未成熟心肌缺血再灌注损伤后L-精氨酸的保护作用

目的:用幼兔体内心脏缺血再灌注损伤模型,研究小剂量L-精氨酸对未成熟心肌的保护效果。方法:24只新西兰幼兔(3～4周龄)随机分4组,每组6只:正常对照组;缺血/再灌注组;L-精氨酸组;L-硝基精氨酸甲酯组。测定各组的心室血液动力学指标、血浆肌酸激酶和乳酸脱氢酶(lactatedehydroge-nase,LDH)、心肌组织中总一氧化氮合酶(NOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及eNOS(eNOS=总NOS-iNOS)活性。结果:L-精氨酸组左心室收缩压(LVSP)、心室内压力变化率(±dp/dt)、左心室舒张压(LVDP)恢复明显高于缺血/再灌注组和L-硝基精氨酸甲酯组(P<0.05);L-精氨酸组左心室舒张期末压(LVEDP)明显低于缺血/再灌注组和L-硝基精氨酸甲酯组(P<0.05)。L-精氨酸组的血浆肌酸激酶和LDH低于缺血/再灌注组和L-硝基精氨酸甲酯组(P<0.05)。缺血/再灌注组、L-精氨酸组、L-硝基精氨酸甲酯组总NOS高于正常对照组(P<0.05);L-精氨酸组eNOS高于正常对照组、缺血/再灌注组、L-硝基精氨酸甲酯组(P<0.05)。4组iNOS差异无显著性意义(P>0.05)。结论:小剂量L-精氨酸能改善缺血/再灌注损伤后未成熟心肌的左心室血流动力学指标,这种保护作用是通过提高eNOS活性实现的,而与iNOS活性无关。     

大鼠胰腺缺血再灌注损伤微循环改变的实验

目的：探讨胰腺缺血再灌注后微循环的改变与胰腺损伤的关系。方法：实验于2002—12／2004—01在徐州医学院神经生物学研究中心实验室，解放军第九十七医院实验科、徐州市心血管研究所实验室完成。24只大鼠随机分为假手术组，缺血再灌注1h组，缺血再灌注6h组，每组8只。测定血淀粉酶，脂肪酶了解胰腺外分泌功能；光镜、电镜观察胰腺组织结构改变；微循环显微镜检测胰腺微循环的血管直径、血流速度、血流状态；测定胰腺组织干／湿比，了解组织含水量的变化。结果：24只大鼠全部进入结果分析。①胰腺缺血再灌注后血清淀粉酶、脂肪酶含量：缺血再灌注1h组淀粉酶和脂肪酶含量高于假手术组[(26．67&;#177;9．99)μkat／L,(5．24&;#177;1．82)μkat／L,(14．53&;#177;3．98)μkat／L,(2．83&;#177;1．64)μkat／L，(t=2．60，349，P&;lt;0．05)]，缺血再灌注6h时明显高于假手术组[(41．59&;#177;10．95)μkat／L，(10．66&;#177;2．61)μkat／L，(t=7．35，7．54，P&;lt;0．01)]。淀粉酶、脂肪酶随着再灌注时间延长而增加。②胰腺缺血再灌注后形态学改变：缺血再灌注1h组光镜下呈现急性水肿性胰腺炎表现，缺血再灌注6h组损伤加重，出现出血、坏死。③胰腺缺血再灌注后微循环的改变：缺血再灌注1h组和缺血再灌注6h组的微动脉口径小于假手术组[(18&;#177;6)μm，(20&;#177;9)μm，(22&;#177;8)μm，(t=2．42—3．85，P&;lt;0．05)]。缺血再灌注1h组和缺血再灌注6h组的微静脉口径均较假手术组扩张[(30&;#177;8)μm，(35&;#177;15)μm，(25&;#177;10)μm，(t=2．42—3．85，P&;lt;0．05)]，缺血再灌注6h组较缺血再灌注1h组微静脉口径明显扩张(t=3．69，P&;lt;0．05)。缺血再灌注1h组与缺血再灌注6h组的血流速度均较假手术组减缓[(0．44&;#177;0．12)mm／s，(0．21&;#177;0．04)mm／s，(0．56&;#177;0．03)mm／s，(t=2．42—4．19．P&;lt;0．05—0．01)]，并且缺血再灌注6h组较缺血再灌注1h组血流速度显著减缓(t=5．19，P&;lt;0．01)。④胰腺再灌注后胰腺组织干湿比的改变：缺血再灌注1h组胰腺干湿比明显少于假手术组[(26．5&;#177;2．3)％，(30．1&;#177;2．1)％，(t=3．23，P&;lt;0．05)]，缺血再灌注6h组胰腺干湿显著减少[(20．4&;#177;2．2)％，(t=8．23，P&;lt;0．01)]。结论：胰腺缺血再灌注1h时即发生微循环障碍及组织损伤，再灌注6h微循环障碍进一步恶化，胰腺缺血再灌注后，胰腺组织损伤与微循环紊乱的发展呈现一致性。     

