三甲益肝颗粒对大鼠肝纤维化的抑制作用

目的研究三甲益肝颗粒（SJG）对四氯化碳（CCl4）诱导的实验性大鼠肝纤维化的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法健康SD大鼠50只随机分为3组。模型组（18只）和SJG组（17只）均采用40％CCl4花生油溶液皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,每周2次;对照组（15只）皮下注射生理盐水。从实验开始之日起,模型组给予蒸馏水灌胃,SJG组每天给予SJG灌胃。分别于6周末、8周末收获大鼠肝组织做Masson染色,检测胶原纤维的表达;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果模型组胶原纤维所占面积多于对照组（P〈0．01）,SJG组胶原纤维所占面积少于模型组（P〈0．01）。正常对照组大鼠肝组织α-SMA仅在汇管区的小叶间动脉、静脉血管壁处表达,模型组α-SMA的表达多于正常对照组（P〈0．01）,SJG组α-SMA的表达较模型组减少（P〈0．01）,8周α-SMA的表达虽比6周有所增加,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SJG可能抑制肝星形细胞的活化,抑制胶原纤维的沉积,从而有效地减轻肝纤维化的程度。     

异甘草酸镁对四氯化碳肝纤维化大鼠肝组织病理改变的影响

目的:探讨异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)早期、晚期干预对四氯化碳( carbon tetrachloride,CCl4)肝纤维化模型大鼠肝组织结构和肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)活化的影响.方法: 32只3月龄雄性SD大鼠随机分为对照组(10只)、CCl4模型组(10 只)、MgIG早期干预组(6 只,在CCl4造模开始同时即每日腹腔注射MgIG 30 mg/kg)和MgIG晚期干预组(6只,在CCl4造模5周后每日腹腔注射MgIG 30 mg/kg).各组大鼠在造模10周后取材,从每只大鼠肝脏等距随机抽选4个肝组织块制作石蜡包埋切片,行Masson染色和HE染色观察肝组织一般结构和胶原纤维数量和分布的变化;另从每只大鼠肝脏随机抽选5个组织块制作电镜超薄切片,在电镜下观察肝组织超微结构的改变.结果: 与对照组比较, CCl4大鼠肝组织内肝细胞出现明显的脂肪变性、坏死和再生,胶原纤维增生,假小叶形成,HSC体积增大、数量增多;MgIG早期干预或晚期干预对CCl4大鼠肝组织一般结构、超微结构以及HSC的活化增殖均无明显影响.结论: CCl4诱导大鼠肝组织发生肝纤维化或肝硬化的病理改变,可能与HSC的活化、增殖有关;MgIG对CCl4大鼠的肝纤维化病理进展没有明显的抑制或逆转作用.     

肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ受体1型的表达及其与α-平滑肌肌动蛋白表达相关性研究

目的 了解血管紧张素Ⅱ受体1型(angiotensinⅡ type 1 receptor,AT1R)在肝纤维化大鼠肝脏的表达及其与胶原纤维含量和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的关系.方法 将30只SD大鼠随机分成正常组(n=10)和肝纤维化组(n=20).正常组正常饲养,肝纤维化组给予40% 四氯化碳(CCL4)橄榄油0.4 mL/100 g体质量背部皮下注射,每3 d注射1次,第5 w末处死两组大鼠,肝组织制备成石蜡切片后进行Masson三色染色、AT1R和α-SMA免疫组织化学染色,采集图片后用image pro plus 6.0软件对阳性表达进行累计光密度测定.对所得数据进行相关和回归分析.结果 AT1R在正常组大鼠肝脏不表达或血管周围弱表达,在肝纤维化组肝脏汇管区周围和纤维间隔周围大量表达,其主要在肝细胞浆和(或)膜表达,肝星状细胞未见表达;半定量测定及相关分析结果 显示,α-SMA与胶原纤维、AT1R与胶原纤维、AT1R与α-SMA的相关系数分别为0.958、0.971、0.990(P＜0.01).结论 AT1R在肝纤维化大鼠肝细胞大量表达,在肝星状细胞不表达,AT1R的含量与胶原纤维含量、α-SMA表达量存在正相关性.     

干扰素-α对CCl4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的:观察干扰素-α (interferon α,IFN-α)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制.方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组(n=15)、模型组(n=15)、IFN-α治疗组(n=15).正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN...     

