壮药“复方铁草胶囊”抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察壮药"复方铁草胶囊"的抗肿瘤作用。方法:采用肝癌H22移植性实体瘤小鼠为动物模型,以瘤重为评价指标观察复方铁草胶囊体内抗肿瘤作用;采用MTT法测定复方铁草胶囊含药血清对肝癌H22细胞的生长抑制率,研究复方铁草胶囊的体外抗肿瘤作用。结果:复方铁草胶囊20,10,5g/kg剂量组均能明显抑制肝癌H22移植性实体瘤生长,与空白对照组比较有显著性差异(P0.05或P0.01);复方铁草胶囊20%含药血清组H22细胞的生长抑制率为29.51%,与空白对照组比较,差异有显著性意义(P0.01)。结论:复方铁草胶囊对肝癌H22细胞株体内外生长均具有明显抑制作用。     

银杏外种皮提取物对小鼠肝癌的抑制作用及其对Survivin表达的影响

目的研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extracts,GBEE)对小鼠肝癌的抑制作用及其凋亡机制。方法体外培养H22小鼠肝癌细胞,采用MTT法检测细胞增殖;建立小鼠H22肝癌移植性实体瘤模型,连续灌胃给药9天后剥离瘤块、称取瘤质量,计算对肝癌移植瘤生长的抑瘤率;应用荧光染色法观察H22肝癌细胞的凋亡形态、计数凋亡细胞并计算凋亡率;应用流式细胞术检测H22肝癌细胞的凋亡率;应用ELISA法检测H22肝癌细胞培养上清中基因蛋白Survivin的含量。结果 GBEE(0.625~160μg·ml-1)对H22细胞的体外增殖皆有抑制作用,抑制率为1.57%~54.97%,具有浓度依耐性;GBEE(50~200mg·kg-1)对小鼠H22肝癌移植性实体瘤生长具有抑制作用,抑制率分别为34.76%、40.11%和50.80%,具有量效关系;GBEE可诱导H22细胞凋亡,抑制Survivin蛋白表达。结论 GBEE对小鼠肝癌具有抑制作用,其作用机制与下调Survivin表达而诱导癌细胞凋亡有关。     

黑蒜水提液对小鼠肝癌H22移植性实体瘤的生长干预

目的:探讨黑蒜水提液对人肝癌SMMC 7721细胞及小鼠肝癌Hep.A22移植性实体瘤生长的作用。方法:体外培养SMMC 7721细胞,观察黑蒜水提液干预后对细胞增殖的影响;将昆明小鼠移植H22肝癌细胞后,分阴性对照组,环磷酰胺组,黑蒜水提液低、中、高剂量组,联合加热治疗组6个组,计算黑蒜水提液对肝癌实体瘤的抑瘤率、胸腺指数和脾指数;对小鼠血清细胞因子IL-2含量测定。结果:黑蒜水提液对肝癌肿瘤均有明显的抑制生长作用,抑瘤有效率可大于40%。结论:通过确定黑蒜水提液作为纯中药抗肿瘤药物的抑瘤作用,为临床应用提供实验依据。     

紫金散对H22小鼠肝癌实体瘤及腹水瘤抑瘤率的实验研究

目的:观察紫金散对小鼠H22肝癌腹水瘤及实体瘤的抑瘤率及量效关系。方法:将昆明小鼠移植H22肝癌细胞后,分为模型组,环磷酰胺组,紫金散低、中、高剂量组,观察紫金散对肝癌腹水瘤及实体瘤的抑瘤率。结果:紫金散3个剂量组对H22小鼠肝癌腹水瘤抑瘤率分别为6.77%,15.59%,14.90%,紫金散3个剂量组对H22小鼠肝癌实体瘤抑瘤率分别为30.8%,38.31%,48.59%。结论:紫金散对H22小鼠肝癌实体瘤有较好的治疗作用。     

