上、下坡跑台运动对去卵巢小鼠破骨细胞分化NF-κB信号通路的影响

目的:通过去卵巢手术制备小鼠骨质疏松模型,对比研究上、下坡跑台运动对去卵巢小鼠破骨细胞分化的影响,以及NF-κB信号通路在介导运动对破骨细胞分化影响过程中的作用。方法:32只8周龄C57 BL/6雌性小鼠被随机分为4组:假手术安静组(S组)、去卵巢安静组(O组)、去卵巢上坡跑组(U组)和去卵巢下坡跑组(D组)。U组和D组小鼠于摘除卵巢一周后分别进行为期8周的上坡跑和下坡跑训练,每周训练5次,每次训练40 min,跑台坡度分别为±9°,跑速均为0.8 km/h。S组和O组在笼中正常饲养,不进行任何训练。8周后对股骨组织进行抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色检测,并对其骨髓进行破骨细胞原代培养,检测破骨细胞分化过程中NF-κB信号通路相关蛋白的表达。结果:各组小鼠股骨TRAP阳性染色区域的平均光密度值和平均阳性染色面积百分比存在显著差异,表现为O组显著高于S组,两运动组显著低于O组,且D组显著低于U组。各组小鼠破骨细胞前体IκBα和p65蛋白相对表达量无显著性差异;而p-IκBα和p-p65蛋白相对表达量组间差异显著,表现为O组显著高于S组,两运动组显著低于O组,且D组显著低于U组。结论:小鼠去卵巢后骨组织破骨细胞特异性酶TRAP大量生成,显示去卵巢手术可引起小鼠骨组织破骨细胞的大量分化和活化,而跑台运动可通过抑制破骨细胞分化过程中p65和IκBα蛋白的磷酸化而有效抑制破骨细胞分化NF-κB信号通路,从而有效抑制骨吸收,且下坡跑效果优于上坡跑。     

不同持续时间中等强度运动对去卵巢大鼠骨量及骨微结构的影响

目的:探讨不同持续时间中等强度跑台运动对去卵巢大鼠骨量及骨微结构的影响。方法:3月龄雌性SD大鼠随机分为9组:去卵巢组(OVX-4、8、12三组),假手术组(SHAM-4、8、12三组),去卵巢+运动组(OVX+T-4、8、12三组),每组10只。运动组采用跑台训练,坡度5°,60分钟/天,5天/周。分别于4、8、12周取材测试。以DXA测定大鼠全身BMD;以骨形态计量学测量大鼠胫骨骨微结构,测试结果主要包括静态参数(BV/TV、Tb.Th、Tb.N和Tb.Sp)和动态参数(Ob.N/mm、%L.Pm、MAR、BFR/BS、Oc.N/mm)两部分。结果:骨密度结果显示,与同期OVX组大鼠相比,OVX+T-4组无显著变化,OVX+T-8、12组显著升高,虽仍低于同期SHAM组,但两者之间无显著性差异。静态参数结果显示,与同期OVX组相比,OVX+T-4组各静态参数均无显著变化;OVX+T-8、12组BV/TV、Tb.Th显著升高,Tb.Sp显著下降,但与同期SHAM组相比仍显著降低。动态参数结果显示,OVX+T-4、8、12组的骨吸收指标(Oc.N/mm)显著低于同期OVX组,骨形成参数无显著性差异;而与同期SHAM组相比,骨吸收参数已无显著性差异,而骨形成参数(Ob.N/mm、%L.Pm、BFR/BS)仍显著升高。结论:持续4周的中等强度跑台运动可抑制去卵巢大鼠骨吸收,但尚未对去卵巢大鼠的密度和骨微结构产生明显影响;持续8周及以上的中等强度跑台运动不仅可以显著抑制去卵巢大鼠的骨吸收,还能够明显改善由于去卵巢所导致的骨密度下降及骨微结构破坏。     

