丰富康复训练对脑缺血大鼠行为功能表现的影响

目的：研究丰富康复训练能否促进大鼠脑缺血再灌注后行为功能表现的改善.方法：雄性Wistar大鼠77只,体重160-200g,随机分为缺血丰富训练组（Ischemia＋Enriched,IE组,n=36）,缺血对照组（Ischemia＋Standard,IS组,n=8）,假手术丰富训练组（Sham＋Enriched,SE组,n=21）和假手术对照组（Sham＋Standard,SS组,n=12）,使用线栓模型造成右侧大脑中动脉阻断（MCAO）并再灌注,丰富训练组自术后2d至28d群居于丰富环境笼并按步骤给予跑笼、转棒及杂技训练,记录杂技时间,对照组则独居标准环境笼,不予任何训练.再灌注1d、7d、14d、21d和28d分别进行各项行为功能测试.结果：杂技运动时间日益缩短,14d以前IE组显著性劣于SE组（P＜0.05）,14d以后无显著性差异;训练前,缺血组间和假手术组间Bederson神经功能评分和感觉运动评分无显著性差异（P＞0.05）,缺血组则显著性劣于假手术对照组（P＜0.05）,训练后,28d时Bederson评分IE组显著性优于IS组（P＜0.05）,感觉运动评分中仅21d时斜笼测试IE组显著性优于IS组（P＜0.05）;肢体放置测试和足失误测试中IE组与IS组间始终无显著性差异（P＞0.05）,但IE组恢复趋势优于IS组,缺血组仍显著性劣于假手术对照组（P＜0.05）.结论：丰富康复训练可促进脑缺血大鼠行为功能表现的改善.     

康复训练介导NGF/VEGF/CD34表达对脑缺血再灌注大鼠血管再生的影响

目的：观察康复训练对脑缺血再灌注大鼠神经功能的影响，探讨康复训练调节血管再生的机制。方法：将SD大鼠适应性喂养1周后，进行脑缺血再灌注手术造模，24h后挑选神经功能评分2~3分的大鼠和假手术大鼠分为假手术组（8只），康复组（16只）和脑缺血组（24只），康复组每天按计划进行跑步训练，分别于康复训练的第7天、第14天对大鼠进行神经行为学评分并随机挑选部分大鼠进行取材进行TTC染色、免疫组化及免疫印迹实验。结果：脑缺血再灌注造成大鼠神经功能损伤，7d和14d的康复训练有效提高了大鼠神经行为学评分（P＜0.05）。此外，脑缺血再灌注诱导了大鼠脑中血管内皮生长因子（VEGF）与神经生长因子（NGF）蛋白表达增加，促进脑中血管微循环的建立；与脑缺血组相比，7d和14d康复训练显著增加了大鼠脑中VEGF与NGF表达（P＜0.05），加速了缺血区血管微循环的建立（P＜0.05）。结论：康复训练对于脑缺血再灌注有良好的治疗效果，其机制可能是增加了VEGF与NGF表达，加速了缺血区血管微循环的建立。     

运动训练对大鼠脑缺血再灌注后肢体功能恢复及微管相关蛋白含量的影响

目的　研究运动训练对局部脑缺血再灌注大鼠的肢体功能恢复是否具有促进作用 ,并同时从分子角度探讨其相关机制。方法　将大鼠随机分为运动组、对照组、假手术组及正常对照组 ,采用线栓法制作Wistar大鼠大脑中动脉闭塞 (middlecerebralarteryocclusion ,MCAO)再灌注模型。运动组大鼠术后每天进行游泳训练 ,采用前肢放置实验及平衡实验观察各组大鼠肢体功能恢复情况 ,并同时采用免疫组化法观察脑缺血周边区微管相关蛋白 2 (MAP 2 )的免疫活性强度。结果　大鼠局部脑缺血再灌注后 ,运动组大鼠前肢放置实验评分及平衡实验评分均优于对照组 ,运动组大鼠前肢放置实验评分在术后第 9,11,13 ,15,17,19,2 1,2 3及 2 5天时 ,较对照组差异均有极显著性意义 (P均 <0 .0 1) ;平衡实验评分在第 7,9,11,13 ,17及 19天时较对照组差异均有显著性意义 (P <0 .0 1或 0 .0 5) ;运动组大鼠皮层缺血周边区MAP 2表达水平亦高于对照组 ,在术后第 14 ,2 8天时较对照组差异具有显著性意义 (P均 <0 .0 5)。结论　运动训练能促进缺血再灌注大鼠的肢体功能恢复 ,其相关机制可能与上调缺血周边区MAP 2的表达有关     

