巴戟天正丁醇提取物对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤后炎性细胞因子的影响

目的：观察巴戟天正丁醇提取物对乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤后炎性细胞因子的影响。方法：采用培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧／复氧损伤模型，实验分正常细胞培养组、缺氧／复氧损伤模型组、巴戟天正丁醇提物小、中、大剂量组。平衡法测定TNF-α、IL-1β、IL-6的含量变化。结果：巴戟天正丁醇提物可明显改善缺氧、复氧损伤；降低TNF-α、IL-1β、IL-6的含量。结论：巴戟天正丁醇提取物对缺氧／复氧损伤的心肌细胞有防护作用；其防护作用可能与降低TNF-α、IL-1β、IL-6的含量有关。     

丹参水提物对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

本文研究丹参水提物对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用。以乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺氧-复氧损伤模型,检测不同浓度丹参水提物预处理后细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转移酶(AST)的泄漏量及Akt的磷酸化水平。丹参水提物对缺氧-复氧损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,这可能与它激活PI3K/Akt信号通路有关。     

PGE_1对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的　研究PGE1对纯化培养心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法　采用纯化培养的心肌细胞建立缺氧 /复氧损伤模型 ,实验分 5组 :正常细胞培养组、缺氧 /复氧损伤模型组、缺氧 /复氧损伤 +PGE1(5、15、4 5 μg·L-1)组。分别用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力 ,硫代巴比妥酸显色法测定MDA含量 ,MTT染色法测定线粒体脱氢酶活性改变并测定LDH含量变化。结果　PGE1可明显提高SOD、LDH活性 ,降低MDA含量并可提高线粒体脱氢酶活性。结论　PGE1具有明显的抗缺氧复氧损伤、保护心肌作用     

巴戟天正丁醇提取物对缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响研究

目的:研究巴戟天正丁醇提取物(BEM)对缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:实验分6组,即正常、缺氧复氧模型(A/R)、丹参注射液(SM)及BEM高、中、低剂量组;通过电镜观察凋亡心肌细胞形态变化,原位缺口末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化染色法测心肌细胞B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤-2连接X蛋白(Bax)的表达。结果:细胞形态学显示BEM对缺氧复氧过程中的心肌细胞的形态具有显著的保护作用(P<0.01);TUNEL结果显示,BEM高、中、低剂量组与A/R组比较可显著降低心肌细胞的凋亡指数(P<0.01);SM及BEM高、中、低剂量组均可使A/R乳鼠心肌细胞Bcl-2阳性表达灰度值显著升高(P<0.01),细胞Bax阳性表达灰度值显著降低(P<0.01)。Bcl-2与Bax的表达呈负相关(r=-0.983)(P<0.01)。结论:BEM可抑制缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡的发生,其机制可能与促进Bcl-2蛋白的表达、抑制Bax蛋白的表达有关。     

葛根素对缺氧复氧心脏微血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨葛根素在心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cell,CMEC)缺氧复氧损伤中的作用。方法:将CMEC随机分为空白组、模型组、葛根素低、中、高剂量(25,50,100 mg·L^-1)共3组。四甲基偶氮唑(methylthiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,比色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,Western blot法检测Caspase-3和Bcl-2蛋白表达。结果:葛根素预处理后,缺氧复氧CMEC细胞活力增强,细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量降低,SOD活性增强,Caspase-3蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加。结论:葛根素可拮抗缺氧复氧所致的CMEC损伤,可能与其抗氧化及抗凋亡活性相关。     

缺氧-复氧对心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用

目的观察缺氧_复氧对大鼠心室肌细胞的损伤及川芎嗪的保护作用。方法在缺氧_复氧条件下 ,测量对照组和不同浓度川芎嗪组对杆形心肌细胞百分比、心肌细胞内K /Na 浓度比及Ca2 浓度的影响。结果缺氧_复氧对大鼠心室肌细胞有损伤作用 ,浓度为4μmol·L -1 的川芎嗪对缺氧_复氧损伤细胞有保护作用 ,它能抑制损伤细胞挛缩 ,提高损伤细胞生存率 ,抑制心肌细胞内K /Na 浓度比的降低、增加细胞内Ca2 浓度 ,且剂量越大 ,保护作用越好 ,即川芎嗪对缺氧_复氧损伤细胞的保护呈剂量依赖性。结论川芎嗪对缺氧_复氧损伤的大鼠心肌细胞具有保护作用 ,它能显著地对抗缺氧_复氧对心室肌细胞的损伤作用     