运动对去势雌性大鼠松质骨BMP-2、TNF-α表达的影响

目的 :探讨运动对去势雌性大鼠骨组织BMP - 2 ,TNF -α表达的影响并讨论其在骨代谢变化中的意义。方法 :2 4只 4月龄雌性大鼠随机分为 3组 :对照组、单纯去势组、去势后运动组。单纯去势组和去势后运动组大鼠均行双侧卵巢切除。去势后运动组大鼠卵巢切除后在跑台上进行中等强度运动 (1 8m/min ,1h/day,5d/week) 1 0周。 1 0周后处死动物对血钙、血碱性磷酸酶、血骨钙素、尿钙、尿肌酐、尿羟脯氨酸进行检测以评定骨转换状态。同时对股骨近端松质骨中BMP - 2 ,TNF -α进行免疫组织化学染色 ,并结合计算机图像分析系统对表达强度进行评定。结果 :与对照组比较 ,单纯去势组大鼠骨吸收增强 ,骨转换加快 ,去势后运动组骨吸收和骨转换则无明显变化 ;与单纯去势组相比 ,去势后运动组大鼠骨转换和骨吸收均显著下调。单纯去势组大鼠TNF -α、BMP - 2阳性表达强度显著高于对照组 ,去势后运动组TNF -α、BMP - 2阳性表达与对照组相比无显著差异 ;去势后运动组大鼠骨组织中TNF-α、BMP - 2表达显著低于单纯去势组。结论 :运动对去势后大鼠的骨吸收增强和骨转换加快有抑制作用。卵巢切除后骨组织中TNF-α和BMP- 2高表达 ,运动对去势后骨组织中TNF -α和BMP - 2表达增加起下调作用     

不同运动对2型糖尿病小鼠骨中cAMP/CREB/Atf4途径及骨形成的影响

目的:探讨2型糖尿病(T2DM)小鼠骨形成变化及不同运动对T2DM小鼠骨中环磷酸腺苷(c AMP)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)/激活转录因子4(ATF4)途径和骨形成的影响。方法:40只4周龄C57BL/6雄性小鼠,适应性喂养1周后随机分为正常对照组(ZC,10只)和T2DM造模组(30只)。T2DM造模组小鼠造模成功后随机分为T2DM对照组(TC组,9只)、T2DM游泳组(TS组,9只)和T2DM下坡跑组(TD组,9只)。利用游泳和下坡跑对TS组和TD组小鼠进行8周训练。结束后,取小鼠血清并利用ELISA法检测c AMP浓度;取右侧股骨并利用RT-PCR法检测CREB、ATF4、骨钙素(OC)、骨钙蛋白(OCN)和骨涎蛋白(BSP)的m RNA表达;取右侧胫骨并利用West-blotting法检测CREB蛋白表达;取小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)并诱导其向骨细胞(OB)分化,利用碱性磷酸酶(ALP)染液对OB染色;取左侧股骨并用Micro-CT对股骨远端BMD进行扫描。结果:与ZC组相比,TC组c AMP浓度下降,CREB、ATF4、OC、OCN和BSP m RNA及CREB蛋白表达均显著下降(P<0.05或P<0.01),OB成骨能力和BMD显著下降(P<0.01)。与TC组相比,TS组OC和OCN m RNA表达上调(P<0.05或P<0.01),OB骨形成能力增强;TD组c AMP浓度下降,CREB、ATF4、OC和OCN m RNA及CREB蛋白表达均显著上调(P<0.05或P<0.01),OB骨形成能力和BMD显著增加(P<0.01)。与TS组相比,TD组c AMP浓度升高,CREB、ATF4和OC的m RNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01),OB骨形成能力增强。结论:2型糖尿病小鼠骨形成代谢被抑制;下坡跑通过激活2型糖尿病小鼠骨中c AMP/CREB/ATF4途径,促进成骨细胞分化及骨形成能力,提高骨密度,且其作用效果优于游泳。     

rhBMP-2对兔下颌骨牵引成骨的影响及BMP-4的表达

 目的 通过观察兔下颌骨牵引成骨过程,探讨不同剂量重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)在不同时间对成骨区新骨生成的影响及其BMP-4的表达.方法 日本大耳白兔48只行单侧下颌骨牵引,分别将不同剂量 rhBMP-2胶原复合物植入骨切开处,间歇期5 d,牵引速度0.4 mm/d,2/d,共牵引5 d.用免疫组化方法观察牵引成骨新骨生成区BMP-4在固定1、7、14、28 d时的表达及新骨生成情况.结果 随着稳定期延长,牵引间隙内新骨逐渐生成.1.5 mg BMP-2剂量组的新骨生成优于对照组,3 mg BMP-2剂量组的新骨组织在同一时期内最多.BMP-4主要定位于成骨细胞和软骨细胞中,表达高峰出现在稳定期的1、7 d,此后逐渐下降,第28天阳性表达微弱.结论 rhBMP-2能促进牵引成骨,并具有浓度依赖性,BMP-4可能在牵引成骨的早期发挥重要作用.     