电针结合运动疗法对脑梗死大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨电针结合游泳训练对脑缺血再灌注大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响以及其促进大鼠受损功能恢复的机制。方法选取健康雄性SD大鼠50只,随机分为假手术组、对照组、电针组、训练组、联合治疗组,每组10只。采用线栓法制备左侧大脑中动脉阻塞(MCAO)2 h再灌注模型。电针组大鼠行电针治疗,每日1次,每次20 min;训练组行游泳训练,每日1次,每次20 min;联合治疗组行电针治疗与游泳训练,均为每日1次,每次20 min;对照组和假手术组大鼠不行任何治疗。采用Zausinger评分及前肢放置试验评定大鼠功能缺损情况,并采用RT-PCR法测定缺血侧大脑皮层VEGF m RNA表达量。结果假手术组无神经功能缺损。与对照组相比,电针组、训练组及联合治疗组受损神经功能均得以改善(P<0.05)。训练组的Zausinger评分高于电针组,且前肢放置试验评分低于电针组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。联合治疗组与任何单一治疗的评分相比均具有显著差异(P<0.05)。与电针组、训练组相比,联合治疗组VEGF m RNA表达量明显增多,差异具有显著性(P<0.05)。训练组VEGF m RNA表达量高于电针组,差异无显著性(P>0.05)。结论电针疗法与运动训练均能够改善大鼠受损的运动、感觉功能及提高脑缺血再灌注大鼠大脑皮层中VEGF m RNA表达量,且联合治疗能够取得更好的效果;其机制可能与高表达的VEGF能够更好地促进血管的重塑与再生相关。     

运动训练对大鼠脑梗死后肢体功能和GAP-43、MAP-2表达水平的影响

目的:研究运动训练能否促进大鼠局部脑缺血再灌注后的功能恢复并从神经可塑性角度探讨其机理。方法:线栓法制作Wistar大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO)模型,随机分为运动组、对照组、假手术组及正常组,运动组术后24h起每天游泳10min,采用行为测试试验评分观察肢体功能恢复情况,免疫组化法观察脑缺血周边区生长相关蛋白-43(GAP-43)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的免疫活性强度。结果:大鼠局部脑缺血再灌注后,运动组前肢放置试验和平衡试验评分优于对照组,前肢放置试验在第9、11、13、15、17、19、21、23、25天差异具有显著性(P均<0.01),平衡试验在第7、9、11、13、17、19天差异具有显著性(P<0.01—0.05)。运动组皮层缺血周边区GAP-43和MAP-2表达水平高于对照组,前者在第7天、14天、28天差异有显著性(P<0.05),后者在第14天、28天差异有显著性(P<0.05)。结论:运动训练能促进大鼠MCAO后的肢体功能恢复,其机制可能与缺血周边区GAP-43和MAP-2的表达上调有关。     