三甲益肝颗粒对肝纤维化大鼠Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达的抑制作用

目的研究三甲益肝颗粒(SJG)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化(HF)的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法健康SD大鼠50只分为3组:模型组(n=18)和SJG组(n=17)采用体积分数40%CCl4花生油溶液皮下注射,每周2次,诱导HF模型;同时,SJG组给予SJG灌胃,模型组给予蒸馏水灌胃,每天均1次;对照组(n=15)采用皮下注射生理盐水,每周2次,并给予蒸馏水灌胃,每天1次。分别于第6周末、第8周末取肝组织观察病理组织学变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原(Ⅰ-PC、Ⅲ-PC)mRNA的表达。结果与同期模型组相比,SJG组坏死、炎症反应及纤维化程度显著减轻(P<0.01);第6周末时胶原纤维集中在中央静脉和汇管区周围,少数汇管区纤维化扩大,形成细小、菲薄的纤维间隔,但小叶结构保留;第8周末时可见较宽的纤维间隔,但未形成假小叶。模型组Ⅰ-PC、Ⅲ-PC mRNA的表达较正常对照组显著增加(P<0.01),SJG组与模型组相比显著减少(P<0.01)。结论SJG能减轻中毒大鼠肝脏坏死及炎症,抑制Ⅰ-PC、Ⅲ-PC mRNA的表达,从而抑制HF。     

汉防己甲素抗肝纤维化的形态计量学研究

[目的 ]观察汉防己甲素的抗肝纤维化的作用 .[方法 ]将 72只大鼠随机分组 .用 5 0 %四氯化碳油剂皮下注射 14周制作大鼠肝纤维化模型 .治疗组用汉防己甲素灌胃 ,连续 14周 ,第 4,8,14周取肝组织作切片 ,着重观察肝细胞脂肪变性、纤维化程度 ,并利用彩色图象分析系统测量胶元纤维的面积 .[结果 ]中毒组肝细胞脂肪变性从第 4周开始逐渐加重 ,第 14周有所减轻 ,肝纤维化从第 4周开始逐渐加重 ,第 14周形成假小叶 ;治疗组肝细胞脂肪变性、肝纤维化程度比中毒组轻 ,肝组织内胶原含量明显减少 ,与中毒组比较有显著性差异 .汉防己甲素的疗效每kg体重 5 0mg组优于 30mg组 .[结论 ]汉防己甲素有较好的抗肝细胞脂肪变性及抗肝纤维化的作用     

干扰素-α对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的：观察干扰素-α（interferonα,IFN-α）对四氯化碳（CCl4）诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制。方法：45只Wistar大鼠随机分为正常组（n=15）、模型组（n=15）、IFN-α治疗组（n=15）。正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN-α治疗组大鼠予以50%CCl4 2 mL/kg腹腔注射造模,每周注射2次,共8周;IFN-α治疗组于第9周予以IFN-α每日10万U/只,皮下注射,共治疗3周。11周末处死所有大鼠。取肝组织进行炎症活动度半定量评分、纤维化半定量评分,检测羟脯氨酸含量,Ⅰ型和Ⅲ型胶原、转化生长因子-β1（transforming growth factorβ1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）及组织金属蛋白酶抑制因子（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）mRNA表达量,以及MMP-9和TIMP-1蛋白表达量。结果：与模型组比较,IFN-α治疗组肝组织炎症活动度半定量评分、纤维化半定量评分显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;羟脯氨酸含量及Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达量显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;TGF-β1,CTGF,α-SMA,TIMP-1 mRNA表达量及TIMP-1蛋白表达量显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）,MMP-9蛋白及mRNA表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：IFN-α可明显减轻CCl4诱导的大鼠肝纤维化及肝脏炎症反应,其作用机制可能为下调促肝纤维化因子TGF-β1和CTGF的表达,抑制肝星状细胞的活化,减少细胞外基质的合成;抑制肝纤维化降解因子TIMP-1的表达,调节细胞外基质的降解。     

Effect of oxymatrine on the p38 mitogen-activated protein kinases signalling pathway in rats with CCl4 induced hepatic fibrosis

