大黄酰缬氨酸对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用与放射增敏作用研究

目的:研究大黄酰缬氨酸对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用和放射增敏活性。方法:不同浓度大黄酰缬氨酸(0、6.03、18.09、54.28、162.85、488.56、732.84、1 465.68μmol/L)作用于Hela细胞24、48 h后采用MTT法测定细胞活力,计算抑制率、半数抑制浓度(IC50)与20%抑制浓度(IC20)并绘制浓度-抑制率曲线。试验分为模型(等容培养液)6组与大黄酰缬氨酸(30μmol/L)6组,培养细胞24 h后分别接受0、1、2、4、6、8 Gyγ射线照射(剂量率:0.78 Gy/min),再继续培养24 h,绘制照射剂量-存活比曲线,计算N(外推数)、D0(平均致死剂量)、SF2(单次照射2 Gy的细胞存活比)、SER(模型组D0与用药组D0之比或模型组SF2与用药组SF2之比)。结果:54.28、162.85、488.56、732.84、1 465.68μmol/L大黄酰缬氨酸作用24 h时和6.03、18.09、54.28、162.85、488.56、732.84、1 465.68μmol/L大黄酰缬氨酸作用48 h时均可明显抑制细胞活力;其对宫颈癌He La细胞的抑制作用呈剂量依赖性,IC50分别为179.423μmol/L(24 h)和84.192μmol/L(48 h),IC20分别为52.943μmol/L(24 h)和30.505μmol/L(48 h)。与模型组比较,大黄酰缬氨酸组细胞N、D0、SF2降低,SER升高。结论:大黄酰缬氨酸体外能明显抑制Hela细胞生长,增加Hela细胞的放射敏感性。     

姜黄素对鼻咽癌抗拒株的放射增敏作用及其机制研究

目的探讨姜黄素对放射诱导产生的鼻咽癌抗拒株CNE-2R的放射增敏作用及其机制。方法通过MTT实验筛选姜黄素的最佳浓度;对克隆生存实验结果进行L-Q拟合和单机多靶拟合,计算相关放射生物学参数;再通过流式细胞术检测细胞周期的改变;最后通过RT-qPCR实验检测细胞周期及DNA损伤修复相关基因的表达情况。结果浓度在10μmol·L~(-1)的姜黄素对CNE-2R细胞无明显抑制作用。给药后抗拒株CNE-2R的α/β值从6.56增加到1 596;SF2从1.93 Gy减少到0.361 Gy;N值从1.60减少到1.06;D0值从3.27减少到2.12;Dq值从1.53减少到0.12。细胞周期G2期明显增多,G1期稍微减少,S期明显减少。CDK4基因的表达明显上调,GADD45 g、BRCA1基因的表达明显下调。结论姜黄素通过调控GADD45 g、CDK4、BRCA1基因的表达,改变CNE-2R的细胞周期和影响DNA损伤修复,发生G2期阻滞,从而增加了抗拒株的放射敏感性。     

姜黄素对宫颈癌放射增敏的研究进展

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,其发病率仅次于女性乳腺癌,居第二位,其病死率已跃居妇科恶性肿瘤之首。放射治疗是中晚期宫颈癌的主要治疗手段,但由于宫颈癌对辐射中低度敏感,想达到满意的疗效需提高宫颈癌对辐射的敏感性。近年来,姜黄素因具有提高肿瘤放射敏感性的特性而引起了国内外学者的广泛关注。多项体外实验证实姜黄素对宫颈癌具有抑制及放射增敏作用,本文就其对宫颈癌放射增敏机制进行了归纳总结。现将此方面的研究进展进行综述。     

小剂量紫杉醇对乏氧Hela细胞放射敏感性影响的研究

目的探讨紫杉醇对正常和乏氧状态下人宫颈癌细胞Hela的放射增敏作用。方法细胞乏氧模型、细胞放疗、采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）快速比色法检测细胞增殖率;结果不同浓度的紫杉醇作用于乏氧和正常状态下的Hela细胞,均表现出增殖抑制作用,且呈浓度依赖性,乏氧状态下的Hela细胞增殖率明显大于正常状态下的细胞,两者相比差异有统计学意义（P〈0.05）,说明乏氧细胞可对对化疗药物表现出一定的抵抗作用。小剂量的紫杉醇（1×10-3mg/L）可增加正常和乏氧状态下的He-la细胞对放射线的敏感性,其增殖率分别为（19.67±5.06）%、（12.38±3.55）%,且两者相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论乏氧细胞对化疗药物有一定的抵抗作用;紫杉醇对乏氧及正常状态下的Hela细胞均有抑制作用,且呈现浓度依赖性;小剂量的紫杉醇对乏氧状态下的Hela细胞具有放射增敏作用。     