强化运动训练对脑缺血再灌注大鼠运动功能及MAP-2表达的影响

目的：探讨应用常规和强化运动训练对脑缺血再灌注大鼠运动功能以及海马区和梗死灶周围微管相关蛋白-2（MAP-2）表达的影响。方法：采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1h,再灌注第7、14和21天,54只造模成功的大鼠随机分为造模对照组（A组）、常规运动训练组（B组）和强化运动训练组（C组）,分别采用姿势反射试验、肢体不对称应用试验和角落试验观察各组大鼠的运动功能。结果：3组实验大鼠的3项行为学测试评分在造模后24h均无明显差异,但在第7、14和21天时则有一定差异,与A组比较,除造模后第21天时B组角落试验评分外,B组和C组3项测试评分在造模后第7天、14d和21天均明显好于A组;与B组比较,除造模后第21天肢体不对称应用试验评分外,C组评分在第14天和21天均明显好于B组。MAP-2的免疫组化结果显示,与A组比较,B组和C组在海马区和梗死灶周围MAP-2表达的光密度值在第14天和21天时均明显高于A组,而且C组MAP-2表达的光密度值在第14天和21天时也明显高于B组。结论：运动训练可促进脑缺血再灌注大鼠运动功能的恢复,其机制可能与脑内MAP-2水平上调有关,强化运动训练的效果更明显。     

谷红注射液对脑缺血再灌注大鼠皮层血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨谷红注射液对脑缺血再灌注大鼠梗死侧皮层区血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠30只,分为假手术组(n=6)、模型组(n=6)、乙酰谷酰胺组(n=6)、红花注射液组(n=6)和谷红注射液组(n=6)。采用大鼠大脑中动脉梗阻(MCAO)2 h再灌注模型,再灌注24 h后腹腔注射给药,连续14 d。治疗后,ELISA法检测各组大鼠皮层区VEGF表达。结果与假手术组相比,模型组VEGF表达显著降低(P0.001)。与模型组相比,乙酰谷酰胺组和谷红注射液组VEGF的表达提高(P0.05)。结论谷红注射液能提高大鼠脑缺血再灌注后皮层区VEGF的表达,可能是其发挥抗脑缺血再灌注损伤的作用机制之一。     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后nNOS表达的影响

目的探讨异丙酚对大鼠局灶性脑缺血．再灌注损伤后神经型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响及其可能的脑保护机制。方法78只雄性Wistar大鼠随机分为3组：假手术组（s组,n=6）;缺血．再灌注组（I-R组,n=36）;异丙酚干预组（P组,n=36）。I-R组和P组按不同再灌注时间又随机分为三个亚组：1h亚组、3h亚组、6h亚组（n=12）。采用右侧大脑中动脉线栓法（MCAO）建立大鼠局灶性脑缺血．再灌注模型。s组行假手术操作,但不行线栓法阻断血流及药物干预;I-R组于缺血2h后再灌注时即刻右侧侧脑室注射生理盐水（1mg／kg）;P组于缺血2h后再灌注时即刻右侧侧脑室注射1％异丙酚（1mg／kg）。所有大鼠于再灌注前进行神经学功能评分;分别于各再灌注时间点断头取脑组织,1Trc染色法测定脑梗死灶（n=6）;苏木精．伊红（HE）染色观察脑组织病理学变化（n=6）;免疫组织化学方法测定nNOS蛋白表达（n=6）。结果与I-R组比较,P组神经学功能评分降低（P〈0．05）。在I-R组内,与1h亚组比较,3h亚组和6h亚组脑梗死灶明显增大（P〈0．05）;P组3h亚组、6h亚组与I-R组同时间亚组比较．脑梗死灶减小（P〈0．05）。S组神经细胞结构完整;I-R组神经细胞结构破坏,有核分裂及核溶解;与I-R组比较．P组脑组织病理学改变减轻。s组仅有少量nNOS蛋白表达;在I．R组内,nNOS蛋白在1h亚组表达升高,在3h亚组表达到高峰,6h亚组与3h亚组比较表达降低（P〈0．05）;P组3h亚组、6h亚组与I—R组同时间亚组比较,nNOS蛋白表达减少（P〈0．05）。结论异丙酚抑制大鼠局灶性脑缺血．再灌注后nNOS蛋白的表达,可能是其脑保护作用机制之一。     

