单细胞凝胶电泳检测吸烟者外周血淋巴细胞DNA的损伤

目的检测吸烟者外周血淋巴细胞DNA的损伤状况,探讨单细胞凝胶电泳在分子流行病学研究中的应用价值.方法单细胞凝胶电泳.结果吸烟者的外周血淋巴细胞DNA损伤显著重于非吸烟者,拖尾长度分别为(27.5±2.8)μm和(16.2±1.5)μm;尾矩分别为11.3±1.7及3.0±0.9,并且呈现剂量反应关系;随着吸烟剂量的增加,外周血淋巴细胞的DNA损伤加重.结论吸烟可以造成外周血淋巴细胞DNA损伤.单细胞凝胶电泳能够较灵敏地反映人群因有毒化学物质造成的DNA损伤,在分子流行病学研究中具有重要的应用价值.     

单细胞凝胶电泳法检测HBV患者外周血淋巴细胞DNA损伤

目的探讨乙型肝炎病毒与DNA损伤的关系以及不同感染模式慢性乙型肝炎患者(大三阳和小三阳患者)DNA损伤情况。方法应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测对照组和不同感染模式慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA的损伤情况,采用彗星分析软件对实验结果进行淋巴细胞损伤率、彗星尾长(Tail Extent)、彗星尾DNA百分含量(Tail % DNA)、彗星尾惯量(Tail Inertia)、Olive尾距(Olive Tail Moment)等指标进行分析。结果经SCGE技术后得HBV感染与DNA损伤断裂关系有统计学意义(P0.05);大小三阳组间DNA损伤断裂有统计学差异(P0.05)。小三阳组经SCGE技术后所得彗星图像可见有少量彗星尾。大三阳组经SCGE技术后所得彗星图像可见有明显彗星尾。慢性乙型肝炎组外周血淋巴细胞DNA损伤与对照组比较彗星尾长、尾惯量在统计学上有显著性差异(P0.05);不同感染模式的乙型肝炎外周血淋巴细胞DNA损伤比较,尾长、尾DNA百分含量和尾惯量在统计学上有统计学差异(P0.05)。结论 HBV感染可能造成外周血淋巴细胞DNA损伤,且不同感染模式的损伤情况不同。     

用单细胞凝胶电泳观察氟砷单独及联合对淋巴细胞DNA损伤

目的 观察氟、砷单独及联合作用对正常人淋巴细胞DNA的损伤作用及特点。方法 采用单细胞凝胶电泳（SCGE）实验，观察不同剂量氟、砷单独及联合应用对正常人淋巴细胞DNA的损伤。结果 人淋巴细胞在浓度为0．1、0．5μmol／L的NaAsO2及浓度为10、50μmol／L的NaF染毒24h后，均引起明显的DNA泳动（彗星尾）并呈现明显的剂量-效应关系；氟砷联合作用淋巴细胞，在0．5μmol／L NaAsO2＋50μmol／L NaF的剂量下，细胞DNA的损伤呈现出协同作用（P〈0．01）。结论 NaAsO2与NaF均可引起DNA损伤；低剂量NaAsO2与NaF联合作用时，则呈现协同作用。     

应用单细胞凝胶电泳比较研究砷对人类细胞DNA的损伤

目的：探讨不同细胞对砷的基因毒性反应及其机理,探讨快速,敏感及经济的细胞基因毒性检测方法。方法：应用单细胞凝胶电泳（Single cell gel electrophoresis,SCGE)或彗星试验（comet assay)比较研究,结果;细胞DNA损伤与砷处理量间呈显著的剂量反应关系和时效关系。受试细胞对砷的基因毒性反应的敏感性强弱顺序为：PMA－HL60＞DMSO－HL60＞HL60＞淋巴细胞,人工计数彗星尾分级频数与计算机自动测量慧星尾DNA泳动量的结果完全一致,用非参数Mann-Whitney多变量检验分析彗星尾分级频数的显著性与参数Tukey多变量检验分析量彗星尾DNA泳动量的显著性完全相同,而且不同浓度的砷与5级彗星尾频数的相关性比其与阳性彗星尾总数间的更为显著,结论：微量砷即可引起细胞不同程度的DNA损伤,不同细胞亚群对砷的基因毒性反应不同,SCGE是一个简便,快速,敏感及经济的细胞基因毒性检测方法,可应用于各级水平的环境与人类疾病（砷污染）监测与研究。     

