地高辛标记探针原位杂交法检测人脑胶质瘤组织猴病毒40的表达

目的 :检测猴病毒 40 (SV40 )DNA在人脑胶质瘤中的定位表达 ,探讨其在脑胶质瘤发生发展中的生物学意义。方法 :采用地高辛标记探针原位杂交技术 ,检测 2 5 6例人脑胶质瘤和 11例正常脑组织标本。结果 :SV40DNA定位于胶质瘤细胞核 ,阳性细胞呈弥漫性或局灶性分布 ;SV40DNA阳性率 40 .6 % (10 4/2 5 6 ) ,正常脑组织均未检测出SV40DNA ;SV40DNA阳性率与病理分级无关 (P >0 .0 5 )。结论 :SV40感染与人脑胶质瘤病因学密切相关 ;地高辛标记探针原位杂交技术 ,是探讨SV40病毒核酸在组织中定位、分布和感染机制的一种新的特异性方法。     

地高辛标记探针原位杂交法检测人脑胶质瘤组织猴病毒40的表达

目的：检测猴病毒40（SV40）DNA在人脑胶质瘤中的定位表达,探讨其在脑胶质瘤发生发展中的生物学意义。方法：采用地高辛标记探针原位杂交技术,检测256例人脑胶质瘤和11例正常脑组织标本。结果：SV40 DNA定位于胶质瘤细胞核,阳性细胞呈弥漫性或局灶性分布;SV40 DNA阳性率40.6％（104／256）,正常脑组织均未检测出SV40 DNA;SV40 DNA阳性率与病理分级无关（P＞0.05）。结论：SV40感染与人脑胶质瘤病因学密切相关;地高辛标记探针原位杂交技术,是探讨SV40病毒核本以在组织中定位、分布和感染机制的一种新的特异性方法。     

整合素β1亚基表达与人脑胶质瘤侵袭与复发的关系

目的 :检测脑胶质瘤中整合素 β1基因表达 ,阐明其临床意义 .方法 :应用免疫组化和原位杂交法 ,分析 5 3例人脑胶质瘤整合素 β1基因表达 ,对患者随访并比较其预后 .结果 :整合素 β1蛋白阳性率 ,在I～IV级脑胶质瘤分别为 3 6.3 %,3 8.5 %,72 .2 %和 81.8%,高级别 (Ⅲ～Ⅳ )高于低级别(Ⅰ～Ⅱ ) (P <0 .0 5 ) ,其mRNA表达同蛋白表达 .高表达整合素β1的患者预后较差 .结论 :整合素 β1的高表达与脑胶质瘤分化程度低、侵袭性强密切相关 ,是预测患者预后的较好标示物     

p16蛋白在脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的 :探讨抑癌基因p16蛋白在脑胶质瘤发生、分化过程中的作用及其与预后的关系经。方法 :采用免疫组化的方法检测 5 4例脑胶质瘤患者病理标本中的p16蛋白 ,分析p16蛋白的缺失与病理分级、患者预后之间的关系。结果 :全组共有 2 9例 (5 3.7% )标本p16蛋白表达阴性 ,Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤的p16蛋白的阴性率明显高于Ⅰ、Ⅱ级 (P <0 .0 5 )。p16蛋白表达阳性患者的复发率明显低于p16蛋白表达阴性者 (P <0 .0 5 ) ,分别为 2 0 .0 %和 5 5 .2 %。结论 :p16蛋白的缺失与脑胶质瘤的恶性程度有关 ,恶性程度越高 ,p16蛋白的缺失率越高 ;p16蛋白的缺失与预后相关 ,其缺失率越高 ,患者复发率越高。     

血管内皮生长因子与脑胶质瘤恶性程度的相关性研究

应用免疫组化 SABC法和原位杂交检测血管内皮生长因子 ( VEGF)在 ～ 级脑胶质瘤中的表达。结果 62例 ～ 级脑胶质瘤组织 VEGF免疫组化阳性率分别为 3 0 .7%、40 .0 %、73 .7%和 86.7% , ～ 级脑胶质瘤阳性率明显高于 ～ 级脑胶质瘤 ,差异显著 ( P<0 .0 1 )。原位杂交显示 VEGFm RNA表达 ,与 VEGF蛋白表达结果相近。提示VEGF高表达与脑胶质瘤组织分化程度低、侵袭强等恶性表型密切相关 ,并可能对这些恶性表型起正性调节作用     