脑缺血后Caspase-3蛋白Bcl-2和Bax基因表达在神经损伤中的作用

目的:探讨实验性大鼠脑缺血/再灌注损伤后Caspases-3蛋白、Bax和BcL-2基因调控神经元凋亡的作用机制与临床意义。方法:成年健康雄性Wistar大鼠64只,随机分为对照组和实验组各32只。实验组大鼠制备大脑中动脉闭塞再灌注模型。再灌注后2组大鼠均于不同时间点进行神经功能评分(Bederson评分)、按Feeney评分测定整合及协调功能,检测前肢放置试验和运动功能得分;利用TUNEL法观察脑神经元凋亡情况;免疫组化法检测脑缺血区Caspases-3、Bax和BcL-2阳性神经元的表达。结果:实验组大鼠再灌注6h～7d时Bederson和Feeney评分明显低于对照组;而前肢放置检测评分高于对照组(均P0.05,0.01)。14d各项检测指标转为正常,与对照组相同。再灌注48h点实验组大鼠皮质及海马区TUNEL、Caspase-3和Bax阳性神经元达高峰,然后开始下降,14d接近3h点表达,但均明显高于对照组(P0.05,0.01);再灌注6h～7d点皮质海马区Bcl-2阳性神经元表达呈降低趋势,14d接近3h点。结论:脑缺血后Caspases-3蛋白、Bax和Bcl-2基因表达调控神经元凋亡并促进神经损伤。     

运动训练改善脑缺血大鼠梗死体积与神经行为能力的实验研究

目的：观察运动训练能否促进大鼠局部脑缺血再灌注后的神经功能恢复，并且观察早期运动训练对脑缺血再灌注后梗死体积的影响，从而探讨其促进功能恢复的机制。方法：成年雄性SD大鼠24只，随机分成运动训练组、对照组和假手术组，每组8只。大脑中动脉闭塞（MCAO）法造模24h后，运动训练组给予跑台训练，每天30min，连续训练2周，对照组及假手术组给予相同的抓取和固定。采用神经行为学评分评价造模情况及神经功能的恢复情况；甲苯胺蓝染色观察大鼠局部脑缺血再灌注后梗死体积的大小。结果：2周后，运动训练组的神经行为学评分明显高于对照组（P〈0．05），并低于假手术组（P〈0．05）；运动训练组的脑梗死体积明显小于对照组（P〈0．05）。结论：脑缺血再灌注后早期运动训练能够减小脑梗死体积，促进脑缺血大鼠神经功能的恢复。     

The Effects of Antecedent Exercise on Motor Function Recovery and Brain-derived Neurotrophic Factor Expression after Focal Cerebral Ischemia in Rats

[Purpose] In the present study, we investigated the effect of antecedent exercise on functional recovery and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) expression following focal cerebral ischemia injury. [Subjects] The rat middle cerebral artery occlusion (MCAO) model was employed. Adult male Sprague-Dawley rats were randomly divided into 4 groups. Group I included untreated normal rats (n=10); Group II included untreated rats with focal cerebral ischemia (n=10); Group III included rats that performed treadmill exercise (20 m/min) training after focal cerebral ischemia (n=10); and Group IV included rats that performed antecedent treadmill exercise (20 m/min) training before focal cerebral ischemia (n=10) as well as treadmill exercise after ischemia. At different time points (1, 7, 14, and 21 days) Garcia’s score, and the hippocampal expressions level of BDNF were examined. [Results] In the antecedent exercise group, improvements in the motor behavior index (Garcia’s score) were observed and hippocampal BDNF protein expression levels increased. [Conclusion] These results indicate that antecedent treadmill exercise, before permanent brain ischemia exerts a neuroprotective effect against ischemia brain injury by improving motor performance and increasing the level of BDNF expression. Furthermore, the antecedent treadmill exercise of appropriate intensity is critical for post-stroke rehabilitation.Key words: Antecedent exercise, Brain-derived neurotrophic factor, Cerebral ischemia     