大鼠心脏缺氧缺血再灌注损伤与果糖二磷酸镁的保护途径

目的：观察具有改善心脏能量代谢作用的果糖二磷酸镁对实验性大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护性途径。方法：实验于2005-03在锦州医学院药理学实验室完成。24只SD大鼠随机分为3组：对照组、缺血再灌注组和果糖二磷酸镁组，每组8只。3组大鼠均实施主动脉递引灌流，采用Langendorff方法用KH缓冲液[(NaCI 118．5，NaCO325．0，KH2PO4 1．2，KCI 4．8，MgSO4 1．2，CaCl2 2．0，葡萄糖1．0)mmol／L]制备离体大鼠心脏缺血再灌注模型，将果糖二磷酸镁(2.4mmol／L)加入灌流液内，停灌时间30min，再灌注时间1h。分别在心脏灌流稳定20min，再灌注60min记录左室收缩压、左室压力变化速率，并收集1min冠状动脉血流量。取左心室标本测总超氧化物歧化酶活性用黄嘌呤氧化酶法，测组织丙二醛含量用硫代巴比妥酸法。结果：24只SD大鼠均进入结果分析。①再灌注后左室收缩压比较：果糖磷酸镁组明显低于缺血再灌注组[(73．0&;#177;6．8，109．0&;#177;9．2)mmHg，τ=10．789，P&;lt;0．05)]。②再灌注后左室压力变化速率比较：缺血再灌注组明显低于对照组[(913&;#177;233，1889&;#177;304)mmHg／s，τ=6．756，P&;lt;0．01)]。③再灌注后心脏冠状动脉血流量比较：果糖磷酸镁组明显高于缺血再灌注组[(4．6&;#177;0.4，3．5&;#177;0．5)mL／min,τ=2．693，P&;lt;0．05)]。④再灌注后左心室肌组织总超氧化物歧化酶活性比较：果糖磷酸镁组明显高于缺血再灌注组[(33．06&;#177;3．03，22．18&;#177;4．79)NU／mg，(τ=8．123，P&;lt;0．01)]。⑤再灌注后左心室肌组织丙二醛含量比较：缺血再灌注组组明显高于对照组[(10.00&;#177;1．13，2．56&;#177;0．63)nmol／mg，(τ=18．76，P&;lt;0．01)]。结论：果糖二磷酸镁对再灌注损伤心肌可改善其收缩功能，并降低心肌组织中的丙二醛含量，从而减少氧自由基的产生，起到抗脂质过氧化而保护心肌的作用。     

一氧化氮在大鼠心肌缺血后处理中的作用

目的：探讨在体条件下,一氧化氮（N0）对缺血后处理心肌保护作用的影响及可能的途径。方法：建立大鼠在体缺血再灌注模型,将24只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组及一氧化氮合酶（NOs）抑制剂NW—L-硝基精氨酸甲酯（L—NAME）药物干预后处理组（药物干预组）。于再灌注末测定血浆肌钙蛋白I（cTnI）,NO。超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量,测定心肌组织梗死面积,免疫组化方法观察心肌组织内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达。结果：与缺血再灌注组及药物干预组相比,缺血后处理组心肌梗死面积明显减少,血浆cTnI,MDA含量降低,血浆N0,s0D含量升高,心肌细胞胞浆内eNOS表达增加。结论：缺血后处理通过eNOS／NO信号通路,抑制脂质过氧化反应,减轻心肌缺血／N：灌注损伤。     

兔心脏缺血再灌注损伤后重组水蛭素的保护作用及其机制

背景：重组水蛭素能否通过抑制白细胞浸润来拮抗心肌缺血／再灌注(ischemia／reperfusion，IR)损伤，从而起到对心肌的保护作用?目的：观察重组水蛭素对缺血心肌内白细胞浸润的影响，进一步探讨重组水蛭素对心肌保护的作用机制。设计：随机对照的实验研究。地点、材料和干预：本实验在第四军医大学唐都医院心血管病实验室完成。选取24只日本大耳白兔随机分为2组，每组12只。IR组：心脏左冠状动脉前降支IR动物模型，缺血45min、再灌注120min，再灌注前后静脉应用生理盐水；重组水蛭素组：缺血45min、再灌注120min，再灌注前15min静注重组水蛭素(1mg／kg)，再灌注时继以持续静滴重组水蛭素[1mg／(kg&;#183;h]120min。主要观察指标：心肌梗死范围及缺血心肌内白细胞浸润的变化。结果重组水蛭素组的心肌梗死范围为(11．7&;#177;2．4)％，与缺血再灌注组的(21．2&;#177;5．3)％比较，梗死范围明显缩小(t=7．436，P&;lt;0．01)。缺血再灌注组的髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性为(56．01&;#177;3．83)nkat／g，重组水蛭素组(35．51&;#177;1．67)nkat／g。重组水蛭素组缺血心肌内白细胞聚集较缺血再灌注组显著减少(t=3．935，P&;lt;0．05)。结论：重组水蛭素能够抑制再灌注期缺血心肌内白细胞浸润，拮抗心肌IR损伤。     

