1—乙酰基-3-邻-甲基苯甲酰基-5-氟尿嘧啶的研究——Ⅲ、高效液相色谱法测定小鼠主要代谢物的血药浓度

通过溶剂提取,采用高效液相仪反相色谱法测定了小鼠口服A-OT-FU淀粉液后的主要代谢产物3-邻-甲基苯甲酰基-5-氟尿嘧啶(TFU)和5-氟尿嘧啶(5-FU)的血药浓度曲线,两者达最高血药浓度时间均为0.5小时。     

氟尿嘧啶眼膏的制备及含量测定

目的制备氟尿嘧啶眼膏并建立质量控制方法。方法以黄凡士林、羊毛脂、液体石蜡为基质制备氟尿嘧啶眼膏，用紫外分光光度法测定氟尿嘧啶的含量。结果测定氟尿嘧啶平均回收率为98．47％，RSD=1．20％（n=5）。结论本制剂工艺简单，质量稳定、可控，能适应临床需要。     

5-氟尿嘧啶-壳聚糖微囊体外释放度测定方法的建立

目的:建立5-氟尿嘧啶-壳聚糖微囊体外释放度测定的方法。方法:通过紫外全波长扫描确定5-氟尿嘧啶最大吸收波长,以紫外分光光度法测定其含量,以直接释药法测定其体外释放度,同时进行了方法学考察。结果:5-氟尿嘧啶-壳聚糖微囊体外释药量在6～14 mg/L浓度范围内线性关系良好,平均回收率为100.69%,RSD为0.95%。结论:所建立的方法简单、方便、准确,适合于5-氟尿嘧啶-壳聚糖微囊体外释放度的测定。     

罗格列酮具有人结肠癌氟尿嘧啶化疗增敏作用

目的探讨罗格列酮(Rosiglitazone)对人结肠癌氟尿嘧啶化疗增敏作用。方法体外培养人结肠癌HT-29细胞,分别或联合应用不同浓度的罗格列酮、氟尿嘧啶(fluorouracil,5-Fu)处理人结肠癌细胞系(HT-29)细胞,MTT比色法测定药物对细胞增殖抑制作用,采用台盼蓝染色细胞计数法观测药物对HT-29细胞生长曲线的影响,采用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术观察计算细胞凋亡率,并分析细胞周期的变化。结果1.5umol/L罗格列酮能明显增强氟尿嘧啶对HT-29细胞增殖和生长抑制作用。1.0μmol/L罗格列酮能显著增强氟尿嘧啶诱导HT-29细胞凋亡,使HT-29细胞阻滞于G1期。结论罗格列酮能增加氟尿嘧啶对HT-29细胞的化疗敏感性,其机制可能与诱导HT-29细胞凋亡和G1期阻滞有关。     

构建5-氟尿嘧啶电化学传感器电极材料的研究进展

电化学检测方法具有准确度高、成本低、操作简单易行的特点,广泛应用于各种药物含量的分析测定。5-氟尿嘧啶在肿瘤的治疗中起着重要作用,但药物过量会引起许多显著的不良反应,因此,5-氟尿嘧啶的含量测定是很有必要的。本文结合国内外文献对5-氟尿嘧啶的报道,综述了近几年电化学检测5-氟尿嘧啶的电极修饰材料、检测方法及其检测结果,认为运用生物提取物作为修饰材料是5-氟尿嘧啶电化学传感器的重要研究方向。     

几种不同曲线在生物样品测定中对准确度的影响

本文用发锰测定方法对三种曲线(标准曲线、工作曲线、校正工作曲线)在生物材料样品测定中对准确度的影响进行了讨论,认为校正工作曲线对准确度的满足为最好,建议在其他曲线不能满足准确度要求的情况下,可考虑使用校正工作曲线。     

5-氟尿嘧啶缓释化疗药代动力学研究

目的 研究5-氟尿嘧啶缓释化疗的药代动力学特点。方法 将30例消化道恶性肿瘤患者按5-氟尿嘧啶给药方法分为2组：5-氟尿嘧啶缓释化疗组15例，5-氟尿嘧啶全身化疗组15例。观察并比较两组患者5-氟尿嘧啶的半衰期（t1/2）、表观分布容积（Vd）及曲线下面积（AUC）。结果 两组患者5-氟尿嘧啶的t1/2 Vd及AUC间差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论 5-氟尿嘧啶缓释化疗的t1/2较全身化疗长，药物主要分布在肿瘤局部，血浆药物分布较少。     