Background Recent studies have suggested that p38 mitogen-activated protein kinases （MAPK） signalling pathway plays an important role in hepatic fibrosis. This study explored the antifibrotic effect of oxymatrine on tetrachloromethane induced liver fibrosis in rats and its modulation on the p38 MAPK signalling pathway. Methods One hundred and twenty healthy male Sprague-Dawley rats were randomly assigned to six groups： normal （n=20）, induced fibrosis （n=20）, colchicine （n=20） and three treatment groups of oxymatrine （n=20x3）. We obesrved changes in deposition of collagen, hyaluronic acid （HA）, laminin （LN）, collagen type IV （CIV）, procollagen III （PCIll） and hydroxyproline （Hyp）, a-smooth muscle actin （α-SMA） and phosphor-p38 （pp38）. Results The relative indicators of changes in histopathology, HA, LN, CIV, PCIII, Hyp, a-SMA and pp38 were raised significantly in the induced fibrosis group （P〈0.01 vs normal group）. The semiquantitative hepatic fibrosis staging scores of middle dose group and high dose group were decreased （P 〈0.05 and P 〈0.01 respectively vs the induced fibrosis group）, as was the average area of collagen in rats＇ liver, the concentrations of serum HA, LN, CIV, PCIII and liver tissue homogenate Hyp. The gene expression of α-SMA mRNA was considerably decreased in the treated animals, as was the protein espression of pp38 protein. Conclusions Oxymatrine is effective in reducing the production and deposition of collagen in the liver tissue of experimental rats in ways which relate to modulating the fibrogenic signal transduction via p38 MAPK signalling pathway.     

三甲益肝冲剂抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的　观察三甲益肝冲剂 (SJYGG)对大鼠肝纤维化的防治作用。方法　 30只SD大鼠随机分为SJYGG预防组 (A组 )、模型组 (B组 )和SJYGG治疗组 (C组 )。各组均以二甲基亚硝胺 (DMN)腹腔注射 (每周连续 3d ,每天 1次 )共 4周 ,诱导肝纤维化模型。A组造模同时给予SJYGG(每日 6 .8g·kg-1)灌胃 ,共 8周。C和B两组造模 4周后 ,分别给予SJYGG(每日 6 .8g·kg-1)和生理盐水灌胃 ,共 4周。 8周后留取肝标本 ,行HE染色和Masson染色。结果　 (1)A组 :肝索排列基本整齐 ,有少量出血 ,汇管区稍扩大 ,未见胶原纤维增生。B组 :肝组织大片出血坏死 ,有假小叶形成。C组 :肝索排列紊乱 ,有出血坏死 ,汇管区扩大 ,有纤维间隔伸向肝小叶。 (2 )Masson染色胶原定量分析 :B组明显高于A、C两组 (P <0 .0 1) ,A组低于C组 (P <0 .0 5 )。结论　在DMN诱导的肝纤维化模型中 ,SJYGG具有预防和治疗肝纤维化的作用 ,且预防效果优于治疗。     

补肾柔肝方对二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的预防作用及其机制研究

目的：探讨补肾柔肝方对二甲基亚硝胺（dimethylnitrosamine，DMN）诱导大鼠肝纤维化的预防作用及初步机制。方法：雄性Wistar大鼠40只，随机分为正常对照组（n=10）、模型组（n=15）及补肾柔肝方预防组（n=15）。模型组和补肾柔肝方预防组以10mg／kgDMN腹腔注射，1次／d，每周连续3d，共4周。模型组在造模同时给予生理盐水灌胃，补肾柔肝方预防组在造模同时给予补肾柔肝方灌胃，共4周；第4周末处死全部大鼠，留取血清及肝组织标本。采用全自动生化分析仪检测血清总胆红素（total bilirubin．Tbil）、丙氨酸氧基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、白蛋白等；应用逆转录聚合酶链式反应法检测肝组织结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）和Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果：补肾柔肝方预防组大鼠一般状态明显好于模型组；模型组大鼠死亡率为13．33％（2／15），补肾柔肝方预防组死亡率为6．67％（1／15）；模型组大鼠腹水发生率为46．67％（7／15），补肾柔肝方预防组大鼠腹水发生率为20％（3/15）·雨组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；补肾柔肝方组肝功能较模型组有显著改善（P〈0.01）。模型组肝组织CTGF和Ⅰ型胶啄mRNA表达明显增强，补肾柔肝方预防组与模型组相比明显减弱（P〈0．01）。结论：补肾柔肝方可通过抑制大鼠盱组织CTGF和Ⅰ型胶原mRNA的表达．达到抗肝纤维化的作用。     

