蜕膜细胞条件培养液中TNF-α及EGF对卵巢癌细胞侵袭基因uPA/PAI-1表达的影响

目的 研究蜕膜细胞条件培养液(decidual cell conditioned media,DCM)中肿瘤坏死因子(TNF-α)及表皮生长因子(EGF)对卵巢癌细胞株(COC1)侵袭基因尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)/纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)表达的影响.方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取蜕膜细胞条件培养液(DCM),分别将加有TNF抗体及EGF抗体的DCM处理卵巢癌细胞株(COC1),利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭基因uPA/PAI-1的表达进行分析.结果 COC1表达PAI-1,不表达uPA.与DCM组比较,TNF-α抗体组可以使COC21 PAI-1mRNA的表达上调,二者之间差异有显著性(P＜0.01).与DCM组比较,FGF抗体组PAI-1mRNA的表达不明显,呈下调的趋势,二者之间亦差异有显著性(P＜0.01).结论 早孕DCM中TNF-α降低了DCM抑制COC1纤溶酶原系统作用的能力;而EGF增加了DCM的上述能力.同时说明纤溶酶原系统在COC1的侵袭能力方面不起主导作用.     

蜕膜细胞条件培养液对卵巢癌细胞株COC1侵袭相关基因表达的影响

目的 研究蜕膜细胞条件培养液(DCM)对卵巢癌相关侵袭基因表达的影响。方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取DCM,用DCM处理卵巢癌细胞株COCl,利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭相关基因的表达进行分析。结果卵巢癌细胞株COC1表达基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)及纤溶酶原抑制剂(PAI-1),而不表达MMP-9、TIMP-1及尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)。早孕及晚孕DCM能显著下调卵巢癌细胞株COC1 MMP-2的表达(P<0.01);早孕及晚孕DCM处理的卵巢癌细胞株COC1也表达TIMP-2、PAI-1 mRNA,且有显著差异(P<0.01)。结论DCM可以通过改变卵巢癌细胞株COCl侵袭基因MMP-2/TIMP-2以及B-PA/PAI-1之间的平衡,从而降低卵巢癌细胞株COCl的侵袭能力。     

蜕膜细胞条件培养液对卵巢癌细胞株COC1侵袭相关基因表达的影响

目的 研究蜕膜细胞条件培养液(DCM)对卵巢癌相关侵袭基因表达的影响。方法 原代培养早孕蜕膜细胞及晚孕蜕膜细胞并提取DCM，用DCM处理卵巢癌细胞株COC1，利用RT-PCR法对卵巢癌侵袭相关基因的表达进行分析。结果 卵巢癌细胞株COC1表达基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-2)及纤溶酶原抑制剂(PAI-1)，而不表达MMP-9、TIMP-1及尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)。早孕及晚孕DCM能显著下调卵巢癌细胞株COC1 MMP-2的表达(P＜0．01)；早孕及晚孕DCM处理的卵巢癌细胞株COC1也表达TIMP-2、PAI-1mRNA，且有显著差异（P＜0．00）。结论 DCM可以通过改变卵巢癌细胞株COC1侵袭基因MMP-2／TIMP-2以及u-PA／PAI-1之间的平衡，从而降低卵巢癌细胞株COC1的侵袭能力。     

蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响

目的 探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对洋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法 用体外培养早孕，早孕蜕膜细胞的方法制备DCM，然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞，用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果 正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2，MMP-9，基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1），尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA)mRNA均有表达；而TIMP-2，纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1)mRNA未见表达，早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2，MMP-9，uPAmRNA的表达，而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕，晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达，但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论 蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2，MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡，而影响滋养细胞的侵袭能力。     

蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响

目的　探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法　用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果　正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1）、尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA）mRNA均有表达;而TIMP-2、纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）mRNA未见表达。早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2、MMP-9、u-PAmRNA的表达,而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达,但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论　蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2、MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡,而影响滋养细胞的侵袭能力。     

