含L-4-氧代赖氨酸和N3-(4-甲氧基富马酰)-L-2,3-二氨基丙酸寡肽类似物的合成及其抗白念珠菌活性

运用“违法传递”概念,根据白念珠菌对寡肽的传送特点,设计并合成了8个含L-4-氧代赖氨酸(以下称I-677)和N³-(4-甲氧基富马酰)-L-2,3-二氨基丙酸(以下称FMDP)的寡肽类似物,均系新化合物。体外抗白念珠菌试验表明:I-677-FMDP-肽(I-677-FMDP,I-677-AA-FMDP,其中AA=Nva,Val,Leu,Phe,Pro,D,L-p-Cl- Phe,D-Pgly)是I-677单体摩尔活性的40～770倍,是FMDP的60～1130倍,其摩尔最低抑菌浓度为6.56×10^-9～3.5×10^-10mol·disk^-1。羧肽酶A存在时化合物I-677-FMDP体外抗菌试验表明,含FMDP的化合物I-677-FMDP能抵抗羧肽酶A的酶解。     

抗真菌药物的研究VI.C-端含MEDP的寡肽的合成和抗白念珠菌活性

目的:寻找高效低毒的抗真菌化合物。方法和结果:根据违法传递概念设计合成了12个碳端含有MEDP(N³-[(2R,3R)-4-methoxyepoxysucinyl]-L-2,3-diaminopropanoicacid)的二肽和三肽(1～12),均系新化合物。结论:体外抗白念珠菌实验表明:有些二肽三肽体外实验显示了较强的抑菌活性,其中Val MEDP的活性最强,其MMIC为45nmol·mL^-1,较母体MEDP提高960倍。     

新型抗EV71病毒3C蛋白酶抑制药的设计、合成及其活性

摘 要 目的： 寻找抗EV71病毒新化合物。方法: 采用分子模拟技术,以EV71病毒3C蛋白酶活性口袋为靶,设计二肽、三肽,四肽,五肽和六肽等多个系列寡肽化合物,合成对接评分较高的寡肽化合物并进行抗EV71病毒活性筛选。结果: 五肽对接评分高于其他系列寡肽,显示五肽化合物与EV71 病毒3C蛋白酶有更强的键合力。研究中合成了两个评分较高的五肽化合物25和化合物16,体外抗EV71病毒活性实验显示化合物25活性较强（EC₅₀=1.36 μmol·L^-1,CC₅₀=211.94 μmol·L^-1, SI=155.84）,而化合物16则无明显活性。结论:五肽化合物25可作为抗EV71病毒新骨架开展进一步研究。     

抗癌抗生素C1027与单克隆抗体Fab片段偶联物的抗肝癌作用

抗人肝癌单克隆抗体(单抗)3A₅用木瓜蛋白酶消化得到Fab片段。单抗3A₅和Fab片段分别与抗癌抗生素C1027偶联,偶联物经克隆生成法测定对肝癌细胞有很强的杀伤作用,C1027,Fab-C1027和3;3A₅-C1027的IC₅₀分别为6.5×10^-16,8.6×10^-16和4.2×10^-14mol·L^-1;Fab-C1027偶联物对非靶细胞(KB)的IC₅₀值为1.4×10^-13mol·L^-1,与靶细胞(BEL-7402)的IC₅₀值相比,两者相差160倍。说明Fab-C1027的杀伤活性强于3A₅-C1027,并对靶细胞呈选择性杀伤作用。给皮下移植人肝癌的裸鼠iv剂量0.1 mg·kg^-1,结果C1027和Fab-C1027的抑瘤率分别为59和85%,说明Fab片段与C1027偶联物比游离C1027的疗效更高。     