北五味子提取物对实验性肝纤维化大鼠肝损伤的保护作用

目的：观察北五味子提取物(EFSC)对实验性肝纤维化大鼠肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法：将60只Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,马洛替脂组,100、200和400 mg/kgEFSC组,每组10只。皮下注射CCl4花生油溶液10周建立大鼠实验性肝纤维化模型。各组大鼠给药4周后测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）活性,白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、总蛋白（TP）和一氧化氮（NO）水平,检测各组大鼠肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮合酶（NOS）活性,丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）和羟脯氨酸（Hyp）水平。结果：与模型组比较,200和400 mg/kgEFSC组大鼠血清ALB水平和ALB/GLO比值显著升高（P<0.05或P<0.01）,血清AST、ALT活性和GLO、NO水平均显著降低（P<0.05或P<0.01）;肝组织中SOD活性和GSH 水平显著升高（P<0.05或P<0.01）,Hyp和MDA水平显著降低（P<0.05）。结论：EFSC可改善肝功能,抑制肝脏胶原纤维的生成,纠正肝纤维化引起的ALB水平低下,减轻肝细胞脂质过氧化损伤,从而防止肝纤维化的形成与发展。     

Effects of hepatotrophic factors on the liver after portacaval shunt in rats with portal hypertension

Background Portacaval shunt （PCS） prevent hepatotrophic factors from flowing into the liver, but they enter directly the systemic circulation and worsen liver injury. This study was designed to investigate the effects of hepatotrophic factors through the portal vein on the liver in rats with portal hypertension after portacaval shunt. Methods Intrahepatic portal hypertension （IHPH） was induced by intragastric administration of carbon tetrachloride, and end-to-side PCS was performed. Eight normal rats served as controls, and eight rats with IHPH served as IHPH model （IHPH group）. Another 32 rats with IHPH-PCS were randomly subdivided into 4 groups： normal saline （NS） given to 8 rats, hepatocyte growth factor （HGF） 8, insulin （INS） 8, hepatocyte growth factor and insulin （HGF＋INS） 8. Hepatotrophic factors were infused into the portal vein through an intravenous catheter. Portal venous pressure （PVP） was measured. The levels of serum alanine aminotransferase （ALT） and aspartate aminotransferase （AST） were tested biochemically and those of hyaluronic acid （HA） and laminin （LN） were measured by radioimmunoassay. Hepatic fibrosis was assessed histologically and the expression of collagens type I and In were detected immunohistochemically. Ultrastructural change of hepatocytes and the number of mitochondria were observed under an electron microscope. The data were compared between groups and subgroups by Student-Newman-Keuls procedure with SPSS 10.0. Results PVP was significantly higher in the IHPH rats than in the control rats （P〈0.05）. The levels of serum ALT, AST, HA, and LN, hepatic fibrosis score, the amount of collagen deposition, collagens type I and III increased more significantly in the IHPH group than in the control rats （P〈0.05）. The number of mitochondria decreased more significantly in the IHPH rats than in the control rats （P〈0.05）. The levels of serum ALT, AST, HA and LN as well as hepatic fibrosis score, the amount of collagen deposition, and the amount of collagens type I and M in the HGF and HGF＋INS rats were significantly lower than those in the NS rats （P〈0.05）. The damage to hepatocyte ultrastructure was markedly alleviated and the number of mitochondria was increased more significantly in the HGF and HGF＋INS rats than in the NS rats under an electron microscope. Conclusions Perfusion of exogenous hepatotrophic factors through the portal vein can alleviate liver injury, minimize the damage to the ultrastructure of hepatocyte, protect liver function, and lessen hepatic fibrosis in rats with portal hypertension after PCS.     

保肝宁对肝纤维化大鼠瘦素及瘦素受体的影响

目的 探讨保肝宁抗肝纤维化的作用机制.方法 采用复合因素建立肝纤维化大鼠模型,采用同位素放射免疫分析法检测血清瘦素水平.用免疫组化方法观察保肝宁对肝纤维化大鼠肝组织瘦素、瘦素受体表达的影响.结果 与正常组比较,模型组及各药物组血清瘦素水平均明显升高(P＜0.01).与模型组比较,保肝宁药物组血清瘦素水平明显下降,差异有显著性意义(P＜0.01),保肝宁明显抑制模型大鼠肝组织瘦素、瘦素受体的表达.与模型组比较,差异有显著性意义(P＜0.01).结论 保肝宁可有效防治大鼠肝纤维化,其作用机制可能与通过降低血清瘦素水平,抑制模型大鼠肝组织瘦素、瘦素受体的表达密切相关.     

