乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时炎性反应的影响

目的 评价乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤时炎性反应的影响.方法 健康SD大鼠40只,体重250～280 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将大鼠随机分为假手术组(S组)、心肌缺血再灌注损伤组(IR组)、脂肪乳组(Ⅰ组)和乳化异氟醚组(EI组),每组10只.采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注180 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.S组、IR组、Ⅰ组和EI组于尾静脉分别输注0.9％生理盐水、0.9％生理盐水、30％脂肪乳和乳化异氟醚2 ml/kg(液态异氟醚体积比为8％),给药时间30 min,停止给药后30 min制备模型.于再灌注180 min时抽取心脏血后处死大鼠取心脏,采用TTC染色法测定心肌梗死面积,放射免疫法测定血浆肿瘤细胞坏死因子a(TNF-a)浓度,免疫组化法检测缺血心肌细胞核因子-κB p65(NF-κB p65)和细胞黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 与S组比较,其余3组心肌梗死面积增加,血浆TNF-α浓度升高,心肌NF-kB p65和ICAM-1表达上调(P＜0.05);与IR组和I组比较,EI组心肌梗死面积减少,血浆TNF-a浓度降低,心肌NF-κB p65和ICAM-1表达下调(P＜0.05).结论 乳化异氟醚预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制心肌细胞NF-kB和ICAM-1表达,减轻炎性反应有关.     

乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响

目的 探讨乳化异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注时NF-κB活性的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,体重230～280 g,随机分为4组(n=12):假手术组(S组)仅穿线不结扎;缺血再灌注组(IR组)结扎左冠状动脉前降支30 min,恢复灌注120 min制备心肌缺血再灌注损伤模型;脂肪乳剂组(L组)经股静脉输注30%脂肪乳剂4 ml·kg-1·h-1 30 min后制备模型;乳化异氟醚组(EI组)经股静脉输注乳化异氟醚4 ml·kg-1·h-130 min,洗脱15 min后制备模型.于再灌注120 min时采集股动脉血样,采用ELISA法测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、IL-6浓度及磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,随后处死大鼠取心脏,采用Western blot法测定心肌细胞NF-κB活性,电镜下观察心肌细胞的超微结构.结果 与S组比较,IR组、EI组和L组心肌细胞NF-κB活性升高,血清IL-6、cTnI浓度及CK-MB活性升高(P＜0.05或0.01);与IR组比较,ET组心肌细胞NF-κB活性降低,血清IL-6、cTnI浓度及CK-MB活性降低(P＜0.05);电镜结果显示:EI组心肌细胞损伤程度较IR组和L组减轻.结论 乳化异氟醚预处理可通过降低NF-κB活性抑制炎性反应,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

乳化异氟醚预处理对兔缺血再灌注心肌血流动力学的影响

近年来研究表明吸入麻醉药异氟醚可模拟缺血预处理发挥心肌保护作用，减轻再灌注期心肌功能抑制。以脂肪乳为载体静脉注射的乳化异氟醚可产生麻醉作用，但是否也具有心肌保护作用，尚无报道。为了进一步研究乳化异氟醚预处理对心肌缺血的保护效应，本实验在兔心肌缺血再灌注模型上测定不同时点血流动力学的有关指标，旨在探讨乳化异氟醚预处理对兔缺血再灌注心肌的血流动力学影响。     