氟尿嘧啶的理化性质及透皮促渗剂对氟尿嘧啶经皮渗透的研究

目的：对氟尿嘧啶的理化性质进行研究,并考察促渗剂对氟尿嘧啶透皮吸收的影响,为氟尿嘧啶经皮给药剂型的设计提供理论依据。方法：考察温度、光照及pH对氟尿嘧啶稳定性的影响;测定氟尿嘧啶在水、不同pH磷酸盐缓冲液以及多种油和表面活性剂中的溶解度;采取改进的Franz扩散池和离体小鼠皮肤研究氟尿嘧啶在不同pH环境下以及添加促渗剂后对离体鼠皮透皮吸收的影响。结果：在4℃、25℃、32℃、60℃条件下,在pH5．0、pH7．4、pH8．0磷酸盐缓冲液中,在光照条件（4500Lx）下,氟尿嘧啶均能稳定存在。氟尿嘧啶在水及不同pH磷酸盐缓冲液中的溶解度均大于在油和表面活性剂中的溶解度。氟尿嘧啶在水和不同pH磷酸盐缓冲液中的体外经皮释放均符合零级释放。含不同促渗剂的氟尿嘧啶的透皮速率及累积渗透量有明显差别,其促进强度依次为桉叶油〉薄荷油〉氮酮〉H二乙二醇单乙基醚H〉N-甲基-2-吡咯烷酮。结论：氟尿嘧啶不受温度、光照、pH值的影响;制成经皮给药制剂时,桉叶油的加入对氟尿嘧啶的促渗作用最大。     

共沉淀富集FAAS法测定水样中痕量镉的质量控制分析

在水样分析中 ,难免会有一定的误差 ,为把检测分析误差控制在允许限度内 ,提高分析检验工作质量 ,我们采用质量控制方法 ,并利用共沉淀富集火焰原子吸收分光光度法 ,对水中痕量镉进行了测定 ,得到了较满意的结果 ,报告如下。1　标准曲线的制作、回归及统计检验1 .1　标准曲线的制作　在水样分析中很多测定方法都是采用标准曲线法进行样品的定量分析。即配制一个被测物的标准系列 ,在与样品测定相同条件下进行测定。标准曲线的使用时间取决于各种因素如试剂重新配制及测量仪器的稳定性等 ,因此在每次分析样品的同时绘制标准曲线是最理想的 ,…     

主链含氨基酸、5-氟尿嘧啶和膦甲酸乙酯(膦乙酸乙酯)的聚磷酰胺和聚磷酸酯的合成及抗肿瘤活性研究

由1,3-双(氨基酸丙酯盐酸盐)-5-氟尿嘧啶与膦甲(乙)酸乙酯在DMF中反应制得二十种主链含氨基酸、膦甲(乙)酸乙酯和5-氟尿嘧啶三组分的聚合物。通过核磁、红外和紫外光谱以及元素分析测定了聚合物的结构。并试验了聚合物的体外抗肿瘤活性。     

人肝癌BEL-7402/5-FU多药耐药细胞株的建立及其生物学特性观察

目的:建立人肝癌BEL-7402/5-FU多药耐药细胞株。方法:采用体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的诱导方法建立5-FU获得性BEL-7402/5-FU多药耐药细胞株。MTT法检测耐药细胞株对多种化疗药物的交叉耐药性。观察其细胞形态学、生长曲线、倍增时间、平板克隆形成率、贴壁率、细胞周期分布、染色体核型以及裸鼠致瘤性。流式细胞术检测阿霉素在亲本及耐药细胞株内的积聚量。免疫细胞化学法检测胸苷酸合酶在耐药细胞内的表达。结果:成功建立人肝癌BEL-7402/5-FU多药耐药细胞株模型。该耐药细胞对阿霉素、长春新碱、奥沙利铂及甲氨蝶呤均有不同程度的交叉耐药性,但对羟基喜树碱仍较敏感。体外培养见细胞趋向群集性生长。耐药细胞株倍增时间较亲本细胞株长,克隆形成率则较亲本细胞株低,差异有统计学意义。耐药细胞贴壁率在23、h明显低于亲本细胞株,其G0/G1期细胞分布比率较低而S期比率明显增加。阿霉素在耐药细胞株内的积聚量低于亲本细胞株,耐药细胞株胸苷酸合酶的蛋白表达量较亲本细胞株明显增强。结论:人肝癌BEL-7402/5-FU多药耐药细胞株可以成为研究5-FU获得性耐药机制及开展多药耐药逆转剂筛选较好的体外模型。     