TNF-α对A549细胞MMPs和TIMPs mRNA的影响

目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对A549细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的影响。方法比较分析正常对照组和经TNF-α(10ng/ml)预处理的TNF-α组A549细胞的MMPs和TIMPs mRNA表达水平差异。结果与正常对照组比较,TNF-α预处理可致MMPs家族中MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MMP-10、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-19、MMP-25和MMP-27mRNA水平明显升高(P<0.05或P<0.01),而MMP-17和MMP-28mRNA转录水平明显降低(P<0.05或P<0.01),TIMPs家族中TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达上调(P<0.01),TIMP-3和TIMP-4的mRNA表达下调(P<0.01)。结论TNF-α能影响MMPs和TIMPs表达谱的改变。     

EGFR信号通路调控结肠癌Caco-2细胞侵袭转移的分子机制

目的探讨EGFR信号通路与人结肠癌Caco-2细胞增殖和侵袭转移的关系及其调控分子机制。方法采用MTT法和Boyden小室体外侵袭实验检测Caco-2细胞增殖和体外侵袭能力;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2基因转录水平;采用W estern b lot法检测P-EGFR和P-ERK蛋白表达。结果外源性EGF(10μg/L)增加P-EGFR和P-ERK蛋白表达同时使24 h细胞生长率提高了23.35%(P<0.01),使过膜细胞数由(208±3)上升到(241±5)(P<0.01)。当用AG1478(20μmol/L)和PD98059(40μmol/L)分别阻断EGFR和ERK/MAPK后,EGF作用消失,Caco-2细胞生长明显抑制(P<0.01),但无时间效应关系;Caco-2细胞体外侵袭力明显减弱(P<0.01)。RT-PCR测定显示,EGF能增加Caco-2细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达和减少TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达;而AG1478能逆转EGF的作用,使MMP-2、MMP-9 mRNA的表达下降,TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达上升,结果MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01)。结论EGFR-ERK/MAPK信号通路通过改变基质金属蛋白酶和其抑制剂mRNA比值调控人结肠癌细胞侵袭转移能力。     

艾拉光动力治疗对兔耳增生性瘢痕组织中MMP-2、MMP-9、MMP-13及TIMP-1的mRNA水平的影响

目的:研究艾拉光动力治疗对兔耳增生性瘢痕中基质金属蛋白酶-2信使核糖核酸(MMP-2mRNA)、基质金属蛋白酶-9信使核糖核酸(MMP-9mRNA)、基质金属蛋白酶-13信使核糖核酸(MMP-13mRNA)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1信使核糖核酸(TIMP-1mRNA)的变化,探讨艾拉光动力治疗对兔耳增生性瘢痕的初步治疗机制。方法:将实验动物分为正常组、阴性对照组、高浓度艾拉光动力治疗组、低浓度艾拉光动力治疗组、光动力治疗组,对高浓度艾拉光动力治疗组、低浓度艾拉光动力治疗组、光动力治疗组分别进行干预治疗,1次/周,共3次,于治疗后1月、2月和3月采集样本,进行RT-PCR实验。结果:治疗组中MMP-2、MMP-9、MMP-13的mRNA表达水平在艾拉光动力治疗后1月、2月和3月的增生性瘢痕表达要明显高于阴性对照组,差异具有显著性(P?0.01),而治疗组中TIMP-1的mRNA表达水平要明显低于阴性对照组,差异具有显著性(P?0.01);高浓度治疗组与低浓度治疗组之间比较有差异(P?0.05)。结论:艾拉光动力治疗可改变兔耳增生性瘢痕中的MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、MMP-13mRNA和TIMP-1mRNA的表达,使MMPs/TIMP-1之间的比例上调。     