HPLC-荧光法测定人血浆中羟基喜树碱的两种构型及其相互间的转化

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定人血浆中羟基喜树碱两种活性成分盐型羟基喜树碱(C-HCPT)和酯型羟基喜树碱(L-HCPT)含量的方法,并且对两者之间的相互转化进行了初步研究。方法 采用HPLC-荧光法,Lichrospher C₁₈色谱柱,流动相为乙腈-0.075 mol·L^-1醋酸铵缓冲液(32∶68,pH 6.4),流量1.0 ml·min^-1,检测器激发波长为363 nm,发射波长为530 nm,内标法计算药物浓度。结果 人血浆样品中C-HCPT、L-HCPT峰分离良好,内源性杂质不干扰样品峰,最低检测浓度均为5 ng·ml^-1。C-HCPT、L-HCPT浓度范围在15～2000 ng·ml^-1间呈线性相关,回归方程分别为Y₁=9.393×10^-4X₁-9.1×10^-6和Y₂=1.0207×10^-3X₂-3.4×10^-6,相关系数分别为r₁=0.9997和r₁=0.9998,相对回收率分别为96.79%～119.64%和100.23%～112.93%,日内和日间变异均小于10%。两者之间的转化具有一定规律性;C-HCPT标准血样-20℃冻存20 d稳定,L-HCPT标准血样的稳定性有待进一步研究。结论 本方法专属性强，灵敏、可靠，适用于HCPT 类制剂给药后血药浓度的监测和体内的药代动力学特征研究；有关两者相互转化的机制及L-HCPT 稳定性问题尚待进一步深入研究。     

粉防己碱,小檗胺等四氢异喹啉类生物碱对大鼠脑内M-胆碱受体的作用

用放射受体结合方法,研究了36种四氢异喹啉类生物碱及其半合成衍生物对大鼠脑内M-胆碱受体的结合特性。实验发现,粉防己碱对M-胆碱受体的亲和力最高,其K_i值为7.3×10^-8mol/L。小檗胺、四氢黄连碱和半合成原小檗碱衍生物B₁亦具有较高亲和力,K_i值分别为1.9×10^-7,6.8×10^-7和8.1×10^-7mol/L。四氢小檗碱半合成原小檗碱衍生物B₂,B₃,B₄,B₅,B₆和半合成小檗胺衍生物E₁及半合成蝙蝠葛碱衍生物D₁对M-胆碱受体的亲和力为中等强度,K_i值在1～2×10^-6mol/L之间。实验结果提示,某些四氢异喹啉类生物碱的药理作用可能与M-胆碱受体有关。     

变价态唐松草新碱—PVC膜离子选择电极的研制及解离常数的测定

本文研制了以四苯硼—唐松草新碱缔合物为电活性物质的变价态唐松草新碱—PVC膜电极。电极膜按电活性物质:PVC:DBP为1:8:8组成。该电极在pH 5.0～6.0,Ⅰ=0.05的NaCl—HCl溶液中Nernst响应范围为1×10^-3～1×10^-5mol/L。电极斜率为58.2 mV/logc。检测限为2.5×10^-6mol/L。用直接电位法考察了TDH⁺,TDH₂CF⁺⁺共存时溶液pH和电极斜率S的关系。用S—pH关系,测定了25℃,Ⅰ=0.05时的Ka₁值为(2.5±0.2)×10^-4,用E—pH关系,测定了25℃,Ⅰ=0.05时的Ka₂值为(8.1±0.9)×10^-8。     

红芪中红外光谱指纹图谱与其体外抗氧化活性的谱效相关性

目的 探讨红芪中红外光谱(mid-infrared spectrum,MIR)指纹图谱与抗氧化活性之间的谱效关系。方法 采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)采集12个产地红芪药材的MIR指纹图谱,采用DPPH法测定12个产地红芪药材的抗氧化作用,采用Person相关性分析与多元非线性回归分析(逐步后退法)构建两者的谱效关系。结果 红芪煎煮液浓度为80 mg·mL^-1时对DPPH的清除率最大;红芪MIR指纹图谱与抗氧化活性之间的谱效关系方程为Y=57.329X₁-32.913X₃+48.571X₉(P<0.05,R=0.936)。结论 红芪MIR指纹图谱X₁,X₃ ,X₉峰强度,即3 378,2 372,864 cm^-1处吸收峰所代表的化学基团对其抗氧化活性有显著影响。     

西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法以Fluo-3/AM作为Ca²⁺荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)均能明显抑制1×10^-2 mol·L^-1 H₂O₂引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1%, 57.1%和74.3%(P<0.01),无钙条件下分别为26.2%,32.1%和50.0%(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷 (1×10^-8,1×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)能抑制70 mmol·L^-1 CHCl₃导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8%, 27.8%和50.0% (P<0.01)。结论西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。     

