葛根素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的抗氧化作用及对部分生化指标的影响

目的探讨葛根素对大鼠缺血再灌注损伤肝脏的抗氧化作用及对部分生化指标的影响。方法建立大鼠全肝缺血再灌注模型，60只大鼠随机分为三组，每组20只，分别为假手术对照组（A组）、肝缺血／再灌注组（B组）和肝缺血／再灌注加葛根素治疗组（C组），分剐在肝缺血前、缺血45min、再灌注45min共3个时相点，检测血浆超氧化物歧化酶（SOD）活性、黄嘌呤氧化酶（XO）活性、丙二醛（MDA）浓度以及血清谷丙转氨酶（ALT）活性。结果肝缺血／再灌注组，血浆XO，MDA及ALT显著高于假手术对照组、SOD明显低于假手术对照组（P〈0．05或Y〈0．01）；而葛根素治疗组与缺血／再灌注组比较，上述指标均有显著性差异（P〈0．05或P〈0．01）。结论葛根素可通过降低氧自由基水平（增强SOD活性、减弱XO活性）拮抗脂质过氧化反应（降低MDA浓度），从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤的修复作用

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养方法，建立大鼠肝脏缺血．再灌注损伤动物模型，观察骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血．再灌注损伤的修复作用。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，建立大鼠肝脏缺血．再灌注损伤的模型。动物模型制备后，将30只大鼠随机分为实验组（即尾静脉注入骨髓间充质干细胞0．5ml，约10^6个）10只，阴性对照组（尾静脉注入生理盐水0．5ml）10只。以正常大鼠作为空白对照组10只。结果各组大鼠于1周，2周，4周进行采血，取脏器进行各项指标检测。肝脏缺血．再灌注损伤大鼠在第1周实验组和阴性对照组的丙氨酸转移酶（ALT）、门冬氨酸转移酶（AST）和丙二醛（MDA）均明显高于空白对照组，差异显著，P〈0．05。第2周时，实验组大鼠ALT、AST和MDA与阴性对照组比较，明显低于阴性对照组P〈0．05，但SOD明显高于阴性对照组P〈0．05。第4周时，实验组大鼠ALT、AST和MDA与阴性对照组比较，明显低于阴性对照组P〈0．05。但实验组与空白对照组MDA和SOD有差异P〈0．05。结论大鼠骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤的修复可起促进作用。     

MMP-9抑制剂对大鼠肝脏缺血再灌注模型的影响分析

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抑制剂对大鼠肝脏缺血再灌注模型的影响。方法选择36只健康雄性Wistar大鼠,将其随机分成3组,对照组(大鼠未进行任何处理不建立肝脏缺血再灌注模型)12只,模型组(肝脏缺血再灌注模型组建立前采用生理盐水处理)12只大鼠,实验组(肝脏缺血再灌注模型建立前采用盐酸多西环素处理)12只。检测各组大鼠肝脏缺血再灌注1 h、6 h、24 h血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)与丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量;观察评价肝脏组织损伤情况,肝脏组织的淤血、空泡样变、坏死程度以及MMP-9水平。结果模型组与实验组再灌注1 h、6 h、24 h的血清ALT与AST水平、肝组织病理评分均显著高于对照组(P <0.05)实验组低于模型组(P <0.05),模型组和实验组在肝脏缺血再灌注6 h时血清ALT与AST水平最高(P <0.05)。模型组与实验组再灌注1 h、6h、24 h的肝组织MMP-9相对表达水平均显著低于对照组(P <0.05),实验组高于模型组(P <0.05)。结论 MMP-9抑制剂能抑制大鼠肝脏缺血再灌注损伤,促进恢复大鼠的肝功能,缓解肝组织病变状况。     

