多奈哌齐对血管性痴呆模型小鼠海马p38 MAPK mRNA表达的影响

目的探讨多奈哌齐对血管性痴呆模型小鼠海马p38 MAPK mRNA表达的影响。方法双侧颈总动脉线结反复缺血—再灌注法制备血管性痴呆小鼠模型,设多奈哌齐治疗组,采用多奈哌齐连续治疗4 wk,并设假手术组及模型组为对照组,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,用原位杂交技术观测其p38 MAPK mRNA的表达变化。结果多奈哌齐组小鼠学习、记忆成绩明显优于血管性痴呆模型组(P<0.05),其海马p38 MAPK mRNA表达明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论多奈哌齐影响血管性痴呆小鼠海马p38MAPK mRNA表达,改善血管性痴呆小鼠学习、记忆功能。     

米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠的神经保护作用

目的观察米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠海马和皮层损伤的保护作用并探讨其机制。方法实验动物设4组:转基因模型组和药物处理组APP/PS1转基因小鼠各10只,老年对照组为野生型C57小鼠10只,药物处理组给予米索前列醇,另两组给予羧甲基纤维素钠,均在小鼠24周龄时以200μg·kg-1的量开始灌胃给予,连续给药20周,每周连续5 d,每天1次;在指标测试阶段,另取10只8周龄野生型C57小鼠作为青年对照组。采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,HE染色观察海马和皮层神经元形态变化,生化法检测海马和皮层SOD活性、MDA含量变化,免疫组织化学法检测海马和皮层Aβ表达情况。结果与老年对照组小鼠相比,转基因模型组小鼠寻台潜伏期明显延长,海马和皮层神经元出现明显核固缩,SOD活性明显下降,MDA含量明显增加,Aβ表达明显增多;给予米索前列醇后,APP/PS1转基因小鼠寻台潜伏期明显缩短,海马和皮层神经元核固缩明显减轻,SOD活性明显升高,MDA含量明显降低,Aβ表达明显减少。结论米索前列醇对APP/PS1转基因小鼠海马和皮层的神经损伤有显著保护作用,其机制可能与米索前列醇减轻APP/PS1转基因小鼠脑组织氧化应激有关。     

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠对海马转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)表达的调节作用。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。90只雄性昆明小鼠随机分为3组,假手术组(30只)、模型组(30只)及盐酸多奈哌齐治疗组(30只)。在术后第29、30天,经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组织化学和Western blot方法检测各组小鼠海马CREB的表达变化。结果盐酸多奈哌齐治疗组小鼠的学习和记忆成绩明显高于VD模型组小鼠(P<0.05);盐酸多奈哌齐治疗组小鼠海马CA1区CREB蛋白阳性表达的平均吸光度值显著高于VD模型组(P<0.05)。结论盐酸多奈哌齐能够上调VD小鼠CREB的表达。     

氯肟衍生物对记忆障碍模型动物空间学习记忆障碍改善作用及其机制研究

目的研究氯肟衍生物arimoclomol和TCO-2对记忆障碍动物学习记忆能力的影响并初步探讨其机制。方法采用东莨菪碱致记忆获得性障碍小鼠模型和侧脑室注射Aβ1-42所致记忆障碍大鼠模型。动物分为正常组、模型组、多奈哌齐对照组、arimoclomol干预组和TCO-2干预组。正常组与模型组动物每日相同时间腹腔注射相应剂量的药物溶剂(生理盐水);多奈哌齐对照组及待测药物干预组分别给予相应剂量的药物。给药8 d后,采用Morris水迷宫方法检测动物的空间学习记忆能力,并且检测动物海马组织的乙酰胆碱酯酶活性;检测侧脑室注射Aβ1-42大鼠海马组织的Aβ1-42含量,并测定磷酸化tau蛋白表达。结果与模型对照组相比,给予两种氯肟衍生物的动物搜索平台潜伏期缩短,穿越平台次数增加,表明氯肟衍生物可以明显改善注射东莨菪碱或Aβ1-42引起的记忆障碍;给予氯肟化合物还能够明显降低脑内乙酰胆碱酯酶活性和Aβ1-42含量,下调磷酸化tau蛋白的表达。结论氯肟衍生物可改善东莨菪碱以及侧脑室注射Aβ1-42所致的记忆障碍,其作用机制可能与增强中枢胆碱能系统功能、降低脑内Aβ蛋白和磷酸化tau蛋白含量有关。     

新型乙酰胆碱酯酶抑制剂双配基-（-）-美普他酚改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆功能的机制