吉西他滨对人胰腺癌细胞系BxPC-3的放射增敏作用

目的 探讨吉西他滨对人胰腺癌细胞系BxPC-3的细胞毒性、放射增敏作用.方法 用MTT法测定吉西他滨对BxPC-3细胞生长的作用,集落形成法观察其对BxPC-3细胞的放射增敏作用,流式细胞术分析吉西他滨作用后细胞周期及凋亡变化,免疫细胞化学染色观察Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 占西他滨对BxPC-3细胞具有浓度依赖性抑制作用(IC50-106 μg/ml),选择浓度为IC10(0.04μg/ml),可增加X射线对BxPC-3的杀伤作用,放射增敏比SER为1.15.药物浓度为0.04μg/ml时S期细胞比例增高.吉西他滨作用24 h后,细胞Bax表达增加,而Bcl-2表达下降.结论 吉西他滨对人胰腺癌BxPC-3细胞系有细胞毒性作用和一定的放射增敏作用;其机制可能与吉西他滨引起S期阻滞和调节凋亡相关基因的表达有关.     

放射增敏剂IPdR的作用机制及研究进展

目的： 对放射增敏剂5-碘-2-嘧啶酮-2''脱氧核糖（IPdR）进行综述，为放射增敏剂提供研发思路及参考。方法： 通过查阅国内外相关文献，分析IPdR理化性质、作用机理及其作为放射增敏剂的优势，总结IPdR的药效和毒理学研究结果以及Ⅰ期临床的最新进展，对Ⅱ期临床试验的开展及安全评估方案进行展望。结果与结论： IPdR作为IUdR（5-碘-2''去氧尿苷）的前体化合物，是一种卤代核苷类似物，可通过口服进入人体。血液中的IPdR在醛氧化酶的作用下，逐渐转化为能够发挥药效的IUdR，进而与肿瘤细胞的DNA结合，提高了病灶组织的放射敏感性，从而发挥药效。根据前期药效和毒理学数据发现，IPdR作为放射增敏剂效果良好，具有可口服、毒性较低的特点。目前该药物已经完成I期临床，即将开展Ⅱ临床试验，有望成为一种新型的口服放射增敏药物。     

吡柔比星在骨肉瘤细胞放射增敏中的作用研究

目的研究吡柔比星在骨肉瘤细胞MG-63的放射增敏中的作用。方法用MTF法检测不同浓度吡柔比星对对数生长期的MG-63细胞的抑制作用,确定IC10的数值,作为实验的药物浓度。用克隆形成分析法测定MG-63细胞在IC10浓度吡柔比星作用24h后给予不同剂量（0、2、4、6、8Gy）照射以及IC10浓度紫杉醇作用不同时间（12、24、36h）后给予一定剂量射线照射的存活分数（SF）,拟合细胞生存曲线并计算放射增敏比,分析吡柔比星作用于MG．63细胞不同时间（12、24、36h）后细胞生存率的变化。结果不同浓度吡柔比星作用24h后,MG-63细胞抑制率逐渐增高（P〈0．01）,其药物毒性呈浓度依赖性,IC10为0．004μg／ml。ICIO浓度吡柔比星增敏比分别1．49（DO比）、1．06（Dq比）和1．04（SF2比）,MG石3细胞a／13值为2．23,IC10浓度吡柔比星作用后为0．27。ICIO浓度吡柔比星作用于MG-63细胞不同时间后再进行照射,细胞存活分数随时间延长逐渐降低（P〈0．01）。结论吡柔比星对MG-63细胞有放射增敏作用,在一定时间内与药物作用时间呈正相关。     