缺血预处理及磺脲类降糖药物对在体大鼠缺血再灌注损伤心肌的作用

目的：观察经典缺血预处理对在体大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护效应以及磺脲类降糖药物对其产生的影响。方法：将实验动物分为假手术组、缺血再灌注组、经典缺血预处理组和磺脲类降糖药物处理组，每组8只，观察经典缺血预处理和磺脲类降糖药物对心肌超微结构的影响，同时测定心肌组织丙二醛含量。结果：经典缺血预处理后缺血再灌注后的心肌丙二醛含量[(0．99&;#177;0．26)μmol／g]明显降低，与模型组[(1．68&;#177;0．33)μmol／g]比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)，而且保护心肌超微结构；磺脲类药物预处理组心肌丙二醛含量[(1．71&;#177;0．26)μmol／g]与模型组比较，差异无显著性意义，且心肌超微结构明显破坏。结论：磺脲类药物预处理可以取消经典缺血预处理对在体大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护效应。     

人参皂甙Re对大鼠急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响

背景：心肌细胞缺血再灌注损伤近来已成为临床研究的热点，但人参及其提取物对急性缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡的作用尚未阐明。目的：观察人参皂甙Re对急性缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2，Bax，Bad和Fas基因蛋白表达的影响，探讨人参皂甙Re抑制心肌细胞凋亡的可能机制。设计：随机对照实验研究。地点、对象和干预：本实验在湖北省武汉市同济医院动物实验中心完成。实验共用Wastar大鼠15只，雌雄不分。按随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组、人参皂甙Re治疗组，每组各5只。建立Wistar鼠缺血再灌注心脏模型。应用原位末端标记法检测心肌凋亡细胞，并进行细胞计数；原位杂交和免疫组化检测Bcl-2mRNA和基因表达产物的蛋白质，通过图像分析系统测量阳性染色区域的平均吸光度值进行量化分析，以观察人参对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响及基因表达。主要观察指标：人参皂甙Re治疗与否对急性大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2，Bax，Bad和Fas基因蛋白表达的影响。结果：①假手术组未发现心肌凋亡细胞。缺血再灌注组心肌凋亡细胞数为(134&;#177;46)个／视野，人参皂甙Re治疗组为(91&;#177;19)个／视野，两组间差异有显著性意义(t=4.63，P&;lt;0．01)。②免疫组织化学检测发现缺血再灌注组及人参皂甙Re治疗组Bcl-2，Bax，Bad和Fas基因蛋白的表达较假手术组明显增加(t=2．79，P&;lt;0．05)，人参皂甙Re治疗组bcl-2的表达与缺血再灌注组比较，差异无显著性意义(t=2．67，P&;gt;0.05)，而Bax，Bad，Fas的表达明显下降(t=2．8l，P&;lt;0．05)，人参皂甙Re治疗组Bcl-2／Bad，Bcl-2／Bad，Bcl-2／Fas比值均较假手术组与缺血再灌注组明显增大(t=2．84．P&;lt;0．05)。结论：人参皂甙Re治疗可以抑制急性缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡，其作用机制可能是抑制了促凋亡基因bax，bad，fas的表达，从而使Bcl-2／Bax，Bcl-2／Bad，Bcl-2／Fas比值增大。     

多次缺血预处理对兔脊髓缺血性损伤时金属元素的影响

背景：缺血预处理对主动脉手术的脊髓缺血性损害有良好的保护作用，但是脊髓缺血预处理保护作用的机制尚未完全阐明。目的：探讨多次缺血预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。设计：以实验动物为研究对象，完全随机对照实验研究。单位：一所大学医院的麻醉科。材料：实验于2002-09／12在武汉大学人民医院麻醉学研究室完成。24只日本大白兔随机双盲分为假手术组、缺血再灌注组和缺血预处理保护组，每组8只。干预：假手术组不阻断主动脉，缺血再灌注组阻断主动脉45min，缺血预处理保护组阻断主动脉5min，开放5min，反复4次之后再阻断45min。主要观察指标：术后第7天检测脊髓组织金属元素(钙，镁，铜，锌)的浓度。术后观察后肢神经功能的评分、后肢针电极肌电图和脊髓组织病理学的改变。结果：缺血再灌注组脊髓组织钙，铜的浓度较假手术组显著性升高(P&;lt;0．05或0．01)，镁，锌的浓度则显著性降低(P&;lt;0．05)。缺血再灌注组脊髓组织钙、锌的浓度分别较缺血预处理保护组显著性升高或降低(P&;lt;0．01)。缺血再灌注组后肢神经功能评分均显著性低于假手术组和缺血预处理保护组(P&;lt;0．05或0．01)，脊髓病理学和后肢肌电图亦较缺血预处理保护组有显著性病理改变(P&;lt;0．01)。结论：多次缺血预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤具有显著而又快速的保护作用，其保护机制与维持缺血区域钙，镁，铜，锌离子的平衡有关。     