人脑胶质瘤中增殖细胞核抗原、p53、p21ras及EGFR蛋白的表达

目的:探讨人脑胶质瘤中多种基因蛋白的异常表达及意义。方法:应用免疫组化技术检测102例手术切除人脑胶质瘤组织标本中增殖细胞核抗原(PCNA)及p53,p21ras及EGFR蛋白的表达。胶质瘤组织PCNA标记指数(PCNALI)为556±155,p53,p21ras及EGFR蛋白的表达率分别为586%,523%,42%,均显著高于正常脑组织。PCNALI及EGFR蛋白表达与胶质瘤恶性程度相关(P<001),p53,p21ras及EGFR蛋白的表达与胶质瘤恶性程度无关(P>005)。胶质瘤中PCNALI与EGFR蛋白表达无明显相关(P>005),而与p53和p21ras表达相关(P<005)。结论:p53,p21ras和EGFR异常表达与胶质瘤的发生发展相关,PCNALI是评估增殖活性的良好指标。     

凋亡抑制蛋白Survivin在脑星形细胞肿瘤中的表达及与p53、bcl-2的相关性研究

目的 :探讨凋亡抑制蛋白 Survivin在人脑星形细胞肿瘤中的表达及其与 p5 3和 bcl- 2蛋白表达的相关性。方法 :应用免疫组织化学 SP法 ,检测 Survivin、p5 3、bcl- 2在 4 5例人脑星形细胞肿瘤中的表达。结果 :4 5例脑星形细胞肿瘤标本中 33例表达 Survivin蛋白 ,阳性率为 73.3% ,并随星形细胞肿瘤的恶性程度而增高 (P<0 .0 5 ) ;其中星形细胞瘤阳性率为 36 .4 % ,间变性星形细胞瘤为 81.2 % ,胶质母细胞瘤为 88.9%。而 p5 3蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 5 8.3% (14 /2 4 )、90 .5 % (19/2 1)。两者比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;bcl- 2蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 76 .5 % (13/17)、71.4 % (2 0 /2 8)。两者比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。Survivin蛋白表达阳性率与脑星形细胞肿瘤中 p5 3蛋白表达密切相关 ,与 bcl- 2蛋白表达无相关性。结论 :(1) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞肿瘤的组织学分级相关 ,提示 Survivin蛋白表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关。 (2 ) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞瘤中 p5 3蛋白异常表达密切相关。     

p53、mdm2蛋白在睾丸肿瘤中的表达及意义

目的　探讨 p53、mdm2蛋白在睾丸肿瘤中的表达及其临床价值。 方法　应用免疫组化技术法检测 42例睾丸肿瘤 p53、mdm2蛋白阳性表达水平。结果　发现 p53、mdm2蛋白表达阳性率分别为 45 .2 % (1 9/ 4 2 )和 61 .9% (2 6/ 4 2 ) ,其阳性率与肿瘤病理分级和临床分期呈显著正相关 (P <0 .0 1 ) ,p53蛋白阳性表达与mdm2蛋白阳性表达呈高度正相关 (P <0 .0 1 )。结论　p53、mdm2蛋白检测有助于判断睾丸肿瘤的恶性程度及预测患者的预后。     

人脑胶质瘤组织P~(16INK4)蛋白的表达及其基因突变SSCP分析

目的 :探讨人脑胶质瘤组织 P16INK4蛋白低表达水平与胶质瘤恶性程度的关系及其基因突变的情况。方法 :采用免疫组化方法测定人脑胶质瘤标本 41例 ,同时采用新鲜胶质瘤组织标本1 5例进行 p1 6m RNA表达逆转录 PCR检测 ,并进行基因突变单链构象多态性分析 ( SSCP)。结果 :P1 6蛋白阳性表达 30例 ,阴性表达 1 1例 ,胶质瘤组织 p1 6m RNA表达水平相对低于对照组 ,p1 6基因外显子 2未发生基因突变 ,也未发生外显子 2的纯合缺失。结论 :胶质瘤组织p1 6m RNA和蛋白表达水平降低 ,并与其分级相关 ,提示 P1 6蛋白及其 m RNA异常是影响胶质瘤发生发展的重要因素 ,胶质瘤组织 p1 6基因突变率较低     