阿托伐他汀对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨阿托伐他汀保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的机制,为临床防治缺血再灌注损伤寻找新思路。方法分离SD乳鼠(出生1～3d)心肌细胞进行原代培养,建立H/R模型,取培养第3d的心肌细胞随机分成3组:正常对照组(CON组)、H/R组、H/R+ATV组。应用MTS法检测心肌细胞的存活率;化学发光免疫分析法检测心肌细胞特异性损伤指标肌钙蛋白I(cTnI)的含量;采用SYBR GREEN荧光定量PCR检测各组HIF-1α、VEGF mRNA表达水平。结果与CON组比较,H/R组心肌细胞存活率明显降低(P<0.05),血清肌钙蛋白I明显升高(P<0.05),HIF-1α和VEGF mRNA表达水平显著升高(P<0.05);用阿托伐他汀预处理后心肌细胞存活率明显升高(P<0.05),血清肌钙蛋白I明显降低(P<0.05),HIF-1α和VEGF mRNA表达水平进一步升高(P<0.05)。结论阿托伐他汀可能通过上调HIF-1α及VEGF的表达水平进而保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞。     

红景天苷衍生物N03对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的：研究红景天苷衍生物1-C-β-D-吡喃葡萄糖基-N-（2′-氯苯甲基）甲胺（1-C-β-D-glucopyranosyl-N-(2’-chlorophenyl) methyl methanamine,N03）对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用。方法：以1~2 d龄Wistar大鼠乳鼠心室肌进行心肌细胞培养并建立缺氧-复氧损伤模型,检测不同浓度（2,10,50 mg&#8226;L-1）N03预处理后细胞的形态变化,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶（CK）、天冬氨酸转移酶（AST）的泄漏量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,luminometer法检测细胞中三磷酸腺甘(ATP)水平,荧光探针负载法检测其是否能够拮抗缺氧-复氧损伤所引起的细胞内活性氧(ROS)升高和钙超载。结果：红景天苷衍生物N03能减轻心肌细胞缺氧-复氧损伤后LDH,CK和AST的漏出量,同时能够升高SOD活性,降低缺氧-复氧损伤所致的ATP水平下降程度和拮抗细胞内ROS升高和钙超载。结论：红景天苷衍生物N03对缺氧-复氧损伤的心肌细胞具有明显的保护作用,可能对心肌缺血的一些疾病具有治疗作用     

板蓝根对脂多糖刺激鼠释放炎性细胞因子的影响

目的探讨板蓝根抗内毒素活性部位F022对脂多糖(LPS)刺激鼠单核细胞释放炎性细胞因子的影响。方法取BALB/C小鼠腹腔内单核细胞,实验设计为6组。其中,实验组根据F022浓度分为1%、0.5%、0.25%、0.125%4组,分别加入板蓝根F022部位液后再加入LPS液;LPS阳性组仅加入LPS液;阴性组加入1%F022液。之后检测细胞培养上清液中3种炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和一氧化氮(NO)水平。结果LPS可刺激鼠单核细胞过度释放炎性细胞因子TNF-α、IL-6和NO;与阳性组比较,实验组炎性细胞因子水平降低,且呈剂量依赖性。结论板蓝根抗内毒素活性部位F022对LPS刺激鼠单核细胞过度释放炎性细胞因子具有抑制作用。     

二氢石蒜碱对大鼠乳鼠培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的观察二氢石蒜碱(dihydrolycorine,DL)对Wistar大鼠的乳鼠培养心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的保护作用。方法采用培养的Wistar乳鼠的心肌细胞,建立H/R损伤模型,检测指标包括:①心肌细胞存活率;②超氧化物歧化酶(SOD)活性;③丙二醛(MDA)含量;④乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果模型组缺氧后心肌细胞存活率降低,复氧后进一步下降,各个时间点细胞内SOD活性下降,MDA含量升高,乳酸脱氢酶(LDH)活性升高,与正常组比较差异具有显著性(P<0.01);在DL1、10、100μmol·L-1组,随着给药浓度的增加,细胞存活率升高,LDH活性变低,MDA含量逐渐趋于恢复正常,SOD活性逐渐回升,表明经DL干预之后,心肌细胞抗损伤能力加强,发生损伤的程度减轻。结论DL对培养的乳鼠心肌细胞H/R损伤具有保护作用,其作用在一定范围内呈剂量依赖关系,机制可能与其阻断α、β受体、抑制心肌细胞脂质过氧化反应有关。     