小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径干预对葡萄糖代谢的影响

目的：观察小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径干预对大鼠术后葡萄糖代谢的影响，寻找解决术后胰岛素抵抗的方法。方法：实验于2005—01／2006—08在解放军第四军医大学第二附属医院中心实验室完成。实验分组：96只大鼠随机数字表法分为4组，正常对照组，L-硝基-精氨酸甲酯处理组，L-精氨酸处理组，L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组，每组24只。实验干预：建立大鼠小肠部分切除模型，各干预组分别尾静脉注射1mg／kg L-硝基-精氨酸甲酯、100mg／kg L-精氨酸处理、0．5mg／kg L-硝基-精氨酸甲酯＋50mg／kg L-精氨酸处理进行一氧化氮代谢途径干预。正常对照组只注射1mL生理盐水。实验评估：①给药后2，8，12，24，48h取血，测定血清中一氧化氮含量及血糖检测。②给药后24h，48h，1周后采用胰岛素敏感性实验计算每公斤代谢体质量每分钟代谢葡萄糖的量。结果：96只大鼠均进入结果分析。①血清一氧化氮含量：L-硝基-精氨酸甲酯处理组各时间点血清一氧化氮含量低于正常对照组（P〈0、05），而L-精氨酸处理组各时间点血清一氧化氮含量高于正常对照组（P〈0．05）；L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．1）。②空腹血糖：给药后8，12，24，48h L-硝基-精氨酸甲酯处理组高于正常对照组（P〈0．05）。给药后8，12，24，48h L-精氨酸处理组低于正常对照组（P〈0．05）；L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．1）。③稳态情况下每千克代谢体质量每分钟代谢葡萄糖的量：L-硝基-精氨酸甲酯处理组显著低于正常对照组（P〈0．05），而L-精氨酸处理组则显著高于正常对照组（P〈0．05）；L-精氨酸＋L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．1）。结论：小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径在葡萄糖转运和胰岛素活性方面可能起着重要作用，提示其可能是解决术后胰岛素抵抗的一种方法。     

当归注射液、三七总皂甙和外源性环磷酸腺苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：观察当归注射液、三七总皂甙(PNS)和外源性环磷酸腺苷(cAMP)对缺血再灌注(IR)过程心肌的保护作用，研究上述3种药物抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法：80只SD大鼠随机数字表法分成5组(每组n=16)：空白组，IR组，当归治疗组，PNS组和cAMP组，建立在体心肌缺血再灌注动物模型。用化学扩增法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性，TBA法测定丙二醛(MDA)含量，免疫组化SP法观察心肌细胞热休克蛋白70(HSP70)、蛋白激酶C(PKC)的表达和Fas，Bcl-2的含量，原位末端TUNEL法检测细胞凋亡指数，在电镜下观察心肌细胞的超微结构。结果：当归注射液和PNS均显著降低了再灌注心肌MDA水平(P&;lt;0．01)，增强了SOD活性(P&;lt;0．01)和HSP70的表达(P&;lt;0．01)，同时改善了心肌的超微结构。当归注射液明显增加了PKC的含量(P&;lt;0．05)，并使PKC从细胞核转移到细胞膜。PNS组PKC的含量高于IR组，(P&;lt;0．01)，但比正常心肌明显减少(P&;lt;0．05)。cAMP使凋亡指数和Fas含量明显减少(P&;lt;0．01)，Bcl-2含量明显增多(P&;lt;0．01)。结论：当归注射液可通过抗氧化作用、增加HSP70的表达和调节PKC的表达发挥抗心肌缺血再灌注损伤，对心肌有明显的保护作用。PNS长时间处理可促进HSP70的表达，对心肌再灌注损伤有良好的保护效应。cAMP具有抗心肌缺血再灌注损伤的作用，其作用机制可能是通过调节Fas和Bcl-2介导的心肌缺血再灌注细胞凋亡而实现。     

促红细胞生成素对全脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和诱导型一氧化氮合酶蛋白的影响

目的：观察促红细胞生成素(EPO)对短暂性全脑缺血再灌注后海马CA1区iNOS蛋白表达的影响，探讨其对缺血脑组织保护的可能机制。方法：应用四动脉血流阻断法制作大鼠短暂性全脑缺血再灌注模型；于再灌注开始时经腹腔注射EPO(3000U／kg)；48h灌注取脑。苏木精一伊红染色和TUNEL法染色观察海马CA1区神经细胞坏死和凋亡。应用免疫组织化学方法检测iNOS蛋白的表达。结果：短暂性全脑缺血15min再灌注后48h，苏木精一伊红染色海马CA1区存活神经元细胞数正常组(211．28&;#177;7．95)个／视野，假手术组为(209．28&;#177;11．34)个／视野，EPO治疗组海马CA1区存活神经元细胞数为(170．28&;#177;8．12)个／视野，缺血组为(146．84&;#177;8．35)个／视野。EPO治疗组与缺血组比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。TUNEL法凋亡细胞测定，正常组无阳性细胞，假手术组阳性细胞(152．48&;#177;18．52)个／视野，EPO治疗组有(1797．51&;#177;151．35)个／视野，缺血组有(2250．41&;#177;180．06)个／视野，两者比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。iNOS蛋白的表达测定，正常组无阳性细胞，假手术组海马CA1区阳性细胞区灰度值为5．36&;#177;1．54，EPO治疗组为31．80&;#177;6．42，缺血组为49．46&;#177;8．96。EPO治疗组与缺血组比较，两者差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。结论：EPO可减少大鼠短暂性全脑缺血再灌注后神经元的死亡和凋亡，抑制iNOS蛋白的表达。     