卡维地洛对心肌梗死大鼠心肌基质金属蛋白酶及其组织抑制因子表达的影响

目的:明确卡维地洛对心肌梗死(心梗)后大鼠心肌基质金属蛋白酶(MMP)及其组织抑制因子表达的影响.方法:建立大鼠急性心梗模型,成模后用药组(n=12)予卡维地洛(10 mg·kg-1·d-1)灌胃,用药42 d.未用药组(n=12)予等量生理盐水灌胃.另设假手术组(n=9)为对照.检测各组大鼠心功能和血流动力学参数,酶谱法测定心室肌MMP-2、MMP-9活性,免疫组化和荧光定量PCR检测心室肌MMP-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)蛋白和mRNA表达以及TIMP-1、IL-1β、TNF-α mRNA表达.结果:与假手术组比较,心梗组左室舒张末压(LVEDP)升高、左室压最大上升速率( dp/dtmax)和最大下降速率(-dp/dtmax)均降低(P<0.01),MMP-2、MMP-9活性增强(P<0.01),MMP-2、MMP-9、TIMP-2蛋白表达增多,MMP-2、MMP-9、TIMP-2、IL-1β mRNA升高(P<0.05),TIMP-1、TNF-α mRNA升高(P<0.01);与心梗未用药组比较,用药组LVEDP降低(P<0.01), dp/dtmax、-dp/dtmax升高(P<0.05),MMP-2、 MMP-9的活性降低(P<0.01).MMP-2、MMP-9、TIMP-2蛋白和mRNA表达减少以及TIMP-1、IL-1β、TNF-α mRNA表达减少.结论:卡维地洛在显著降低MMP-2、MMP-9活性的同时也轻度降低了TIMPs表达;它还可以通过减少IL-1β和TNF-α基因表达,起到降低MMPs分泌的作用,从而预防和逆转心梗后心室重构,改善心功能.     

基质金属蛋白酶及其抑制物在胎盘粘连发生中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9、MMP-2及基质金属蛋白酶抑制物（TIMP）-1、TIMP-2在胎盘粘连发生中的作用。方法选择孕足月胎盘粘连产妇23例作为胎盘粘连组,其中9例分娩后即刻取蜕膜组织作为蜕膜粘连组;芷常足月分娩产妇28仍j作为正常胎盘组,其中1i例分娩后即刻取蜕膜组织作为正常蜕膜组。采用免疫组化PicTmeTM二步法分别梭测4缉产妇MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达水平;免疫组化结果采用彩色图像分析软件定量分析。结果①胎盘粘连组与正常胎盘组相比,MMP-9蛋白表达水平明显高于正常眙盘组,TIMP-1蛋白表达水平低于正常胎盘组,差异有统计学意义（PMMP-9〈0．05,PTIMP-1〈0．05）。②蜕膜粘连组较之正常蜕膜组相比,MNP-9蛋白表达的水平无统计学差异（P〉0．05）,TIMP-1蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。③胎盘粘连组与正常胎盘组相比,MMP-2蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义（PMMP-2〈0．05）,TIMP-2蛋白表达无统计学差异（PTIMP-2〉0．05）。④蜕膜粘连组较之正常蜕膜组相比,MMP-2表达水平无统计学差异（P〉0．05）,TIMP-2表达水平明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论母胎界面MMP和TIMP比例失衡导致子宫细胞外基质降解增加造成胎盘粘连。在胎盘界面以MMPs升高为主要机制,而在蜕膜界面则以TIMPs降低不能有效抑制MMPs的降解作用而导致胎盘粘连。     

MMP 2/TIMP 2在妊娠输卵管黏膜中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物-2(TIMP-2)与输卵管妊娠的关系.方法 选择输卵管妊娠组25例、正常输卵管组27例及正常宫内早孕组28例,采用免疫组织化学染色技术及半定量病理图像分析系统检测输卵管妊娠黏膜组织、正常输卵管黏膜组织及正常宫内早孕组子宫蜕膜组织中MMP-2及TIMP-2的表达.结果 MMP-2和TIMP-2阳性表达均在正常宫内早孕组最高,在输卵管妊娠组中较高,在正常输卵管组中最低,三组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MMP-2/TIMP-2参与了输卵管妊娠过程,且与输卵管妊娠缺乏蜕膜化反应有关.     

MMP-9和TIMP-3在早孕先兆流产绒毛及蜕膜中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制物-3(TIMP-3)在早孕先兆流产和正常早孕绒毛及蜕膜中的定位及表达,并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法,检测正常早期妊娠和先兆流产行负压吸宫术者各30例的绒毛和蜕膜组织中MMP-9和TIMP-3的表达。结果MMP-9在先兆流产组绒毛和蜕膜中的表达均高于正常早孕组;TIMP-3在先兆流产组和对照组绒毛和蜕膜中的表达差异无统计学意义;MMP-9/TIMP-3的比值在先兆流产蜕膜和绒毛中的表达均高于正常妊娠组。结论MMP-9在早期流产发生过程中具有重要作用;MMP-9和TIMP-3的平衡对于正常早期妊娠的维持起重要作用。     

