锌转运体8自身抗体的放射配体检测法

目的建立锌转运体8自身抗体（ZnT8A）的放射配体检测法（RLA）。方法采用重组人ZnT8质粒,经试管内转录与翻译,获得“S-ZnT8抗原,35S-ZnT8与血清在自制旋转孵育器上旋转温育后,用蛋白A-琼脂糖沉淀免疫复合物。免疫复合物经TBST缓冲液洗涤后,用多功能闪烁发光分析仪检测沉淀物放射性计数值。参加国际糖尿病免疫学会（IDS）和美国疾病预防控制中心联合举办的第六次糖尿病自身抗体国际标准化评估（DAsP2009）,评价该方法的敏感性和特异性。检测429例1型、855例2型糖尿病患者以及405例正常人ZnT8A水平,初步评价其临床应用价值。结果该方法批内CV3．9N～9．8N,批间CV4．3％～13．8％;DASP2009显示,该方法敏感性66％,特异性100％。受试者操作特性曲线（ROC）分析显示,曲线下面积为0．879±0．034;该方法阳性阈值ZnT8A指数为0．011（405名正常人的99％百分位点）,检测1型糖尿病患者阳性率24．0％,高于初诊2型糖尿病患者1．3％和健康人0．99％（P均do．01）。结论建立的RLA法检测ZnT8A敏感性高、特异性强、重复性好,可应用于自身免疫糖尿病的诊断与分型。     

中老年糖尿病患者胰岛自身抗体检测的意义

目的探讨谷氨酸脱羧酶抗体（GAD—Ab）和SOX13抗体（SOX13-Ab）在／〉50岁糖尿病患者中的分布规律及其与胰岛功能的关系。方法检测211例≥50岁糖尿病患者GAD—Ab和SOX13-Ab,分析两种抗体在不同病程、体质指数（BMI）及空腹C肽（FCP）组的阳性率,比较抗体阳性与阴性患者的临床特征。结果①单独GAD—Ab与单独SOX13-Ab阳性率（9．0％与9．9％）之间无显著差异,但均显著高于抗体双阳性者（0．9％,P〈0．05）;②SOX13-Ab单一阳性组病程显著低于抗体阴性组,而GAD—Ab单一阳性组病程显著高于抗体阴性组（P均〈0．05）;③不同病程（〈5、≥5年）范围内,GAD—Ab单一阳性组FCP、2hPCP显著低于抗体阴性组（P〈0．05）,而SOX13-Ab单一阳性组FCP、2hPCP与抗体阴性组无显著差异。结论中老年糖尿病患者GAD—Ab与SOX13-Ab分布的重叠性低,联合检测有助于分型诊断;这两种抗体对中老年糖尿病患者胰岛功能的影响程度不同,此可能部分解释了中老年糖尿病患者胰岛功能的异质性。     

SOX13抗体对急性起病自身免疫糖尿病的诊断意义

目的探讨SOX13抗体(SOX13Ab)对急性起病自身免疫糖尿病的诊断价值。方法162例急性起病糖尿病患者根据谷氨酸脱羧酶抗体(GADAb)和蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA2Ab)阳性与否分为经典[GADAb和(或)IA2Ab阳性]和非经典1型糖尿病(DM)(GADAb和IA2Ab均阴性)两亚组,正常对照组120名,分析SOX13Ab分布规律、该抗体阳性患者临床特征及其对胰岛功能的影响。结果(1)急性起病组和经典1型DM亚组SOX13Ab阳性率均高于正常对照组(9.3%vs2.5%,9.9%vs2.5%;均P<0.05);SOX13Ab( )/GADAb( )双阳性者6例(3.7%),无1例SOX13Ab( )/IA2Ab( )双阳性者;(2)SOX13Ab分布峰值处于发病年龄61～70岁;(3)SOX13Ab单一阳性组临床特征(包括代谢综合征相关指标异常程度等)与GADAb、IA2Ab单一阳性和抗体阴性组间差异无统计学意义(P>0.05);(4)SOX13Ab单一阳性组C肽介于GADAb、IA2Ab单一阳性和抗体阴性组之间。结论SOX13Ab检测可提高诊断急性起病自身免疫糖尿病的敏感性。     

