PKC信号通路在实验性肝癌发生过程中的变化特征及与卵圆细胞增殖转化的关系

[目的]探讨实验性肝癌发生、发展过程中PKC-α和C-Jun的表达与卵圆细胞生长之间的关系.[方法]用诱癌剂3-甲基-4-甲基氨偶氮苯(DAB)饲喂SD大鼠构建肝癌模型.分别用斑点杂交检测PKC-α mRNA及用Nortben Blot检测C-Jun mRNA在肝癌发生过程中几个阶段(第4周、第8周、第14周、第17周、第24周)的表达,并用薄层色谱仪线性扫描进行半定量.[结果]在第4周,诱癌组肝脏汇管区出现少量卵圆细胞,同时诱癌组肝脏可检测到PKC-α和C-Jun mRNA的表达.更有意义的是,诱癌组PKC-α和C-Jun mRNA的表达强度及卵圆细胞的数量随着实验的进程从第8周开始急剧增加,持续经过第14周并在第17周达到高峰,然后开始下降.同时在第17周出现不典型增生的卵圆细胞及多灶性肝细胞癌和胆管上皮细胞癌.在第24周,诱癌组肝脏出现大片肝细胞癌和胆管上皮细胞癌,但几乎看不到正常和不典型增生的卵圆细胞,同时PKC-α和C-Jun mRNA的表达强度急剧减弱,因此,在整个诱癌过程中,PKC-α和C-Jun mRNA表达的变化曲线与卵圆细胞的增殖及恶性转化基本一致.[结论]在实验性肝癌发生过程中卵圆细胞可能是肝癌的始动细胞,PKC-α和C-Jun在卵圆细胞的增殖和恶性转化中发挥重要的作用,并由此推测PKC-α和C-Jun的过表达是肝癌形成的前期事件.     

实验性大鼠肝癌及肝组织中非特异性酯酶活性观察

用含0.01%的二乙基亚硝胺(DEN)水溶液作诱癌剂喂饲雄性SD 大鼠.在诱癌期间,分期取鼠肝进行病理和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)及非特异性酯酶(NSE)组化检查,并用等电点聚焦电泳(IEF)观察肝匀浆中NSE 同工酶谱的变化。实验表明,从第2周起。肝组织中γ-GT活性逐渐增强,分布由小胆管转向肝细胞胞浆内。NSE 活性自第4周后开始进行性减弱,在肝癌细胞内活性消失.NSE 同工酶谱的变化早于酶组织化学示肝内NSE 活性变化。自第4周起,部份鼠肝匀浆在pH6.93～7.72的同工酶活性减弱或消失,带瘤匀浆中这种变化尤为明显.     

实验性大鼠肝癌癌前期的超声-病理对比

3ˊ-甲基-4-二甲基氨基偶氮苯(3ˊ-Me-DAB)诱发Wistar雄鼠肝癌的成癌前期,鼠肝出现中毒性肝炎,早期肝硬化和中晚期肝硬化等3种不同阶段的病理改变,与病理相对比的超声检测显示其声象有相应的动态演变规律,据此将鼠肝成癌前期的声象变化分为4级,其特点与鼠肝的组织密度。病理类型及纤维间质含量多少有关,并认为加强对回声分级在Ⅱ-Ⅱ级的肝脏进行超声监测,可能有利于尽早发现肝癌的发生。     

刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中作用的探讨

目的探讨大鼠实验性肝癌发病中刺五加对肌体免疫功能和抗氧化酶活性的影响。方法４６只ＳＤ雄性大鼠被随机分成对照组（喂普通饲料）、３－甲基４－双甲氨基偶氮苯（３－Ｍｅ－ＤＡＢ）组（喂含０．０６％３Ｍｅ－ＤＡＢ饲料 １０周）和刺五加组（饲喂同 ３－Ｍｅ－ＤＡＢ外、另加入刺五加 ４．５ｇ／ｋｇ饲料,用常规方法检测全血谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量,用微量化学发光造检测吞噬细胞活性（ＰＭＮ－ＣＬ）。结果１．ＰＭＮ－ＣＬ检测峰值、积分值和吞噬细胞指数,３－ＭｅＤＡＢ组较正常组和刺五加组均有显著升高（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）２．全血ＧＳＨ－ＰＸ活性、ＳＯＤ活性,刺五加组较３－ＭｅＤＡＢ组均有显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＭＤＡ含量刺五加组和３－ＭｅＤＡＢ组均较正常组升高（均Ｐ＜０．０５）。结论刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中有提高抗氧化酶活性和对抗致癌剂引起的机体中性粒细胞吞噬功能代偿性增高的作用。     

大鼠肝癌组织中卵圆细胞C-kit和PCNA的表达

目的：研究实验性大鼠肝癌组织中卵圆细胞的功能。以及C—kit和PCNA的表达，探索卵圆细胞与肝癌发生的关系．方法：SD大鼠120只分为正常组、诱癌组和干预组．研究DAB诱癌过程中卵圆细胞分布的病理特点，C—kit及PCNA免疫组化．结果：在诱癌2wk，c—kit和PCNA阳性细胞首先出现在汇管区，以后时间逐渐增加，C—kit阳性细胞在22wk逐渐减少．8wk时，PCNA阳性细胞较前减少．结论：汇管区的终末胆管树为肝干细胞的重要发源地，它在肝癌的发生过程中起着重要作用．     

