愈合率由对照的95.4%±3.1%与92.5%±2.4%下降至74.0%±3.6%(P＜0.05);实验组穿膜细胞数由对照的(255.3±16.1)个与(267.3±14.9)个下降至(150.3±14.6)个(P＜0.05).结论 BMP9可以在体外抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭与迁移.     

淫羊藿苷通过下调转移相关蛋白2抑制MGC803细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨淫羊藿苷是否通过调控转移相关蛋白2(MTA2)表达抑制人胃癌细胞系MGC803细胞增殖、迁移和侵袭及其作用机制。方法以不同浓度淫羊藿苷干预MGC803细胞,MTT法检测细胞活力; Transwell小室法和Western blot分别检测细胞迁移和侵袭及MMP-2、MMP-9和MTA2蛋白表达;将MTA2 siRNA转染至MGC803细胞后检测细胞活力、迁移和侵袭;将pc DNA-MTA2转染至MGC803细胞,联合淫羊藿苷处理,MTT法和Traswell小室法检测细胞活力、迁移和侵袭。结果不同浓度淫羊藿苷均能有效抑制MGC803细胞活力。以200μmol/L淫羊藿苷干预MGC803细胞后,细胞迁移和侵袭能力下降(P0. 05),MMP-2、MMP-9、MTA2蛋白表达下调。敲减MTA2能够抑制细胞活力、迁移和侵袭。过表达MTA2可部分逆转淫羊藿苷对MGC803细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论淫羊藿苷能够通过调控MTA2、MMP-2和MMP-9蛋白表达,抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

肝星状细胞通过活化γδ T细胞抑制人HepG2肝癌细胞增殖和侵袭北大核心CSCD

目的研究人肝星状细胞(HSC)作用于γδ T细胞进而对肝癌细胞增殖、侵袭能力产生的影响。方法利用密度梯度离心法及流式细胞术分离获取健康志愿者与肝癌患者的外周血γδ T细胞,使用TranswellTM小室共培养LX-2细胞和γδ T细胞。ELISA检测γδ T细胞上清液中γ干扰素(IFN-γ)含量,CCK-8法检测HepG2的增殖能力,Transwell^(TM)侵袭实验检测HepG2细胞侵袭能力。结果与LX-2细胞共培养后,γδ T细胞分泌IFN-γ量增加,健康志愿者组IFN-γ分泌量增加比肝癌患者组更明显。共培养后γδ T细胞对HepG2细胞增殖、侵袭的抑制能力增强,且健康志愿者组抑制效果增强较肝癌患者组更明显。结论 HSC可以活化γδ T细胞、促进其分泌IFN-γ,进而增强γδ T细胞抑制肝癌细胞增殖和侵袭的能力。     

苦参碱通过TLR3下调PI3K/Akt通路抑制子宫肌瘤细胞的增殖、侵袭和迁移北大核心CSCD

目的:探讨苦参碱抑制子宫肌瘤细胞凋亡、侵袭和迁移的机制。方法:将子宫肌瘤细胞分为对照组(不做任何处理)、苦参碱低、中、高剂量组(分别用0.5、1.0、2.0 mg/ml的苦参碱处理)、pcDNA3.1/TLR3质粒(TLR3)+高剂量苦参碱组(2.0 mg/ml苦参碱处理)、NC组(转染空质粒+2.0 mg/ml苦参碱处理)。RT-qPCR检测各组细胞TLR3、PI3K mRNA表达;CCK-8法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕实验检测各组细胞迁移;Transwell检测各组细胞侵袭能力;Western blot检测各组细胞TLR3、PI3K、p-Akt、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:与对照组相比,苦参碱低、中、高剂量组TLR3 mRNA、PI3K mRNA、TLR3、PI3K、p-Akt、MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);与苦参碱高剂量组相比,TLR3+苦参碱高剂量组TLR3 mRNA、PI3K mRNA、TLR3、PI3K、p-Akt、MMP-2、MMP-9表达与细胞增殖、迁移和侵袭能力提高,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.05),TLR3-NC+苦参碱高剂量组与苦参碱高剂量组TLR3 mRNA、PI3K mRNA、TLR3、PI3K、p-Akt、MMP-2、MMP-9表达、细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:苦参碱通过下调TLR3表达下调P13K/Akt通路,抑制子宫肌瘤细胞增殖、侵袭和迁移。     