酪氨酸磷酸酶抗对LADA诊断意义

对122例起病年龄≥25岁，起病半年内无酮症的Ⅱ型糖尿病患及50例正常人用放射配体进行谷氨酸脱羧酶抗体（GAD65－Ab)、酪氨酸磷酸酶抗体（IA2－Ab）的检测及胰岛功能测定。二种抗体在糖尿病组的阳性率分别为21．3％（26／122）及5．7％（7／122）。IA2－Ab的阳性率在糖尿病组与正常组无显性差异（P＞0．05），且7例阳性中仅1例单独存在。结论：在LADA的诊断中，酪氨酸磷酸酶的检测需与其它胰岛细胞自身抗体结合进行。     

1型糖尿病患者的临床特点和多种胰岛自身抗体检出情况

目的分析1型糖尿病（T1DM）患者多种胰岛自身抗体的检出情况和不同类型T1DM的临床特征。方法选取2010年11月至2011年11月在中日友好医院住院的67例T1DM患者,分析其临床特征及胰岛细胞抗体（ICA）、胰岛素抗体（IAA）、谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）[酶联免疫吸附试验（ELISA）法和免疫沉淀法（RIP）检测]、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA2A）和锌转运蛋白8抗体（ZnT8A）等6种胰岛自身抗体情况。结果本组T1DM共67例,其中经典型T1DM53例,成人迟发性自身免疫糖尿病（LADA）12例和暴发性1型糖尿病（FT1D）2例。起病年龄2～77岁,体质指数（BMI）（22±4）kg／m2,糖化血红蛋白（HbAlc）9．7％±2．4％,空腹C肽（0．3±O．4）μ／L。GADA（ELISA）阳性51例（76．1％）,GADA（RIP）阳性35例（52．2％）,IA2A阳性19例（28．3％）,ZnT8A阳性16例（23．9％）,IAA阳性16例（23．9％）,ICA阳性10例（14．3％）。前4种抗体检测方法至少1种阳性者共56例（83．6％）。51例ELISA法GADA阳性包括了35例RIP检测GADA阳性中的33例、19例IA2A阳性中15例及16例ZnT8A阳性中的14例。经典1型糖尿病在发病初至半年内需要胰岛素治疗,而LADA平均在发病3．9年后需要胰岛素治疗。2例FT1D患者起病急,发病时血糖分别为41．1和23．1mmol／L,HbAlc分别为7．8％和6．5％,空腹及餐后血C肽均小于0．03μg／L或不能测出。结论ELISA检0n．0GADA对1型糖尿病的诊断有较高敏感性,联合多种抗体检测对T1DM诊断作用有限。FT1D起病急骤,代谢紊乱更为严重。     

蛋白酪氨酸磷酸酶2自身抗体微量平板放射结合检测法的建立与临床应用

目的建立蛋白酪氨酸磷酸酶2自身抗体（IA-2A）的微量平板放射结合检测法（RBA）,并初步评价其临床应用价值。方法经纯化的^35S-IA-2抗原与血清在96孔V形底平板中缓慢振荡孵育24h,而后转入已包被蛋白A的Millipore平板中,洗涤后采用多功能液体闪烁发光仪计数。检测162例1型糖尿病（T1DM）患者、210例新诊2型糖尿病（T2DM）患者和224名健康者血清中IA-2A浓度,初步评价其临床应用效果。结果（1）该法检测IA-2A批内CV4．1％～10．0％,批间CV5．7％～12．8％。（2）国际第4次糖尿病自身抗体检测标准化评估回报结果显示,其灵敏度为72％,特异度为98％。与放射配体法（RLA）结果判定一致率为96．5％,检测值呈显著正相关（r=0．962,P〈0．01）。（3）IA-2A在T1DM患者中阳性率为22．8％,明显高于健康者的0．89％（P〈0．01）;在T2DM患者中阳性率为2．4％,与健康者相比差异无统计学意义。（4）该法检测指血IA-2A与RLA法检测静脉血结果判定一致率为100％。结论微量平板RBA法灵敏度、特异度、重复性好,能适用于末梢血IA-2A检测,具有较好的临床应用价值。     