白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍对小鼠H22肝癌细胞周期及凋亡的影响

目的:通过研究白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍对小鼠H22肝癌细胞周期及凋亡的影响,初步探讨其抗H22肝癌的作用机制。方法:昆明种小鼠50只,接种H22细胞24 h后,随机分为模型对照组,白花蛇舌草和半枝莲普通粉15.6 g·kg-1组,白花蛇舌草和半枝莲微粉低、中、高剂量(7.8,11.7,15.6 g·kg-1)组5组。ig,模型组给予生理盐水ig,10 d后,流式细胞术观察药物对小鼠移植性肿瘤H22肝癌细胞周期、凋亡率、细胞增殖指数(PI)的影响。结果:白花蛇舌草和半枝莲微粉15.6 g·kg-1剂量组G0/G1细胞百分比,细胞增殖指数(PI)及凋亡指数(AI)分别为(58.72±6.62)%,(41.28±6.62)%,(36.11±4.83)%(n=10),与模型对照组(27.48±1.75)%,(72.52±1.75)%,(13.72±4.56)%(n=10)相比,有显著差异;与普通粉组(43.24±4.30)%,(56.76±4.30)%,(25.41±4.00)%(n=10)相比,也有统计学差异(P<0.05)。结论:白花蛇舌草和半枝莲微粉配伍能够抑制小鼠H22肝癌移植瘤的生长,其机制可能与阻滞细胞于G1→S期,促进肿瘤细胞凋亡,减少增殖有关。     

马钱子碱隐形脂质体与普通脂质体的抗肿瘤作用比较

目的比较马钱子碱隐形脂质体与普通脂质体的抗肿瘤作用。方法昆明种小鼠接种肝癌H22瘤株复制成移植性肝癌H22小鼠模型,测定马钱子碱溶液、普通脂质体和隐形脂质体(剂量均为3.23 mg·kg~(-1),ip,8 d)对实体瘤小鼠的抑瘤率,并比较各组实体瘤小鼠的体重、免疫器官(脾和胸腺)指数。结果同剂量的马钱子碱溶液、普通脂质体、隐形脂质体的抑瘤率分别为28.64%、57.96%和71.36%;马钱子碱普通脂质体和隐形脂质体对荷瘤小鼠均无免疫抑制作用。结论与普通脂质体相比,隐形脂质体作为马钱子碱的载体能够进一步增强其抗肿瘤效果。     

冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用

目的研究冬凌草甲素自微乳对H22移植性肿瘤模型小鼠的肿瘤抑制作用。方法采用昆明小鼠接种肝癌H22瘤株造成相应的移植性荷瘤小鼠模型,以实体瘤模型小鼠的瘤重、抑瘤率观察冬凌草甲素自微乳对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用;以胸腺指数、脾脏指数为指标观察冬凌草甲素自微乳对免疫器官的影响;以小鼠平均生存时间观察冬凌草甲素自微乳对腹水瘤模型小鼠的生命延长作用。结果冬凌草甲素自微乳能有效地抑制实体瘤模型荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,低、中、高(67,100,150 mg.kg-1)3个剂量组的抑瘤率分别为:43.94%、54.65%、59.57%;冬凌草甲素自微乳给药组小鼠胸腺指数和脾脏指数与荷瘤对照组相比,无显著性差异;中剂量(100 mg.kg-1)冬凌草甲素自微乳对腹水瘤肿瘤模型小鼠的生存时间具有延长作用,与荷瘤对照组相比具显著性差异。结论冬凌草甲素自微乳对荷瘤小鼠肿瘤生长具有一定的抑制作用,抑制作用强于冬凌草甲素,并有剂量依赖性。     

抗癌方有效部位群对荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的:观察抗癌方有效部位群对小鼠移植性S180肉瘤、H22肝癌瘤体的抑制作用及肿瘤坏死因子(TNF)活性的影响。方法:通过小鼠移植性S1 80肉瘤生长试验、小鼠移植性H22肝癌瘤株生长试验及采用MTT法测定肿瘤坏死因子(TNF)活性试验,观察抗癌方对S180荷瘤小鼠、H22荷瘤小鼠的瘤体重量、抑瘤率及肿瘤坏死因子(TNF)活性的影响。结果:抗癌方大剂量组(1.00g/kg)、中剂量组(0.50g/kg)、小剂量组(0.25g/kg)能够明显抑制小鼠移植性S180、H22荷瘤小鼠瘤体的生长,减少瘤体重量、增强抑瘤率(P0.01,P0.05);抗癌方大剂量组(1.00g/kg)、中剂量组(0.50g/kg)明显升高TNF活性(P0.05或0.01)。结论:抗癌方对小鼠移植性S180肉瘤、H22肝癌具有显著的抑瘤作用,增强肿瘤坏死因子(TNF)活性是其可能作用机制之一。     

