急性胆道感染时肝脏能量代谢改变及其防治的实验研究

本文以肝细胞线粒体呼吸速率(S)、呼吸控制率(RCR)、氧化磷酸化效率(ADP/O)和肝脏ATP含量为指标测定了大鼠急性梗阻性胆管炎(AOC)时线粒体呼吸功能的变化,并观察了异搏停和地塞米松对线粒体损害的防治效果。结果发现,AOC术后6h时线粒体Ⅳ态呼吸速率(S_4)即有明显增强,RCR、ADP/O和肝脏ATP含量明显降低,而异搏停和地塞米松对AOC的治疗组在术后48h内各指标均无明显变化。结果提示,AOC早期即能够引起严重的肝细胞线粒体呼吸功能损害和能量代谢障碍,异搏停和地塞米松能够有效地防治AOC所致的肝细胞线粒体呼吸功能和能量代谢障碍。     

快速输液对严重烧伤早期多脏器功能衰竭预防的动物实验研究

本文证明严重烧伤立即输液对预防烧伤早期MOF有利;延迟均匀输液则不利;而延迟快速输液可部分预防MOF发生。其表现为立即和延迟快速输液组的SV、SI、LVSWI、RVSWI、FAP维持在伤前值的50％以上,并逐渐恢复接近伤前值。PAWP小于1.3kPa,ALT、LDT增加没有超过伤前值的2倍。DB、TB、UN、Cr、PaO_2、P(A-a)O_2、MDA、RCR、ADP/O和ATP变化不明显。血培养阳性率、死亡率和MOF发生率低,病理改变轻。     

氯胺酮对腹腔感染脓毒症大鼠肝线粒体能量代谢的影响

目的 探讨氯胺酮对脓毒症大鼠肝线粒体能量代谢的影响以及氯胺酮对脓毒症肝损伤的保护机制。方法 采用盲肠结扎穿孔（CLP）制作脓毒症模型，将大鼠随机分为假手术组（C组）、盐水组（NS组）、氯胺酮组（K组），模型制作12h后开始分别给予生理盐水和氯胺酮，观察4h后制备肝线粒体和组织匀浆，并采用Clark氧电极技术测定线粒体呼吸功能和定磷法测定ATP酶活性。结果 盐水组的呼吸控制率（respiratory control rate，RCR）和ADP／O明显低于假手术组，而态3呼吸速率和态4呼吸速率明显高于假手术组，且ATP酶各值均较假手术组明显降低；氯胺酮组能明显提高RCR、ADP／O和ATP酶的活性，降低态3呼吸速率态和4呼吸速率。结论 脓毒症大鼠肝损伤可能与ATP酶活性被抑制有关，而氯胺酮通过提高ATP酶的活力，减轻细胞和线粒体钙超载，改善细胞能量代谢功能，从而有效地保护了肝脏的结构和功能。     

养心通脉方对大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体功能的影响

目的：研究养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体呼吸功能的影响。方法实验大鼠被随机分为3组（每组15只）：对照组、模型组、养心通脉方组,实验结束后所有动物采用脱颈椎法处死,通过测定呼吸控制率(RCR)、二磷酸腺苷磷/氧(ADP/O)比值及 ATP 的浓度来评价线粒体的呼吸功能,并对线粒体内胆固醇、磷脂（PL）、甘油三酯（TG）和游离脂肪酸（FFAs）的含量进行测定。结果模型组中大鼠心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均明显低于对照组（P＜0.001）,而在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均接近于对照组（P＞0.05）。与对照组相比,模型组中胆固醇、TG 和 FFAs 的水平均明显升高（P＜0.001）,同时磷脂（PL）水平明显降低（P＜0.001）。但在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内胆固醇、TG、FFAs以及PL的水平均与对照组无明显差异（P＞0.05）。结论养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体的呼吸功能及其膜完整性具有保护作用。     

大鼠烫伤后早期肝脏线粒体RCR和ADP/O的变化

Sprague-Dawley(SD)大鼠(雄性)烫伤(相当于体表面积的20％,Ⅲ°)后30分钟组和烫伤后2小时组,其肝脏线粒体呼吸控制率(RCR)均比固定对照组和正常对照组高,差异显著;且烫伤后30分钟组肝脏线粒体氧化磷酸化效率(ADP/O)比固定对照组高,差异亦显著。此外从对32只雄性Wistar大鼠的测定结果中,也发现烫伤后30分钟组的肝脏线粒体RCR比固定对照组高,差异显著。SD大鼠烫伤后4小时组,其ADP/O比固定对照组低,差异十分显著;而RCR已接近正常。(大鼠肝脏线粒体活性测定时,均以琥珀酸盐为氧化底物)。说明大鼠烫伤后早期肝脏线粒体氧化磷酸化曾有偶联增强的时相。     