跑台运动对帕金森病模型小鼠黑质、海马CA1区ERK1/2信号通路及记忆能力的影响

目的:观察跑台运动干预后帕金森病(PD)小鼠记忆能力以及黑质、海马CA1区突触可塑性蛋白的变化,并探讨ERK1/2信号通路在运动改善PD小鼠记忆能力中的作用.方法:36只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水对照组(SC组)、PD模型组(PD组)、生理盐水+运动组(SE组)、PD+运动组(PDE组)、PD+运动+二甲基亚砜...     

负重爬梯运动调节去卵巢大鼠OPG/Ikkα/Runx2基因表达以及对股骨结构和生物力学的影响

目的:探讨负重爬梯运动对去卵巢大鼠OPG/Ikkα/Runx2基因表达调控以及对股骨微结构与生物力学特征变化的影响。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为3组,假手术组(CON组,10只)、去卵巢手术组(OVX组,10只)和去卵巢手术运动组(OVX-CL组,10只)。OVX-CL组进行85°、梯阶间距2 cm、总高1 m、负重量为自身体重15%的爬梯训练。8周实验干预后称重,并检测血清中磷(P)、钙(Ca)、碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸性磷酸酶(StraCP)、破骨细胞分化因子(RANKL)、骨保护素(OPG)等含量;qRT-PCR检测RANKL、OPG、IkB激酶α(Ikkα)、核因子κB2(NFκB2)和Runt相关转录因子2(Runx2)表达量,并对股骨的微结构参数(Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp、BMD~(trab)、BMD~(cort)、BV/TV、和SMI)和生物力学特性(ML、Stiffness、EAC和MOE)进行检测。结果:OVX-CL组血清中钙(Ca)和RANKL含量均低于OVX组(P<0.05),ALP水平与OPG/RANKL比值均高于OVX组(P<0.05);OVX-CL组股骨组织RANKL、Ikkα及NFκB2的基因表达量与OVX组相比降低(P<0.05),OVX-CL组与OVX组相比,OPG和Runx2基因的表达量增加(P<0.01);MicroCT检测结果显示,OVX-CL组与OVX组相比,骨小梁数量与松质骨矿密度增加(P<0.05),骨小梁分离度、结构模型指数均降低(P<0.05);OVX-CL组最大载荷及刚度均增加(P<0.05)。结论:负重爬梯运动可通过对OPG/Ikkα/Runx2的基因调控改善成骨与破骨之间的平衡状态,对提高去卵巢大鼠骨微结构和力学特征有积极作用。     

不同干预疗法对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构影响的对比研究

目的:对比观察跑台运动、全身垂直振动、金雀异黄酮和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨微结构的影响,为绝经后骨质疏松的防治提供理论参考依据。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组(10只)和去卵巢组(50只)。去卵巢10周时,将去卵巢组大鼠按体重分层后又随机分为去卵巢组、跑台运动组、振动训练组、金雀异黄酮组和雌激素组,并开始进行不同的干预处理。干预处理8周时,腹主动脉取血处死各组大鼠,游离左股骨和第5腰椎,从每组随机取6只大鼠的左股骨和第5腰椎行micro-CT扫描及三维结构重建,选取股骨远端和第5腰椎椎体距生长板1 mm处,2.0mm×3.5 mm、厚0.9 mm的骨组织区域为感兴趣区域,进行骨形态计量学分析。结果:与去卵巢组比较,去卵巢大鼠经全身垂直振动和雌激素干预后,股骨体积骨密度(v BMD)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁数目(Tb.N)显著增加,骨小梁间隙(Tb.Sp)显著下降,骨小梁厚度(Tb.Th)和结构模型指数(SMI)无显著变化。经跑台运动和金雀异黄酮干预后,Tb.Sp显著下降,其他指标无显著变化;去卵巢大鼠经跑台运动、全身振动、金雀异黄酮和雌激素干预后,第5腰椎所有检测指标均无显著变化。结论:全身垂直振动和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨微结构的改善效应大于跑台运动和金雀异黄酮,且对股骨的改善效应大于腰椎。     