谷氨酸脱羧酶抗体诊断成人隐匿性自身免疫性糖尿病探讨

采用放射配体法检测谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ６５）抗体，对１９５例≥３５岁非酮症Ⅱ型糖尿病起病半年以上者和４５例正常对照者的观察表明：本组Ⅱ型糖尿病者ＧＡＤ６５抗体阳性率为１４．８％，高于正常对照者的２．２％；发病年龄〈４０岁、有酮症史、体重指数（ＢＭＩ）〈２１ｋｇ／ｍ＾２、空腹血清Ｃ肽〈０．３ｎｍｏｌ／Ｌ和（或）胰升糖素刺激后６分钟血清Ｃ肽〈０．６ｎｍｏｌ／Ｌ者，ＧＡＤ６５抗体阳性率均高于相应对照组（     

血清三抗体及C肽检测对成人迟发型糖尿病诊断的意义

目的探讨谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）、胰岛素自身抗体（IAA）、胰岛细胞抗体（ICA）和血清C肽检测对诊断成年迟发型糖尿病（LADA）的意义。方法对初诊为糖尿病的N0例患者进行血清GADA、IAA、ICA以及空腹和餐后C肽检测，并对抗体阳性及阴性患者的C肽水平进行比较。结果三抗体检测为阳性者58例，GADA阳性者21例（36．2％），ICA阳性者14例（24．1％），IAA阳性者6例（10．3％），双抗体阳性者15例（25．9％），三抗体阳性者2例，（3．4％）。抗体阳性患者的空腹和餐后C肽明显低于抗体阴性患者，双抗体和三抗体阳性患者的空腹和餐后C肽低于单抗体阳性患者，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论三抗体检测有助于在初诊糖尿病患者中筛选LADA，对其早期诊断具有重要意义。     

检测65KD热休克蛋白抗体对Ⅰ型糖尿病诊断的意义

利用卡介苗（BCG）65KD热休克蛋白作为抗原，ELISA法检测Ⅰ型糖尿病患者血清中64KD抗体。对30例Ⅰ型糖尿病、30例Ⅱ型糖尿病、5例系统性红斑狼疮（SLE）、8例甲状腺机能亢进（甲亢）的患者及44例健康人血清进行检测。结果表明，64KD抗体在Ⅰ型糖尿病中的检出率为83．3％，在Ⅱ型糖尿病中的检出率为13．3％，在SLE及甲亢中均为阴性，健康人仅1例阳性。此方法的批内变异系数为4．57％～8．62％，批间变异系数为5．57％～12．7％。诊断特异性为94．6％，诊断敏感性为83．3％，诊断指数为177．9％。     

抗人肝癌铁蛋白抗体对原发性肝癌的放射免疫显像

应用^131I标记的抗人肝癌铁蛋白抗体对16例原发性肝癌作放射免疫显像分析，其阳性离为81．3％（13／16）。其中经肝动脉插管注射者8例，阳性率为100％（8／8）。注射后当天断层摄影（SPECT）即可获得阳性显像，以第4－6天最为清晰，有3例追踪到第20天仍可获阳性显像。其3、5和8天时肝癌与正常肝部位的中位放射强度比值分别为1．4、1．6和1．8，最高可达2．9。经外周静脉注射者8例，阳性率为62．％％（5／8），低于经肝动脉插管注射者。比值分别为1．2、1．3和1．4，最高为1．8。