塞来西布对食管癌ECA-109细胞系放射增敏效应的研究

目的：了解环氧化物酶-2（COX-2）选择性抑制剂——塞来西布对食管癌ECA-109细胞系的放射增敏作用。方法：选择ECA-109细胞系作为试验对象,检测ECA-109细胞系的COX-2表达水平,设塞来西布0.25、50、100μmol/L4个实验组,分别予6MV-X线照射0、2、4、6Gy后,再分别行MTT比色试验、克隆形成实验、流式细胞仪计数,检测细胞的增殖能力、克隆形成能力及凋亡3项指标。结果：不同辐射剂量与不同浓度的塞来西布对ECA-109细胞的增殖、凋亡率作用有统计学差异（P〈0.05）,塞来西布与放射对ECA-109细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用随塞来西布的浓度和照射剂量的增加而增强;塞来西布联合放射对ECA-109细胞的存活率、D0值和Dq值作用均小于单纯放射组,Dq变小;塞来西布和4Gy（6MV-X）联合用于ECA-109细胞其凋亡率有统计学差异（P〈0.05）。结论：塞来西布能抑制ECA-109细胞增殖,诱导其凋亡。塞来西布与放射联合应用对ECA-109细胞的增殖抑制、诱导凋亡有协同增强的作用。     

Z—A衍生物的放射增敏作用

据统计,70％的肿瘤患者最终都需要进行放射治疗,但放疗由于肿瘤本身血运差乏氧等内在规律,而影响着放疗的疗效,寻找有效的放射增敏药剂成为有效和重要的一种手段。我们选用Z-A类衍生物对小鼠进行了较详细的放射增敏研究,以期找到一种对临床放疗有效的药物。 1.材料和方法 Z-A类药物系生化类制剂,由加拿大国立癌症研究院提供,白色粉末易容于水,化学性质稳定,分子量为214.1经我们测试:LD_(so)为:1486mg/kg,以无菌性注射用水配成500mg/ml的工作值,小鼠照射前50分钟行腹腔注射,注射剂量LD1/5用药后未发现小鼠有神经毒症状。     

丹参酮ⅡA衍生物的合成与放射增敏活性测定

目的对丹参酮ⅡA进行结构修饰,以期得到放射增敏效果较好的衍生物。方法通过曼尼希反应在丹参酮ⅡA的16位引入不同的小分子胺,通过EI MS、1HNMR确证化合物结构,通过噻唑蓝（MTT）法测定其对Hela细胞的半数抑制浓度（IC50）及20%抑制浓度（IC20）值,初步评价几种衍生物的放射增敏活性。结果得到丹参酮的5个化合物,其中4个未见文献报道。其中3个进行了放射增敏活性测定,发现在16位引入芳香环的衍生物C5放射增敏效果增强。结论在16位引入芳香环可能是提高药物放射增敏活性的一种方式。     

中药安迪粉针剂的放射增敏作用

目的 探讨安迪粉针剂(Andi)增强电离辐射生物学效应的作用机理。方法 以人食管癌细胞株(ECA l09)为观察对象，采用电镜、流式细胞仪分析、台盼兰染色等方法，分别观察对照、Andi、^60Co—γ线照射和Andi 照射4个组对ECA 109细胞的形态、细胞周期、细胞凋亡和坏死等的影响；并采用改良硫代巴比妥酸荧光法测定丙二醛(MDA)；羟胺法测定超氧化物歧化酶(SOD)。结果 在乏氧条件下，Andi能引起ECA 109细胞坏死(P＜0．05)，并增加MDA含量(P＜0．05)；而Andi 照射组的作用比单用Andi和单纯照射明显增强(F＝6．53，P＜0．01)；从Andi、照射、Andi照射3个组的光镜和电镜结果发现，ECA l09癌细胞明显变性、坏死、凋亡，但以Andi 照射组的改变更显著；电镜显示Andi组有较多ECA l09细胞存在糖原颗粒堆积。结论Andi可以引起乏氧ECA 109细胞的糖代谢障碍，增加细胞内自由基的产生，引起细胞坏死；Andi与^60Co—γ线合用能进一步促进乏氧细胞坏死，具有协同作用；Andi放射增敏作用的机理可能与其促进癌细胞内自由基产生或影响癌细胞糖代谢有关。     