目的阿尔茨海默病(AD)是一种以认知功能障碍为主要特征的神经退行性疾病,是老年痴呆症最常见的类型。目前针对该病已上市的药物多为胆碱酯酶抑制剂,但只能改善AD的认知功能障碍,不能有效干预AD的疾病进程。双配基-(-)-美普他酚[Bis(9)-(-)-meptazinol,B9M]是依据多靶点导向配体策略设计研发的新型胆碱酯酶抑制剂,可同时作用于乙酰胆碱酯酶(ACh E)的催化位点和外周阴离子位点,能够有效抑制ACh E活性及由其诱导产生的β-淀粉样蛋白(Aβ)聚集。本研究主要探讨B9M对AD转基因模型小鼠学习记忆功能的影响,进而分析其潜在的病理机制。方法选用8月龄APP/PS1双转基因小鼠作为AD模型,以3个剂量B9M(每天0.2,0.6和2μg·kg~(-1))皮下注射4周,通过筑巢、新物体识别和Morris水迷宫实验,研究B9M对AD模型小鼠认知功能障碍的改善作用。实验结束后将小鼠处死,收集脑组织样本进行免疫组化和ELISA等实验,研究B9M对AD小鼠脑内ACh E活性、Aβ含量和胶质细胞活化的影响,探讨B9M对AD模型小鼠的疾病修饰作用。结果8月龄APP/PS1转基因小鼠筑巢能力明显下降。B9M经皮下给药4周后,B9M给药组的筑巢评分明显高于未给药APP/PS1模型组,提示B9M能够明显提高小鼠的筑巢能力。APP/PS1转基因小鼠新旧物体识别指数为44.09%,接近50%,提示其对新旧物体无识别能力。而B9M连续给药4周可显著提高APP/PS1小鼠的新物体识别指数,进一步表明B9M能够改善AD模型小鼠的识别记忆能力。水迷宫实验结果表明,B9M给药可明显缩短APP/PS1小鼠寻找平台的潜伏期。与模型组相比,B9M给药组(0.6和2μg·kg~(-1))及阳性药物多奈哌齐组小鼠在目标象限穿越平台时间和距离百分比均存在显著性差异。各组小鼠的游泳速度不存在显著性差异,提示B9M能显著提高小鼠的空间学习和记忆能力。探讨B9M作用机制发现,B9M可通过抑制皮质和海马区ACh E活性降低乙酰胆碱(ACh)水解,提高突触间隙ACh含量。B9M可显著降低APP/PS1转基因小鼠脑内可溶和不可溶性Aβ40和Aβ42含量,显著抑制脑组织中胶质细胞的集聚,减少胶质细胞的增生。B9M 2.0μg·kg~(-1)减少Aβ斑块、抑制胶质细胞活化的效果最为显著,给药剂量是阳性对照药物多奈哌齐的千分之一。结论 B9M皮下连续给药4周可有效提高8月龄APP/PS1转基因小鼠的筑巢和新物体识别能力,改善空间学习和记忆障碍。B9M通过抑制APP/PS1小鼠脑内ACh E活性改善其学习记忆功能,通过减少脑内Aβ斑块、降低Aβ40和Aβ42含量、抑制胶质细胞激活逆转AD相关病理进程,提示B9M具有症状改善和疾病修饰双重作用,是极有潜力的抗AD新药。     

美金刚激活NGF/TrkA信号通路改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆障碍

目的考察NGF/TrkA信号通路在美金刚(memantine,MEM)改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆障碍中的作用及其相关机制。方法以Morris水迷宫、被动避暗试验及自主活动试验观察动物行为学变化,免疫组化检测小鼠脑内Aβ1-42表达水平,ELISA法及比色法考察其脑内ChAT及AChE活性,并用Western blot法检测小鼠海马NGF的水平及其特异性受体TrkA下游ERK通路相关蛋白的表达水平。结果 MEM明显改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆障碍,并明显降低其脑内Aβ1-42蛋白沉积。MEM可上调NGF表达水平,继而激活NGF-TrkA通路,明显增加TrkA、c-raf、ERK1/2及其下游效应蛋白CREB的磷酸化水平;同时,增强其脑内ACh生成酶ChAT并降低其水解酶AChE活性。结论 MEM可能通过增加NGF的表达,激活TrkA信号通路,降低APP/PS1转基因小鼠脑内Aβ1-42蛋白沉积,从而改善其学习记忆障碍。     