MMP-2和TIMP-2在甲状腺乳头状癌中的表达及与转移的关系

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-2和金属蛋白酶组织抑制剂TIMP-2在甲状腺乳头状癌中的表达及其与甲状腺乳头状癌侵袭与转移的关系.方法应用原位杂交技术检测95例甲状腺乳头状癌及59例癌旁组织中MMP-2 mRNA,TIMP-2mRNA的表达水平.用免疫组化S-P法检测上述组织中MMP-2蛋白、TIMP-2蛋白的表达.结果MMP-2mRNA和蛋白在甲状腺乳头状癌中的阳性率分别为74.7%和77.9%,而在癌旁组织中的阳性率分别为10.2%和25.4%,两者差异有显著性(P＜0.01,P＜0.01).TIMP-2 mRNA和蛋白在甲状腺乳头状癌中的阳性率分别为58.9%和64.29%,而在癌旁组织中的阳性率分别为20.3%和16.9%,两者差异有显著性(P＜001,P＜0.01).结论基质金属蛋白酶MMP-2mRNA和蛋白、TIMP-2mRNA和蛋白在甲状腺乳头状癌中呈高表达,MMP-2mRNA和蛋白的表达随甲状腺癌侵袭程度升高、转移而升高,而TIMP-2 mRNA和蛋白的表达随甲状腺癌侵袭程度升高、转移而降低,提示MMP-2和TIMP-2表达失衡与甲状腺乳头状癌侵袭与转移有密切关系.     

基质金属蛋白酶及金属蛋白酶组织抑制剂与脑膜瘤侵袭性的研究近况

原位杂交法及免疫组化法实验研究显示,基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9在脑膜瘤组织中的表达异常,提示其与脑膜瘤侵袭性有关,金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)和TIMP-2可特异性地抑制MMPs的活性,证明MMPs和TIMPs之间的平衡是影响脑膜瘤侵袭性的重要因素。深入研究MMPs和TIMPs在脑膜瘤中的表达及其调节机制,以及如何通过阻断MMPs的活性来抑制脑膜瘤的侵袭性,有望成为治疗脑膜瘤的新途径。     

MMP-2/TIMP-2在妊娠滋养细胞疾病组织中的表达及意义

目的 探讨金属基质蛋白酶-明胶酶A(MMP-2)及其抑制剂(TIMP-2)在妊娠滋养细胞疾病发生、发展及预后中的作用.方法 采用原位杂交、免疫组化法分别从mRNA、蛋白质水平检测MMP-2/TIMP-2在正常早孕绒毛及妊娠滋养细胞疾病中的表达.结果 未恶性转化葡萄胎MMP-2低表达,TIMP-2高表达,恶性转化葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒癌中MMP-2表达逐渐增强,TIMP-2表达相反.妊娠滋养细胞肿瘤组与正常绒毛、葡萄胎组相比,MMP-2、TIMP-2的表达均有显著性差异(P＜0.01,P＜0.001).结论 金属基质蛋白酶的激活与抑制比例失衡在妊娠滋养细胞疾病发展、浸润和转移中起重要作用.     

TNF-α和IFN-γ对Hep-2喉癌细胞MMPs表达的调节作用

目的:研究喉癌Hep-2细胞系中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和MT1-MMP的表达及TNF-α和IFN-γ对MMPs表达的调节作用.方法:分别在细胞生长的不同时期收集细胞,采用半定量RT-PCR方法,分析Hep-2细胞MMP-2、MMP-9、MT1-MMP和TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达水平.结果:细胞接种后24 hMMP-2和MMP-9的mRNA水平最高.Hep-2细胞在第2、3天MT1-MMP mRNA的表达水平最高,细胞表达相对恒定的TIMP-1而细胞内TIMP-2 mRNA的表达水平比TIMP-1高2倍.TNF-α可增强Hep-2细胞的MMP-2 mRNA的表达, IFN-γ可抑制MMP-2的表达. 两种因子联合应用时其作用可相互抵消.MT-MMP和TIMP-1对TNF-α和IFN-γ的调节不敏感.TIMP-2 mRNA的水平可被TNF-α抑制1倍,而IFN-γ能够增强TIMP-2 mRNA的水平.结论:细胞因子对MMPs的转录有调节作用,IFN-γ能够降低MMP-2、MMP-9的表达,可成为一种很有价值的喉癌辅助治疗药物.     

