粪便SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用研究

目的 探讨粪便SEPT9(Septin9)基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的价值.方法 从126例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁组织及其术前粪便中提取DNA,应用多重置换扩增(MDA)结合巢式甲基化特异性PCR(nMSP)检测结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化水平;以手术后病理诊断为标准,比较结直肠癌组织和粪便中SEPT9甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性.结果 在126例结直肠癌中,癌组织SEPT9检出率为84.1%,癌旁组织检出率为7.9%,二者比较有统计学差异(P<0.01),特异性为92.1%;结直肠癌粪便SEPT9基因甲基化检测结果与组织检测结果一致;在各临床分期之间,SEPT9甲基化检出率无统计学差异(P>0.05).结论 结直肠癌组织SEPT9基因甲基化异常发生率高;粪便SEPT9甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物.     

联合Septin9基因甲基化、FOBT及CEA检测在结肠癌患者诊断中的临床意义

目的 探讨联合Septin9基因甲基化、FOBT及CEA对结肠癌诊断的临床意义。方法 回顾性分析2016年1月至2020年9月本院收治的结肠癌患者及其健康对照组临床资料,分为结肠癌组56例、癌前病变组56例和健康对照组21例。通过统计三组Septin9基因甲基化、FOBT及CEA数据,绘制工作特征曲线(ROC)并比较ROC曲线下面积(AUC)。结果 Septin9基因甲基化在结肠癌患者中阳性率最高;ROC曲线结果显示联合FOBT、CEA以及Septin9甲基化的AUC为0.9127(95%CI)。3项评价指标联合检测在结肠癌患者诊断效能最高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 联合检测结肠癌患者外周血血浆游离Septin9基因甲基化、FOBT及CEA能够显著提高结肠癌患者的诊断效能。     

外周血Septin9基因甲基化和血清CA199联合检测在结直肠癌筛查中的诊断价值

目的 探讨外周血Septin9基因甲基化和血清糖类抗原199(CA199)联合检测在结直肠癌(CRC)筛查中的诊断价值。方法 选取2018年8月至2020年8月云南新昆华医院收治的202例结直肠病变患者为研究对象,其中CRC患者93例(CRC组),结直肠息肉患者109例(结直肠息肉组);同时选择同期体检健康者50例作为对照组。采用实时荧光PCR测定Septin9基因甲基化的情况,化学发光法测定CA199的水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Septin9基因甲基化和CA199对结直肠癌的诊断价值。结果 CRC组外周血Septin9基因甲基化和CA199阳性率显著高于结直肠息肉组和对照组(P<0.05),结直肠息肉组Septin9基因甲基化和CA199阳性率亦高于对照组(P<0.05)。Septin9基因甲基化诊断CRC的灵敏度为89.32%,约登指数为0.681 1,AUC为0.793,均高于CA199检测的结果,但CA199诊断CRC的特异度较外周血Septin9基因甲基化高;二者联合检测的灵敏度、约登指数和AUC均较单项检测高(P<0.05)。治疗后,CRC...     

Septin9基因甲基化在食管癌诊断中的应用价值

目的评价外周血Septin9基因甲基化DNA检测方法在食管癌诊断的应用价值。方法收集2018年1-12月在徐州医科大学附属医院初诊的31例食管癌患者作为实验组,20例健康者作为对照组。以病理诊断为金标准进行确诊,同时进行外周血血浆Septin9甲基化的检测。用受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积对Septin9甲基化对食管癌的诊断进行评价,并分析其与临床病理特征之间的联系。结果 Septin9甲基化检测诊断食管癌的灵敏度为67.6%,特异度为100.0%,ROC曲线下面积为0.839,差异具有统计学意义;但其检测结果与食管癌的临床病理特征之间无相关性。结论外周血Septin9基因甲基化检测可作为筛查食管癌一个有效的辅助指标。     