蛋白激酶C活化对大鼠缺血再灌注心肌细胞核三磷酸肌醇受体结合活性的影响

目的：观察具有抑制心肌细胞凋亡作用的蛋白激酶C活化对缺血再灌注心肌细胞核三磷酸肌醇受体结合活性的影响，以探讨其对心肌的保护作用。方法：实验于2003—04／07在解放军第三军医大学药理教研室完成。选用SD健康大鼠12只。随机分为2组，缺血再灌注组及假手术对照组，每组6只。缺血再灌注组：冠状动脉结扎30min，再灌注3h。假手术对照组：只埋线不结扎冠状动脉。采用蔗糖密度梯度离心法提纯心肌细胞核，将分离纯化的两组心肌细胞核分别平等进行2个亚组：磷酸化组和非磷酸化组，磷酸化组进行蛋白激酶C激动剂12—o-十四烷酰佛波醋酸酯-13磷酸化干预后，与非磷酸化组同时进行氚-1，4，5三磷酸肌醇的放射受体分析，比较两组细胞核经磷酸化后细胞核三磷酸肌醇受体结合活性变化。结果：进入结果分析大鼠12只。①心肌细胞凋亡指数：缺血再灌注组明显高于假手术对照组(9．88&;#177;0．33，0．6&;#177;0．0，P(0．01)。②大鼠心肌细胞核膜三磷酸肌醇受体的结合活性：缺血再灌注组与磷酸化组明显低于非磷酸化组【(88．27&;#177;0．08)，(136．05&;#177;0．05)pmol／g,P&;lt;0．05】。③大鼠心肌细胞核膜三磷酸肌醇受体的结合力：磷酸化组和非磷酸化组无明显差异【(102．83&;#177;0．09)，(106．24&;#177;0．26)pmol／g，P&;gt;0．05】。结论：大鼠心肌缺血再灌注时，蛋白激酶C可能是通过抑制心肌细胞核膜三磷酸肌醇受体的结合活性，进而参与了抑制缺血再灌注性心肌细胞凋亡的发生与发展。     

局灶性脑缺血再灌注后脑腺苷含量和烯醇化酶的动态变化

目的：研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织腺苷含量、烯醇化酶表达的动态变化及桂哌齐特对此的影响。方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。应用反相离子对高效液相色谱法和免疫组织化学法分别检测脑腺苷含量及烯醇化酶表达的动态变化。并进行神经功能评分。结果：模型组大鼠脑缺血及再灌注后4个时间点脑腺苷含量均较基础水平(1．01&;#177;0．14)μmol／g增高(P&;lt;0．05)；桂哌齐特组缺血后20min为(3．26&;#177;0．30)μmol／g，60min时为(1．91&;#177;0．20)μmol／g，较模型组[分别为(2．40&;#177;0．38)μmol／g，F=92．572，P&;lt;0.05；(1．27&;#177;0．17)μmol／g]显著升高(F=92．572，43．051，P&;lt;0．05)，再灌注后15min及60min呈现增高的趋势(P&;gt;0．05)。烯醇化酶的表达在脑缺血再灌注后各时间点均明显降低(P&;lt;0．05)，桂哌齐特组均明显高于模型组(P&;lt;0.05)，且神经功能评分有明显改善。结论：脑缺血再灌注后脑组织腺苷含量急骤升高，但持续时间短暂。桂哌齐特对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经元有保护作用，可能与其增加内源性腺苷含量从而增强腺苷的脑保护作用有关。     