人脑胶质瘤中cyclin D2的表达及其与细胞增殖的关系

目的 :研究人脑胶质瘤中cyclinD2蛋白的表达与肿瘤恶性程度的关系及其对细胞增殖活性的影响 .方法 :采用免疫组化方法检测 5 2例人脑胶质瘤和 8例正常人脑组织标本中cyclinD2和PCNA的表达水平 ,计算两者标记指数 ,统计分析两者之间及其与胶质瘤病理分级之间的关系 .结果 :正常脑组织中无cyclinD2或PCNA表达 .随着人脑胶质瘤病理分级的增高 ,cyclinD2平均标记指数明显升高 .在WHO分级Ⅰ～Ⅳ级胶质瘤中 ,Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ级与Ⅳ级、Ⅰ级与Ⅲ级以及低度恶性胶质瘤 (Ⅰ～Ⅱ )与高度恶性胶质瘤 (Ⅲ～Ⅳ )之间标记指数存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) .类似cyclinD2 ,PCNA标记指数随脑胶质瘤恶性程度增高而升高 .cyclinD2与PCNA的平均标记指数呈明显正相关 (r =0 .6 5 4 ,P <0 .0 1 ) .结论 :人脑胶质瘤中cyclinD2的表达与细胞增殖活性和病理学分级密切相关 ,很可能参与了人脑胶质瘤细胞的恶性转化 .     

膀胱移行细胞癌中p53、mdm2蛋白表达和意义

目的 :探讨P53、mdm2蛋白表达与膀胱移行细胞癌 (TCC)生物学行为的关系。　　　　方法 :用免疫组织化学S -P法检测 59例膀胱TCC组织中P53、mdm2蛋白的表达。结果 :膀胱TCC组织中P53蛋白阳性表达率为 54 .2 % ,低分化、浸润性癌组织中P53蛋白阳性表达明显高于高分化、浅表性癌组织 (P <0 .0 5) ,mdm2蛋白阳性表达率为 47.5 % ,高分化、浅表性癌组织中mdm2蛋白阳性表达明显高于低分化、浸润性癌组织 (P <0 .0 0 5)。P53和mdm2蛋白表达呈负相关 (P <0 .0 5) ,P53蛋白阳性表达组 3年成活率低 ,复发率高 (P <0 .0 5)。结论 :P53和mdm2异常表达在膀胱TCC发生发展中起重要作用     

膀胱癌尿脱落细胞P16、cyclin D_1、P53、mdm2蛋白表达及其意义

目的 :检测P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白在膀胱移行细胞癌 (TCC)尿脱落细胞中的表达 ,以探讨其临床意义。方法 :用免疫组织化学S -P法检测 2 1例膀胱TCC尿脱落细胞及组织中P16、cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白的表达。结果 :膀胱TCC尿脱落细胞中 ,P16蛋白阳性表达率为 71.4 % (15 / 2 1) ;cyclinD1蛋白阳性表达率为 2 8.6 % (6 / 2 1) ;P5 3蛋白阳性表达率为 33.3% (7/ 2 1) ;mdm2蛋白阳性表达率为 2 3.8% (5 / 2 1)。对照组P16蛋白表达均为阳性 ,cyclinD1、P5 3、mdm2蛋白表达均为阴性。P16、cyclinD1、P5 3、mdm2基因在尿脱落细胞中异常表达均与相应的组织中表达相吻合。多基因蛋白联合表达肿瘤检出率为 81% (17/ 2 1) ,常规尿细胞学检查肿瘤检出率为19.1% (4/ 2 1)。两种方法比较差异有显著性意义 (χ2 =18.0 8,P <0 .0 0 5 )。结论 :尿脱落细胞的P16、cyclinD1、P5 3、mdm2多基因蛋白联合检测可作为膀胱TCC诊断有意义的参考指标。     

p53、p27及mdm2在胃肠道间质瘤中的表达

目的 研究p53、p27和mdm2蛋白在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及其与GIST生物学行为的关系,为预测该肿瘤的侵袭潜能提供理论依据和可能的预测指标.方法 收集68例手术切除的GIST标本,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织中p53、p27和mdm2蛋白的表达,并结合病理形态学及生物学行为评价进行统计学分析.结果 68例GIST中p53、p27和mdm2蛋白阳性表达率分别为75%、54.41%和27.94%.p53阳性表达率在极低度侵袭危险性(VLB)、低度侵袭危险性(LR)和高度侵袭危险性(HR)组三组间,细胞核分裂数≤10/50 HPF和10/50 HPF两组间的差别均有统计学意义(P<0.05),在肿瘤直径≤5 cm和5cm两组间差异有高度统计学意义(P<0.01);p27阳性表达率在VLR、LR和HR组间比较有统计学意义(P<0.05),在肿瘤直径≤5 cm和5 cm两组间差别有高度统计学意义(P<0.01);mdm2阳性表达率在细胞核分裂数≤10/50HPF和10/50HPF两组间比较差别有统计学意义(P<0.05).结论 p53、p27和mdm2蛋白表达与GIST的发生、发展有关,检测p53、p27及mdm2表达可以作为GIST生物学行为评价的有效指标.     