乳化异氟醚对大鼠肺缺血-再灌注内质网应激的影响

目的探索乳化异氟醚预处理对大鼠肺缺血-再灌注损伤诱导内质网应激的影响。方法雄性SD大鼠32只随机分成四组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)、乳化异氟醚预处理(EI组)、脂肪乳组(IL组)。S组腹腔注射生理盐水10.5ml/kg,24h后仅开胸游离左肺门,不进行阻断左肺门;IR组、EI组和IL组分别腹腔注射生理盐水、8%乳化异氟醚10.5 ml/kg、30%脂肪乳10.5ml/kg,24h后通过阻断左肺门1h后再灌注2h建立大鼠原位肺缺血-再灌注损伤模型。于再灌注2h即刻经左心室采集血样检测PaO2、PaCO2值;取左肺组织测湿重/干重比(W/D),通过HE染色评估肺组织病理损伤程度;通过RT-PCR和Western blot检测肺组织中GRP78和CHOP的表达水平。结果与S组比较,IR组、EI组和IL组PaCO2、肺组织GRP78、CHOP mRNA和CHOP蛋白表达明显升高,PaO2明显降低(P0.05),GRP78蛋白表达水平差异无统计学意义;与IR组比较,EI组、IL组PaCO2、肺组织GRP78mRNA、CHOP mRNA和CHOP蛋白表达明显降低、PaO2明显升高(P0.05),GRP78蛋白表达水平差异无统计学意义。与IL组比较,EI组PaCO2、肺组织W/D、GRP78、CHOP mRNA和CHOP蛋白表达明显降低、PaO2明显升高(P0.05),GRP78蛋白表达水平差异无统计学意义。病理显示EI组和IL组肺损伤轻于IR组,EI组肺损伤轻于IL组。结论乳化异氟醚和脂肪乳预处理均可减轻大鼠术后肺缺血-再灌注损伤引起的过度内质网应激,并且乳化异氟醚的保护效果更显著。     

乳化异氟烷预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价乳化异氟烷预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性新西兰白兔32只,体重2.5～3.0 kg,随机分为4组(n=8):缺血再灌注组(IR组)、异氟烷预处理组(I组)、乳化异氟烷预处理组(EI组)和脂肪乳组(INT组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注180 min的方法建立兔心肌缺血再灌注模型.各组稳定30 min后,I组吸入3%异氟烷,维持呼气末浓度2.20%30 min,洗脱15 min;EI组先以1 ml/s的速率静脉注射8%乳化异氟烷8～10 ml,然后静脉输注6～8 ml·kg-1·h-1,维持呼气末浓度1.28%30 min,洗脱15 min;INT组先以1 ml/s的速率静脉注射30%脂肪乳9 ml,然后静脉输注7 ml·kg-1·h-1持续30 min.于稳定30 min(T0)、缺血前(T1)、缺血即刻(T2)、缺血30 min(T3)、再灌注60 min(T4)、120 min(T5)和180 min(T6)时,记录HR、SP和MAP,计算HR和SP的乘积(RPP).于T6时抽取动脉血样3 ml,测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性和IL-6、IL-10的浓度,并测定心肌梗死范围.结果 与T0时比较,T2-6时各组HR、MAP和RPP呈进行性下降(P<0.05);四组间HR、MAP和RPP比较差异无统计学意义(P>0.05).与IR组比较,I组和EI组心肌梗死范围减小,血清CK、LDH的活性和IL-6浓度降低,L-10浓度升高(P0.05).结论 乳化异氟烷预处理可减轻兔心肌缺血再灌注损伤,机制可能与其抑制炎性反应有关.     

异氟醚预处理兔缺血再灌注心肌蛋白质组双向凝胶电泳分析

目的研究异氟醚预处理对缺血再灌注心肌保护的相关蛋白的变化。方法将8只新西兰大白兔随机分为心肌缺血再灌注对照组(C组)和异氟醚预处理组(I组),每组4只。两组均接受左冠状动脉前降支阻断40 m in,开放再灌注120 m in。I组在缺血前24 h前吸入1MAC异氟醚2 h。分别取各组缺血区心肌进行二维凝胶电泳,利用Im ageM aster 2D软件分析实验结果。结果与C组对比,I组有13个蛋白表达发生了显著变化,其中表达明显增强的有10个蛋白,表达明显降低的有3个蛋白。结论差异表达的蛋白可能在异氟醚对心肌缺血再灌注损伤的保护中发挥作用。     