竹叶提取物对缺氧／复氧心肌细胞的保护作用

目的本研究旨在探讨竹叶提取物(BLE)对缺氧/复氧心肌细胞的保护作用及其分子机制。方法采用原代培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧/复氧损伤模型,实验分为正常细胞培养组、缺氧/复氧损伤模型组、缺氧/复氧损伤 BLE(10-1,10-2,10-3,10-4,10-5g.L-1)组、缺氧/复氧损伤 X iangdan(2.5×10-3g.L-1)组。检测培养基质乳酸脱氢酶(LDH)的活性,细胞线粒体脱氢酶活性,超氧化物歧化酶活性(SOD),NO的含量,心肌细胞Ca2 和丙二醛(MDA)浓度。结果BLE可显著提高缺氧/复氧心肌细胞SOD的活性及细胞线粒体脱氢酶活性,并能显著抑制LDH的活性、MDA的生成,提高NO的含量,降低Ca2 的含量。结论BLE对缺氧/复氧心肌细胞损伤具有一定的保护作用。     

葛根素对外周血内皮祖细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的：研究葛根素对外周血内皮祖细胞（EPCs）缺氧/复氧损伤的保护作用。方法：采用密度梯度离心法和贴壁培养法相结合,使用专用培养基EGM-2,成功分离纯化EPCs,通过形态学、细胞表面分子标志物检测、内皮祖细胞吞噬功能对其鉴定;采用Krebs液建立缺氧/复氧损伤模型,用葛根素干预后,采用MTT法测定细胞活力、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶（LDH）释放量、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性、硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）含量;Western blot法考察胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达。结果：与模型组相比,葛根素20.8 mg·L^-1及41.6 mg·L^-1组显著提高细胞活力（P<0.05,P<0.01）;葛根素20.8 mg·L^-1及41.6 mg·L^-1能显著降低NO、MDA含量和LDH释放量（P<0.01）;葛根素20.8 mg·L^-1,41.6 mg·L^-1,83.2 mg·L^-1均显著提高缺氧/复氧后细胞SOD活性（P<0.01）,并上调细胞HO-1、胞核Nrf2蛋白表达（P<0.01）,显著降低胞浆Nrf2蛋白表达（P<0.01）。结论：葛根素可显著拮抗缺氧/复氧对EPCs的损伤,可能与其抑制细胞过氧化损伤,增强细胞抗氧化能力有关。     

钙拮抗剂对缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因的作用及抗损伤的研究

目的观察钙离子拮抗剂维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平对大鼠缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因(Egr-1)及抗细胞损伤的作用。方法取生长d 5～6的大鼠心肌细胞分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、DMSO组、维拉帕米(2μmol.L-1)组、地尔硫卓(10μmol.L-1)组和硝苯地平(10μmol.L-1)组,除对照组外其他组制作心肌细胞H/R损伤模型。测定肌酸激酶、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶及丙二醛的变化,观察心肌细胞损伤情况;RT-PCR方法检测培养心肌细胞中Egr-1mRNA表达水平;Western blot方法检测培养心肌细胞中Egr-1蛋白的表达水平。结果与H/R组相比,维拉帕米组、地尔硫卓组和硝苯地平组Egr-1mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05),心肌细胞损伤程度明显减弱(P<0.01)。结论维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平均可抑制Egr-1的表达,减轻H/R心肌细胞的损伤,这可能是钙离子拮抗剂保护心肌细胞H/R损伤的共同机制之一。     

灵芝多糖肽对培养乳大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用

目的研究灵芝多糖肽(GLPP)对培养乳大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用。方法用出生1~3 d的SD乳大鼠进行心肌细胞原代培养,取培养3~4 d的心肌细胞分为正常对照组、H/R组和GLPP给药组(12.5,25,50和100 mg·L-1)。MTT法检测细胞存活率;电镜检测细胞形态改变和线粒体损伤;用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率;以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,用激光扫描共聚焦显微镜观察心肌细胞内钙离子荧光强度变化;以活性氧(ROS)敏感的荧光探针2,7-二氢二氯荧光素(DCFH-DA)标记细胞,激光共聚焦显微镜下观察ROS含量变化。结果与正常对照组比较,H/R组细胞存活率降低(P<0.05);GLPP 12.5,25,50和100 mg·L-1组细胞存活率与H/R组比较明显增加(P<0.01)。与正常对照组比较,H/R组可见线粒体损伤,GLPP给药组可以减轻线粒体损伤。流式细胞仪检测结果表明,与正常对照组比较,H/R组细胞凋亡率增加(P<0.01);GLPP组与H/R组比较细胞凋亡率明显减小(P<0.01)。与正常对照组比较,H/R组[Ca2+]i增加,细胞内ROS含量增高(P<0.01);与H/R组比较,GLPP给药组细胞[Ca2+]i减少,细胞内ROS含量降低(P<0.01)。结论GLPP对H/R损伤的乳大鼠心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能与减少细胞内自由基含量和减轻细胞内钙超负荷有关。     

硫酸镁对缺氧/复氧诱导海马神经元凋亡的作用

无论是创伤性或缺血性脑损伤后,脑组织以及神经细胞内Mg2 含量、血清Mg2 含量皆明显下降,而且Mg2 下降程度和脑外伤伤情明显相关.Mg2 对缺氧/复氧诱导的新生大鼠离体海马神经神经元凋亡的作用,目前报道甚少.本研究在缺氧/复氧诱导离体培养海马神经元凋亡的模型上,观察了Mg2 对损伤海马神经元的作用.     