p33~（ING1b）和p53在胶质瘤中的表达及相关性研究

目的检测p33ING1b及p53基因蛋白在脑胶质瘤中的表达及相互关系。方法选取行脑胶质瘤手术切除的新鲜胶质瘤标本40例,应用S-P免疫组织化学方法检测p33ING1b和p53基因蛋白在瘤组织及10例正常组织中的表达,选用秩相关对结果进行分析。结果 40例胶质瘤标本中p33ING1b阳性表达率为77.5%（31/40）,正常组织中全部表达阳性（100%）;随着肿瘤级别的增高,p33ING1b表达水平下降。p53蛋白的阳性表达率为37.5%（15/40）,随着肿瘤级别的增高,p53表达水平也越高。p33ING1b与p53在胶质瘤中的蛋白表达水平呈负相关（r=-0.716,P〈0.01）。结论 p33ING1b与p53的表达存在相关性,可能是影响脑胶质瘤发生发展的重要因素。     

p53基因蛋白在原发性肺癌的表达及意义

目的 检测原发性肺癌中ｐ５３基因蛋白表达与组织类型、分化程度以及淋巴结转移的关系。方法 应用免疫组化ＩＤＰ法，用鼠抗人ｐ５３单克隆抗体检测ｐ５３蛋白的表达。结果４４例原发性肺癌中ｐ５３基因蛋白表达阳性率５６．８％。其中鳞癌１４例、腺癌３０例、阳性率分别５７．１％、４６．７％。高分化１０例，中分化２０例，低分化１４例，阳性率分别为４０％、５０％、５７．１％。肺癌有淋巴结转移的ｐ５３阳性率为６５．５％     

p14~(ARF)、mdm2、p53基因蛋白表达与胃癌相关性及联合诊断价值分析

目的分析p14^(ARF)、mdm2、p53基因异常表达与胃癌相关性以及联合评定价值。方法基于S-P法(免疫组织化学染色法)检测18例正常胃黏膜组织(健康对照组)、24例胃黏膜增生组织(增生组)、50例胃黏膜癌变组织(癌变组)标本中p14(ARF)、mdm2、p53基因异常表达与胃癌相关性以及联合评定价值。方法基于S-P法(免疫组织化学染色法)检测18例正常胃黏膜组织(健康对照组)、24例胃黏膜增生组织(增生组)、50例胃黏膜癌变组织(癌变组)标本中p14^(ARF)、mdm2、p53基因表达水平,分析其与胃癌的相关性及用于诊断胃癌的准确度、敏感度、特异度。结果癌变组、增生组、健康对照组p14(ARF)(88.0%、75.0%、22.2%)、mdm2(88.0%、70.8%、27.8%)、p53表达(48.0%、41.7%、11.1%)阳性率均呈下降趋势(P均<0.05);三者表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05);p14(ARF)、mdm2、p53基因表达水平,分析其与胃癌的相关性及用于诊断胃癌的准确度、敏感度、特异度。结果癌变组、增生组、健康对照组p14(ARF)(88.0%、75.0%、22.2%)、mdm2(88.0%、70.8%、27.8%)、p53表达(48.0%、41.7%、11.1%)阳性率均呈下降趋势(P均<0.05);三者表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05);p14^(ARF)、mdm2、p53联合用于胃癌诊断的准确度为93.4%,敏感度为96.0%,特异度为95.2%,均显著高于三者单独诊断的性能。结论 p14(ARF)、mdm2、p53联合用于胃癌诊断的准确度为93.4%,敏感度为96.0%,特异度为95.2%,均显著高于三者单独诊断的性能。结论 p14^(ARF)、mdm2、p53基因异常表达与胃癌发病和病情发展密切关联,联合检测三者的表达水平对胃癌的诊断及病情评定具较高临床价值。     

Expression and significance of P53 protein and MDM-2 protein in human gliomas

Background  P53 is one of the most studied tumor suppressors in the cancer research, and over 50% of human tumors carry P53 mutations. MDM-2 is amplified and/or overexpressed in a variety of human tumors of diverse tissue origin. The aim of this study was to examine the expression of P53 protein and MDM-2 protein in gliomas, and to investigate the relationship between the expression of the two proteins and the histopathological grades of glioma. The relationship between MDM-2 protein expression and P53 protein expression was also analyzed.