左旋紫草素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及其作用机制

目的探讨左旋紫草素(shikonin,SHK)联合顺铂(cisplatin,CDDP)对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及作用机制。方法采用CCK-8法分别测定不同浓度的顺铂、紫草素和紫草素联合顺铂溶液对宫颈癌Hela细胞增殖的活性抑制作用;流式细胞仪测定紫草素联合顺铂后诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的情况;Western blot检测Caspase-3蛋白表达情况。结果左旋紫草素对宫颈癌Hela细胞有抑制作用,24 h与48 h的IC50分别为1.05和0.89 mg·L~(-1)。紫草素联合顺铂作用于Hela细胞48 h后,细胞数量明显变少,胞体变圆,缩小,出现明显的细胞凋亡现象;不同浓度的紫草素联合顺铂作用于Hela细胞,24 h/48 h的IC50值(0.15 mg·L~(-1)SHK+CDDP 2.82 mg·L~(-1)/1.87 mg·L~(-1);0.3 mg·L~(-1)SHK+CDDP 2.43 mg·L~(-1)/1.52 mg·L~(-1);0.6 mg·L~(-1)SHK+CDDP 2.01 mg·L~(-1)/1.23 mg·L~(-1))明显低于顺铂(CDDP 3.54 mg·L~(-1)/2.78 mg·L~(-1))的IC50值,具有显著性差异(P<0.05);用流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,随着紫草素浓度的增大,紫草素联合顺铂(1.2 mg·L~(-1)SHK+CDDP总凋亡率15.6%)细胞凋亡比率增高,与对照组顺铂(CDDP总凋亡率3.7%)相比,具有显著性差异(P<0.05)。0.3、0.6、1.2 mg·L~(-1)紫草素+顺铂分别作用Hela细胞48 h后,Western blot结果显示,Caspase-3随着紫草素浓度的增加,出现了明显的裂解活化,促进了凋亡。结论紫草素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞有明显的抑制作用,其抑制作用与促进Hela细胞凋亡有关。     

放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究

研究目的：9402号是以烟酰胺为母体化合物合成的烟酰氨基酸类化合物，其放射增敏作用比母体化合物烟酰胺效果更好，而且毒性更低。为了观察9402号对正常组织是否有增敏作用，我们研究了9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞的增敏作用。材料与方法：实验动物：昆明种小鼠，由中国医学科学院实验动物研究所提供，体重18-22g。许可证号：SCXK京2004—0001。药物：9402号药（N-烟酰基-L-天门冬氨酸），为白色块状晶体，含量大于99％，熔点182～191℃。由中国医学科学院放射医学研究所药物室合成。照射条件：60Coγ射线，全身照射，剂量率81．79cGy／min。给药及实验分组：实验分为单纯照射组，加药照射组和正常对照组。     

天花粉蛋白对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗增敏作用

目的 观察天花粉(TCS)联合顺铂对宫颈癌HeLa细胞的化学治疗(化疗)增敏作用,并探讨其作用机制。方法 细胞计数检测试剂盒(CCK8)法检测TCS、顺铂单独或联合用药对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响;CompuSyn软件分析TCS联合顺铂的联合用药指数(CI值);细胞划痕实验与Transwell法检测药物对细胞迁移的影响;流式细胞术检测药物对细胞凋亡的影响;蛋白印迹法检测药物对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果 TCS与顺铂均能抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,TCS+顺铂抑制作用更强,TCS对顺铂增敏指数为3.04;不同浓度TCS联合顺铂作用HeLa细胞48 h后,CI值均<1,且具有浓度依赖性(P<0.05);细胞划痕实验与Transwell法实验中,TCS+顺铂较TCS或顺铂单独给药能更明显抑制HeLa细胞迁移(P<0.05);流式细胞术中,与TCS或顺铂单独给药相比,TCS+顺铂可增加HeLa细胞凋亡比例(P<0.05);蛋白印迹实验中,与TCS或顺铂相比,TCS+顺铂可上调促凋亡蛋白Bax、c-PARP表达,下调凋亡抑制蛋白Bcl-2表达(P<...     