5-氟尿嘧啶缓释剂瘤内植入治疗胰腺癌的实验研究和临床研究(英文)

目的纲察5-氟尿嘧(5-FU)缓释剂对荷胰腺癌裸鼠肿瘤细胞及胰腺癌患者血清肿瘤标记物和细胞免疫的影响。方法(1)5-FU缓释剂的体外释放实验和体外抑瘤实验。(2)将荷胰腺癌细胞株PC3裸鼠60只,姑且机分成静脉对照组(A组)、5-Fu缓释剂植组(E组)治疗前、后14D测肿瘤大小。治疗2周后观察肿瘤组织学变化。免疫组化法测定bcl-2和Bax的蛋白表达水平;TUNEL法检测凋亡指数(AI)。(3)手术探查不能切除之胰腺癌69例随机分成3组。将5-FU缓释剂瘤内植入治疗组、术后行5-FU静脉化疗组和对照组。分别于术前1d和术后第14天采血,测定各组血清中NK细胞,T细胞亚群和CEA,CA50 ,CA19-9 ,CA242血清肿瘤记物水平。结果5 mg 5-FU缓释剂第1天释放量最大,为0 .85 mg,第3天为0 .45 mg,其后在0 .25 mg水平维持稳定的缓慢释放;释放时间长达14d以上。5-FU缓释剂第1天的浸出液对人胰腺癌细胞株PC-3的抑制率达60 .27 %,第3天为34 .25 %,以后稳定在25 %左右。5-FU缓释剂瘤内注谢治疗组裸鼠移植瘤生长速度减慢,bcl-2ad基因表达明显低于其他各组,而Bax基因表达明显高于其他各组,肿瘤细胞的AI明显高于其他各组。D组和E组肿瘤组织中炎症反应和血管内膜增厚程度明显高于其他各组。术后治疗组CD4+/CD8+和NK细胞水平高于静脉5-FU化疗组,而血清中上述5种肿瘤标记物低于对照组和静脉化疗组。结论5-FU缓释剂能在2周内在体外较稳定地特续释放,对人胰腺癌细胞株PC-3有持续抑制作用。该剂瘤内注射可明显抑制荷胰腺癌瘤裸鼠瘤体的生长,其作用机与药物在肿瘤组织中引起的炎症反应和血管内膜增厚等因素有关;并可能与诱导肿瘤细胞的凋亡有关。该剂植入胰腺癌实体内,能明显降低5种血清肿瘤标记物水平,同时对患者的细胞免疫功能影响较小,5-FU缓释剂可望成为治疗不能切除之胰腺癌的较好的制剂。     

噻唑蓝还原法测脂肪乳剂对人结肠癌细胞增殖的影响

目的:测定脂肪乳剂和5-FU单独或共同培养情况下对人结肠癌细胞增殖的影响,为肿瘤患者应用脂肪乳剂作为营养支持手段提供必要的理论基础。方法:应用噻唑蓝还原法(MTT法)观察LoVo结肠癌细胞株与不同浓度脂肪乳剂和5-FU单独或共同培养情况下,脂肪乳剂和5-FU对LoVo细胞增殖的影响。结果:5-FU对LoVo细胞增殖的抑制随其浓度的增加而增加;较高浓度脂肪乳剂对LoVo细胞的增殖有促进作用;不同浓度的脂肪乳剂与5-FU联合应用并不影响5-FU对LoVo细胞的抑制作用。结论:体外实验表明,脂肪乳剂并不影响化疗药物抑制肿瘤细胞增殖的作用,化疗期间可应用脂肪乳剂提供必要的营养支持。     

1-乙酰基-3-邻-甲基苯甲酰基-5-氟尿嘧啶的研究(简报)-——Ⅶ、对小鼠免疫功能的影响

用小鼠行巨噬细胞吞噬试验和迟发变态反应试验,证明口服A-OT-FU组的抑制作用优于5-FU组和FT-207组。     

MiR-195对BEL-7402/5-FU细胞5-氟尿嘧啶耐药性的影响

目的 探讨miR-195对BEL-7402/5-FU细胞5-氟尿嘧啶药物敏感性的影响。方法采用qRT-PCR检测BEL-7402细胞与BEL-7402/5-FU细胞中miR-195的表达水平。将miR-195质粒载体瞬时转染至BEL-7402/5-FU细胞;MTT检测细胞药物敏感性的改变。结果相比于BEL-7402细胞,miR-195在BEL-7402/5-FU细胞中表达水平下调;miR-195转染组的细胞增殖抑制率较miRNA阴性对照组及未转染组明显增高。结论MiR-195能够增加BEL-7402/5-FU细胞对5-氟尿嘧啶的药物敏感性,抑制细胞增殖。     

