乳腺癌及其癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

目的 通过原位观察乳腺癌及其癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖的表达,探讨其在乳腺组织恶性转化进行中的作用。方法 利用原位ＤＮＡ断裂点的３－羟基末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术,增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学染色原位观察３１例乳腺癌,２０例乳腺不典型增生,２０例乳腺单纯性增生中的细胞凋亡与细胞增殖,以８例正常乳腺组织为对照。     

乳腺癌及其癌前病变中细胞凋亡与p53、bcl-2蛋白的表达

目的：通过观察乳腺癌及其癌前病变中细胞凋亡调控基因ｐ５３、ｂｃｌ－２的表达,探讨细胞凋亡与凋亡调控基因在乳腺组织恶性转化进程中的作用。方法：利用ＤＮＡ缺口末端标记技术和免疫组织化学染色,原位观察３１例乳腺癌,２０例乳腺不典型增生和２０例乳腺单纯性增生中细胞凋亡和ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白的表达,以８例正常乳腺组织作为对照。结果：乳腺不典型增生和单纯性增生中细胞凋亡指数显著高于乳腺癌及正常乳腺组织（ｐ〉     

宫颈癌中癌基因、细胞增殖和细胞凋亡的定位观察

宫颈癌的发展缓慢且多由癌前病变发展而来。本研究采用免疫组化技术及ＤＮＡ缺口末端标记(ＴＵＮＥＬ)技术对正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变(ＣＩＮ)和宫颈鳞癌患者的手术石蜡标本进行癌基因、细胞增殖和细胞凋亡状况的检测 ,同时对该组患者的临床及病理资料进行分析。1　材料与方法1.1　材料取自上海医科大学妇产科医院 1987年 1月至1994年 12月手术石蜡标本 4 7例 ,其中ＣＩＮⅠ～Ⅱ级 8例 ,ＣＩＮⅢ级 16例 ,宫颈鳞癌 18例 ,年龄 2 9～ 73岁 ,平均 56岁。同期同年龄段正常宫颈组织 5例作对照。1.2　方法检测ｐ53、ｃ ｍｙｃ表达和ＰＣＮＡ…     

不同浓度洋地黄对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究不同浓度洋地黄对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖和凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法:取对数生长的细胞,不同浓度洋地黄处理,MTT法观察洋地黄对MDA-MB-231细胞活性、增殖的影响;Hoechst 33342染色观察洋地黄促细胞凋亡作用,细胞色素C含量及caspase 9活性变化检测线粒体损伤程度;生长曲线法观测洋地黄对细胞增殖的影响,Western blot检测细胞周期蛋白表达。结果:高浓度的洋地黄（≥100nmol/L）引起MDA-MB-231细胞凋亡,促进细胞色素C释放,增加caspase 9活性。低浓度洋地黄（30nmol/L）不引起肿瘤细胞凋亡,但是抑制细胞增殖,抑制细胞周期素D1和细胞增殖抗原PCNA的表达,增强p21cip1蛋白的表达。结论:高浓度洋地黄通过线粒体损伤通路促进乳腺癌细胞凋亡,低浓度洋地黄通过干扰细胞周期抑制乳腺癌细胞的生长。     

宫颈癌中细胞增殖和细胞凋亡的关系研究

Objective To study the relationship between cell proliferation and apoptosis in cervical carcinoma and its clinical significance.Methods The cell proliferation and apoptosis of cervical epithelial cells in archival formalin-fixed,paraffin-embedded tissue sections of normal cervix ,cervical intraepithelial neoplasms(CN) and cervical squamous carcinoma were tested by using immunohistochemistry assay and DNA nick end-labeling technigue.The proliferation index(PI) and apoptosis index(AI) were calculated and their correlation with clinical and pathological data was analyzed. Results PI was gradually increased,but the AI and AI/PI ratio decreased from normal cervical epithelium,CIN to cervical carcinoma. There was no significant relationship among cell proliferation,apoptosis,clinical stages and pathological grades.High AI was always asso-ciated with a poor prognosis of the patients. Conclusion Cell proliferation and apoptosis allow to distinguish among normal epithelium,CIN and cervical carcinoma and are useful for the assessment of the malignant potential of tumor tissues.     

bcl-2/bcl-xL反义寡核苷酸对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的　观察靶向bcl 2 /bcl xL基因的反义寡核苷酸 (ASODN )对乳腺癌细胞株MCF 7增殖和凋亡的影响。方法　将bcl 2 /bcl xLASODN及其对照序列通过脂质体转染MCF 7细胞。采用MTT法测定MCF 7细胞增殖 ,荧光显微镜定量检测MCF 7细胞凋亡率。结果　与对照序列相比 ,bcl 2 /bcl xLASODN能抑制MCF 7增殖和诱导其凋亡 (P <0 .0 1)。结论　bcl 2 /bcl xLASODN在乳腺癌治疗方面作为 1种新的化合物值得进一步研究     