三氯化钆对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

【目的】探讨枯否细胞抑制荆三氯化钆对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响，并分析其可能机制。【方法】将64只成年雄性SD大鼠随机分为3组：三氯化钆预处理＋缺血再灌柱组（GD组，n=24），生理盐水预处理＋缺血再灌注组（NS组，n=24），假手术组（Sham组，n=16）。按Pringle＇s法建立肝脏95％缺血模型：选择性阻断肝门静脉左支及肝动脉30min，再灌注120min。各组经下腔静脉取血测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子（TNF-α）浓度；各组分别于再灌注120min后经尾静脉注射印度墨汁，断尾取血测量0D5 min and OD15 min值以计算枯否细胞吞噬系数；取左叶肝组织行病理切片检查。【结果】①缺血30min及再灌注120min后GD组ALT、AST、TNF-α浓度低于NS组（P〈0．05）。②再灌注120min后GD组枯否细胞吞噬系数较NS组及Sham组降低（P〈0.05）。③GD组再灌注120min后肝组织形态学改变均较NS组轻。【结论】三氯化钆能减少枯否细胞释放细胞因子（主要是肿瘤坏死因子）从而减轻肝脏热缺血再灌注损伤。     

吗啡对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的:缺血再灌注是肝脏手术和肝移植术中不可避免的病理过程,吗啡对于心肌缺血再灌注损伤以及对抗心肌细胞凋亡等方面已有了很大的研究进展.观察吗啡对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响,并分析其可能作用途径.方法:实验于2006-08/2007-03在辽宁医学院附属医院外科实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.①实验分组及方法:选用Wistar大鼠60只,按随机数字表法分成4组(n=15),正常对照组、假手术组、缺血再灌注组及缺血再灌注 吗啡干预组,缺血再灌注组建立大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型;缺血再灌注 吗啡组于缺血再灌注前给予0.3 mg/kg盐酸吗啡注射液腹腔内注射.②实验评估:于再灌注90 min后,各组大鼠经左心室取血,测定血浆中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性;取肝脏组织,应用流式细胞仪检测肝细胞凋亡率,应用免疫组化法检测半胱氨酸蛋白酶3的表达变化.结果:60只大鼠均进入结果分析.①血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性:缺血再灌注组显著高于正常对照组和假手术组(P＜0.01),吗啡 缺血再灌注组显著低于缺血再灌注组(P＜0.01).②肝细胞凋亡率:缺血再灌注组显著高于正常对照组和假手术组(P＜0.01),吗啡 缺血再灌注组显著低于缺血再灌注组(P＜0.01).③肝脏组织半胱氨酸蛋白酶3的表达:缺血再灌注组显著高于正常对照组和假手术组(P＜0.01),吗啡 缺血再灌注组显著低于缺血再灌注组(P＜0.01).结论:吗啡可抑制缺血再灌注损伤后肝细胞的凋亡,减轻肝脏的损伤,从而起到保护肝脏的作用.     

HMGB1移位和释放与肝脏缺血再灌注损伤的机制

目的探讨HMGB1移位和释放与肝脏缺血再灌注损伤的关联。方法选取45只1月龄的雄性SD大鼠,采用随机数字法,将其分为假手术组、缺血再灌注组、HMGB1干预组,每组15只。比较三组大鼠肝功能指标、肝组织中细胞凋亡指数、炎症因子表达和氧化应激水平。结果缺血再灌注组肝组织ALT、AST、MDA、细胞凋亡指数、MPO、组肝组织HMGB1mRNA及其蛋白表达、肝组织TNF-α、IL-6表达高于假手术组,HMGB1干预组较缺血再灌注组低,但仍高于假手术组(P0.05)。缺血再灌注组SOD明显低于假手术组,HMGB1干预组明显高于缺血再灌注组、低于假手术组(P0.05)。结论输注HMGBI抗体可有效改善大鼠肝脏缺血再灌注损伤,机制与下调炎性因子表达、降低炎症引起的细胞凋亡相关。     