血浆Septin9基因甲基化检测在胃肠道病变中的临床应用价值评价

目的探讨血浆Septin9基因甲基化在胃肠道病变进展过程中的临床应用价值。方法纳入2017年5月至2020年11月在福建医科大学附属第一医院行血浆Septin9基因甲基化检测(PCR荧光法)的受检者(包括结直肠癌和胃癌患者、消化系统良性病变患者及无疾病证据受检者)2128例,收集相关临床资料,并进行ROC曲线分析。结果术前结直肠癌和胃癌患者、消化系统良性病变患者、无疾病证据受检者血浆Septin9基因甲基化的阳性率分别为57.67%、43.71%、17.72%和4.88%。与无疾病证据受检者组相比较,术前结直肠癌和胃癌患者Septin9基因甲基化检测的敏感性分别为57.71%和43.71%,特异性分别为95.12%和95.12%。临床分期为Ⅲ~Ⅳ期的结直肠癌(68.92%)和胃癌(48.80%)患者的血浆Septin9基因甲基化的阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期结直肠癌(50.51%)和胃癌(18.82%)患者,术前行该检测的结直肠癌(57.76%)和胃癌(43.71%)患者的阳性率亦高于术后行该检测的结直肠癌(31.45%)和胃癌(33.76%)患者,且有63.33%结直肠癌与69.23%胃癌患者在术后该指标由阳性转变为阴性。ROC曲线分析结果表明,单独血浆Septin9基因甲基化在筛查结直肠癌患者与结直肠良性病变患者或无疾病证据受检者组中ROC曲线下面积(AUC^ROC)分别为0.681和0.764,在筛查胃癌患者与胃良性病变患者或无疾病证据受检者组中的AUC^ROC分别为0.649和0.694。在筛查结直肠癌与结直肠良性病变患者组中,Septin9联合癌胚抗原检测的AUC^ROC可提高至0.789。结论血浆Septin9基因甲基化检测在结直肠癌和胃癌中具有一定的诊断价值,但仍需结合其他的诊断方法。     

血清SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌诊断中的应用

目的探讨血清代替血浆检测SEPT9基因甲基化在结直肠癌(CRC)诊断中的价值。方法收集70例CRC患者、38例腺瘤或息肉患者及15例其他肠道疾病患者血清样本。用Epi pro Colon 2.0试剂盒进行SEPT9基因甲基化检测,依据肠镜病理诊断进行验证,比较SEPT9、癌胚抗原(CEA)和粪便潜血试验(FOBT)的敏感性和特异性,并进行统计学分析。结果 CRC患者血清SEPT9的阳性率(81.4%)明显高于对照组(13.2%),差异有统计学意义(χ2=92.814,P0.01)。CRC患者血清SEPT9的敏感性为81.4%(95%CI:72.4%~90.4%)、特异性为86.7%(95%CI:72.4%~100%)。临床分期为Ⅰ期的CRC患者SEPT9阳性率为42.9%,Ⅱ期为88.9%,Ⅲ期为82.4%,Ⅳ期为100%,差异有统计学意义(χ2=16.572,P0.01)。SEPT9的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.841,明显高于CEA(0.716)和FOBT(0.792)。3者联合检测AUCROC可达0.935。结论血清SEPT9基因甲基化的检测是早期诊断CRC的有效方法,联合检测CEA及FOBT可以提高诊断效能。     

血浆Septin9基因甲基化检测性能评价及对结直肠癌患者的筛查价值

摘要：目的：评价血浆 Septin9 基因甲基化检测试剂盒对结直肠癌(CRC)的诊断价值，并进行性能验证。 方法：收集2016年10月至2017年5月CRC手术患者的术前血浆标本32例及健康成人血浆标本10例。采用血浆 Septin9 基因甲基化检测试剂盒检测两组血浆 Septin9 基因甲基化水平，对该试剂盒诊断CRC的符合率、最低检出限和精密度进行评价，并与癌胚抗原（CEA）和粪便隐血试验（FIT）进行方法学比较。 结果：血浆 Septin9 基因甲基化试剂盒检测CRC患者的阴、阳性符合率为100%；检测限参考品阳性；精密度变异系数＜5%，符合基本性能要求。 Septin9 基因甲基化检测用于诊断CRC的敏感性为62.50%，特异性为90.00%，阳性预测值为95.20%，阴性预测值为42.90%。血浆 Septin9 基因甲基化检测对于CRC的检出率为62.50%，明显高FIT（28.13%）及CEA（28.13%）的检出率，差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。 Septin9 基因甲基化检测的曲线下面积（AUC^ROC）为0.762。 Septin9 基因甲基化检测对于Ⅰ期CRC的检出率为50.00%。 结论：该血浆 Septin9 基因甲基化试剂盒的性能指标满足预期临床用途要求，可以作为CRC血清学辅助诊断标志物。     