夏天无总生物碱对痴呆大鼠学习记忆障碍及中枢胆碱能神经系统功能的影响

目的　观察夏天无总生物碱 (Xiatianwutotalalkaloids,XA)对喹啉酸损毁海马所致大鼠学习记忆障碍和中枢胆碱能神经系统功能的影响。方法　采用双侧海马CA1区微注射喹啉酸造成大鼠学习记忆障碍模型 ,在造模前 1wk至造模后 3wk内 ,大鼠每天igXA 0 2 5 ,0 5 ,1mg·kg-1。采用三等分Y迷宫测定大鼠学习记忆能力 ,并采用比色法检测海马乙酰胆碱酯酶 (acetylcholinesterase ,AChE)活性和大脑皮层乙酰胆碱 (acetylcholine ,ACh)含量的变化。结果　大鼠双侧海马内微注射喹啉酸可引起大鼠学习记忆功能障碍 ,海马中AChE活性下降 ,大脑皮层ACh含量减少 ;XA可显著改善喹啉酸诱导的痴呆大鼠学习记忆功能障碍 ,同时明显抑制模型大鼠海马的AChE活性 ,提高大脑皮层ACh含量。结论　XA可改善喹啉酸损毁海马造成的痴呆大鼠学习记忆功能障碍 ,而其机制可能与抑制脑AChE活性 ,从而提高ACh含量 ,增强中枢胆碱能系统的功能有关。     

阿里红多糖对阿尔茨海默症小鼠认知功能的作用机制研究

目的 考察阿里红多糖（FOPS）改善淀粉样前体/早老素（APP/PS1）阿尔茨海默症小鼠的认知功能及潜在机制。方法 C57BL/6J雄性小鼠作正常组;根据体重将APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分为4组：模型组、对照组、FOPS-a实验组和FOPS-b实验组,每组8只。模型组正常饲养,对照组给予0.65 mg·kg^-1盐酸多哌奈齐,FOPS-a实验组给予60 mg·kg^-1 FOPS-a, FOPS-b实验组给予60 mg·kg^-1 FOPS-b,灌胃给药;qd,连续给药3个月。用Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,实时荧光定量-聚合酶链反应法测定海马区糖原合成酶激酶-3（GSK3α）、淀粉样前体蛋白（APP）、β淀粉样蛋白（Aβ）基因转录情况,蛋白质印迹法检测GSK3Α、APP、Aβ_1-42、早老素（PS-1）蛋白的表达。结果 模型组、正常组、对照组、FOPS-a组、FOPS-b剂量组第4天逃避潜伏期分别为（48.29±10.49）,（27.36±17.25）(28.91±20.31),（...     

健脑益智汤对类阿尔茨海默病大鼠血清胆碱酯酶和脑皮质细胞凋亡的影响

目的:观察健脑益智汤对阿尔茨海默病(AD)大鼠血清乙酰胆碱酯酶(AChE)和脑皮质细胞凋亡的影响。方法:老年Wistar大鼠侧脑室注射聚集态的β-淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))建立复合式类AD大鼠模型,测定健脑益智汤灌胃给予AD大鼠(10.6,21.2,42.4g·kg~(-1),qd)3周后血清AChE和脑皮质细胞凋亡百分率,实验设立盐酸多奈哌齐(0.525 mg·kg~(-1))作为阳性对照组。结果:与正常对照组比较,AD模型组血清AChE活性增强(P<0.01),脑皮质细胞凋亡百分率显著增加(P<0.01);与模型组比较,健脑益智汤中、高剂量组AChE活性和脑皮质细胞凋亡百分率均降低(P<0.05,P<0.01),与盐酸多奈哌齐组接近。结论:健脑益智汤可抑制AD大鼠血清Ache活性和脑皮质细胞凋亡。     

参芪醒脑浸膏对阿尔茨海默病模型小鼠认知功能障碍的改善作用及机制研究

目的 探讨参芪醒脑浸膏对D-半乳糖诱导脑老化致阿尔茨海默病(AD)模型小鼠认知功能障碍的改善作用及机制。方法 选取无特定病原体级美国癌症研究所小鼠110只,随机分为对照组(16只)、大剂量对照组(15只)、模型组(17只)、小剂量组(16只)、中剂量组(16只)、大剂量组(16只)及多奈哌齐组(14只)。除对照组、大剂量对照组外,其余小鼠使用D-半乳糖溶液颈背部皮下注射,连续注射65 d制备AD小鼠模型。于造模当日开始灌胃给药,小剂量组予参芪醒脑浸膏3.5 g生药/kg,中剂量组予参芪醒脑浸膏7 g生药/kg,大剂量对照组、大剂量组予参芪醒脑浸膏14 g生药/kg,多奈哌齐组予多奈哌齐1 mg/kg,对照组、模型组予相同容积的蒸馏水,均为1次/d,连续给药65 d。采用Morris水迷宫实验及物体识别实验评价小鼠的空间学习记忆及识别记忆能力。采用蛋白质印迹法检测小鼠大脑皮质和海马组织内神经元核抗原(NeuN)、神经生长因子(NGF)的表达水平。结果 模型组第3～5天逃避潜伏期长于对照组(均P<0.05),小、中、大剂量组第3～5天及多奈哌齐组第3～4天逃避潜伏期均短于模型组(均P...