乾坤胶囊抗小鼠移植性肝癌的实验研究

目的:观察乾坤胶囊对小鼠移植性肝癌(H22)模型的抗肿瘤和延长生命作用,并探讨该复方中药抗肿瘤的作用机制。方法:建立小鼠移植性肿瘤模型(H22肝癌),灌胃给予不同剂量的中药,观察乾坤胶囊的抗肿瘤作用(抑瘤率)和对荷瘤小鼠的延长生命作用,并观察药物对肝癌细胞株(H22)接种于BALB/c小鼠造成肝转移的抑制作用,以免疫学方法检测小鼠治疗后的细胞免疫功能的改变(NK、LAKI、L-2、TNF-α、T淋巴细胞转化能力),并以流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)、肿瘤细胞凋亡和细胞周期动力学改变(凋亡率和增殖指数),以及肿瘤组织癌基因(p53和PCNA)的表达。结果:乾坤胶囊具有明显的抑瘤作用并可延长荷瘤小鼠的生存时间,抑制肿瘤的转移。乾坤胶囊抑瘤作用的主要机制是增强小鼠的细胞免疫功能,促进肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤细胞增殖指数,抑制肿瘤细胞DNA的合成和调节癌基因的表达。结论:乾坤胶囊具有显著的抑瘤作用,其作用机制主要为提高机体的细胞免疫功能,诱导肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。     

无梗五加果实提取物抗肿瘤活性研究

目的:探讨无梗五加果实乙醇和多糖提取物对肝癌H22荷瘤小鼠的抗肿瘤活性。方法:采用将H22肝癌细胞接种于小鼠右前肢腋窝皮下的方法,建立小鼠肝癌H22肿瘤模型。随机设立空白组、模型组、阳性药对照组、无梗五加果实醇提物高、低剂量组、无梗五加果实粗多糖高、低剂量组、无梗五加果实精多糖高、低剂量组。ELISA法检测荷瘤小鼠血清中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。并称定瘤重、胸腺和脾脏,计算各给药组的抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果:与模型组相比,无梗五加醇提物高、低剂量组,粗多糖高剂量组,精多糖高、低剂量组对小鼠移植性实体瘤H22均有抑制作用,抑瘤率分别为53.27%、52.87%、51.98%、31.64%、38.14%,其中以无梗五加果实醇提物抑瘤作用最显著。且无梗五加果实各给药组(除粗多糖低剂量组)均能提高荷瘤小鼠的胸腺指数、脾脏指数及血清中IL-2、IL-6、TNF-α的水平,具统计学意义(P0.05)。结论:无梗五加果实乙醇提取物和多糖对小鼠H22移植性实体瘤都具较好的抑制作用,且乙醇提取物对肿瘤的抑制作用要强于多糖。     

消癌解毒方对肝癌细胞株H22凋亡及Survivin表达的影响

目的:研究消癌解毒方对肝癌细胞株H22凋亡及Survivin表达的影响,探讨其可能的抗癌机制。方法:建立小鼠H22移植瘤模型,分对照组和XJR低、中、高剂量(10、30、90g/kg)组及顺铂(0.001g/kg)组进行治疗,流式细胞术检测各组移植瘤细胞周期及凋亡率,Western blot法检测H22移植瘤细胞Survivin蛋白表达。结果:消癌解毒方各剂量组和顺铂阳性对照组的小鼠平均凋亡率均高于模型组小鼠平均凋亡率。二者比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。FCM细胞周期显示,与模型组比较,消癌解毒方中剂量组和顺铂阳性对照组细胞G0/G1期比例相对增加,P<0.05,差别具有统计学意义,S期及G2从期比例相对下降,细胞周期于G0/G1期发生阻滞,P<0.05,差别具有统计学意义。Western blot法检测各组Survivin蛋白表达结果与模型组相比,各组Survivin蛋白表达均有下降趋势,其中DDP阳性对照组Survivin蛋白表达降低最明显,消癌解毒方10mg/kg低剂组、90mg/kg高剂组和30mg/kg中剂组Survivin蛋白表达也依次降低。结论:消癌解毒方能促进肿瘤细胞凋亡,抑制Survivin蛋白表达,是其抗癌作用机制之一。     