五灵胶囊对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用

目的　研究五灵胶囊对大鼠肝纤维化的作用 .方法　采用以四氯化碳为主的复合因素致大鼠肝纤维化 ,观察五灵胶囊对肝组织病理学、肝组织和血清中羟脯氨酸 (HYP)、 , 型前胶原 (PC ,PC )含量的影响 .结果　病理学检查显示 ,模型组大鼠肝细胞损伤严重 ,胶原纤维大量增生 ,形成假小叶 .五灵胶囊组大鼠肝细胞结构破坏不明显 ,肝纤维化程度轻 ,在 3.0 g· kg- 1时治疗效果最好 .各治疗组的肝组织 HYP含量均较模型组明显下降 ,尤以五灵胶囊组 (3.0 g·kg- 1 )下降幅度最大 (P<0 .0 1) .各治疗组的血清 PC 及肝PC 含量均较模型组明显下降 (P<0 .0 1) .此外五灵胶囊组(3.0 g· kg- 1 )还可显著降低血清 PC 含量 (P<0 .0 1) .结论　五灵胶囊可有效地治疗肝纤维化     

羟尼酮可阻止大鼠肝星状细胞活化：基于抑制TGF-β1通路蛋白的磷酸化

目的 探讨羟尼酮对CCl₄诱导的大鼠肝纤维化的作用及相关机制。方法 66只雄性SD大鼠按随机数字法分为对照组10只、模型组20只、羟尼酮(100 mg/kg)组12只、羟尼酮(250 mg/kg)组12只、吡非尼酮(250 mg/kg)组12只,采用CCl₄皮下注射进行肝纤维化造模,羟尼酮、吡非尼酮予以灌胃给药,处死大鼠后,留取血清检测肝功能,利用肝脏组织检测羟脯氨酸的含量,肝组织进行HE染色和Sirius Red染色,对炎症和纤维化程度进行评分。将人肝星状细胞系LX-2分组：对照组、TGF-β1组、羟尼酮组、吡非尼酮组,经过TGF-β1刺激和羟尼酮、吡非尼酮处理后,Western blot分别检测α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白和磷酸化Smad3、磷酸化p38、磷酸化Erk1/2、磷酸化Akt等磷酸化蛋白。结果 动物实验显示羟尼酮组大鼠肝功能值有改善,肝组织羟脯氨酸含量明显减少,肝组织纤维化程度显著降低,且均具有统计学意义(P<0.05)。细胞实验发现随羟尼酮浓度的增高,ɑ-SMA和Ⅰ型collagen蛋白表达水平降低;TGF-β1刺激细胞后...     

小柴胡汤对实验性肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达干预研究

目的:研究肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化情况,探讨不同剂量小柴胡汤对实验性模型大鼠肝纤维化程度的影响。方法:肉眼观察、常规HE染色法和免疫组化染色法观察小柴胡汤对实验性肝纤维化模型大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的影响。结果:6、12周肝纤维化模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与正常对照组比较显著增加(P<0.01);12周肝纤维化模型组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较6周肝纤维化模型组显著增加(P<0.05)。小柴胡汤治疗组与同期肝纤维化模型组相比,肝纤维化程度显著减轻(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少(P<0.05)。不同剂量小柴胡汤组间Ⅰ、Ⅲ型胶原含量比较无显著性差异(P>0.05)。结论:肝纤维化发生、发展过程中,Ⅰ、Ⅲ型胶原含量显著增加,小柴胡汤能减轻模型大鼠肝纤维化程度,下调Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。     

氯沙坦对实验性肝纤维化模型大鼠的作用

目的   研究氯沙坦对40%CCL4诱导的大鼠肝脏纤维化的影响。方法   制备CCL4诱导的大鼠肝纤维化模型,同时给予氯沙坦灌胃,共6周,分别取血和肝组织,检测血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT);光镜下观察肝组织病理改变;偏光显微镜下观察肝组织纤维化的程度;免疫组化检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;检测大鼠肝组织中AngⅡ、AT1R mRNA表达。结果   与模型组比较,氯沙坦干预组炎症反应、纤维化程度明显减轻,Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达明显减少( P<0.05),肝功能改善;肝组织中AngⅡ、AT1R mRNA表达降低(P<0.05)。结论   氯沙坦可能通过降低AngⅡ、AT1R的表达,而对CCL4诱导的大鼠肝纤维化起到一定的保护治疗作用。     

Upregulation of TNF-α mRNA in hepatic fibrosis rats induced by dimethylnitrosamine