丹参酮对过氧化氢致慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

目的:观察丹参酮对过氧化氢致慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA损伤的影响.方法:利用快速、灵敏的检测细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳(SCGE)技术并结合IMI 1.0慧星分析软件,以"彗星"尾长、尾%DNA、尾惯量和尾矩来评价淋巴细胞DNA的损伤程度.结果:加入丹参酮后使过氧化氢致慢性乙肝患者外周血淋巴细胞的DNA经SCGE形成的"彗星"尾长、尾%DNA、尾惯量和尾矩值减小(P＜0.05).结论:丹参酮对过氧化氢致慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA损伤有一定的拮抗作用.     

T-2毒素对大鼠心肝肾及外周血淋巴细胞DNA损伤的实验观察

目的 探讨T－2毒素在体内的毒作用靶器官以及对T－2毒素中毒的敏感监测方法和生物标志。方法 采用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术及动物实验。结果 在所测的器官中,以大鼠肝脏对T－2毒素最为敏感,其次为外周血淋巴细胞（PBL）。结论 外周血淋巴细胞的DNA损伤可以作为机体T－2毒素中毒的生物标志进行探索。     

亚砷酸钠对大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的研究

目的 研究亚砷酸钠(NaAsO2)染毒对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用.方法 Wistar大鼠32只,体质量180～200 g,雌雄各半,按体质量随机分为4组,分别为0(对照)、0.05、0.15、0.45 mg/L NaAsO2染毒组,每组8只.大鼠自由饮用含不同剂量NaAsO2的水,每天测量体质量并记录水消耗量.连续染毒30 d后,眼眶静脉采血,应用单细胞凝胶电泳试验评价大鼠外周血淋巴细胞的损伤程度.结果 0.05、0.15、0.45mg/L染砷组大鼠的体质量增长[(121.00±38.57)、(120.62±42.80)、(125.38±48.68)g]和饮水量[(36.9±6.2)、(37.9±5.8)、(39.3±4.2)ml/d]与对照组[(119.25±47.27)g、(38.4±5.1)ml/d]比较,差异无统计学意义(F值分别为0.040、0.828,P均＞0.05).0.05、0.15、0.45 mg/L染砷组大鼠的外周血淋巴细胞拖尾率[46.25%(185/400)、57.00%(228/400)、64.00%(256/400)]、彗星尾长[(32.89±17.18)、(58.74±36.28)、(77.55±35.73)μm]、尾矩[(6.29±3.74)、(11.20±9.64)、(17.30±12.60)μm]显著高于对照组[39.25%(157/400)、(18.73±15.83)、(2.61±1.05)μm,P均＜0.01];随着染砷剂量的增加,淋巴细胞拖尾率、彗星尾长和尾矩均呈上升趋势.结论 低剂量砷染毒可引起大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤.