多西紫杉醇联合5-FU及CF治疗晚期胃癌24例疗效观察

目的:探讨多西紫杉醇联合氟尿嘧啶(5-FU)及亚叶酸钙(CF)治疗晚期胃癌的临床疗效及不良反应。方法:24例晚期胃癌患者给予多西紫杉醇、氟尿嘧啶(5-FU)、亚叶酸钙(CF)联合治疗,21-28天为1个周期,两个周期后评价疗效并观察患者生活质量改善情况和不良反应。结果:24例病人治疗总有效率为50%,患者的生活质量显著提高;毒副反应主要为恶心、呕吐、腹泻、脱发、白细胞减少及血小板抑制,无败血症和死亡病例。结论:多西紫杉醇联合5-FU及CF治疗晚期胃癌有较好的近期疗效,不良反应轻,患者易于耐受。     

Runt相关转录因子3在人结肠癌HCT-116/5-FU耐药细胞株中的表达及其与耐药的相关性

目的 建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法 采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116及耐药株HCT-116/5-FU的半数抑制浓度(IC₅₀值),绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间(TD);qRT-PCR和Western blot法检测亲本株HCT-116细胞及耐药株HCT-116/5-FU细胞中RUNX3、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)的mRNA和蛋白表达。采用siRNA技术敲低HCT-116细胞中RUNX3的表达,分为RUNX3敲低组(si-RUNX3-1组、si-RUNX3-2组)和阴性对照组(si-NC组),qRT-PCR和Western blot法分别在mRNA水平和蛋白水平验证RUNX3的敲低效率;CCK-8法测定si-RUNX3组和si-NC组的IC₅₀值,Western blot法测定两组中P-gp、MRP1和LRP的表达情况。结果 成功构建稳定的人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,耐药倍数为7.7倍;HCT-116/5-FU耐药细胞株群体TD较HCT-116亲本株明显延长(P<0.001),耐药细胞群体TD是亲本细胞的1.38倍(P=0.002),耐药株细胞形态发生变化。耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3 mRNA表达水平较亲本细胞株HCT-116明显降低(P=0.048),P-gp(P=0.008)、MRP1(P=0.001)和LRP mRNA(P=0.001)表达水平较亲本细胞株HCT-116明显升高;耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3蛋白质相对表达量较亲本细胞株HCT-116明显降低(P<0.001),P-gp、MRP1、LRP蛋白的相对表达量较亲本细胞株明显升高(P均<0.001)。成功构建了RUNX3低表达的HCT-116细胞模型,si-RUNX3-1组RUNX3 mRNA的表达与si-NC组相比差异无统计学意义(P=0.064),si-RUNX3-2组明显低于si-NC组(P=0.034);si-RUNX3-1组和si-RUNX3-2组RUNX3蛋白的表达量均明显低于si-NC组(P均<0.001),si-RUNX3-2组的敲低效率更高。选用si-RUNX3-2组完成后续实验,si-RUNX3组的IC₅₀值较si-NC组明显升高,下调RUNX3的表达能明显降低HCT-116细胞对5-FU的敏感性(P<0.001);si-RUNX3组的P-gp、MRP1和LRP蛋白相对表达量均明显高于si-NC组(P均<0.001)。结论 RUNX3表达下调能降低人结肠癌HCT-116细胞对5-FU的敏感性,可能与RUNX3表达的降低上调P-gp、MRP1和LRP等耐药蛋白表达,从而增加细胞的耐药性有关。     