2型糖尿病大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的变化与糖尿病心肌病变关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)大鼠心脏基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)的变化及其在糖尿病心肌病变(Diabetic Cardiomyopathy,DC)发病中的意义。方法高脂食物喂养、小剂量链脲菌素诱导2型糖尿病大鼠模型。正糖高胰岛素嵌铗技术(EICT)检测两组大鼠胰岛素抵抗情况,葡萄糖输注速率(GIR)表示胰岛素抵抗;测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)和计算HW/BW;RT-PCR测定两组大鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA水平,免疫组化法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白水平。结果糖尿病大鼠GIR明显低于正常对照组(P0.01)。糖尿病大鼠心脏:HW和HW/BW明显高于正常对照组(P0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多(P0.01),MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达增加(P0.01),MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白含量增加(MMP-2、TIMP-1:P0.05;TIMP-2:P0.01);MMP-2、MMP-9与TIMP-1蛋白水平比值及MMP-2与TIMP-2蛋白水平比值均显著降低。结论 T2DM大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2增加,MMPs/TIMPs比值降低,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多;心脏MMPs/TIMPs表达改变与心脏间质纤维化有关。     

慢性充血性心力衰竭患者血清基质金属蛋白酶与肿瘤坏死因子-α变化的相关性研究

目的探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化及相关性。方法CHF患者48例,正常对照组30例。采用ELISA法测定血清MMP-9和TIMP-1的含量,双抗体夹心法测定血清TNF-α的含量,分析MMP-9/TIMP-1值与TNF-α和左室舒末内径(LVEDD)及射血分数(EF)的关系。结果CHF患者血清MMP-9、MMP-9/TIMP-1值和TNF-α含量明显增加(P均<0.01),TIMP-1含量明显减少(P<0.01),MMP-9/TIMP-1值与TNF-α含量和LVEDD呈正相关(P<0.05),与EF呈负相关(P<0.05)。结论CHF患者MMP-9/TIMP-1值与TNF-α含量呈明显的正相关。MMP-9/TIMP-1值可作为左室重构和左心功能恶化的指标。     

肥大细胞类胰蛋白酶促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435的跨膜侵袭

 目的 研究类胰蛋白酶对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435侵袭力的影响及其机制。方法 通过体外细胞侵袭力试验观察不同浓度、不同时间类胰蛋白酶对乳腺癌MDA-MB-435细胞跨膜侵袭力的影响，并利用RT-PCR以及明胶酶谱法研究类胰蛋白酶对基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinases-2，TIMP-2）表达水平的调节。结果 150～500pmol/L的类胰蛋白酶可以促进MDA-MB-435细胞的跨膜侵袭；还可以促进MMP-2、TIMP-2的mRNA表达（P<0.01）和MMP-2的蛋白表达（P<0.05）。 结论 类胰蛋白酶可以促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435细胞的跨膜侵袭，该作用可能与增加MMP-2的mRNA和蛋白表达、TIMP-2的mRNA表达相关。     

基质金属蛋白酶在脑白质疏松症血-脑脊液屏障机制中的实验研究

目的 分析基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)的mRNA在脑组织的表达,探讨血-脑脊液屏障(BBB)损伤致脑白质疏松症(LA)发生的作用机制。方法 18只5月龄雄性自发性高血压(SH)大鼠为实验组,同龄7只雄性Wistar大鼠为对照组。取大鼠脑组织,应用HE染色及免疫组织化学染色,观察其病理变化及髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经中丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。取大鼠脑白质组织,使用Real-time PCR技术,检测MMP-9、MMP-2和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA的表达水平。结果 HE染色显示,SH大鼠脑白质区神经元和少突胶质细胞数量减少,星形胶质细胞反应性增生。实验组较对照组GFAP表达增加,而MBP和NF表达减少。实验组大鼠脑白质区TIMP-1、MMP-9和MMP-2 mRNA表达水平升高。其中,TIMP-1与MMP-2 mRNA升高显著(P＜0.05),而MMP-9 mRNA表达两组无显著性差异(P＞0.05)。结论 5月龄SH大鼠可作为脑白质疏松症的实验动物模型。MMPs导致的BBB破坏可能是脑白质疏松症的发病机制之一。