升陷汤及单味药材水提物对缺氧/复氧致心肌损伤的保护作用

目的 通过观察升陷汤及单味药材水提物对离体培养的大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响,并对其作用机制进行初步探讨。方法 培养H9C2大鼠心肌细胞,共分成8组：空白对照组,缺氧/复氧组（模型组）,缺氧复氧损伤后药物干预组（升陷汤全方及5个单味药材水提物组）。分别对心肌细胞凋亡率、心肌细胞的活力、细胞内活性氧（ROS）活性、细胞内钙离子浓度（Ca²⁺）等指标进行检测。结果 升陷汤全方及黄芪、知母等药材干预能明显降低细胞凋亡率、细胞内ROS活性和Ca²⁺浓度（P<0.05）,其中,全方的作用最强。与缺氧/复氧组细胞内ROS活性和Ca²⁺浓度增加至空白对照组的2.49倍及1.71倍相比,全方能使细胞内ROS活性和Ca²⁺浓度增加率降至缺氧/复氧组的41.37%和15.20%。结论 升陷汤及单味药材对缺氧/复氧致心肌损伤具有保护作用,该作用的机制可能通过抑制细胞凋亡、降低细胞内ROS以及Ca²⁺的浓度所致。     

膜修饰脂质体对缺氧心肌细胞的保护作用

目的考察亲脂性化合物3{4[2羟基(1甲基乙胺基)丙氧基]苯基}丙酸十六醇酯(PAC)膜修饰脂质体对缺氧心肌细胞的保护作用。方法将普通脂质体(Plain L)、PAC膜修饰脂质体(PAC L)分别于常氧和缺氧条件下与乳鼠心肌细胞共同培养1、22、4 h,荧光法测定正常与缺氧心肌细胞对脂质体的摄取,以不加脂质体的细胞为对照,台盼兰染色法测定心肌细胞存活率。结果在常氧状态下1、2、24 h心肌细胞对PAC L的摄取较Plain L分别高约3.97、3.87、4.27倍,而在缺氧状态下心肌细胞对PAC-L的摄取较Plain L分别高约4.26、6.24、29.51倍。当细胞连续缺氧24 h时,对照组、Plain L组、PAC L组的心肌细胞存活率分别为7.8%、29.7%、95.4%。结论与Plain L相比,PAC L对缺氧状态的心肌细胞具有较强的亲和性,脂质体的加入能够明显降低缺氧对心肌细胞的损伤,PAC L对缺氧心肌细胞具有较强的保护作用,效果明显优于Plain L,且随着缺氧时间的延长这种优势越显著。     

吡那地尔预处理对缺氧/复氧成后年大鼠心肌细胞内钙离子浓度的影响

目的观察吡那地尔(Pinacidil)预处理对缺氧/复氧后成年大鼠心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,以探讨吡那地尔在缺氧/复氧中抑制钙超载作用的机制。方法通过Langen-dorff离体心脏灌注装置,用Ⅱ型胶原酶对心脏逆行灌注,进行成年大鼠心肌细胞的分离与培养,建立心肌细胞缺氧/复氧模型。实验分组及处理:(1)正常组(NOR组):细胞正常培养;(2)缺氧/复氧组(CON组):细胞在95%N2+5%CO2培养箱中缺氧45 min,复氧1 h;(3)吡那地尔组(Pina组):先加入吡那地尔(30μmol/L)预处理15 min,再缺氧45 min,复氧1h;(4)格列苯脲拮抗Pina组(Gi+Pina组):先用格列苯脲(50μmol/L)处理5 min后,余处理同Pina组。通过Fluo-3/AM荧光指示剂负载,用激光共聚焦显微镜检测心肌细胞Ca2+浓度变化。结果 NOR组心肌细胞内钙离子荧光强度值较低;细胞缺氧45 min,复氧1 h后其荧光强度值与NOR组相比显著增高(P<0.01);而Pina组细胞内荧光强度值较CON组及Gi+Pina组低(P<0.01)。结论心肌细胞缺氧/复氧后...