中等强度跑台运动对去卵巢大鼠腰椎骨量、骨髓脂肪细胞数量和血脂水平的影响

目的:通过观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠腰椎骨量、骨髓脂肪细胞数量和血脂水平的影响,探讨其预防绝经后骨质疏松的机制。方法:将45只3月龄雌性SD大鼠按体重随机分为假手术、去卵巢静止、去卵巢运动和雌激素四个组。运动组每周进行4次45 min、速度18 m/min、坡度5°的跑台训练。雌激素组每周颈部皮下注射3次17-β雌二醇,剂量为25μg/kg体重。正式运动处理14周时,称量各组大鼠体重和第5腰椎(L5)干重;检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、雌激素(E2)水平以及L5的骨矿物含量和骨密度;常规HE染色观察第2腰椎(L2)组织形态学变化,计数骨髓腔内脂肪细胞数。结果:去卵巢静止组L5骨密度、骨矿物含量、骨干重/体重以及血清E2、TC和HDL/TC水平显著低于其他三组,而血清LDL/TC水平和骨髓脂肪细胞数目显著高于其他三组;去卵巢静止组血清TC和LDL水平显著高于假手术和去卵巢运动组,与雌激素组比较无显著性差异;各组HDL水平均无显著变化。结论:中等强度跑台运动减缓去卵巢大鼠椎骨骨量丢失的效应可能与其能改善去卵巢大鼠血脂紊乱、抑制去卵巢大鼠椎骨骨髓脂肪细胞的增加有关。     

运动与复方丹参合剂联合应用对去卵巢大鼠骨体积和骨量的影响

目的:观察运动和复方丹参合剂(CDM)联合应用对去卵巢大鼠骨体积和骨量的影响。方法:健康4月龄雌性SD大鼠48只随机分成6组:正常对照组,假去卵巢组,去卵巢组,去卵巢+复方丹参合剂组,去卵巢+运动组,去卵巢+复方丹参合剂+运动组。去卵巢+复方丹参合剂组和去卵巢+复方丹参合剂+运动组大鼠于去卵巢手术后第2天开始给予复方丹参合剂溶液(10 ml.kg-1.d-1)灌胃,持续11周。去卵巢+运动组和去卵巢+复方丹参合剂+运动组大鼠于去卵巢术后第7天开始给予中等强度的运动训练,每周5天,每天以16 m/min速度跑45 min,跑道倾角0,持续10周。第11周末,麻醉状态下动脉放血处死各组大鼠,观察左股骨骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重变化。结果:去卵巢组大鼠骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重等指标均低于假去卵巢组(P<0.01);去卵巢+复方丹参合剂组和去卵巢+运动组大鼠骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重等指标虽较去卵巢组显著增加(P<0.01),但仍显著低于假去卵巢组(P<0.01);去卵巢+复方丹参合剂+运动组大鼠骨直径、骨体积、骨湿重、骨干重、骨灰重等指标均显著高于去卵巢+复方丹参合剂组和去卵巢+运动组(P<0.01)。结论:运动可加强复方丹参合剂改善去卵巢大鼠骨体积和骨量的作用。     

Smad5基因敲除小鼠听生理和耳蜗形态实验观察

目的观察Smad5基因敲除小鼠(Smad5+/-)听生理和耳蜗形态改变,探讨Smad5基因是否为一种新的听功能相关基因。方法双盲对照法对Smad5(+/-)和Smad5(+/+)小鼠进行听性脑干诱发电位(ABRs)的听阈检测和耳蜗毛细胞形态观察及毛细胞计数。结果ABR听阈Smad5(+/-)小鼠24周时为90.63±17.65dB(SPL),Smad5(+/+)小鼠为63±19.94dB(SPL),二者差异显著(P<0.01)。耳蜗基底膜铺片显示Smad5(+/-)小鼠内、外毛细胞缺失,其中在底回处尤其突出,Smad5(+/+)小鼠内、外毛细胞少量缺失。Smad5(+/-)与Smad5(+/+)小鼠外毛细胞计数差异有显著性意义(P<0.01),而内毛细胞计数差异无显著意义(P>0.05)。结论Smad5基因敲除导致小鼠中、重度听力下降,耳蜗基底膜毛细胞缺失,以外毛细胞为主。Smad5基因敲除导致毛细胞缺失是Smad5(+/-)小鼠听力损失的原因之一。推测Smad5基因可能是听功能相关基因。     