大黄素型羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响

目的:研究大黄中活性成分大黄素型羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制和体外放射增敏活性。方法:MTT法测定大黄素型羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制活性,集落形成实验测定各化合物对HeLa细胞的放射增敏活性,单靶多击模型拟合剂量存活曲线,计算放射生物学参数和放射增敏比。结果:大黄素、大黄酸、芦荟大黄素、大黄酚对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用呈剂量依赖性,其半数抑制浓度(IC50)值分别为262.1、79.9、59.6、435.6μmol·L-1;集落形成实验结果显示,给药合并照射组细胞存活分数低于单纯照射组,芦荟大黄素、大黄酸对宫颈癌HeLa细胞体外放射增敏比分别为1.84和1.13。结论:芦荟大黄素等羟基蒽醌类化合物对宫颈癌HeLa细胞具有较为明显的生长抑制活性,并且对宫颈癌HeLa细胞具有放射增敏活性。     

蝎毒的放射增敏实验研究

目的 探讨蝎毒对放疗的增敏效应及其作用机制。方法 将Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞接种于ＮＩＨ小鼠右后肢外侧皮内，当肿瘤平均直径达到６ｍｍ左右时开始实验，观察蝎毒（０．６ｍｇ／ｋｇ）、放疗（４Ｇｙ）及其联合治疗组的肿瘤倍增时间（ＭＤＤＴ）、生存时间（ＡＳＴ）、病理改变和细胞凋亡变化。结果 对照组、蝎毒组、放疗组和蝎毒→放疗组的ＭＤＤＴ分别为（１０．２±０．３４）ｄ、（１１．５±０．３８）ｄ、（１３．７±０．４２）ｄ和（１６．１±０．５３）ｄ，各治疗组均可延长荷瘤小鼠生存期，引起肿瘤组织的坏死，诱发细胞凋亡，联合治疗效果更为突出。结论 蝎毒对荷Ｌｅｗｉｓ肺癌的ＮＩＨ小鼠瘤体不仅有抑制或杀伤作用，而且对放疗有增敏作用。诱发细胞凋亡是其抗肿瘤的主要机制之一。     

检测细胞周期分布的改变以探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制

目的 检测细胞周期分布的改变以探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.方法 实验分对照组、单纯加热组、单纯照射组和联合处理组.采用流式细胞仪分析G2/M期分布比例及凋亡百分比,Western-Blotting检测CyclinB1的表达,改良的荧光染色法观察核碎片形态.结果 联合处理组G2/M期分布比例较高,CyclinB1表达较高,并产生更多的核碎片,放射诱导的凋亡百分比并不增加.结论 G2/M期分布比例增高,CyclinB1表达增加是温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.     

检测细胞周期分布的改变以探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制

目的 探讨温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.方法 实验分4个组,对照组、单纯加热组、单纯照射组和联合处理组.采用流式细胞仪分析G2/M期分布比例及凋亡百分比,Western-Blotting检测CyclinB1的表达,改良的荧光染色法观察核碎片形态.结果 联合处理组G2/M期分布比例较高,CvclinB1表达较高,并产生更多的核碎片,放射诱导的凋亡百分比并不增加.结论 G2/M 期分布比例增高,CyclinB1表达增加是温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射增敏作用的机制.     

洛铂对宫颈癌细胞放射敏感性的影响及其机制

目的：观察洛铂对人宫颈癌细胞（Hela细胞）放射敏感性的影响,并初步探讨其机制。方法将体外培养的Hela细胞分为空白组、低浓度洛铂组、高浓度洛铂组、空白＋照射组、低浓度洛铂＋照射组、高浓度洛铂＋照射组,单次照射6 Gy,比较各组细胞的存活情况,并通过流式细胞术检测和比较各组细胞的凋亡情况及细胞周期分布。结果洛铂对Hela细胞生长有抑制作用。空白组、低浓度洛铂组、高浓度洛铂组细胞的D0值分别为1.76、1.42、0.86 Gy（F=4006.0,P=0.00）,Dq值分别为1.99、1.37、0.92 Gy（F=3087.0,P=0.00）,α值分别为0.085、0.254、0.262 Gy-1（F=614.6,P=0.00）,β值分别为0.0652、0.181、0.234 Gy-2（F=1342.1,P=0.00）。空白组、低浓度洛铂组、高浓度洛铂组、空白＋照射组、低浓度洛铂＋照射组、高浓度洛铂＋照射组的细胞凋亡率分别为（1.10±0.01）％、（1.01±.006）％、（2.32±0.03）％、（2.87±0.008）％、（2.96±0.02）％、（4.38±0.01）％（F=23.1,P=0.00）。洛铂可以阻滞细胞于G2/M期。结论洛铂对人宫颈癌细胞有放射增敏作用,其机制可能与促进细胞凋亡有关。