青蒿醇提物对H22肝癌小鼠的抑瘤作用研究

目的：观察青蒿醇提物对H：：肝癌小鼠的体内抑瘤作用。方法：取H。肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,随机分为模型对照组、5-氟尿嘧啶组（5-Fu）及青蒿醇提物125mg／（kg·d）组、500mg／（kg·d）组,5-Fu组肌肉注射给药,其余各组灌胃给药。连续给药8d后,剖瘤称取质量,计算抑瘤率;利用高效液相色谱仪测定青蒿醇提物中青蒿素含量。结果：与模型对照组比较,青蒿醇提物各剂量组均不同程度的抑制肿瘤生长（P〈0．Ot）,青蒿醇提物125me,／（kg·d）组和青蒿醇提物500m/（kg．d）组的抑瘤率分别为54．6％、50．6％;本实验青蒿醇提物中青蒿素含量为0．02％,而在青蒿素抗H。小鼠肝癌试验中,青蒿素在剂量为10mg／（kg·d）时,对H22小鼠肝癌已没有明显的抑制作用。结论：青蒿醇提物对肝癌有明显的抑制作用;除青蒿素以外,中药青蒿中可能存在其它的抗肿瘤成分。     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。     

猫人参有效部位对小鼠移植性肿瘤H22的抑制作用及机制探讨

目的:研究猫人参抗肿瘤活性部位(MA,MB)对小鼠皮下移植性肿瘤H22的生长抑制作用,并对其作用机制进行初步的探讨。方法:利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察猫人参中提取的2个有效部位MA,MB的体内抗肿瘤作用,并运用流式细胞术和末端脱氧核苷转移酶介导的d-UTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测它们对肿瘤细胞周期的影响及诱导凋亡作用。结果:MA,MB高、中、低3个剂量组对小鼠移植性肿瘤都具有抑制作用,使肿瘤细胞阻滞于G₀-G₁期而使S期细胞减少,并有诱导细胞凋亡的作用。结论:猫人参有效部位MA,MB能够抑制小鼠移植性肿瘤的生长,其机制可能与影响细胞周期及诱导凋亡有关。     

鲜壁虎冻干粉抑制H22肿瘤血管生成机理的实验研究

目的 探讨鲜壁虎冻干粉对H22肝细胞癌血管生成的机制。方法 建立移植瘤小鼠H22肝细胞癌模型。将30只小鼠随机分为顺铂治疗组、壁虎治疗组以及对照组,分别给予顺铂腹腔注射（1mg/g）,口服鲜壁虎冻干粉（1．2g/kg）及口服等量生理盐水。给药20次后,用肿瘤组织称重法评价抗肿瘤活性,用TUNEL方法检测细胞凋亡率。采用Weidner方法检测肿瘤组织的微血管密度,S-P免疫组化法检测血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞因子（bFGF）的蛋白表达。结果 鲜壁虎冻干粉可抑制H22小鼠肿瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡,并可降低肿瘤组织VEGF、bFGF蛋白的表达,使肿瘤组织内微血管密度下降。结论 鲜壁虎冻干粉可抑制H22小鼠肿瘤生长及血管生成,其机制可能与下调VEGF、bFGF蛋白的表达有关。     

补骨脂复方对H_(22)荷瘤小鼠的抑瘤作用和生存期影响的研究

目的:观察补骨脂复方对小鼠移植性肝癌H22实体瘤抑制作用及生存期的影响。方法:①抑瘤作用观察:小鼠接种H22腹水瘤后,造成移植性小鼠肝癌模型。随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、补骨脂复方组、补骨脂组、蔻仁组,分别观察荷瘤小鼠的抑瘤率。②生存期观察:造模方法同前,随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、补骨脂复方组,观察其对荷瘤小鼠生命延长率的影响。结果:补骨脂复方组、补骨脂组、蔻仁组肿瘤抑制率分别为43.73%(P<0.05)、35.82%(P<0.05)、3.54%。阳性对照组(5-FU组)、补骨脂复方组生命延长时间分别为-15%、16%(P<0.05)。结论:补骨脂组有一定的抑制实体瘤生长的作用,蔻仁组对抑制肿瘤生长无明显作用。补骨脂与蔻仁有协同抑瘤作用,补骨脂复方组可显著抑制小鼠肿瘤的生长,并延长小鼠生存期。     