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织内Nrf2 / HO-1 / NQO1 信号通路的影响

【摘要】 目的 探讨皮肤再生医疗技术 (MEBT/ MEBO) 对大鼠慢性难愈合创面组织内核转录因子红系 2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/ 醌氧化还原酶1(NQO1)信号通路的影响。 方法 选取90只SPF级 Wistar雄性大鼠适应性饲养1周后,采用随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO 组和贝复新组,每组18只。 其中空白组大鼠只做备皮处理, 对照组大鼠建立急性创面模型, 模型组、MEBO组和贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型。模型建立后,空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面予以生理盐水纱布换药处理, MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)药纱换药处理,贝复新组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶药纱换药处理, 对比观察各组大鼠创面愈合率、组织病理学变化情况以及皮肤/ 创面组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白与 HO-1、NQO1 mRNA 表达水平。结果 干预第 3 天, 各组大鼠创面愈合率尤以对照组最高、贝复新组次之 (P均＜0.05); 干预第 7、14 天, 各组大鼠创面愈合率尤以 MEBO 组最高、贝复新组次之 (P均＜0.05)。 HE 染色结果显示, 干预第 3、7、14 天,对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内坏死细胞及炎性细胞逐渐减少, 成纤维细胞与毛细血管逐渐增多,而模型组大鼠创面组织内坏死细胞和炎性细胞减少不明显; Masson 染色结果显示, 干预第 3、7、14 天, 对照组?MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内胶原纤维由细少且紊乱逐渐趋于粗大且平整, 而模型组大鼠创面组织内胶原纤维虽逐渐增粗、增多, 但排列仍较紊乱。 干预第 7 天, 对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 MDA 表达水平均明显低于模型组 (P均＜0.05); 干预第 3、7 天, 对照组、MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 SOD 表达水平均明显高于模型组 (P均＜0.05)。 干预第 3、7 天, MEBO 组和贝复新组大鼠创面组织内 Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白以及 HO-1、NQO1 mRNA 表达水平均明显高于空白组、对照组和模型组 (P均＜0.05), 且干预第 7天, MEBO 组大鼠创面组织内 Nrf2、HO-1 蛋白以及 HO-1 mRNA 表达水平均明显低于贝复新组 (P均＜0.05)。结论 MEBT/ MEBO 可能能够通过激活 Nrf2 / HO-1 / NQO1 信号通路减轻大鼠慢性难愈合创面氧化应激损伤, 促进创面再生修复。     

有氧运动和膳食脂肪对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中SR-B1基因及蛋白表达的影响

为研究有氧运动和低脂膳食抑制动脉粥样硬化斑块形成的可能机制，本研究探讨了１０周有氧运动和低脂膳食对ＡｐｏＥ基因缺陷小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块面积及肝脏ＳＲ－Ｂ１ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响。结果表明有氧运动和／或低脂膳食增加ＡｐｏＥ基因缺陷小鼠肝脏ＳＲ－ＢＩ基因及蛋白的表达水平。肝脏ＳＲ－Ｂ１ｍＲＮＡ水平与动脉粥样硬化斑块间存在负相关关系的趋势（相关系数ｒ值为－０．８１４，显著性检验Ｐ值为０．０６２），而且ＳＲ－Ｂ１蛋白水平与动脉粥样硬化斑块间也存在负相关关系（相关系数ｒ值为－０．８７１，显著性检验的Ｐ值为０．０１４）。结果提示在动脉粥样硬化斑块形成过程中，有氧运动和低脂膳食引起的ＳＲ－Ｂ１基因及蛋白表达水平的增加可能是二者具有抗动脉粥样硬化斑块发生作用的潜在机制。     