组蛋白去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)抑制人脐静脉内皮细胞增殖及侵袭和迁移

目的分析组蛋白特异性去甲基化酶含Jumonji结构域蛋白3(JMJD3)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞周期、凋亡和迁移的影响。方法合成JMJD3的小干扰RNA(siRNA)、构建JMJD3过表达载体;阴性对照siRNA、si JMJD3或质粒p MSCV-PIG、p MSCV-JMJD3转染HUVEC 48 h后,通过荧光实时定量PCR检测JMJD3 mRNA的水平;流式细胞术检测各转染组HUVEC的细胞周期与凋亡的变化;TranswellTM实验和划痕实验检测转染后的HUVEC侵袭和迁移能力的变化。结果 HUVEC转染si JMJD3 48 h后JMJD3的表达水平下降,S期细胞增加、而G1期细胞明显减少。下调JMJD3后HUVEC的增殖能力增强,细胞凋亡减少,细胞侵袭、迁移能力增强。而在HUVEC转染JMJD3过表达质粒MSCV-JMJD3 48 h后,细胞内JMJD3水平增加,S期细胞显著减少,而G1期细胞则明显增加,同时HUVEC的增殖能力受到抑制,细胞凋亡增多,细胞侵袭和迁移能力减弱。结论 JMJD3具有抑制HUVEC增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡的作用。     

Longdaysin通过抑制CSNK1A1表达对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探究Longdaysin对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用及可能机制。方法 将胶质瘤LN229细胞分为对照组（Control组）、 Longdaysin组、 Longdaysin+空载体组（Longdaysin+Vector组）和Longdaysin+CSNK1A1组,CCK-8实验检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;qRT-PCR检测细胞CSNK1A1 mRNA表达;Western blot检测细胞CSNK1A1蛋白表达。结果 Longdaysin抑制LN229细胞增殖、迁移和侵袭,抑制CSNK1A1mRNA和蛋白表达,过表达CSNK1A1逆转Longdaysin对LN229细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论 Longdaysin抑制胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与其抑制CSNK1A1表达有关。     

柔毛水杨梅甲醇提取物通过调控miR-758表达对滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的 探讨柔毛水杨梅甲醇提取物对滋养层细胞增殖、迁移侵袭的影响。方法 不同浓度的柔毛水杨梅甲醇提取物处理人正常滋养细胞HTR8/SVneo后,四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测HTR8/SVneo、正常胎盘滋养细胞、子痫前期胎盘滋养细胞中miR-758表达水平。将miR-758抑制物转染HTR8/SVneo,检测抑制miR-758表达对HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。将miR-758模拟物转染HTR8/SVneo,检测过表达miR-758对柔毛水杨梅作用的HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果 柔毛水杨梅甲醇提取物处理后HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高,miR-758表达显著降低,并呈一定浓度依赖性（P<0.05）。在子痫前期胎盘滋养细胞中miR-758表达升高,抑制miR-758表达后HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著升高（P<0.05）。过表达miR-758能够逆转柔毛水杨梅甲醇提取物对HTR8/SVneo增殖、迁...     

CARD9蛋白与乳腺癌患者特征及癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的 探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain containing protein 9,CARD9)与乳腺癌患者临床特征关系及对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、侵袭的影响.方法 选取2018年1月至2019年9月咸宁市中心医院保存的乳腺癌标本90例,同时选取癌旁组织作...     

SH-6联合CHKA基因沉默对胶质瘤细胞增殖及侵袭的影响北大核心CSCD

目的:探讨特异性AKT抑制剂SH-6联合慢病毒沉默CHKA基因在体内外对胶质瘤细胞系U87增殖、侵袭的影响及机制。方法:构建CHKA短发夹CHKA(shCHKA)慢病毒及对照慢病毒(shNC)感染U87细胞系并设置分组。分别采用CCK-8法检测胶质瘤细胞的增殖,流式细胞术检测胶质瘤细胞的周期、凋亡,Transwell实验观察胶质瘤细胞侵袭。胶质瘤动物模型实验评估联合治疗效果并记录肿瘤体积变化,采用免疫组化及Western blot检测胶质瘤细胞及肿瘤组织中CHKA、PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达。结果:联合治疗能显著抑制胶质瘤细胞的增殖及侵袭,细胞周期主要停滞在G2期,细胞凋亡率显著增加,联合治疗能够使CHKA、PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达量降低。结论:SH-6联合慢病毒沉默CHKA在体内外能够显著抑制U87细胞的增殖及侵袭。本研究可能为脑胶质瘤的联合治疗提供新的抗肿瘤策略。     