乳腺癌细胞可溶性FasL分泌及其淋巴细胞凋亡的诱导

乳腺癌组织有较高的 Fas配基 ( Fas L)表达[1] ,这种表达是否可诱导机体 Fas阳性的免疫效应细胞凋亡 ,从而主动抑制机体的免疫功能 ,目前尚不清楚。作者通过检测乳腺癌细胞株 MCF- 7Fasm RNA和蛋白的表达 ,以及其对可溶性 Fas L ( s Fas L )的分泌 ,观察该细胞株对 Fas表达阳性的 J和 T细胞凋亡的诱导作用 ,从而探讨乳腺癌抑制机体免疫功能的机制。材料与方法一、材料效应细胞和靶细胞系　效应细胞为乳腺癌MCF- 7细胞系 ,靶细胞为 Jurkat白血病 T淋巴细胞,由美国新泽西洲大学任国媚博士提供 ;均在含 1 0%小牛血清的 PRMI1 640培…     

非霍奇金林巴瘤中细胞凋亡与细胞增殖的研究

目的 了解非霍奇金淋巴瘤（NHL）中细胞凋亡与细胞增殖间的关系，探讨两者在NHL发生与发展中的作用。方法 利用TdT介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法和PCNA免疫组化技术原位检测60例NHL中的细胞凋亡和增殖水平，计算凋亡指数（AI）和增殖指数（PI）。结果 B细胞性NHL中，随着恶性度增高，AI和PI均增高（P＜0．05），T细胞性NHL中高度恶性组PI明显高于低度恶性组（P＜0．05），而AI在两组之间无显著性差异（P＞0．05）。AI和PI呈显著正相关（r=0．704，P＜0．01）。结论 在NHL中细胞凋亡与增殖之间可能存在密切的联系，共同参与了NHL的发生和恶性进展。对细胞凋亡和增殖水平的检测可能有助于NHL恶性度及预后的判断。     

膜受体介导的细胞凋亡与细胞增殖

目的:观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞增殖,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞增殖的关系。方法:用肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体分别处理指数生长期的Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞;应用SubG1法和Annexin V/PI等方法通过流式细胞仪检测细胞增殖和细胞凋亡。结果:处于静止期的外周血淋巴细胞对凋亡诱导剂不敏感,凋亡率是6%~8%。Molt-4、Jurkat细胞以及加入PHA刺激的外周血淋巴细胞经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后出现了明显的细胞凋亡,凋亡率是15%~28%。经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后,进入细胞周期增殖的细胞较静止期的细胞凋亡率有明显增加。结论:膜受体介导的细胞凋亡与细胞增殖具有协同作用。     

非霍奇金淋巴瘤的细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

目的观察非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患者细胞凋亡与细胞增殖间的关系,探讨细胞凋亡在肿瘤发生发展中的作用。方法利用原位末端标记技术和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的免疫组化技术原位检测６２例ＮＨＬ中的凋亡细胞及增殖细胞的密度。结果随着ＮＨＬ恶性程度的增高,凋亡细胞数量逐渐减少,与此相反,中度恶性组及高度恶性组的增殖细胞数量明显高于低度恶性组（Ｐ＜０．０１）。结论ＮＨＬ患者不仅存在活跃的细胞增殖,而且还出现较多的凋亡细胞,随着恶性程度的增高,细胞增殖占优势,而凋亡受抑较严重,由此导致肿瘤的发生与发展。     

REGgamma基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的:探讨蛋白酶体激活因子REGgamma(REGγ)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的作用.方法:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ,通过脂质体转染将REGγ基因导入MCF-7,以G418(800mg/L)连续筛选获得稳定高表达REGγ基因的细胞株,以转染空载体和未转染细胞作为对照.分别利用MTT法及免疫细胞化学方法检测各组细胞PCNA的表达分析REGγ基因对细胞增殖的影响;以Caspase-3分光光度法及AnnexinV-FITC的流式细胞仪(FCM)来检测细胞凋亡的变化;以透射电镜(TEM)观察细胞超微结构的改变.结果:获得稳定转染且高表达REGγ的细胞株.经Western Blot检测转染REGγ基因的细胞(实验组),其REGγ蛋白表达明显高于对照组细胞(P＜0.05);未转染组、空载体组和实验组细胞的倍增时间分别为34.6、35.1、26.7h.提示实验组细胞倍增时间缩短;MTT法绘制生长曲线提示实验组细胞生长明显加速;免疫细胞化学检测PCNA结果显示,未转染组、空载体组和实验组细胞的染色灰度值分别为89.61±14.32、87.95±16.38、133.47±8.14,表明实验组细胞PCNA表达明显增强(P＜0.01);Caspase-3分光光度法检测显示,实验组细胞的OD值普遍低于对照组(P＜0.05);Annexin V-FITC的FCM检测显示,实验组细胞的凋亡率明显低于对照组(P＜0.01);TEM观察实验组细胞表现为核仁肥大,线粒体、高尔基体丰富或扩张,未见凋亡小体形成.结论:REGγ基因具有促进乳腺癌MCF-7细胞增殖并抑制其凋亡的作用.     