TNF-α和IL-6在卵圆细胞介导的肝再生中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）在卵圆细胞介导的肝再生中的作用。方法采用2-乙酰氨基芴（2-acetylaminofluroene，2-AAF）加2／3肝切除建立大鼠肝卵圆细胞介导的肝再生模型，以行2／3肝切除诱导的肝细胞介导的肝再生模型作为对照，采用RT-PCR方法检测TNF-α、IL-6在模型组及对照组肝组织中的表达。结果同正常组相比，术后模型组及对照组TNF-α mRNA表达明显上调，模型组持续至术后第3天（P〈0．05），对照组持续至术后第6天（P〈0．05）。对照组IL-6 mRNA术后8h显著升高（P〈0．05），而模型组IL-6mRNA术后无明显变化。结论TNF-α的高表达可能与肝卵圆细胞介导的肝再生过程密切相关。     

Hedgehog信号通路在肝癌发生中的作用

Hedgehog信号通路对于哺乳动物胚胎的正常发育起着极为重要的作用,在人体组织中的异常激活可导致肿瘤的发生。研究表明Hedgehog信号通路的异常激活是肝癌发生的重要机制,尤其与肝癌的早期发生、恶性程度及转移关系密切,这为肝癌的早期诊断诊断与有效治疗提供了新的思路。     

枯否细胞在实验性肝癌形成过程中的作用：大体形态,光 …

单纯用化学致癌剂二乙基亚硝胺及氯化钆填塞枯否细胞，同时对ＤＥＮＡ所诱发的大鼠肝癌形成过程中的大体形态，光镜及电镜下的病理学改变进行了对比研究。     

试验相关因素对SD大鼠血液学指标的影响

目的了解麻醉剂和应激反应对动物生理方面的影响,为动物福利、化合物的毒性检测方法规范化研究提供了可资借鉴的经验。方法选择SPF级SD大鼠为试验动物,按性别(A)、禁食时间(B)、麻醉方式(C)和采血方式(D)4个因素,根据不同因素交互影响分为24组,采集各组SD大鼠血液标本测定血液红细胞计数、血红蛋白水平、白细胞计数及其分类等指标。结果各因素对白细胞计数结果影响的主次顺序为DCAB,各因素水平白细胞计数结果是雄性大鼠雌性大鼠,静脉血动脉血,水合氯醛戊巴比妥钠不麻醉。各因素对白细胞分类结果影响的主次顺序为CD=A=B,各因素水平白细胞分类结果是水合氯醛戊巴比妥钠=不麻醉。各因素对红细胞计数与血红蛋白水平结果影响的主次顺序为CD=A=B,各因素水平红细胞计数与血红蛋白水平是戊巴比妥钠水合氯醛不麻醉,禁食时间各组间血液学指标无统计学差异。结论禁食对血液学指标无影响,血液学指标存在性别、动静脉差异;对白细胞计数及分类的影响水合氯醛麻醉大于戊巴比妥钠麻醉,而对红细胞计数及血红蛋白水平的影响是戊巴比妥钠麻醉大于水合氯醛麻醉,两种麻醉方式各有优缺点。     

卡托普利对糖尿病大鼠肾脏醛糖还原酶基因表达的影响及其意义

目的探讨卡托普利对糖尿病大鼠肾脏醛糖还原酶基因表达的影响及其意义。方法建立糖尿病大鼠模型,分为卡托普利干预组和对照组,15周后处死大鼠,从肾脏皮质抽提mRNA,逆转录分别用Cy5和Cy3标记,成为两组cDNA探针。cDNA探针与基因芯片杂交,扫描仪扫描,用软件进行分析。结果与对照组相比,干预组醛糖还原酶基因表达下调。结论卡托普利可能通过下调醛糖还原酶的表达产生肾脏保护作用。     

新生大鼠成纤维细胞原代培养

目的探讨新生sD大鼠成纤维细胞的培养方法。方法采用胰酶消化法和组织块贴壁法原代培养成纤堆细胞。采用HE染色及波形蛋白（Vimentin）免疫细胞化学染色对培养细胞进行鉴定。结果两种方法均能培养出成纤维细胞,其中酶消化法一次性可获得较多细胞,但细胞状态较差,贴壁慢,生长慢;组织块贴壁法短时间内可长出大量成纤维细胞,一周即可传代。HE染色后倒置相差显微镜下观察细胞形态典型,免疫细胞化学染色结果显示Vimentin呈阳性反应。结论组织块贴壁培养法是获取成纤维细胞简单,可行,快速的方法。     

大鼠糖尿病模型早期病理观察指标的筛选

目的 通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作大鼠糖尿病模型,筛选成模早期对糖尿病变化敏感的器官组织及生化指标.方法 60只雄性SD大鼠随机分成5组,分别腹腔一次性注射0、20、30、50和80mg/kg的STZ,注射STZ后第2天开始检测各组大鼠的空腹血糖、随机血糖及体质量,第9天实验结束时,取肾脏、胰腺、眼球、心脏、肝...     