阿托伐他汀对大鼠血清VEGF、Ang-1以及Ang-2影响

目的通过研究阿托伐他汀对健康大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-1(Ang-1)以及血管生成素-2(Ang-2)水平影响的时间、剂量依赖性,探讨阿托伐他汀作为血管病预防用药在非病理情况下对血管新生的影响。方法将30只健康SD大鼠随机分成对照组、低剂量组与高剂量组,每组各10只,分别连续灌胃生理盐水、低剂量和高剂量的阿托伐他汀28 d。于第1天给药前、第7天给药后24 h、第28天给药后24 h采静脉血,分离血清,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清VEGF、Ang-1以及Ang-2。结果第7天,高剂量组血清VEGF、Ang-2的变化明显升高[(347.20±28.00)pg/ml,(1 915.00±543.30)ng/L,P<0.05];低剂量组血清VEGF、Ang-1的变化明显升高[(653.60±57.10)pg/ml,(1 718.00±283.00)pg/ml,P<0.05],Ang-2的变化明显降低[(-3 016.00±483.00)ng/L,P<0.05];对照组无明显变化。第28天各组血清VEGF、Ang-1、Ang-2水平无明显变化。结论健康大鼠短期应用阿托伐他汀明显改变血清血管特异性生长因子水平,且应用剂量不同变化效果不同。     

细胞外信号调节激酶信号通路在血小板源生长因子促进糖尿病大鼠创面愈合中的作用

目的观察重组人血小板源生长因子(rhPDGF)促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的信号通路：方法26只糖尿病大鼠背部各制备4个全层皮肤缺损创面，创面随机分成A和B两组，A组对照组，B组为rhPDGF(7．0μg／Cm2)治疗组。观察伤后3，7，14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎症细胞浸润情况，并采用免疫荧光技术观察创周和创基修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2(extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2)的表达，用免疫组织化学方法检测原癌基因e—fos、增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen，PCNA)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase，FAK)的变化情况。结果组织学检查显示，rhPDGF治疗的创面大量的炎症细胞浸润，毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组，胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著。免疫学研究显示，伤后3d，rhPDGF治疗组ERK1／2和c—fos的表达明显增强，7d时，ERK1／2和c—fos进一步增强，14d后开始减弱。rhPDGF治疗组各时相点修复细胞PCNA和FAK的表达明显强于对照组：结论ERK1／2信号通路在rhPDGF促糖尿病大鼠创面愈合中起一定作用，并在细胞增殖与迁移中充当重要角色。     

HnRNPA2/B1与肺癌的早期诊断

目的　研究核内不均一核糖核蛋白A2 /B1(HnRNPA2 /B1)与肺癌的相关性及其用于肺癌早期诊断的可行性。方法　利用RT -PCR方法分别扩增癌组织、癌旁组织、正常组织、良性病变组织、纤支镜和经皮穿刺肺活检标本中HnRNPA2 /B1外显子 1～ 2 ,分析比较其表达水平的差异及变化趋势。结果　①HnRNPA2 /B1在正常肺组织、癌旁组织、肺癌组织中表达水平依次增高 ,其阳性率分别为 6 .98%、37.2 %、76 .7%,三组比较有显著性差异 (Ρ <0 .0 5 ) ;HnRNPA2 /B1表达水平在不同的病理类型中的表达阳性率虽有不同 (鳞癌 88.2 %,小细胞肺癌 5 7.1%) ,而且随病理分化程度的降低而增高 ,但是均无统计学差异 (Ρ >0 .0 5 )。②纤支镜和经皮穿刺肺活检标本中HnRNPA2 /B1外显子 1～ 2mRNA阳性率为 6 0 %( 6 /10 ) ,与手术标本的癌组织阳性率比较稍低 ,但无统计学差异(Ρ >0 .0 5 )。结论　HnRNPA2 /B1是肺癌发生、发展过程中的早期事件 ,有可能用于肺癌的早期诊断。     