Septin9基因甲基化检测方法的建立及在结直肠癌血浆标本检测中的应用探讨

目的以荧光聚合酶链反应(PCR)技术为基础,构建早期筛查结直肠癌的血液Septin9甲基化检测体系。方法在美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库查找Septin9甲基化的CpG岛位点,设计相应的PCR引物。提取结直肠癌组织和癌旁组织的DNA,PCR扩增并测序确认Septin9基因启动子区高甲基化位点。针对高甲基化位点,设计荧光PCR和Taqman探针检测技术构建血浆标本甲基化检测体系,并对该检测体系的准确度、特异度、重复性及最低检出量进行评估分析。在57例结直肠癌患者和30例健康人血浆标本中进行Septin9甲基化检测,验证该检测体系的可靠性。结果组织标本中经测序确认Septin9基因高甲基化位点。以该位点为靶点设计荧光PCR检测体系,经评估,该检测体系的准确度为100%,特异度和重复性均为100%,最低检出量可达0.1ng/μL。在57例结直肠癌患者血浆标本中,Septin9甲基化位点检测的阳性率为71.92%(41/57),结直肠癌患者病理分期Ⅰ和Ⅱ期阳性率达64.2%;而健康人群血浆中Septin9基因均无甲基化。结论以Septin9基因甲基化位点为靶标的血浆荧光PCR检测体系具有灵敏度、特异度及准确度高的特点,是结直肠癌早期筛查的可靠检测技术,具有良好的临床应用前景。     

血浆甲基化Septin9基因:一个有潜力的结直肠癌早期筛查标志物

Septin是一类进化上高度保守的细胞骨架蛋白基因家族,具有GTP酶(guanosine triphosphatase,GTPase)活性.家族内的Septin9基因参与细胞分裂、胞吐作用、细胞极性、细胞迁徙、DNA修复等多种生理活动.近年,Septin9基因与肿瘤发生发展中的关系受到广泛关注,甲基化的Septin9基因(methylated Septin9 gene,mSEPT9)被证实为结直肠癌(colorectal cancer,CRC)重要的表观遗传学改变.本文综述了目前常见的几种Septin9基因甲基化检测方法及其对不同种类样本的检测状况,探讨了其在结肠癌早期筛查中的潜在应用价值.     

粪便SDC2基因甲基化检测联合结肠镜在早期结直肠癌筛查中的意义

目的探讨粪便SDC2基因甲基化检测联合结肠镜在早期结直肠癌(CRC)筛查中的意义。方法选择2018年1月-2019年10月在深圳市宝安区中心医院体检的1 000例体检者作为研究对象,使用试剂盒分别检测粪便SDC2基因甲基化和血浆SEPT9基因甲基化,对两者任一结果为阳性者再行结肠镜检查。比较SDC2和SEPT9基因甲基化检测的阳性率以及两者联合结肠镜对进展性腺瘤和CRC的检出率。结果在1 000例筛查对象中,粪便SDC2基因甲基化检测阳性率明显高于血浆SEPT9基因甲基化〔18.10%(181/1 000)比9.80%(98/1 000)〕,差异有统计学意义(P<0.05);粪便SDC2基因甲基化检测联合结肠镜对进展性腺瘤和CRC的检出率均明显高于血浆SEPT9基因甲基化检测联合结肠镜筛查〔进展性腺瘤检出率:2.50%(25/1 000)比1.00%(10/1 000),CRC检出率:1.50%(15/1 000)比0.50%(5/1 000)〕,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论粪便SDC2基因甲基化检测是一种简单无创的CRC筛查新技术,患者接受程度更高,能够避免大规模肠镜筛查带来的弊端,联合结肠镜检测可作为CRC早期筛查的首选策略。     

Septin9基因及甲基化检测在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病率高,致死性强,严重威胁人类健康。Septin9基因与CRC发生密切相关,其在癌组织中呈高度甲基化,是CRC的重要分子特征。检测Septin9基因在患者血浆中的甲基化水平对CRC筛查具有较为理想的效果。该法取样安全、方便,结果准确、稳定,有望取代传统的粪便潜血试验法与结肠镜检法。该文就近年来Septin9基因甲基化在CRC诊断中的研究进展作一综述。     