下调赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)表达抑制乳腺癌细胞的增殖与迁移

目的 探究赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)基因对乳腺癌细胞的增殖及迁移能力的影响。方法 利用基因表达谱交互分析(GEPIA)与Kaplan-Meier分析确定乳腺癌组织LOXL1的表达以及与乳腺癌患者预后的关系。通过慢病毒稳定转染技术,稳定敲低MDA-MB-231细胞和MCF7细胞的LOXL1。采用集落形成实验、 CCK-8法、 5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色实验检测敲低LOXL1对乳腺癌细胞增殖能力的影响,划痕实验以及Transwell^TM实验检测敲低LOXL1对乳腺癌细胞迁移能力的影响。结果 与正常组织相比,LOXL1在乳腺癌组织高表达,且与不良预后相关;敲低MDA-MB-231、 MCF7乳腺癌细胞LOXL1后,细胞增殖和迁移能力明显降低。结论 敲低LOXL1降低乳腺癌细胞的增殖及迁移能力。     

华蟾酥毒基通过调控circNFIX/miR-577通路抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭

目的：研究华蟾酥毒基（CnBu）对乳腺癌细胞MDA-MB-231恶性生物学行为的影响,并探讨其机制是否与调控环状RNA核因子IX(circNFIX)和miR-577表达相关。方法：将MDA-MB-231细胞分为对照（Con）组、CnBu-低剂量（L）组、CnBu-中剂量（M）组、CnBu-高剂量（H）组、si-NC组、si-circNFIX组、pcDNA组、pcDNA-circNFIX组、CnBu+pcDNA组、CnBu+pcDNAcircNFIX组。MTT、Transwell实验分析细胞增殖、迁移和侵袭能力,Westernblot分析Ki-67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达。RT-qPCR分析circNFIX、miR-577表达量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证circNFIX和miR-577的靶向调控关系。结果：CnBu以剂量依赖方式下调Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白和circNFIX表达（P<0.05）,上调miR-577表达（P<0.05）,减弱MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05）。miR-577...     

利多卡因通过LncRNA H19/miR-671-5p分子轴调控胃癌细胞增殖、迁移及侵袭北大核心CSCD

目的:探讨利多卡因对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对LncRNA H19/miR-671-5p的调控机制。方法:体外培养胃癌细胞AGS,使用不同浓度的利多卡因处理细胞;MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;qRT-PCR检测H19及miR-671-5p的表达量;双荧光素酶报告实验验证H19与miR-671-5p的靶向关系;将pcDNA-H19及其阴性对照pcDNA转染至AGS细胞,使用利多卡因处理细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;Western blot检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达量。结果:与Con组相比,利多卡因不同剂量可明显降低细胞活力和Ki-67、PCNA、N-cadherin蛋白水平及H19的表达量(P<0.05),并可减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05),提高E-cadherin蛋白水平及miR-671-5p的表达量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实H19可靶向结合miR-671-5p;H19过表达可明显逆转利多卡因对细胞增殖、迁移及侵袭的作用。结论:利多卡因可能通过抑制H19表达及促进miR-671-5p表达从而抑制胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

软骨同源蛋白1(CART1)敲低诱导MDA-MB-231乳腺癌细胞S期阻滞并抑制其侵袭和迁移

目的运用外源性RNA干扰技术,敲低MDA-MB-231乳腺癌细胞中软骨同源蛋白1(CART1)基因的表达,研究CART1基因沉默后对MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法采用人工合成的针对CART1基因的siRNA,用转染试剂RNAi MAX将CART1-siRNA转染MDA-MB-231细胞。实时定量PCR检测转染后CART1 mRNA水平,Western blot法检测转染后CART1蛋白水平,TranswellTM侵袭实验检测MDA-MB-231细胞侵袭、CCK-8法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期的变化。结果 CART1-siRNA能有效沉默CART1在MDA-MB-231细胞中的表达,CART1沉默后MDA-MB-231细胞侵袭和增殖能力明显下降,S期细胞的比率增高而G2/M细胞比率减少。结论下调MDA-MB-231细胞CART1的表达,可降低其侵袭和增殖能力、诱导S期阻滞。     

颗粒蛋白前体(PGRN)促进小鼠乳腺癌4T1细胞上皮间质转化与侵袭和迁移

目的 探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对小鼠乳腺癌4T1细胞侵袭和迁移的影响及其机制.方法 采用1 μg/mL PGRN处理乳腺癌4T1细胞24 h,通过TranswellTM侵袭实验检测4T1细胞的侵袭能力、划痕实验检测细胞的迁移能力,实时荧光定量PCR检测4T1细胞上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vim...     