紫杉醇诱导乳腺癌细胞凋亡的分子生物学机制

紫杉醇具有促微管聚合及使细胞分裂停滞的作用,但这一作用并非导致人类乳腺癌细胞凋 直接原因。近年来的分子生物学研究提示紫杉醇可能通过启动了与细胞凋亡相关的倍传导通路及一系列蛋白质修饰过程而发挥细胞毒性作用。其中抗凋亡蛋白ｂｃｌ－２的磷酸化似乎起关键性作用,在其上游包括ｃ－Ｒａｆ－１和ＰＫＡ,下游还有ｃａｓｐａｓｅ３、ＰＡＲＰ等都可能参与这一诱导凋亡过程。此外ｐ３４ｃｄｃ激酶、ｐ３５和ｐ２１的介入亦有     

榄香烯乳区域动脉灌注对乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响

目的：观察中药提取物榄香烯乳术前区域动脉灌注对乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响。方法：应用末端转移酶介导的脱氧核苷酸末端标记法（TUNEL法）和增殖细胞核抗原（PCNA）、凋亡抑制基因蛋白（bcl－2）免疫组化检测方法,观察术前榄香烯乳治疗组14例和Ⅰ期手术组17例乳腺癌标本的凋亡指数,增殖指数和bcl－2蛋白表达强度的差异。结果：榄香烯乳治疗组凋亡指数（7．97±1．50）明显高于Ⅰ期手术对照组（2．26±0．49）;bcl－2蛋白表达（分值0．50±0．67）明显低于对照组（1．38±0．87）,P值均＜0．01;榄香烯乳治疗组增殖细胞核抗原指数（44．54±9．99）与对照组（42．80±6．78）差异无显著性,P＞0．05;14例术前榄香烯乳治疗组等级相关分析凋亡指数与bcl－2分值呈中度负相关（rs＝－0．508）。结论：乳腺癌患者术前区域动脉灌注榄香烯乳可降低乳腺癌细胞bcl－2基因蛋白的表达,诱导乳腺癌细胞凋亡。     

凋亡相关基因表达在乳腺癌细胞生长中的作用

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（Ｃｋｉ′ｓ）ｐ２７ｋｉｐ１是ＣＤＫ２／ＣｙｃｌｉｎＥ的抑制蛋白,不仅使细胞周期停滞于Ｇ１期,还可诱导乳腺癌细胞凋亡。我们通过体外实验,分析凋亡相关基因ｂｃｌ２基因族、ｐ２７ｋｉｐ１的表达水平与乳腺癌细胞株生物特性的关系,探讨在阿霉素作用后其基因或蛋白产物表达水平的变化。材料与方法　应用体外细胞培养、细胞爬片技术,采用免疫组化、Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ方法检测不同ＥＲ状态人乳腺癌细胞株ＭＣＦ７、ＭＤＡＭＢ２３１中ｂｃｌ２、ｂａｘ、ｐ２７ｋｉｐ１、ＰＣＮＡ蛋白表达…     

癌前病变Caspase-3表达下调与胃黏膜癌变的关联

目的观察Caspase-3蛋白在胃癌及其癌前病变组织中的表达,分析它与细胞凋亡和细胞增殖的关系,探讨Caspase-3蛋白在胃癌发生过程中的生物学意义及相关分子病理学机制。方法选取184例胃黏膜活检和手术切除组织标本,其中胃癌20例,慢性萎缩性胃炎6例,萎缩性胃炎伴肠上皮化生(简称肠上皮化生)31例,萎缩性胃炎伴不典型增生(简称不典型增生)114例;正常对照13 例。采用SABC法检测Caspase-3蛋白的表达;通过图像域值分析计算其阳性指数,分析其与细胞增殖(Ki67蛋白阳性指数)和凋亡(TUNEL指数)的相关关系。结果 Caspase-3蛋白在重度不典型增生组织中的阳性指数(29．8％±3．9％)显著低于轻度(58．3％±4．2％)和中度不典型增生(50．4％± 4．8％)及萎缩性胃炎(68．3％±3．3％)或肠上皮化生(70．9％±4．3％),差异有统计学意义(P<0．05); 而与胃癌(26．9％±3．0％)相比,差异无统计学意义(P>0．05)。Caspase-3蛋白表达与细胞凋亡呈显著正相关(r=0．94,P<0．05),Caspase-3蛋白阳性组细胞增殖指数(18．3％±2．2％)显著低于阴性组(48．9％±3．1％;P<0．05)。结论 Caspase-3蛋白在萎缩性胃炎、肠上皮化生和(或)轻中度不典型增生黏膜中表达上调,而在重度不典型增生及胃癌组织中表达下调,且这种变化与细胞凋亡呈显著正相关。Caspase-3失活或表达下调相关的细胞凋亡和增殖紊乱可能在胃黏膜损伤及癌变过程中起某种作用。     