二氮嗪对严重烧伤大鼠心肌损害的保护作用及其机制

目的 探讨二氮嗪对严重烧伤早期心肌损害的保护作用及其机制。方法 健康成年Wistar大鼠24只，随机分为正常对照组、烧伤组和烧伤二氮嗪处理组(n=8)。烧伤组、烧伤二氮嗪处理组大鼠造成30％TBS AⅢ度烧伤，伤后30min经腹腔补液，烧伤二氮嗪处理组同时于颈外静脉推注二氮嗪(剂量10mg／kg)。烧伤组和烧伤二氮嗪处理组动物于伤后6h抽血并活杀，测定线粒体K^ 内流、呼吸功能、Ca^2 浓度([Ca^2 ]m)、MDA及血清LDH、CK。结果 二氮嗪处理组线粒体K^ 内流速率明显高于正常组与烧伤组，且线粒体呼吸控制率(RCR)、Ⅲ态呼吸速率(ST3)明显高于烧伤组，而[Ca^2 ]m、MDA含量显著低于烧伤组，Ⅳ态呼吸速率(ST4)与正常对照组无显著差异；同时二氮嗪处理组血清CK、LDH显著低于烧伤组，分别是烧伤组的63．7％和52．0％。结论 二氮嗪可减轻严重烧伤早期心肌细胞损害，其机制可能与开放线粒体K^ 通道，抑制线粒体Ca^2 超载及减少自由基产生有关。     

磷烧伤对大鼠肝脏及线粒体的损伤

目的探讨磷烧伤与肝细胞及其线粒体损伤之间的关系.方法健康wistar大鼠随机分为磷烧伤组、烫伤组、正常对照组.每致伤组每时相点6只,分别于伤后5、10和24 h放血活杀,取血测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）.同时取肝组织,检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）活性以及线粒体呼吸控制率（RCR）、线粒体氧化磷酸化效率（pi/O）、线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）活性变化.结果磷伤后血ALT、GOT、LDH不仅显著高于对照组,也显著高于烫烧伤组（P＜0.05）;磷烧伤组RCR、Pi/O及SDH活性显著低于对照组与烫伤组（P＜0.05）;磷烧伤组肝组织SOD,GSH低于烫伤组但显著高于对照组（P＜0.05）;MDA显著高于对照组但低于烫伤组（P＜0.05）.结论肝细胞及线粒体的损伤不仅有过氧化损伤因素起作用,还有磷转化为磷酸后对肝细胞及其亚结构的毒性作用.     

冷适应大鼠肝脏线粒体的呼吸功能及蛋白质合成

从正常和冷冻大鼠肝脏中分离出线粒体。用氧电极法测定鼠肝线粒体呼吸功能,包括ADP:O比值(P/O值),呼吸控制率(RCR),以[~3H]-Leu参入为指标,观察线粒体内蛋白质合成;以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法观察线粒体内膜蛋白质的变化。结果表明:冷适应2、4周时P/O值和RCR降低,6周时两指标恢复至正常水平。冷适应1,2,4周时线粒体蛋白质合成明显降低。冷适应2,3周时线粒体内膜蛋白质电泳图谱呈现明显变化,冷适应组线粒体内膜有新的蛋白质条带出现。     

钌红减轻严重烧伤早期心肌细胞和线粒体损害

目的 :探讨钌红对严重烧伤早期心肌细胞和线粒体损害的治疗作用。方法 :健康成年Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为正常对照组、烧伤组和钌红治疗组 (n =8)。烧伤组、钌红治疗组大鼠造成 30 %TBSAⅢ°烧伤 ,伤后30min经腹腔补液。钌红治疗组同时于颈外静脉推注钌红 (剂量 2mg/kg) ,3h后再推注 1次。烧伤组和钌红治疗组动物于伤后 6h抽血并活杀。测定线粒体呼吸功能、Ca2 浓度 ([Ca2 ]m)及血清LDH、CK。结果 :钌红治疗组较烧伤组 [Ca2 ]m显著降低 ,线粒体呼吸控制率 (RCR)、Ⅲ态呼吸速率 (ST3)明显升高 ,Ⅳ态呼吸速率(ST4 )降低 ,钌红治疗组血清CK、LDH显著低于烧伤组 ,分别是烧伤组的 65 .0 %和 45 .5 %。结论 :钌红可减轻严重烧伤早期心肌线粒体和细胞损害     

大鼠脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能的变化

目的:探讨甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能的影响。方法:54只SD大鼠,随机分组为:假手术(对照组)、脊髓损伤(SCI组)和甲基强的松龙治疗(MP组),每组又分为处理后6h、12h、24h三个时相组,每组6只,采用Allen's打击法造成脊髓损伤模型,在各时相提取伤段脊髓线粒体,测定线粒体呼吸Ⅲ态(R3)、Ⅳ态(R4)、呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)。结果:SCI组在伤后6h、12h和24h的R3、RCR和P/O显著低于对照组,R4显著高于对照组,有统计学意义(P<0.01);MP组伤后6h和12hR3、RCR和P/O高于SCI组,R4低于SCI组,有统计学意义(P<0.01);MP组R3、R4和RCR在6h和12h时相与对照组之间无明显差异,24h时相R3、RCR和P/O低于正常对照组,有显著差异(P<0.05)。结论:脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能明显受到影响,线粒体内膜通透性增加,线粒体氧化磷酸化的偶联程度明显受到抑制。早期使用甲基强的松龙可明显改善线粒体的呼吸功能,保护伤段脊髓线粒体的稳定性。     