实验性大鼠急性脑缺血细胞凋亡与相关蛋白表达的关系

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡及p53，Bcl-2蛋白家族表达的变化，并探讨它们在细胞凋亡中的作用。方法：实验在华北煤炭医学院形态实验室完成。54只大鼠用随机数字表法随机分成3组：脑缺血组(42只)、假手术组(6只)和正常组(6只)。脑缺血组又分为7组：即缺血2h再灌注1，3，6，12，24，48和72h组(n=6)。采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注模型，用TUNEL法检测细胞凋亡的变化，用免疫组化法检测p53，Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：①缺血2h再灌注1h皮质区可见凋亡细胞[(7．83&;#177;1．72)个／高倍视野]，24～48h达高峰[(43．33&;#177;5．20)个／高倍视野，(48．50&;#177;6．25)个／高倍视野]，72h开始下降[(26．67&;#177;3．56)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见p53蛋白阳性细胞[(14．35&;#177;1．92)个／高倍视野]，24h达高峰[(48．00&;#177;6．42)个／高倍视野]，48h后开始下降[(31．00&;#177;6．60)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见Bcl-2蛋白阳性细胞[(28．62&;#177;6．80)个／高倍视野]，3h达高峰[(56．50&;#177;7．87)个／高倍视野]，6h后开始下降[(45．00&;#177;6．63)个／高倍视野](P&;lt;0．01)；缺血2h再灌注1h皮质区可见Bax蛋白阳性细胞[(45．83&;#177;4．07)个／高倍视野]，24h达高峰[(61．00&;#177;8．88)个／高倍视野]，48h开始逐渐下降[(45．83&;#177;6．49)个／高倍视野](P&;lt;0．05，P&;lt;0．01)。②缺血再灌注后不同时间点细胞凋亡数与p53及Bax蛋白的阳性表达数呈正相关(r=0．843，P&;lt;0．001；r=0．840，P&;lt;0．001)，与Bcl-2蛋白的阳性表达数呈负相关(r=-0．387，P&;lt;0．05)。结论：大鼠脑缺血再灌注后，缺血周边区发生明显的细胞凋亡，同时伴有p53及Bax蛋白表达增加及Bcl-2表达降低，p53及Bax蛋白表达对细胞凋亡起促进作用，而Bcl-2蛋白表达则对细胞凋亡起抑制作用。     

心肌缺血再灌注过程中氟烷、异氟醚和恩氟烷对心脏功能的影响

目的：研究氟烷、异氟烷和恩氟烷对缺血再灌注心肌功能、代谢自由基的影响。方法：SD大鼠104只，随机数字表法分为13小组，每组8只。采用Langendorff离体大鼠心脏模型。按给药方式又分为对照、氟烷、恩氟烷、异氟烷4大组。①对照组(含4小组)：平衡15min组，平衡后续灌15min组，平衡续灌后缺血10min组，平衡续灌缺血25min后复灌30min组。②氟烷组(含3小组)：平衡15min后，灌注含1．5肺泡气最低有效浓度(minimal alveolar concentration，MAC)氟烷灌注液15min组，平衡续灌后缺血10min组，平衡续灌缺血25min复灌含1．5MAC氟烷的灌注液30min组。③恩氟烷和异氟烷组，各包括3小组，情况同氟烷组。各组记录平衡后，给药(或续灌15min)复灌30min左心室收缩压、左心室舒张末期压(left venmtricular diastolic pressure，LVEDP)、左心室发展压、左心室压力升高或降低最大速率、心率、冠状动脉流量(comnary flow，CF)。实验结束后测定心肌超氧化物歧化酶(supemxide dismutase，SOD)活性、心肌丙二醛含量、高能磷酸盐(ATP)含量。结果：①恩氟烷、异氟烷具有明显扩张冠状动脉的作用。恩氟烷能促进缺血再灌注心肌冠脉流量的恢复。②各用药组明显降低左心室发展压、左心室压力升高速率，升高LVEDP(P均&;lt;0．05)；缺血再灌注后，氟烷、恩氟烷、异氟烷组的左心室发展压分别恢复到基础值的57％，62％，59％(P均&;lt;0．01)，左心室压力升高速率分别恢复到基础值的56％，67％，74％(P均&;lt;0．01)；与对照组恢复的左心室发展压(27％)、左心室压力升高速率(13％)相比，差异具有非常显著性意义(P均&;lt;0．01)。③各用药组均能提高心肌ATP含量，缺血后心肌ATP下降较慢，复灌后恢复较快。④复灌后用药组SOD活性较高；丙二醛生成量下降(P&;lt;0．05)。结论：3种挥发性麻醉药对心肌收缩功能具有一定的抑制作用。缺血再灌注后，能明显促进心肌功能与代谢的恢复，而且能提高冠脉流量、SOD酶活性。提示这些作用可能是挥发性麻醉药抗心肌缺血再灌注损伤机制之一。     

辛伐他汀对心肌缺血再灌注损伤保护作用的在体实验

目的：多种技术的应用使闭塞的冠状动脉再通成为可能，此时常会引起缺血再灌注损伤。研究辛伐他汀在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的保护作用。方法：本实验于2003—07／2003—11在解放军总医院动物实验中心完成。23只大鼠随机分为辛伐他汀组(n=10)、假手术组(n=6)和对照组(n=7)，利用大鼠在体心脏缺血再灌注模型进行实验。辛伐他汀组于结扎冠脉前17h腹腔注射给药。八导生理记录仪记录缺血后1，30min及再灌注后1，30min心功能各指标的变化，图像分析软件计算缺血和坏死心肌面积。结果：缺血再灌注后，辛伐他汀组与对照组比较，坏死区面积与危险区面积之比减少21％(P&;lt;0．05)，坏死区面积与左室面积之比减少22％(P&;lt;0．05)。且辛伐他汀组左室内压上升段最大变化速率(+dp／dtmax)、左室内压下降段最大变化速率(-dp／dtmax)、心率及心肌纤维缩短速率最大值(Vmax)分别在再灌注1min和30min时明显改善(P&;lt;0．05)，心室收缩压改变不明显。结论：辛伐他汀可以减少心肌梗死面积，对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