Abstract：

Objective To explore the DNA damage in peripheral blood lymphocytes of rats exposed to sodium arsenite. Methods Thirty-two Wistar rats, weighing 180 - 200 g, equal male and female, were randomly divided into 4 groups, 8 in each group. Sodium arsenite 0(control) ,0.05,0.15,0.45 mg/L were given through drinking water for 30 days. Body weight and drinking water consumption were measured every day. Blood were collected and DNA damage in peripheral blood lymphocytes was examined by single cell gel electrophoresis.Results The increase of body mass[( 121.00 ± 38.57), ( 120.62 ± 42.80), ( 125.38 ± 48.68)g]and water intake [(36.9 ± 6.2), (37.9 ± 5.8), (39.3 ± 4.2)ml/d]in 0.05,0.15,0.45 mg/L sodium arsenite groups were compared with the control group[( 119.25 ± 47.27)g, (38.4 ± 5.1 )ml/d], and the difference were not significant (F = 0.040,0.828, all P ＞ 0.05). The tail ratios[46.25%(185/400) ,57.00%(228/400),64.00%(256/400)], tail lengths [(32.89 ± 17.18), (58.74 ± 36.28), (77.55 ± 35.73 ) μm]and tail moments [(6.29 ± 3.74), ( 11.20 ± 9.64),(17.30 ± 12.60)μm]in 0.05,0.15,0.45 mg/L sodium arsenite groups were significantly higher than those of the control group[39.25%(157/400), (18.73 ± 15.83),(2.61 ± 1.05)μm, all P ＜ 0.01], and the tail ratios,tail lengths and tail moments in lymphocytes increased with increased doses of arsenic concentration. Conclusions Low doses of arsenic exposure can induce DNA damage in peripheral blood lymphocytes of rats.     

单细胞凝胶电泳技术检测大鼠脑缺血再灌注后DNA损伤及海风藤提取物的干预作用

目的用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测局灶性脑缺血再灌注（I／R）大鼠神经细胞DNA损伤及海风藤干预作用。方法应用线栓法建立Wistar大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型，单细胞凝胶实验技术分别观察假手术组、模型组、二甲基亚砜（DMSO）组、海风藤提取物治疗组缺血灶周神经细胞DNA损伤的变化。结果与假手术组比较，模型组和DMSO组DNA损伤率6～72h明显增加，但海风藤组DNA损伤率与其他组比较24、72h有明显下降（P〈0．01，P〈0．05）。结论海风藤可以减轻I／R后神经细胞DNA损伤，对缺血脑组织有保护作用。     

砷与5-氮胞苷对人淋巴细胞DNA损伤的联合作用

为探讨砷和5－氮胞苷对人淋巴细胞DNA损伤及修复的联合作用，应用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术比较研究了5－氮胞苷与砷同时和前后作用于人类淋巴细胞产生的联合毒性，结果显示10μmol/L5-氮胞苷和10μmol/L砷单独处理人淋巴细胞2h引起明显的DNA泳动（彗星尾），但两试剂引起的DNA泳动（彗星尾）间无显差异，5－氮胞苷前处理与砷后处理2h引起的彗星尾与其单独处理组比较非常显，砷前处理与5－氮胞苷后处理引起的彗星尾与其单独处理组比较无显性差异，但较对照组差异显，10μmol/L5-氮胞苷和10μmol/L砷分别单独处理2h引起了人淋巴细胞显的DNA损伤（链断裂），5－氮胞苷与砷在对淋巴细胞DNA的损伤上表现为单纯相加作用。5－氮胞苷前处理显增加了细胞对砷的基因毒性的敏感性，或砷后处理显增加了5－氮胞苷引起的DNA损伤，5－氮胞苷后处理2h显抑制了细胞对砷所致DNA损伤的修复。     

H2O2致小鼠淋巴细胞DNA的损伤及修复

目的 应用单细胞电泳检测（ＳＣＧＥ）过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）致小鼠淋巴细胞ＤＮＡ损伤及其修复。方法 标准ＳＣＧＥ条件下荧光显微镜观察。结果 Ｈ２Ｏ２不同浓度８０、１６０和３２０ｕｍｏｌ／Ｌ,３个组Ｈ２Ｏ２浓度均可致小鼠淋巴细胞ＤＮＡ损伤,较低剂量即可造成细胞拖尾,可逆性损伤在６０ｍｉｎ内可获得明显修复。结论 单细胞电泳可快速灵敏地检测氧化损伤,也可能用于流行病学研究。     