藤黄酸对HepG2细胞的抗增殖作用及其机制研究

目的观察藤黄酸对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用,探讨其作用机制。方法将体外培养的HepG2细胞按随机数字表法分为对照组及藤黄酸低、中、高剂量组,每组5个复孔。对照组以正常培养液培养,加入0.5%二甲基亚砜作为溶媒对照。藤黄酸低、中、高剂量组分别加入依藤黄酸0.1、1.0、10.0μmol/L进行干预。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,采用流式细胞术测定细胞凋亡率,Hoechst染色法观察细胞核凋亡情况,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与对照组比较,藤黄酸低、中、高剂量组HepG2细胞增殖率[(68.00±3.55)%、(51.93±4.36)%、(47.16±4.73)%比(99.87±4.53)%]降低(P<0.01),凋亡率[(23.00±1.22)%、(40.09±4.65)%、(70.32±4.99)%比(4.33±0.57)%]升高(P<0.01),Bcl-2[(0.73±0.10)、(0.25±0.10)、(0.19±0.08)比(0.97±0.11)]蛋白表达降低(P<0.01),Bax[(0.39±0.14)、(0.88±0.15)、(0.85±0.13)比(0.22±0.08)]蛋白表达升高(P<0.01),Bax/Bcl-2比值[(0.34±0.10)、(1.87±0.29)、(1.63±0.23)比(0.13±0.06)]升高(P<0.01);Hoechst染色结果显示,随着藤黄酸作用浓度的递增,HepG2细胞凋亡率呈剂量依赖性递增。结论藤黄酸可通过调控HepG2细胞中Bax及Bcl-2表达抑制细胞增殖。     

半枝莲含药血清对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用

目的：探讨中药半枝莲提取物（ESB）对小鼠肝癌细胞生长的抑制和诱导凋亡作用。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶组。应用MTT法检测药物对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色,荧光显微镜下观察细胞凋亡;流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况。结果：ESB高、中剂量含药血清组有一定的抑制H22肝癌细胞增殖的作用,且呈明显的时效关系。荧光显微镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示：细胞周期各时相中,ESB高、中、剂量含药血清组S期细胞所占的比例明显减少,G1期细胞增多,有明显的诱导凋亡作用。其中空白对照、ESB低、中、高剂量组、5-氟尿嘧啶组H22细胞凋亡率分别为0.51%、1.07%、3.15%、7.83%、11.26%。结论：ESB含药血清不仅可直接抑制小鼠H22肝癌细胞生长,而且可有效诱导细胞凋亡。     

癌痛消胶囊调节小鼠荷H22移植性肝癌细胞VEGF表达的实验研究

目的 :通过观察癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的调节作用 ,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法 :于昆明种雄性小鼠前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml)进行造模。利用造模动物观察瘤块重量 ,计算肿瘤生长抑制率 ,用免疫组化法检测瘤细胞中VEGF的表达程度。结果 :与阴性对照组相比 ,癌痛消胶囊组有明显的抑瘤作用(P<0 05) ,抑瘤率为36 34 % ;病理检测显示 ,造模各组VEGF阳性表达率为100% ,但程度不同 ,癌痛消胶囊组可使肿瘤组织VEGF的表达明显下调 ,与阴性对照组比较 ,差异有显著性意义(P<0 01)。结论 :癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞的生长有抑制作用 ,能减少血管生成调控基因VEGF的表达。     

灵芝孢子油软胶囊对H22肝癌小鼠抑瘤作用及免疫功能的影响

目的:研究灵芝孢子油软胶囊抗肝癌作用及对肝癌小鼠免疫功能的影响。方法:将接种H22肝癌细胞的小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、灵芝孢子油高、中、低剂量组。给药7d后剥离瘤块,计算肿瘤抑制率;给药11d后检测各组小鼠网状内皮细胞的吞噬功能、体液免疫功能、特异性细胞免疫功能、TNF-α、IFN-γ生物调节因子水平。结果:高剂量灵芝孢子油对H22实体瘤的生长具有显著性的抑制作用。高、中、低剂量灵芝孢子油均可显著提高荷瘤小鼠网状内皮细胞吞噬功能及特异性细胞免疫功能(P<0.05,P<0.01);高、中剂量灵芝孢子油可显著提高荷瘤小鼠的血清溶血素水平(P<0.05,P<0.01);高剂量灵芝孢子油能显著提高荷瘤小鼠血清生物调节因子IFN-γ和TNF-α水平(P<0.05)。结论:灵芝孢子油能有效抑制H22肝癌小鼠实体瘤的生长,调节荷瘤小鼠的免疫功能可能是其发挥作用的途径之一。