黄芪和当归注射液对兔肾缺血再灌注损伤时腺苷三磷酸酶的影响

背景：近年研究表明，黄芪和当归具有抗自由基的作用，对肾缺血再灌注损伤具有保护作用。目的：观察黄芪、当归注射液在肾缺血再灌注损伤中对腺苷三磷酸酶(ATP酶)的保护作用及机制。设计：以实验动物为研究对象的观察对比实验。单位：一所医学院的生理教研室及肾功能保护研究室。材料：本实验于2001-01／2001—03在泸州医学院生理实验室完成。选择健康成年日本大耳白兔33只，由泸州医学院实验动物中心提供，雌雄不拘，体质量(1．63&;#177;0．22)b。按随机数字表法分为假手术对照组8只、单纯缺血再灌注组8只、黄芪注射液+缺血再灌注组(黄芪组)8只、当归注射液+缺血再灌注组(当归组)9只。方法：术前1d、手术当天、术后1d，黄芪组、当归组每天分别静脉注射药物(黄芪1．25g／kg、当归12、5g／kg)，对照组和单纯缺血再灌注组每天注射生理盐水5mL／kg。肾缺血lh再灌注48h后，下腔静脉采血，取右肾上极组织置入30mL／L戊二醛固定，下极组织制成组织匀浆。电镜检查肾组织超微结构，测血清肌酐含量及肾组织中ATP酶活性。主要观察指标：肾组织超微结构、血清肌酐含量及肾组织中ATP酶活性。结果：单纯缺血再灌注组肾组织变性显著，黄芪组、当归组病变较单纯缺血再灌注组明显减轻。单纯缺血再灌注组血清肌酐含量明显高于假手术对照组(P&;lt;0．05)；黄芪组、当归组血清肌酐含量较单纯缺血再灌注组降低(P&;lt;0、05)。单纯缺血再灌注组Mg^2+-ATP酶、Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶含量分别为(0．155&;#177;0．020)，(0、179&;#177;0、018)，(0、150&;#177;0、022)nkat／g，与假手术对照组[(0、174&;#177;0、012)，(0、198&;#177;0．012)，(0．18l&;#177;0．017)nkat／g]相比明显降低(t=2．344，2．438，3．014，P&;lt;0．05)；黄芪组及当归组的Mg^2+-ATP酶、Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶活性分别为(0．172&;#177;0．023)，(0．196&;#177;0．077)(0．175&;#177;0．016)(0．177&;#177;0．015)(0．200&;#177;0．011)和(0．181&;#177;0．025)nkat／g，除黄芪组Mg^2+-ATP酶活性较单纯缺血再灌注组差异无显著性外，余均较单纯缺血再灌注组高(t=2．372．2．786，P&;lt;0．05)。结论：黄芪、当归具有抑制ATP酶下降和改善肾局部血流调节紊乱的作用，为其通过保护ATP酶而减轻肾缺血再灌注损伤提供实验学基础。     

血液稀释和缺血预处理对猪心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的：在猪心肌缺血再灌注模型上，观察等容血液稀释和缺血预处理对再灌注损伤心肌的保护作用。方法：18头小型猪建立急性心肌缺血模型，随机分为3组：对照组(组Ⅰ，n=6)，缺血预处理组(组Ⅱ，n=6)，缺血预处理加血液稀释组(组Ⅲ，n=6)，测定心排血量(CO)，混合静脉血氧饱和度(SvO2，)、冠状动脉血流量，计算心肌氧供，氧耗量。于钳扎前、解除钳扎后20，60min分别测定血浆中丙二醛(MDA)，SOD活性、磷酸激酶(CPK)及肌酸磷酸激酶同功酶(CK-MB)，自左心耳剪下标本，测定HSP 70 mRNA表达率。结果：①缺缺血20min时3组MAP、CI及SVRI明显减低(p&;lt;0．01)。但Ⅰ组下降幅度明显大于Ⅱ，Ⅲ组。再灌注60min时，Ⅱ组，Ⅲ组HR明显低于对照值(P&;lt;0．01)，Ⅲ组HR的变化则无统计学意义，Ⅰ组MAP，CI的下降幅度明显大Ⅰ组和Ⅱ组(P&;lt;0．05)．②再灌注20min及60min时，Ⅲ组的冠脉血流量明显大于Ⅰ组(P&;lt;0．05)。③再灌注20min和60min时，3组CPK，CPK-MB均较对照值明显升高(p&;lt;0．05—0．01)，组Ⅰ的升高幅度明显大于组Ⅱ，组Ⅲ。组ⅠSOD值在再灌注20min，60min时逐步降低(P&;lt;0．05)，组Ⅱ，组ⅢSOD值有升高趋势，与对照值比较，无统计学意义。再灌注60min时，组ⅠMDA值明显高于组Ⅱ，组Ⅲ。④组ⅠHSP 70mRNA表达低于组Ⅱ和组Ⅲ。结论：等容血液稀释可明显增强预适应拮抗心肌缺血再灌注造成的心肌损伤。     