可溶性CD30和Th1/Ih2检测在慢性移植肾功能不全患者免疫状态评估中的应用

目的 探讨将血清可溶性CD30(sCD30)和外周血CD3 CD8-T淋巴细胞Th1/Th2检测用于评估慢性移植肾功能不全(CRAD)患者免疫状态的价值.方法 通过分析临床资料,结合移植肾穿刺活检,选取移植术后远期(＞6个月)免疫损伤为主的慢性移植肾功能不全患者(A组)、非免疫损伤为主的慢性移植肾功能不全患者(B组)和移植肾功能正常患者(C组)各15例,采用流式细胞术检测每例患者外周血CD3 CD8-T淋巴细胞IFN-γ和IL-4表达率,以IFN-γ和IL-4表达率之比作为Th1/Th2比例,同时留取标本以ELISA法行血清sCD30水平测定.结果 A、B、C组患者外周血CD3 CD8-细胞IFN-γ表达率(11.2%±6.2%、10.9%±6.4%、12.3%±6.9%)无统计学差异(P＞0.05).A组患者外周血CD3 CD8-T细胞IL-4表达率(4.0%±2.8%)明显低于B、C组(7.9%±5.5%、10.2%±7.5%,P＜0.01),且其Th1/Th2比例(3.1±1.1)明显高于B、C组(1.5±0.5、1.4±0.5,P＜0.01).B、C组患者外周血CD3 CD8-T细胞IL-4表达率和Th1/Th2比例无统计学差异(P＞0.05).A组患者血清sCD30水平(20.2±12.4ng/ml)明显高于B、C组(7.8±3.1ng/ml、7.6±3.0ng/ml,P＜0.01),而B、C组患者血清sCD30水平无统计学差异(P＞0.05).受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,当Th1/Th2比例取1.95时,鉴别以免疫损伤为主的CRAD的敏感度为80%,特异度为90%;血清sCD30水平取10.0ng/ml时,鉴别以免疫损伤为主的CRAD的敏感度为93.3%,特异度为86.7%.结论 以免疫损伤为主的CRAD患者大都存在Th1/Th2平衡失调(向Th1方向偏移),且血清sCD30水平相对较高.根据外周血CD3 CD8-T细胞Th1/Th2比例和血清sCD30水平鉴别以免疫损伤为主的CRAD具有较高的敏感性和特异性.     

Population genetic data on D1S80, D17S5, ApoB, COL2A1 and Ig-JH in Northeastern Thais

Allele frequency distributions at five VNTR loci namely; D1S80, D17S5, ApoB, COL2A1 and Ig-JH were examined in Northeastern Thais. The number of alleles at each locus were 19, 13, 14, 6 and 8 with the heterozygous frequencies of 0.814, 0.818, 0.676, 0.579 and 0.288, respectively. No significant deviations were found by statistical tests for Hardy-Weinberg equilibrium. The combined power of discrimination for all five loci was 0.99998.     

JNK/AP-1信号通路在As_2O_3诱导乳腺癌细胞凋亡中的作用

目的探讨c-Jun N端激酶（JNK）信号通路在As2O3诱导乳腺癌细胞凋亡中的作用。方法体外培养MCF7细胞,以As2O3为刺激源,溴化丙锭（PI）染色结合流式细胞术方法检测细胞周期及细胞凋亡;双荧光素酶报告基因法检测MCF7细胞中AP-1的诱导活化;Western印迹法检测JNK、c-Jun的诱导活化及Fra-1的蛋白表达。结果 As2O3可显著诱导MCF7细胞凋亡并导致细胞周期行进阻滞;As2O3可诱导JNK持续性高强度表达,转录因子AP-1的转录激活活性上调;As2O3可诱导c-Jun活化并诱导Fra-1表达;转染c-Jun显性负性突变体TAM67或Fra-1shRNA可有效降低As2O3诱导的乳腺癌细胞凋亡。结论 JNK/AP-1途径是介导As2O3诱导乳腺癌细胞凋亡反应的重要信号通路。     

大学生篮球运动员集训期间部分淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子mRNA表达变化分析

目的:探讨大负荷体能训练对大学生篮球运动员细胞免疫功能的影响。方法:14名男子大学生篮球运动员进行为期16周的集训,在训练期间分次对运动员外周血淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+/CD8+淋巴细胞比值、NK细胞比例)和Th1/Th2细胞因子 mRNA表达进行检测。结果:在两次分别持续了6周的训练期后,运动员外周血CD3+淋巴细胞数于增加后出现显著下降,从第7周的峰值(59.74±7.18)下降至第16周的最低值(52.02±7.92)(P<0.001);CD8+细胞数第16周(31.15±6.25)与第3周(37.98±7.05)相比显著下降(P<0.05);NK细胞数从第7周的最高值(19.62±5.21)下降至第14周的最低值(14.41±7.93)(P<0.05);IL-4 mRNA表达训练后与基础值(6.56±0.71)相比显著增加,从第7周的7.04±0.35和第14周的7.30±0.25,直至第16周达到最大值7.36±0.45(P<0.05),其他指标的变化不具有统计学意义。结果提示,大负荷训练使运动员细胞免疫功能削弱,Th1/Th2平衡向Th2方向漂移。