花姜酮通过上调FBXW7表达抑制人非小细胞肺癌细胞系A549增殖、迁移和侵袭

目的 探讨花姜酮对非小细胞肺癌细胞系增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制.方法 将人非小细胞肺癌细胞系A549分为对照组、花姜酮-低剂量组、花姜酮-中剂量组、花姜酮-高剂量组、pcDNA组、pcDNA-FBXW7组、花姜酮-高剂量+si-NC组、花姜酮-高剂量+si-FBXW7组.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑...     

达沙替尼通过上调p53表达和下调AKT磷酸化抑制肾癌细胞系786-O及769-P体外活力与迁移

目的:探讨达沙替尼(dasatinib)体外对人肾癌细胞系786-O及769-P增殖、凋亡及迁移的影响及其分子机制。方法:不同浓度(0～2μmol/L)达沙替尼处理786-O细胞及769-P细胞(0μmol/L为空白对照组),采用MTT法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达水平。结果:达沙替尼对786-O及769-P两种细胞均有活力抑制和迁移阻滞的作用,随着浓度增大抑制效果越显著(P<0.05)。达沙替尼对786-O细胞和769-P细胞的IC50分别为(0.958 7±0.028 8)μmol/L和(0.784 3±0.066 0)μmol/L。达沙替尼处理24 h后,促凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达显著增加(P<0.01),细胞周期蛋白D1的表达下降(P<0.05),细胞周期相关通路蛋白p53和p21表达量均显著增加(P<0.05),p-AKT蛋白水平显著下降(P<0....     

淫羊藿苷上调miR-519d表达抑制人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的淫羊藿苷(Icariin)对人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其可能的机制。方法针对SKOV3细胞,给予Icariin不同浓度处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞增殖的变化;应用realtime PCR方法检测Icariin处理不同时间后mi R-519d在SKOV3细胞中的表达变化;利用Lipofect AMINE 2000将antimi R-519d以及其阴性对照质粒载体转染至SKOV3细胞,再给予Icariin,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测SKOV3细胞的增殖、迁移及侵袭能力变化。结果 Icarin显著抑制了SKOV3细胞的增殖,并且呈时间和剂量依赖;随时间变化,Icarin显著上调了mi R-519d在SKOV3细胞的表达水平;转染anti-mi R-519d后,Icarin的作用被阻断,SKOV3细胞的增殖,以及迁移、侵袭能力基本恢复。结论 mi R-519d参与了Icariin抑制SKOV3细胞的增殖,迁移和侵袭的调控过程。     

miR-147a靶向ATF2抑制非小细胞肺癌细胞侵袭和迁移北大核心CSCD

目的:探究miR-147a靶向激活转录因子2(ATF2)对非小细胞肺癌迁移、侵袭和上皮-间质转化的影响。方法:RT-qPCR检测非小细胞肺癌组织和细胞miR-147a和ATF2 mRNA表达,Western blot检测ATF2蛋白表达。采用miR-NC、pc-NC、miR-147a mimic、pc-ATF2质粒分别或联合转染H1703细胞,双荧光素酶报告验证其靶向关系,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、间质钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和ATF2蛋白表达。裸鼠分为4组:control组、miR-147a mimic组、pc-ATF2组、miR-147a+pc-ATF2组。裸鼠左腋下皮下注射转染后的非小细胞肺癌H1703细胞,第30天颈椎脱位法处死,完整取出皮下肿瘤,免疫组化检测N-cadherin阳性表达,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果:与正常肺组织和细胞相比,非小细胞肺癌组织和细胞miR-147a表达显著下调,ATF2 mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.01)。miR-147a靶向下调ATF2表达。与对照组相比,miR-147a mimic组H1703细胞ATF2表达显著下调,侵袭数显著减少,划痕闭合率显著降低,E-cadherin表达显著上调,N-cadherin和Vimentin表达显著下调(P<0.01),共转染pc-ATF2逆转miR-147a mimic对H1703细胞的作用。与对照组相比,miR-147a mimic组移植瘤中N-cadherin阳性细胞百分比降低,E-cadherin表达显著上调,N-cadherin和Vimentin表达显著下调(P<0.01),共转染pc-ATF2逆转miR-147a mimic对H1703移植瘤的作用。结论:miR-147a靶向ATF2可抑制非小细胞肺癌迁移、侵袭和上皮-间质转化。