重组腺病毒携带TNF—-α受体Ⅰ基因对肝脏缺血再灌注损伤的研究

目的探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及可溶性TNF-α受体I（sTNFRI）基凼的保护作用。方法预先给予携带sTNFRI基因的重组腺病毒后建立大鼠缺血再灌注模型,阻断肝左、中叶入肝血流60rain后分别再灌注1h、3h、6h、12h。采用全自动生化分析仪测定血清中肝酶学指标（AST、ALT）,TBA法测定肝脏丙二醛（MDA）含量。大鼠肝脏组织切片HE染色后,行光镜检查,观察肝组织显微结构变化。结果AST、ALT和肝脏的组织形态学都显示模型组较假手术组大鼠有明显的肝脏损伤,其中以再灌注6h肝脏损伤最严重。肝组织MDA含量明显高于假手术组（P〈0．01）,于再灌注3h达到高峰。肝组织TNF-α的表达均明显高于假手术组（P〈0．01）,且于再灌注6h达到高峰。结论sTNFRI可增强抗氧化能力,降低MDA水平,抑制缺血再灌注大鼠体内氧化应激水平,对大鼠缺血再灌注有一定的治疗作用。     

快速康复外科干预对梗阻性黄疸大鼠肝脏缺血再灌注损伤疗效研究

目的 探究快速康复外科对肝脏缺血再灌注损伤的干预作用.方法 健康SPF级SD大鼠60只,随机分成假手术组、非FTS组及FTS组,FTS组分常规组及中药干预组,每组各15只.所有大鼠均行胆总管结扎制备为梗阻性黄疸模型,FTS组及非FTS组均进行肝脏缺血再灌注操作.TFS中药组加用中药干预.24h后检测肝脏组织丙二醛(MDA)、超过氧化物歧化酶(SOD),HE染色观察大鼠肝脏形态学改变,TUNEL法检测肝组织细胞原位凋亡,并计算凋亡指数(AI).结果 各组间MDA比较无差异(P＞0.05);假手术组与FTS常规组SOD无差异(P＞0.05),其余各组相互比较均有差异(P＜0.05);形态学观察:FTS组损伤情况轻于非FTS组;假手术组凋亡指数显著低于其他各组(P＜0.01),非FTS组高于FTS组(P＜0.05).结论 FTS的因素干预,改善了肝细胞的凋亡程度,降低了黄疸大鼠缺血再灌注损伤后肝细胞和肝功能的损伤程度.     

牛肠碱性磷酸酶对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用途径

背景：肝移植以及广泛的肝叶切除等手术常见的病理过程为肝脏缺血再灌注损伤。研究表明，外源性碱性磷酸酶能通过对内毒素的脱磷酸作用而减轻其毒性作用。 目的：建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型，观察牛肠碱性磷酸酶预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007～04／11在南方医院消化科实验室完成。 材料：选用SD大鼠72只，用于建立大鼠肝缺血再灌注模型。方法：将72只肝缺血再灌注模型大鼠按随机数字表法分为3组（n=24）：①假手术组打开腹腔，不阻断肝脏供血。②生理盐水组阻断入肝血流20min，在再灌注前5min从尾静脉注射生理盐水1mL。③牛肠碱性磷酸酶预处理组阻断入肝血流20min，再灌注前5min从尾静脉注射牛肠碱性磷酸酶0、5U／g。 主要观察指标：3组大鼠分别于缺血再灌注后1，3，6，12h各时点分别取6只，分别采用鲎试剂终点显色法检测血清内毒素水平：采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素10水平；检测肝组织髓过氧化物酶活性；应用苏木精-伊红染色法观察肝组织病理改变。 结果：①生理盐水组及牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及肝组织髓过氧化物酶活性在再灌注后均高于假手术组（P〈0、05）。②肝脏缺血再灌注损伤后不同时点牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及髓过氧化物酶活性均低于生理盐水组（P〈0、05），白细胞介素10水平高于生理盐水组（P〈0、05），肝组织病理改变也轻于生理盐水组。 结论：牛肠碱性磷酸酶能减少血清内毒素含量，抑制促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的释放并促进抗炎细胞因子白细胞介素10的释放，减少中性粒细胞在肝组织的浸润活化，从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。