丹皮酚对5-FU诱导的小鼠肠道黏膜损伤的保护作用及对其抗肿瘤活性的影响

目的 研究丹皮酚对5-氟尿嘧啶（5-FU）诱导小鼠肠黏膜损伤中的保护作用。方法 SD成年雄性〖JP2〗C57BL/6J小鼠随机分为对照组（Con组,12只）、5-FU注射组（5-FU组,12只）、丹皮酚25 mg/kg组（5-FU +Pae 25 mg/kg组,13只）、丹皮酚100 mg/kg组（5-FU+Pae 100 mg/kg组,13只）。通过腹腔注射5-FU建立小鼠肠黏膜损伤模型,探讨丹皮酚对小鼠5-FU注射后体重的影响。HE染色观察丹皮酚对小鼠小肠绒毛损伤的形态学影响;免疫组化实验研究小鼠小肠腺细胞凋亡情况;成瘤实验观察丹皮酚对5-FU抗肿瘤活性的影响。结果 注射5-FU 9天后,小鼠体重显著降低,而丹皮酚处理后可显著恢复小鼠体重。丹皮酚可明显降低小肠水肿程度或出血,并使小肠绒毛升高,增加小肠腺细胞数量。免疫组化结果显示,丹皮酚可显著降低小肠腺细胞凋亡程度。结论 丹皮酚可通过抑制小肠腺细胞凋亡降低5-FU对小鼠黏膜损伤的影响,具有一定的抗肿瘤作用,并可增强其抗肿瘤活性。     

Scutellaria barbata extract enhances efficacy and reduces toxicity of chemotherapy in hepatoma H22-bearing mice

Objective: To study the assistant effect of Scutellaria barbata extract (ESB) in 5-fluorouracil (5-FU) chemotherapy? Methods: A mouse model of transplanted hepatoma H22 was used in this study to evaluate the synergic and attenuating effects of ESB in chemotherapy. Tumor inhibition rate, life span of mice and the toxicity of chemotherapy were observed. The body weight, tumor weight, thymus index and spleen index in H22-bearing mice were also measured. The phagocytotic function of macrophages was studied by observing phagocytiz-ation of peritoneal macrophages. Results: The increase of body weight in 5-FU plus ESB groups was higher than that in 5-FU group, and the side effects such as anorexia, abdominal distention and athrepsy were relieved. Compared with untreated group, prolonged lifetime in 5-FU plus high-dose ESB group and 5-FU plus low-dose ESB group was improved. Life prolongation rates in 5-FU plus high-dose ESB group and 5-FU plus low-dose ESB group were 61.46% and 23.59% respectively. High-dose ESB, 5-FU, 5-FU plus low-dose ESB and 5-FU plus high-dose ESB could inhibit the tumor growth, and the tumor inhibition rates were 36.98%, 42.26%, 52.45% and 65.28%, respectively. Thymus index and spleen index were increased significantly in 5-FU plus low-dose ESB group and 5-FU plus high-dose ESB group. White blood cell (WBC) count was decreased obviously in 5-FU group, while the count of WBC was increased in 5-FU plus low-dose ESB group and 5-FU plus high-dose ESB group. The phagocytotic function of macrophages was also increased in 5-FU plus low-dose ESB group and 5-FU plus high-dose ESB group. Conclusion: ESB can enhance the effect of chemotherapy, relieve the side effects and improve immune function of mice in chemotherapy. These results suggest that ESB, as a biochemical modulator to enhance the therapeutic effects, is useful in cancer chemotherapy.     

区域性灌注化疗时5-FU的血液和肝脏组织药物浓度分布特征

目的 研究经肝动脉和门静脉等不同途径区域灌注化疗时5-FU在大鼠血液和肝脏组织中的浓度分布和消除过程,为临床肝脏肿瘤化疗提供参考.方法 经颈静脉注射5-FU或分别经肝动脉及门静脉插管区域灌注,剂量为20 mg/kg体重.采用高效液相色谱法测定血浆及肝脏组织中5-FU的含量.进一步计算5-FU在肝脏和血浆中的药动学数据和穿透比率及治疗优势度.结果 外周静脉注射时,肝脏组织的药物峰浓度(Cmax)和药物时量曲线下面积(AUC)分别为13.79±4.56μg/g,342.20±108.20μg·min/g;血浆Cmax和AUC分别为36.85±5.96μg/ml,842.00?58.00μg·min/ml.肝动脉灌注5-FU时,肝脏组织药物Cmax和AUC分别为29.58±4.30μg/g,794.60±15.40 μg·min/g;血浆Cmax和AUC分别为24.39±4.63μg/ml,639.70?33.80μg·min/ml.门静脉灌注时,肝脏组织药物Cmax和AUC分别为2821±4.06μg/g,733.60±18.3μg·min/g;血浆Cmax和AUC分别为21.02±406μg/ml,529.80±111.50μg·min/ml.结论 与外周静脉注射全身化疗比较,区域性肝动脉或门静脉灌注化疗可显著提高肝脏组织中的药物浓度,同时减少化疗药物在外周血中的分布,可作为临床肝癌化疗的较好治疗措施.