SEPT9基因在肿瘤中的研究进展

Septin 9(SEPT9)基因是保守骨架蛋白基因家族成员之一,具有三磷酸鸟苷酶活性(GTPase),可参与细胞极化、细胞分裂和细胞膜重构等多种生物过程。研究证实SEPT9与诸如恶性肿瘤等人类疾病发生发展密切相关,且SEPT9已成为现阶段肿瘤相关研究的新热点。本文阐述了SEPT9基因的结构特点、SEPT9蛋白作用机制及其在多种常见肿瘤发生进展中的作用,探讨了其作为标志物在肿瘤早期筛查中的潜在应用价值。     

血浆SEPT9基因甲基化在结直肠癌根治术后复发监测中的应用

目的 分析血浆SEPT9基因甲基化(mSEPT9)在结直肠癌根治术患者术后复发监测中的应用效果.方法 选取2014年4月至2018年4月在该院行根治术的154例结直肠癌患者作为研究对象,采用试剂盒检测患者外周血标本中的mSEPT9和癌胚抗原(CEA),并分析mSEPT9与年龄、性别、体质量指数(BMI)、淋巴结转移、发...     

MSP技术检测慢性淋巴细胞白血病患者孕激素受体B基因甲基化异常

目的 建立检测慢性淋巴细胞白血病患者孕激素受体B基因CpG岛甲基化状态改变的方法.方法 提取外周血DNA,经亚硫酸盐修饰,然后采用甲基化特异性PCR技术检测9例慢性淋巴细胞白血病患者及5例正常对照外周血DNA 孕激素受体B基因CpG岛甲基化状态.结果 在9例慢性淋巴细胞白血病患者外周血中5例成功地检测到孕激素受体B基因甲基化异常,而正常对照均没有发现甲基化异常.结论 建立的检测慢淋孕激素受体B基因异常甲基化的方法是可靠的,该方法可能对监测肿瘤进程有一定作用.     

骨髓增生异常综合征患者SFRP5基因启动子区甲基化状态研究

背景:SFRP5基因启动子区的甲基化与急性髓系白血病的发生密切相关.作为白血病的前期,骨髓增生异常综合征患者中SFRP5基因启动子区的甲基化状态尚不清楚.目的:探索骨髓增生异常综合征中WNT/β-catenin信号传导通路拮抗基因分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)基因的甲基化状态.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)法对43例骨髓增生异常综合征患者的骨髓或外周血进行SFRP5基因启动子区甲基化状况检测,并以70例门诊普通患者的外周血作为对照.结果与结论:113例样本均成功进行了MSP检测,进入结果分析.43例骨髓增生异常综合征患者中检出5例(11.6%)SFRP5的甲基化,70例正常对照中检出1例(1.4%)SFRP5的甲基化,并且均为不完全甲基化状态.SFRP5在骨髓增生异常综合征患者中的甲基化率显著高于正常对照(χ2=5.511,P=0.019).43例患者样本中,17例为骨髓样本,26例为外周血样本.而5例甲基化的样本中,2例为骨髓样本,3例为外周血样本.样本的来源(骨髓/外周血)对于甲基化状态的结果无显著差异(χ2=0.001,P=0.982).提示,SFRP5基因的甲基化与骨髓增生异常综合征有相关性,SFRP5基因的甲基化可能是引起骨髓增生异常综合征的分子机制之一.     

SEPT9甲基化检测在结直肠癌早期诊断中价值的研究进展

结直肠癌是我国常见恶性消化道肿瘤之一,其发病率逐年上升且预后不好,病死率较高。早发现、早诊断可有效降低结直肠癌致死率。目前,临床用于结直肠癌诊断及监测的肿瘤标志物有癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA199)、糖类抗原242(CA242)等,这些标志物在结直肠癌早期诊断中的临床价值不够理想。因此,探索新的、早期诊断价值更高的肿瘤标志物用于结直肠癌筛查是当前研究的热点之一。SEPT9是一种抑癌基因,SEPT9基因甲基化检测对结直肠癌早期诊断有较高的特异度和灵敏度,该文就SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的研究进展进行综述。     