NK/T细胞淋巴瘤细胞凋亡和细胞增殖特征及意义

Objective:The aim was to study the features and clinical significance of cell apoptosis and proliferation of NK/T cell lymphoma.Methods:TdT-mediated dUTP nick end labeling and immunohistochemical Streptavidin-peroxidase method were used to study cell apoptosis and the expression of proliferation cell nuclear antigen in 25 NK/T cell lymphoma and 10 reactive lymphoid tissues.Results:Apoptotic index(AI) and proliferative index(PI) averaged(1.92%±0.86%) and(41.48%±5.10%) respectively in the 25 NK/T cell lymphom...     

丹参酮ⅡA对乳腺癌细胞的影响及其分子机制

目的 观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制.方法 选取处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞,设对照组(0μg/ml TanⅡA)和处理组(0.25、0.50、0.75μg/ml TanⅡA),处理MCF-7细胞48 h.MTT法检测各组MCF-7细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测各组MCF-7细胞的凋亡率,Western Blot和RT-PCR分别检测各组MCF-7细胞中p53、Bcl2的蛋白和mRNA表达水平.结果 与对照组比较,不同剂量TanⅡA处理组的MCF-7细胞增殖抑制率升高(P﹤0.05),且呈剂量-时间依赖性;随着TanⅡA作用剂量的增加,MCF-7细胞的凋亡率逐渐增大,均高于对照组(P﹤0.05).与对照组比较,0.75μg/ml TanⅡA处理组的p53蛋白表达升高,Bcl2蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P﹤0.05);与对照组比较,0.75μg/ml TanⅡA处理组的p53 mRNA表达水平增加,Bcl2 mRNA表达水平降低,分别为对照组的4.88倍和0.42倍(P﹤0.05);0.75μg/ml TanⅡA处理组的p-AKT蛋白表达水平(0.866±0.015)低于对照组的p-AKT蛋白表达水平(1.000±0.020),差异有统计学意义(P﹤0.05).结论 TanⅡA对乳腺癌MCF-7细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用,其凋亡作用与p53和Bcl2蛋白的表达有关,其抗凋亡机制与p-AKT信号通路有关.     

沙立度胺抑制乳腺癌细胞增殖的体外实验

背景与目的:观察沙立度胺对体外乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231的抑制作用,以及对细胞凋亡细胞周期的影响.材料与方法:经不同浓度(10μg/ml、50 μg/ml、100 μg/ml.、200 μg/ml)的沙立度胺处理MCF-7和MDA-MB-231细胞不同时间(24 h、48 h、72 h)后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活和生长情况,分析量效关系、时效关系.采用流式细胞仪检测沙立度胺对细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:在10～200μg/ml浓度范围,沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖均有抑制作用(P＜0.01＝.在药物作用48 h后,对各组细胞的抑制率均达到高峰,尤以100μg/ml浓度组抑制率最高.沙立度胺作用后的乳腺癌细胞在流式细胞分析图上见细胞凋亡峰(亚G1峰),100μg/ml沙立度胺作用48 h后,MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡率分别为9.66%和11.18%,与对照组凋之率比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:沙立度胺对MCF-7和MDA-MB-231细胞的体外增殖具有明确抑制作用,并可诱导细胞凋亡.     

胃癌及癌前病变细胞增殖和凋亡与bcl-2/bax表达的关系

目的：观察细胞凋亡和增殖及其调控基因在胃癌及癌前病变发生发展过程中的异常变化,探讨细胞凋亡在胃癌演变中的作用。方法：对１２８例胃癌及癌前病变患者和正常人,采用原位末端标记法（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｌｙ ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｌａｂｅｌｌｉｎｇ,ＴＵＮＥＬ）及免疫组化技术检测胃粘膜上皮细胞凋亡、增殖及ｂｃｌ－２／ｂａｘ表达。结果：正常人、浅表性胃炎、萎缩性胃