A study on mitochondrial respiratory dysfunction and lipid peroxidation in the liver after radiation,burn,and combined radiation-burn injuries in mice

Male mice were subjected to 6 Gy total body irradiation,20% TBSAfull-thickness burns,or combined radiation-burn injury and lipid peroxides(LPO),vita-min E,sulfhydryl group,respiratory control ratio(RCR),ADP/O ratio,and cytochromeoxidase activity of the liver mitochondria were determined in the first 9 d postinjury.Theresults are as follows:(1)LPO level increased in the early postinjury stage after combinedradiation-burn injury,on the 5th-7th day after irradiation and on the 7th day postburn.(2)Vitamin E level decreased significantly in the two groups of radiation and burn inju-ries but showed no significant decrease after combined injury.(3)The sulfhydryl groupshowed a tendency to increase in all the 3 groups.(4)The activity of cytochrome oxidaseincreased significantly on the 7th day after radiation but decreased considerably in theburn and combined injury groups.(5)RCR and ADP/O ratio decreased more significantlyin the combined injury group than in either the radiation group or the burn group.These facts suggest that the respiratory dysfunction of the liver mitochondria results mostprobably from the damage on the mitochondrial membrane due to lipid peroxidation.     

放射损伤,烧伤及复合伤时肝线粒体功能障碍与脂质过氧化作用

本文采用小鼠6 Gyγ射线全身照射和20％Ⅲ度凝固汽油烧伤模型,观察了伤后9 d内单伤和复合伤小鼠肝线粒体脂质过氧化物、维生素E及巯基含量、细胞色素氧化酶活力,呼吸控制率和磷氧比值的变化。结果表明脂质过氧化作用在复合伤组早期增加呈现复合效应。维生素E含量在单伤组下降更明显。巯基含量在各伤组变化总趋势是升高。细胞色素氧化酶活力在单放组第7天显著升高。呼吸控制率和磷氧比值以复合伤组下降更明显。实验结果提示伤后肝线粒体呼吸功能障碍与脂质过氧化损伤有一定关系。     

胆原性脓毒症时动脉血酮体比值与肝细胞能量状态的关系

为分析实验性胆原性脓毒症时动脉血酮体比与肝能量代谢改变之间的关系，借助兔自身对照性动物模型，对胆原性脓毒症状下肝脏线粒体呼吸功能，肝组织ＡＴＰ含量及ＡＫＢＲ进行了动态检测。     

川芎嗪预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤能量代谢的保护作用

目的探讨川芎嗪预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)后肝脏能量代谢的影响。方法将120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、实验组和对照组3组,实验组和对照组制作70%大鼠肝脏IRI模型,实验组大鼠在IRI前3d,每日腹腔注射川芎嗪注射液2mL,各组大鼠分别于术后1h、6h、24h、72h取肝组织观察组织形态学变化,检测肝细胞线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)和肝组织三磷酸腺苷(ATP)含量变化。结果①术后各个相应时相点实验组肝组织病理损伤均较对照组轻;②术后1h、6h、24h对照组肝细胞线粒体RCR及P/O均低于实验组(P均<0.05),72h均恢复正常(P>0.05);③实验组术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于对照组(P<0.05),并且恢复正常也比对照组较早。结论川芎嗪预处理能够改善肝脏能量代谢,提高缺血再灌注后肝脏的抗损伤能力。     

Effect of ionizing radiation on liver mitochondrial respiratory functions in mice

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒａｄｉａｔｉｏｎｅｆｅｃｔｏｎｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｏｆｔｈｅｍｏｕｓｅｌｉｖｅｒｉｎｖｉｖｏ．ＭｅｔｈｏｄｓＬｉｖｅｒｓｏｆＢＡＬＢ／ｃｍｉｃｅｗｅｒｅｓｑｕｅｅｚｅｄｏｕｔｔｈｒｏｕｇｈｏｐｅ...     

A study on liver mitochondria respiration and protein synthesis in cold adapted rats

Mitochondria were isolated from normal and cold adapted rat livers.The respiratory func-tion of mitochondria in rat livers,including ADP:O ratio(P/O)and the respiratory control ratio(RCR),was determined by oxygen electrode method,The protein synthesis in mitochondria wasstudied by observing the incorporation of[~3H]-Leucine into mitochondria.Polyacrylamide gelelectrophoresis was carried out to detect the changes of the inner membrane proteins.It was shownthat the P/O and RCR decreased in cold adapted rats in the 2nd and 4th weeks and returned tothe control level in the 6th week,the protein synthesis of mitochondria decreased significantly incold adapted rats in 1,2 and 4 weeks;the electrophoretic pattern of the inner membrane proteinsin mitochondria from cold adapted rat livers revealed some new bands.