急性髓系白血病患者SFRP2基因甲基化的检测及临床意义

目的检测分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)基因在急性髓系白血病(AML)患者中的甲基化状态,探讨SFRP2基因启动子区甲基化状态与AML发生的关系。方法收集了99例AML患者的骨髓或外周血样本,匹配以70例门诊普通患者的外周血作为对照。采用甲基化特异性PCR(MSP)方法对所有研究样本进行SFRP2基因启动子区甲基化状况检测。结果 99例AML患者中有27例检测到SFRP2基因的甲基化,甲基化率为27.3%;而正常对照组中未检出SFRP2基因的甲基化;两者比较差异有统计学意义(P<0.001)。SFRP2基因的甲基化状态与AML的年龄、性别、临床分型及样本来源(骨髓/外周血)间均未见显著关系(P>0.05)。结论 SFRP2基因启动子区的甲基化与AML的发生有相关性,可能是引起AML的分子机制之一。外周血中的SFRP2基因的甲基化可望作为一项新的分子标记物应用于AML的临床早期检测。     

p16基因甲基化对肺癌早期诊断的临床研究

目的检测肺癌患者支气管灌洗液及全DNA中p16基因甲基化,并探讨其在肺癌早期诊断中的作用。方法利用半巢式甲基化特异性PCR技术,检测26例肺癌患者支气管灌洗液及相应全血中DNA p16基因的异常甲基化状态。结果34.6%(9/26)肺癌组织出现p16基因甲基化,出现甲基化组织对应的血液标本中88.9%(8/9)出现p16基因甲基化。支气管灌洗液中p16基因的甲基化状况与全血中是否出现p16基因甲基化关系密切(P<0.01)。结论肺癌患者支气管灌洗液及血液标本中p16基因甲基化的检测可能有助于肺癌的早期诊断。     

外周血RUNX3基因甲基化在胃癌中的临床价值

目的研究外周血人类RUNX相关转录因子(RUNX3)基因甲基化在胃癌中的临床价值。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)检测胃癌患者(GAC组)及健康者(CON组)外周血RUNX3基因启动子甲基化状态,比较两者间的差异并分析RUNX3基因启动子甲基化与临床病理因素的关系。结果 GAC组患者外周血RUNX3基因启动子甲基化率为56.0%,对照组甲基化率为4.0%,胃癌组患者甲基化率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。GAC组患者外周血RUNX3基因启动子甲基化率在性别、年龄、酗酒史、家族史、幽门螺杆菌(HP)感染和肿瘤部位中的差异无统计学意义(P>0.05),在Lauren′s分型、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者外周血RUNX3基因启动子甲基化与临床病理因素密切相关,可作为胃癌诊断、病情及预后评估的标志物。     

腺瘤样结肠息肉易感基因(APC)及结直肠癌缺失基因(DCC)基因甲基化在肺癌早期诊断的意义

目的 探讨腺瘤样结肠息肉易感基因(APC)及结直肠癌缺失基因(DCC)基因甲基化在肺癌早期诊断的意义。方法 对245例肺癌患者、150例非恶性肺病患者和40例健康志愿者抽取晨起空腹外周血,应用甲基化特异性PCR法检测APC和DCC启动子区甲基化状态。并对其与临床病理特征等进行相关性分析。结果 ①肺癌组患者外周血中APC及DCC启动子甲基化阳性率分别为26.53%(65/245)和36.33%(89/245); 非肺癌组患者外周血中APC及DCC启动子甲基化阳性率分别为2.67%(4/150)和8.00%(12/150); 健康志愿者外周血中APC及DCC启动子甲基化阳性率为0; 肺癌组与非肺癌组、健康志愿者组相比,APC和DCC基因甲基化检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。②APC及DCC基因甲基化联合检测,诊断肺癌灵敏度为52.65%,特异度为89.33%,联合检测与单独APC检测相比,敏感度与特异度差异均有统计学意义(P<0.01); 联合检测与单独DCC检测相比,敏感度有统计学差异(P<0.01),但是特异度差异不明显(P>0.05); ③甲基化检测结果与患者性别、年龄、病理类型、病理分化程度、临床TNM分期等没有相关性(P>0.05)。结论 APC和DCC基因甲基化与非小细胞肺癌的发生发展密切相关,可以作为肺癌早期诊断标志物之一。