电针结合运动疗法对脑缺血大鼠神经功能恢复及神经生长因子的影响

目的:研究电针结合运动疗法对脑缺血大鼠神经功能恢复及神经生长因子的影响。方法:70只SD大鼠随机分为5组各14只,A组为正常对照组,B、C、D和E组制作脑缺血模型,造模成功后1d,B组不做任何干预,C组开始接受电针治疗,D组同时进行滚笼运动训练,E组综合C、D 2组的治疗方法。各组分别在治疗后1、12及24 d时进行神经功能评分,免疫组化法观察神经生长因子(NGF)的表达。结果:造模后12及24 d时C、D、E组神经功能评分和NGF蛋白的表达水平均优于B组(P<0.05);与C、D组比较E组更显著(P<0.05);24 d后各组NGF阳性细胞表达数均较12 d有所下降。结论:规律有序的康复训练能明显提高脑缺血大鼠神经功能的恢复,综合疗法效果更显著,其机制可能与NGF表达上调有关。     

“滋水涵木”针刺对局灶性脑缺血再灌注大鼠血管内皮生长因子、突触素表达的影响

目的:探讨"滋水涵木"针刺对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠神经血管单元相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF)、突触素(SYN)表达的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠144只随机分为假手术组(n=30)、模型组(n=42)、针刺组(n=42)和针刺对照组(n=30)。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO),针刺组和针刺对照组取太溪穴、太冲穴,针刺30 min,1次/日,6次/周,连续2周;假手术组、模型组术后不给予干预。术后第3、7、14天采用m NSS量表对大鼠进行神经行为学评分、TTC染色测脑梗死体积以及免疫组化SP法观察脑梗死周围皮质VEGF、SYN的表达。结果:针刺对照组和假手术组大鼠无神经功能缺损症状,TTC染色未见明显脑梗死灶,VEGF及SYN表达较弱;在术后第7、14天针刺组大鼠神经功能恢复明显优于模型组,术后第3天,针刺组与模型组比较脑梗死面积差异无统计学意义,在第7和14天针刺组脑梗死面积小于模型组(P<0.05);术后第3天,模型组VEGF明显高于假手术组和针刺对照组,在第7天达到高峰,第14天仍表达显著,针刺组在第7和14天VEGF的表达明显高于模型组(P<0.05);在各时间点模型组SYN表达均高于针刺对照组和假手组(P<0.05),第14天表达最显著,针刺组则在第7和14天高于模型组(P<0.05)。结论:"滋水涵木"针刺能促进大鼠脑梗死后神经血管单元的相关蛋白VEGF、SYN的表达,减少脑梗死体积,促进神经功能的恢复。     

Beneficial Effects of Antecedent Exercise Training on Limb Motor Function and Calpain Expression in a Rat Model of Stroke

[Purpose] In the present study, we investigated the effects of antecedent exercise on functional recovery and calpain protein expression following focal cerebral ischemia injury. [Subjects and Methods] The rat middle cerebral artery occlusion model was employed. Adult male Sprague-Dawley rats were randomly divided into 4 groups. Group I comprised untreated normal rats (n=10); Group II comprised untreated rats with focal cerebral ischemia (n=10); Group III comprised rats that performed treadmill exercise (20 m/min) training after focal cerebral ischemia (n=10); and Group IV comprised rats that performed antecedent treadmill exercise (20 m/min) training before focal cerebral ischemia (n=10). At different time points (1, 7, 14, and 21 days), limb placement test score and the levels of calpain protein in the hippocampus were examined. [Results] In the antecedent exercise group, improvements in the motor behavior index (limb placement test) were observed and hippocampal calpain protein levels were decreased. [Conclusion] These results indicated that antecedent treadmill exercise prior to focal cerebral ischemia exerted neuroprotective effects against ischemic brain injury by improving motor performance and decreasing the levels of calpain expression. Furthermore, these results suggest that antecedent treadmill exercise of an appropriate intensity is critical for post-stroke rehabilitation.Key words: Antecedent exercise, Calpain, Cerebral ischemia     