七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的 评价七氟醚后处理对大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠45只,体重250～ 280 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=15):假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(I/R组)和七氟醚后处理组(Spo组).I/R组和Spo组采用结扎左冠状动脉前降支30 min时进行再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型,S组仅在左冠状动脉前降支下穿线.Spo组进行七氟醚后处理,于再灌注前1 min时吸八七氟醚,呼气末浓度2.5％,持续5min.于再灌注120 min时取左室心肌组织,测定缺血危险区和梗死区体积,计算缺血危险区和梗死区体积百分比.取左室缺血危险区心肌组织,测定心肌细胞凋亡指数,测定凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的蛋白及其mRNA的表达,计算Bcl-2/Bax比值.结果 与S组比较,I/R组心肌梗死区体积百分比和心肌细胞凋亡指数升高,Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.05);与I/R组比较,Spo组心肌梗死区体积百分比和心肌细胞凋亡指数降低,Bax蛋白及mRNA表达下调,Bcl-2蛋白及mRNA表达上调,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).结论 七氟醚后处理通过上调Bcl-2表达,下调BBax表达,改善Bcl-2/Bax平衡,抑制心肌细胞凋亡,从而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 观察乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注(IR)损伤的影响,并探讨可能的分子机制。方法 选择SPF级雄性SD大鼠45只,2月龄,体重240～260 g。采用随机数字表法分成五组：假手术组(S组,n=5)、心肌IR损伤组(IR组,n=10)、糖尿病+心肌IR损伤组(DM组,n=10)、糖尿病+心肌IR损伤+乳化异氟醚后处理组(EI组,n=10)和糖尿病+心肌IR损伤+钙/钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)抑制剂(KN93)组(KN93组,n=10)。S组仅开胸穿线但不结扎左冠状动脉前降支(LAD);IR组穿线稳定后30 min阻断LAD,缺血45 min,再灌注2 h建立IR损伤模型;DM组接受腹腔注射2%链脲佐菌素溶液建立糖尿病模型,4周后建立心肌IR损伤模型;EI组建立糖尿病心肌IR损伤模型时,于再灌注前3 min微量输液泵给药8%乳化异氟醚2 mg/kg,持续8 min; KN93组建立糖尿病心肌IR损伤模型时,于缺血前30 min左心室心内局部注射KN93 5μg并平衡30 min。于再灌注2 h后,采用TTC染色法测定心肌梗死面积百分比,ELISA法测定血清CK-MB浓...     

乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时血小板活化因子及其受体表达的影响

目的 探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时血小板活化因子( PAF)及其受体表达的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠32只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、乳化异氟醚组(EI组)和脂肪乳组(LE组).采用线栓阻塞大脑中动脉2h行再灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型.于缺血前24h,S组和I/R组腹腔注射生理盐水10.5 ml/kg,EI组和LE组分别给予8％乳化异氟醚和30％脂肪乳10.5 ml/kg.再灌注12 h时进行神经功能缺陷评分,随后每组处死4只大鼠,采用TTC染色法测定脑梗死体积,每组取其余4只大鼠,采集静脉血样,采用ELISA法测定血浆PAF浓度,随后处死大鼠,分离海马和皮层,采用Western blot法测定PAF受体的表达.结果 与S组比较,其余3组神经功能缺陷评分评分、脑梗死体积百分比、血浆PAF浓度、海马和皮层PAF受体表达升高(P＜0.01);与I/R组比较,EI组上述指标降低(P＜0.05),LE组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乳化异氟醚预处理可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,其机制与抑制PAF及其受体表达有关.     

阿片受体在异氟醚延迟预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨阿片受体在异氟醚延迟预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性新西兰大白兔40只,体重2.0～2.5 kg,采用结扎左冠状动脉前降支40 min,再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型,随机分为4组(n=10):假手术组(S组)吸入纯氧2 h,24 h后仅动脉下穿线不结扎;心肌缺血再灌注组(IR组)吸入纯氧2 h,24 h后行心肌缺血再灌注;异氟醚延迟预处理组(I组)吸人2%异氟醚2 h,24 h后行心肌缺血再灌注;阿片受体阻断剂+异氟醚延迟预处理组(N组)静脉注射纳洛酮6 mg/kg后10 min,吸入2%异氟醚2 h,24 h后行心肌缺血再灌注.于再灌注120 min时取心脏,计算心肌缺血面积和梗死面积,测定磷酸化p38MAPK蛋白表达水平,观察心肌细胞超微结构.结果 S组心肌细胞完整,排列整齐,线粒体形态正常,糖原丰富;IR组和N组心肌细胞水肿,心肌纤维排列紊乱,线粒体、内质网膜水肿,空泡化;I组心肌细胞水肿程度减轻,心肌纤维排列较完整,线粒体轻度水肿.与IR组比较,I组心肌梗死面积减小,磷酸化p38MAPK蛋白表达下调(P<0.05),N组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 阿片受体参与异氟醚延迟预处理减轻兔心肌缺血再灌注损伤.