Objective：To observe the expression level of TNF-α mRNA in rats with hepatic fibrosis induced by dimethylnitrosamine （DMN） and to explore its relationship with collagen metabolism and its diagnostic value for hepatic fibrosis.Methods： Twenty-five male Wistar rats were randomly divided into normal control group （n=10） and model group （n=15）. Model rats were induced by DMN for 4 weeks and at final stage were executed. TNF-α mRNA were detected by RT-PCR and the inflammatory necrosis and collagen deposition in hepatic tissue were observed by HE stain and Sirius red stain. The liver functions were determined by automatic biochemical analytic device. The serum marks of liver fibrosis, such as HA, LN and Ⅳ-C were measured with ELISA and RIA. Results： In this study, the rat model of liver fibrosis induced by DMN was successfully constructed. RT-PCR reveals that TNF-α mRNA expression in control group is lower than that of model group. The liver functions of model group were impaired compared with those of the control group （P〈0.01）. Semi-quantitive analysis revealed that TNF-α/β-actin of normal rats was 0.39±0.12, while 0.93±0.05 of model rats. The concentration of HA （434.44±98.81 vs 252.9±26.59 ng/ml, P〈0.01）, LN （70.67±6.32 vs 37.90±5.97 ng/ml, P〈0.01） and Ⅳ-C （79.39±10.52 vs 21.40±4.17 ng/ml, P〈0.01） were significantly increased in the model group as well. Changes of the indexes were similar to the pathological damage of the liver. Conclusion： The results suggested that activation of TNF-α in liver tissues may be the common pathogenic mechanism of liver fibrosis. TNF-α may be a useful index for the diagnosis of hepatic fibrosis which worthies further investigation.     

肝纤维化大鼠的肝素干预治疗观察

目的：建立肝纤维化大鼠模型,对肝素的抗肝纤维化疗效进行评价。方法: 应用CCl₄建立肝纤维化大鼠模型,分别给予不同剂量的肝素进行抗肝纤维化干预治疗。8周后处死大鼠,留取血清检测透明质酸、Ⅳ型胶原、层连蛋白、Ⅲ型前胶原、转化生长因子β₁等。留取肝组织,行HE和网织纤维染色,采用免疫组织化学方法检测肝组织中转化生长因子β₁的表达,电子显微镜下观察HSC的超微结构变化及狄氏腔内胶原纤维沉积情况。结果: 肝素预防性治疗组和肝素治疗组的各项血清学指标水平与肝纤维化大鼠造模组相比,差异均有统计学意义（P<0.001,P<0.01）。网织纤维染色显示,肝素可明显抑制纤维增生。肝素可以降低血清转化生长因子β₁水平,与免疫组织化学染色结果一致。电镜下可见肝素治疗后狄氏腔内胶原纤维沉积减少。结论: 肝素具有抗肝纤维化作用,其作用机制与抑制转化生长因子β₁表达有关。     

补肾柔肝方治疗大鼠肝纤维化的实验研究

目的:探讨中药复方补肾柔肝方对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine, DMN)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用.方法: 雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组及治疗组.模型组和治疗组大鼠以10 mg/kg的剂量腹腔注射0.5%DMN,1次/d,每周连续3 d,共4周.模型组在造模结束后给予生理盐水灌胃,而治疗组在造模结束后灌胃补肾柔肝方(10 ml·kg-1·d-1)进行治疗干预,共用药4周.第8周末处死全部大鼠,采用全自动生化分析仪检测血清总胆红素(total bilirubin, TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、白蛋白(albumin, A)及球蛋白(globulin, G)等;用放射免疫法检测血清透明质酸(hyaluronic acid, HA)、层黏连蛋白(laminin, LN)及Ⅳ型胶原(collagen Ⅳ, Ⅳ-C)的含量.结果:治疗组大鼠一般状态明显好于模型组;正常组大鼠无死亡,而模型组大鼠病死率为40%(6/15),治疗组病死率为20%(3/15);与正常组比较,模型组大鼠的血清TBIL、ALT及AST显著升高(P<0.01),治疗组较模型组有显著改善(P<0.01);模型组大鼠血清的A/G严重倒置,达到0.62±0.07,较正常组差异显著(P<0.01),而治疗组的A/G有一定程度的改善,为0.77±0.04(P<0.05),但是仍倒置比较明显.血清胶原成分检测结果表明,模型组血清胶原成分HA、LN及Ⅳ-C的含量均较正常组显著增高,分别为正常组的1.72、1.86、3.71倍;治疗组HA、LN、Ⅳ-C均较模型组显著下降,分别为正常组的1.26、1.18、2.47倍.结论:补肾柔肝方对大鼠具有较好的抗肝纤维化作用,可用于肝纤维化的治疗.