电针合谷穴对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑内毛细血管密度及CD34表达的影响

目的观测电针大鼠双侧合谷穴(LI04)对局灶性脑缺血再灌注后脑内CD34表达及血管新生的影响。方法90 只大鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=42)和电针组(n=42)。模型组和电针组采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,电针组采用电针治疗。局灶性脑缺血1 h 后再灌注,观察再灌注后2 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d、21 d 共7 个时相点大鼠神经症状学评分,采用HE染色观察并计算梗死体积和毛细血管密度,免疫组织化学法检测CD34的表达。结果电针组与模型组比较,再灌注后各时间点神经症状学评分降低(P<0.05)。电针组梗死体积显著小于模型组(P<0.001)。与模型组相比,电针组毛细血管密度再灌注后2 h 开始增加(P<0.05),再灌注后24 h 到再灌注后14 d 均较模型组明显增加(P<0.01)。电针组再灌注后3 d CD34阳性细胞表达较模型组明显增加(P<0.01),7 d 增加达高峰(P<0.01),14 d 仍有显著性差异(P<0.05)。结论电针能促进局灶性脑缺血再灌注后CD34的表达,增加毛细血管密度,促进血管新生。     

VEGF/VEGFR在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用

目的:研究VEGF/VEGFR在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用。方法:SD大鼠108只,随机分为假手术组、对照组与VEGFR抗体组,每组36只,制备大脑中动脉缺血再灌注损伤(MCAO)模型,假手术组不造成缺血。VEGFR抗体组在造模前20 min侧脑室注射VEGF抗体,假手术组、对照组侧脑室注射等量生理盐水。比较3组在造模后1、3、7 d Bederson评分、VEGFR及缺血半暗带VEGFR2的变化。结果:VEGFR抗体组的Bederson评分在第1、3天高于对照组(P<0.05),VEGFR的表达在第1、3天低于对照组(P<0.01),但较假手术组高;VEGFR抗体组VEGFR2表达在第1、3天低于对照组(P<0.01)。结论:脑缺血再灌注损伤时,VEGF活化刺激VEGFR表达上调,促进血管内皮细胞增殖,加速新生血管形成。     

丰富康复训练对大鼠脑缺血再灌注后功能恢复及神经元树突生长的影响

目的 观察丰富康复训练对大鼠缺血再灌注脑损伤功能恢复的影响，以及损伤对侧大脑皮层前肢运动代表区第V层锥体神经元树突的可塑性变化。方法 雄性Wistar大鼠32只，体重180～200g，预训练后随机分成两组，缺血组和假手术组，每组16只。线栓法制作右大脑中动脉阻断（MCAO）2h再灌注模型。造模后缺血组随机分成丰富训练组（IE组）和独居组（IS组），假手术组随机分成丰富训练组（SE组）和独居组（SS组），每组8只。术后24h，IE组和SE组置于丰富环境笼饲养，按计划给予跑笼、转棒和杂技等训练，IS组和SS组置于独居笼饲养，不给予任何训练，4组大鼠在造模后24h、1周、2周、3周、4周进行神经功能评估，观察其恢复状况。用Golgi-Cox染色方法，观察损伤对侧大脑皮层前肢运动代表区第V层锥体神经元树突的变化。结果 IE组在各项功能评估中均优于IS组。3周时，肢体放置测试IE组与假手术组已无显著性差异（P〉0.05）；4周时，足失误测试IE组与假手术组已无显著性差异（P〉0．05）。GolgiCox染色，IE组比IS组和假手术组的树突分支点数有明显增加（P〈0．01）。结论 丰富康复训练能有效促进缺血再灌注脑损伤大鼠的功能恢复，并促进缺血对侧与功能恢复相关的大脑皮层神经元发生可塑性变化。