Methods  The expression of P53 protein and MDM-2 protein was immunohistochemically detected using monoclonal antibodies in 242 paraffin embedded tissues, including 30 normal brain tissues from patients with craniocerebral injury and 212 tissues from patients with primary glioma (grade I–II group: 5 cases of grade I, 119 cases of grade II; and grade III–IV group: 53 cases of grade III, and 35 cases of grade IV).

Results  The P53 positive rate was significantly higher in the glioma groups than in the control group (P <0.0001). The P53 positive rate was significantly higher in glioma tissues of grade III–IV than in glioma tissues of grade I–II group (P=0.001). The MDM-2 positive rate was significantly higher in glioma groups than in the control group (P <0.0001). There was no significant difference in the MDM-2 positive rate between the two glioma groups (P=0.936). The expression of P53 protein was not related to expression of MDM-2 protein (P=0.069)

Conclusions  Overexpression of P53 protein might be related to the occurrence and progression of glioma. Overexpression of MDM-2 protein may play an important role in glioma tumorigenesis, but may not be involved in glioma progression. The overexpression of MDM-2 protein was an early event in malignant transformation of glioma. MDM-2 may be a key player in glioma in its own right.

     

胃癌P-耐药糖蛋白和P53、mdm2蛋白表达关系的研究

目的：探讨P－耐药糖蛋白（P－gp)和P53、mdm2蛋白在胃癌组织中的表达关系。方法：应用免疫组化SABC法对79例胃癌进行P－gp、P53、mdm2蛋白表达的检测。结果：P－gp、P53及mdm2蛋白在胃癌组织中的阳性率分别为40．5％（32／79）、58．2％（46／79）、15．2％（12／79）；P－gp表达与淋巴结转移有关（P＜0．01），与胃癌的组织学类型和浸润深度无关（P＞0．05）；P53表达与胃癌的浸润深度和淋巴结转移有关（P＜0．05）；mdm2与胃癌的组织学类型、浸润深度及淋巴结转移无关（P＞0．05）。P－gp过表达与P53过表达呈正相关（P＜0．01），与mdm2过表达呈正相关（P＜0．05）。结论：P－gp、P53及mdm2蛋白多并存于胃癌组织中，可为临床判断病人耐药程度、预后提供依据。     

人脑星形细胞瘤P21 WAF1/CIP1的表达与P53、MDM2及细胞增殖指数间的关系

目的探讨P21、P53和MDM2表达与人脑星形细胞瘤发生、发展及与细胞增殖指数间的关系.方法用免疫组化技术检查41例石蜡包埋的人脑星形细胞瘤标本P21、P53和MDM2蛋白的表达和由增殖细胞核抗原(PCNA)反映的细胞增殖程度,同时用RNA原位杂交技术检测24例新鲜人脑星形细胞瘤标本的p21mRNA表达情况.结果p21mRNA原位杂交检查中无论是高级别肿瘤组或低级别肿瘤组,表达均有明显的差异.免疫组化检查中P21、P53、MDM2和PCNA的阳性率分别为75.6%、68.3%、65.9%和100%.P21蛋白表达在高级别肿瘤中较高P＝0.001,且与细胞增殖指数明显相关,但与P53表达和MDM2表达无明显相关.P53表达与肿瘤组织学分级无关P＝0.424,但与细胞增殖指数明显相关.MDM2表达与肿瘤组织学分级无关P＝0.812,与细胞增殖指数亦无明显相关性.多元线性逐步回归分析表明,细胞增殖指数PCNALI和P21标记指数与肿瘤组织学分级有密切关系P＝0.000和P＝0.001.结论(1)p21mRNA和P21蛋白在人脑星形细胞瘤中过度表达其与细胞增殖指数相关但与P53表达无关表明可能有不依赖于P53的通路诱导P21表达.仅有P21过度表达对抑制肿瘤生长是不够的还需要PCNA参与;(2)P53蛋白表达水平与细胞增殖指数有关,但与肿瘤恶性程度无关,提示p53基因失活可能是人脑星形细胞瘤发生的早期事件(3)细胞增殖指数PCNALI和P21、MDM2标记指数的结果提示p21基因,而非MDM2基因在人脑星形细胞瘤的发展中起作用.