Effects of Extracellular ATP on Survival of Sensory Neurons in the Dorsal Root Ganglia of Rats

After the peripheral nerve injury,degenerationor even necrocytosis will happen in some inflictedneurons and then the axons sprout from the survivalneurons and the nerve regenerate.Hence,the pro-tection of neurons plays a crucial role in the repair ofperipheral nerve injury.It has been proved that ex-tracellular ATP has protective effect on the neuronsof CNS. But whether it has the same effect on thesensory neurons of the dorsal root ganglia is still un-known.In this study,we employed the ce…     

免疫组织化学方法测定TGF-β1在鼠根尖周炎中的表达

目的了解TGF-β1与大鼠急性根尖周炎的关系.方法取16只SD大鼠建立鼠根尖周炎动物模型,制作根尖周组织切片,用免疫组织化学方法测定TGF-β1在根尖周炎中的表达.结果免疫组化研究显示TGF-β1阳性表达细胞分布于根尖周和牙槽骨缺损处,在急性期(1～3周)根尖炎症阶段有高表达,表达细胞多为巨噬细胞、淋巴细胞和成纤维细胞;而在急性期和慢性期(第4周)均未见成骨细胞TGF-β1表达.结论在早期(1～4周)根尖炎症阶段未见成骨细胞TGF-β1表达,推测此物质在该阶段主要起促炎症作用.     

Kupffer 细胞对实验性肝癌中细胞凋亡相关基因表达的影响

对单纯用二乙基亚硝胺 (DENA)及氯化钆 (GC)或酵母多糖 (ZM)分别阻断或激活 Kupffer细胞后 ,同时给以 DENA所引起的大鼠肝癌中的增殖细胞核抗原 (PCNA )、 bax、 p5 3蛋白的表达和肝癌细胞的凋亡运用免疫组织化学和 TU NEL 法进行了对比研究 ,以探讨 Kupffer细胞在大鼠实验性肝癌细胞凋亡中的作用。结果显示 :肝癌组织的增殖指数、凋亡指数在 C组、 A组、 B组分别呈增高或降低趋势 ;bax、 p5 3阳性率在 C组明显高于 A组 (P<0 .0 5 ) ,同时 ,bax、p5 3蛋白的表达与凋亡指数存在正相关。结果提示 ,Kupffer细胞可能促进实验性肝癌细胞凋亡。     

盐酸丁咯地尔对SD大鼠周围神经损害保护作用的初步实验研究

目的:探讨盐酸丁咯地尔对大鼠坐骨神经损害后恢复的影响。方法:以SD大鼠坐骨神经损伤建立周围神经损害动物模型,以坐骨神经传导速度和足趾间距为观察指标,考察盐酸丁咯地尔对坐骨神经损害后恢复的影响。结果:盐酸丁咯地尔高、低剂量组均能显著改善大鼠坐骨神经损害。结论:盐酸丁咯地尔对大鼠坐骨神经损害的恢复有积极的促进作用。     

激光共聚焦显微镜在骨计量学中的应用

激光共聚焦显微镜 (LSCM)是九十年代初出现的一种可用荧光标记进行微形态观察的高分辨显微镜 ,与传统方法比较 ,具有精确、清晰、动态和三维成像等突出优点。骨计量学是研究代谢性骨病的重要方法。本研究将激光共聚焦显微技术引入骨计量学中 ,达到了精确定位和定量分析骨微结构的目的 ,具有无须染色 ,对厚片可进行荧光染色观察的特点 ,其清晰度高 ,制片易 ,可与组织化学、免疫组织化学等方法结合 ,从多个角度、多个层次同时观察骨微结构与各种骨细胞的形态与功能。为代谢性骨病的研究和诊断提供了新的方法和途径。     

霉酚酸酯对大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的: 探讨霉酚酸酯(MMF)在肾间质纤维化模型大鼠中的肾脏保护作用及其可能的作用机制.方法: 采用单侧输尿管结扎(UUO)致大鼠肾间质纤维化.将大鼠随机分为3组:假手术组、模型组、霉酚酸酯治疗组.手术后第9天处死各组大鼠,分别经免疫组织化学方法观察各组大鼠肾组织的血小板源性生长因子-B(PDGF-B)的表达部位、表达水平及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.Masson染色评定各组肾小管间质损害程度.结果: 模型组PDGF-B,α-SMA,PCNA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组(P<0.05),而霉酚酸酯组均明显低于模型组(P<0.05).各项指标作相关分析,PDGF-B与肾小管间质损伤指数(r=0.870,P<0.01),α-SMA(r=0.956,P<0.01),PCNA(r=0.881,P<0.01)呈显著正相关.结论: PDGF-B在肾小管间质纤维化的病程进展中起重要促进作用,霉酚酸酯则可能通过下调PDGF-B的表达减轻肾小管间质纤维化.