线粒体功能与骨骼肌缺血再灌注损伤的关系

目的：观察骨骼肌缺血再灌注后呼吸链电子漏、呼吸控制率、丙二醛和髓过氧化物酶的变化，评价3—硝基—N—甲基水杨酰胺(3-nitro-N-methy solicy solicy lamide，NSMA)对肢体缺血再灌注损伤的影响。方法：实验于1998—10／2000—05在解放军第三○四医院创伤外科研究室完成，制备缺血再灌注模型。将35只健康Wistar大白鼠，饲养环境清洁，合格证号军医动字第B98008号。随机分为7组(对照组、缺血2h、缺血2h再灌注1h、缺血2h用NSMA再灌注1h、缺血6h、缺血6h灌注1h、缺血6h用NSMA再灌注1h)，选取不同时点骨骼肌标本，提取骨骼肌线粒体、测定线粒体呼吸控制率、抗氰呼吸、经皮测量动脉氧分压及局部相对血流量、测定骨骼肌丙二醛含量和髓过氧化物酶活性、对骨骼肌线粒体超微结构进行透射电镜检测。结果：缺血2h(1．45&;#177;0．10)、缺血2h再灌注1h(1．49&;#177;0．13)、缺血6h(0．79&;#177;0．08)、缺血6h灌注1h(1．32&;#177;0．07)RCR比对照组(2．82&;#177;0．25)、缺血2h用NSMA再灌注1h(2．93&;#177;0．47)、缺血6h用NSMA再灌注1h(2．19&;#177;0．38)显著下降(P&;lt;0．01)；缺血2h用NSMA再灌注1h组线粒体氧化磷酸化偶联程度与对照组相似，缺血6h用NSMA再灌注1h组与相应的缺血2h、缺血2h再灌注1h、缺血6h、缺血6h灌注1h组明显提高；缺血2h(3．02&;#177;0．24)、缺血2h再灌注1h(3．30&;#177;0．08)、缺血6h(3．36&;#177;0．22)、缺血6h灌注1h(3．74&;#177;0．21)组抗氰呼吸分别比缺血2h用NSMA再灌注1h(0．22&;#177;0．05)、缺血6h用NSMA再灌注1h(1．46&;#177;0．30)组增加(P&;lt;0．01)；随缺血的时间的延长，丙二醛浓度显著增加(P&;lt;0．01)，髓过氧化物酶的活性显著升高(P&;lt;0．01)，再灌注后丙二醛仍继续增加(P&;lt;0．01)，髓过氧化物酶的活性持续升高(P&;lt;0．01)，相应肢体组织的PO2在阻断期0～1mmHg，2h后再灌注的最初2min血流量先恢复随即减慢，但在阻断6h再灌注时血流基本停止，此时被阻断的肢体无痛觉反应；病理改变在缺血再灌注后最为严重，缺血后预先应用NSMA再灌注骨骼肌大部分线粒体完整。结论：伴随着电子漏增加、线粒体活性降低，丙二醛浓度增加和髓过氧化物酶的活性增高与组织的损伤程度呈正相关；NSMA能影响呼吸链电子传递，使氧自由基减少，进而维持线粒体结构的完整性和线粒体的功能活性，使细胞进行正常的氧化磷酸化，减轻骨骼肌缺血再灌注损伤。     

黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注脑组织超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的：探讨黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注自由基损伤的保护作用，为脑缺血再灌注损伤防治提供新的药物。方法：将大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组及黄芩苷治疗组。动物模型采用大脑中动脉缺血再灌注模型，用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥法分别测定脑组织缺血再灌注3，6h时超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛的含量及黄芩苷对其的影响。结果：脑缺血2h再灌注后3，6h时，脑组织SOD分别为(24．5&;#177;0．28)，(16．27&;#177;0．20)NU／mg，丙二醛分别为(0．66&;#177;0．32)．(1．62&;#177;0．52)μmol／g，与假手术组比较，脑组织SOD明显降低(P&;lt;0．01)，丙二醛则明显增高(P&;lt;0．01)；黄芩苷治疗后脑组织SOD分别为(30．19&;#177;0．36)，(25．74&;#177;0．28)NU／mg，丙二醛分别为(0．42&;#177;0．26)．(0．78&;#177;0．37)μmol／g，与模型组相比，脑组织SOD有所增高(P&;lt;0．01)．而丙二醛则有所降低(P&;lt;0．01)。并且，治疗组大鼠神经功能缺损评分较模型组增高(P&;lt;0．05)。结论：黄芩苷对脑缺血再灌注自由基损伤有一定保护作用。