低剂量T-2毒素与脱氧雪腐镰刀菌烯醇单独及联合染毒对小鼠末梢血有核细胞DNA损伤的观察

目的 观察低剂量T-2毒素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对小鼠末梢血有核细胞DNA损伤的特点及其程度,探索亚临床剂量下的毒性作用.方法 3周龄雌性Balb/c小鼠80只,体质量(14.0±1.5)g.将小鼠按体质量随机分为对照组、T-2毒素组、DON组、T-2+DON联合组,每组20只.经腹腔注射感染毒素,染毒剂量:T-2毒素5 μg·kg-1·d-1,DON 20 μg·kg-1·d-1;对照组给予等量生理盐水.染毒至16周和21周,分别取小鼠尾血,用单细胞凝胶电泳法(SCGE)观察小鼠末梢血有核细胞拖尾率、尾DNA含量、尾长、尾动量变化.结果 ①T-2毒素组,尾DNA含量、尾长、尾动量[16周:(27.71±15.85)%、(13.67±5.56)μm、4.26±3.83;21周:(28.38±15.57)%、(13.83±5.47)μm、4.37±3.82]均增加,与对照组[16周:(11.87±4.61)%、(10.59±6.70)μm、1.34±0.98;21周:(11.31±3.94)%、(10.83±7.05)μm、1.29±1.01]比较,差异有统计学意义(P均<0.05);②DON组拖尾率、尾DNA含量、尾动量[16周:5.62%、(28.13±13.31)%、3.39±2.35;21周:7.71%、(29.17±15.12)%、5.70±4.17]均增加,其中仅拖尾率与对照组(16周:4.34%;21周:4.38%)比较,差异有统计学意义(P均<0.05);③T-2+DON联合组拖尾率、尾DNA含量、尾长、尾动量[16周:6.21%、(30.14±15.48)%、(16.93±6.58)μm、5.54±4.22;21周:8.17%、(30.85±15.76)%、(17.21±6.45)μm、5.70±4.17]均增加,与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05);与T-2毒素或DON组比较,尾DNA含量和尾长均增加(P均<0.05).结论 低剂量T-2毒素和DON均可对小鼠未梢血有核细胞DNA产生明确损伤;T-2和DON联合染毒较单独染毒的损伤作用更明显.     

茶多酚对HL-60细胞氧化损伤时DNA双链残余率的影响

观察茶多酚对ＨＬ－６０细胞氧化损伤时ＤＮＡ双链残余率的影响。方法采用ＤＮＡ功光旋旋法对ＤＮＡ双链残余率进行检测。结果过氧化氢可以对细胞ＤＮＡ造成损伤,细胞浓度为１．５＊１０＾９／Ｌ时,过氧化氢浓度在０．１－０．５ｍｍｏｌ／Ｌ时与ＤＮＡ双链残余率有良好的线性关系。     

Hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤的抑制作用及其机制

目的：观察人工合成的生长激素释放肽hexarelin对H2O2诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞损伤是否有抑制作用及可能的机制。方法：体外原代培养的大鼠胸主动脉内皮细胞,随机分为对照组、H2O2组及H2O2＋10-5 mmol/Lhexarelin组和H2O2＋10-7 mmol/L hexarelin组,通过光镜和电镜观察各组细胞的形态学变化。采用MTT比色法检测各组细胞活力的变化;用比色法检测内皮细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）的含量;用硝酸还原酶法检测内皮细胞培养上清液中一氧化氮（NO）的含量。结果：光镜和电镜观察发现,H2O2可以诱导大鼠胸主动脉内皮细胞损伤及凋亡;而Hexarelin能减轻H2O2所诱导的内皮细胞损伤及凋亡。MTT比色法检测发现,H2O2能使内皮细胞的活力由（0.39±0.03）下降为（0.23±0.04）（P〈0.01）;而1×10-5和1×10-7 mmol/L hexarelin能减轻H2O2对内皮细胞活力的影响,内皮细胞的活力分别由（0.23±0.04）变为（0.30±0.02）和（0.29±0.02）（P〈0.01）。H2O2能诱导内皮细胞产生LDH,由（31.11±4.97）U/L上升为（157.48±7.33）U/L（P〈0.01）;而1×10-5和1×10-7mmol/L hexarelin能减少LDH的生成,由[（157.48±7.33）U/L下降为（55.12±6.11）U/L和（94.48±4.07）U/L（P〈0.01）。另外,H2O2能引起NO生成减少,由（29.38±6.14）μmol/L降为（17.24±7.51）μmol/L（P〈0.01）,而hexarelin能逆转H2O2引起的内皮细胞NO生成的减少,由（17.24±7.51）μmol/L变为（35.95±4.89）μmol/L和（19.73±2.50）μmol/L（P〈0.01）。结论：Hexarelin能够抑制H2O2所诱导的大鼠胸主动脉内皮细胞的损伤及其凋亡,其机制可能与hexarelin抑制氧化应激反应及促进NO的产生有关。     

砷与氟单独及联合染毒对SGC-7901细胞基因组DNA损伤作用的SCGE法观察

目的观察砷、氟及砷氟联合染毒对SGC-7901细胞基因组DNA的损伤作用及特点。方法砷、氟染毒剂量10μmol／L，染毒后4h应用单细胞凝胶电泳技术结合彗星图像分析系统检测DNA损伤。结果①NaAsO2组尾长和尾动量明显大于对照组，NaF组拖尾率显著高于对照组；②氟砷联合染毒组拖尾率、尾DNA含量、尾长和尾动量与对照组差异均有显著意义，但氟与砷引起的DNA损伤作用之间没有观察到交互作用。结论NaAsO2与NaF均可引起DNA损伤，但它们的损伤机理可能是不同的；氟与砷联合染毒仅表现为简单相加作用。     

用SCGE法观察砷、氟、黄绿青霉素和T-2毒素引起的SGC-7901细胞基因组DNA损伤

目的观察砷、氟、黄绿青霉素和T-2毒素对SGC-790l细胞基因组DNA的损伤作用及特点。方法染毒剂量lOμmol／L，染毒后4h应用单细胞凝胶电泳技术结合“彗星图像分析系统”检测DNA损伤。结果NaAsO2组尾长明显大于对照组；NaF组拖尾率显著高于对照组；CIT组总拖尾率、尾长和尾动量均高于对照组；而T-2毒素组各指标均高于对照组。结论NaAsO2、NaF、CIT和T-2毒素均可引起DNA损伤，但各有特点，说明它们引起DNA损伤的机制可能是不同的。     

内吗啡肽对过氧化氢诱导的大鼠胰岛损伤的保护作用

目的 研究过氧化氢(H2O2)对胰岛的损伤及内吗啡肽(EMs)对这种损伤的保护作用.方法 成年雄性Wistar大鼠18只,体质量200～300 g,体外分离、纯化和培养Wistar大鼠胰岛,双硫腙(DyTZ)染色鉴定,锥虫蓝染色检测细胞活力,葡萄糖刺激实验检测胰岛生物活性.四唑蓝(MTT)分析不同浓度的H2O2对胰岛的...     

H_2O_2致小鼠淋巴细胞DNA的损伤及修复

目的　应用单细胞电泳检测 (SCGE)过氧化氢 (H2 O2 )致小鼠淋巴细胞 DNA损伤及其修复。方法　标准 SCGE条件下荧光显微镜观察。结果　 H2 O2 不同浓度 80、16 0和 32 0μmol/ L ,3个组 H2 O2 浓度均可致小鼠淋巴细胞 DNA损伤 ,较低剂量即可造成细胞拖尾 ,可逆性损伤在 6 0 m in内可获得明显修复。结论　单细胞电泳可快速灵敏地检测氧化损伤 ,也可能用于流行病学研究。