大环内酯类抗生素麦迪霉素的电化学特性

在K₂HPO₄,NH₄Cl+NH₃和NaOH的10%(v/v)乙醇水溶液中,除0.01mol·L^-1以上NaOH液作为支持电解质外,麦迪霉素的伏安波皆为两个峰。峰A相当于它的甲醛基还原波,峰B为催化吸附氢波。溶液pH对两峰有强烈的影响。实验表明伏安波有吸附特性,且不可逆。两峰的ip与麦迪霉素的浓度成正比,线性范围分别为3×10^-6～3×10^-5mol·L^-1和1×10^-7～4×10^-5mol·L^-1,检测限为:1×10-6mol·L^-1和5×10^-8mol·L^-1。可应用于麦迪霉素的定量测定。研究了两峰的特性和电极机理,测定了有关的物理常数。     

抗真菌药物的研究II.C-端含氧代赖氨酸二肽的合成及抗白念珠菌活性

引用违法传递概念设计合成了11个C-末端含氧代赖氨酸二肽,进行抗深部致病菌-白念珠菌活性试验,体外实验结果显示极强的抑菌活性,MIC在12.5～0.8μg/disk之间,较母体氧化赖氨酸大50～135倍(克分子比。     

中药青黛中几种微量成分的研究——Ⅰ.吲哚并[2,1b]喹唑啉-6,12-二酮和青黛酮的分离、结构鉴定及合成

从青黛的亲脂部分除去两个主要成分靛兰(Ⅰ)及靛玉红(Ⅱ)后,分得8个微量成分(Ⅲ～Ⅹ,含量3.3×10^-5～4.2×10^-4%)。经物理常数的测定、光谱分析及化学合成鉴定了成分Ⅲ为吲哚并[2,1 b]喹唑啉-6,12-二酮(tryptanthrin)、成分Ⅳ的结构为6-吲羟-吲哚并[2,1b]喹唑啉酮-12。Ⅳ是首次从天然物中分离出来和确定结构的,命名为青黛酮(qingdainone)。成分Ⅴ～Ⅹ的结构尚在证实中。经初步筛选,发现Ⅲ及Ⅳ均对黑色素瘤B₁₆有抑制作用,Ⅳ对小鼠Lewis肺癌有抑制作用。     

云南甘草中新三萜成分的研究

自云南甘草(Clycyrrhiza yunnanensis)根中分离出10个化合物,经化学方法和光谱解析,鉴定9个为五环三萜类化合物:3β,21α,24-三羟基-齐墩果-12-烯-29-羧酸(Ⅰ)、3β,21α-二羟基-齐墩果-12-烯(Ⅱ)、3β,21α,24-三羟基-齐墩果-12-烯(Ⅲ)、桦木酸(Ⅳ)、23-羟基桦木酸(Ⅴ)、齐墩果酸(Ⅵ)、3β-羟基-16-氧-11,13(18)-二烯-3O-羧酸(Ⅶ)、24-羟基甘草内酯(Ⅷ)和21α-乙酰氧基木栓烷-3-酮(Ⅸ);另一个为β-胡萝卜甙(Ⅹ)。其中Ⅰ和Ⅱ为新化合物,分别命名为云南甘草皂甙元B1和B2。其余7个是已知物,但Ⅴ和Ⅸ首次得自甘草属植物,Ⅳ,Ⅵ和Ⅷ首次自云南甘草中分离得到。     

新类型酸性色素定量胺类化合物的研究:专利蓝Ⅴ测定胺类药物

前报认为此新类型蓝色酸性色素的基本构造为二氨基三苯甲烷磺酸,据此,找出了另一种同类型的酸性色素——专利蓝Ⅴ(PBV)。对它进行了配合物的吸收峰、试剂空白的降低、试剂浓度的选定、最佳pH值的选择、检出限、检量线、色素与两种胺的分子配合比、PBV测定法的精密度、五种胺配合物的吸收系数比较等研究,证明它与二甲苯蓝、羊毛罂粟蓝有类似的性质以及同样的灵敏度。进一步说明所认定的此类型的基本构造是对的。     

Effects of heavy metals on the biology of a N2-fixing cyanobacterium Anabaena doliolum

The effects of copper, nickel, and iron on survival, growth, nutrient uptake (NH, NO, and PO), carbon fixation, nitrate reductase, nitrogenase (CH₂ reduction assay), glutamine synthetase (transferase), and alkaline phophatase activities of Anabaena doliolum were studied. About 50% survival of the test alga was scored at 8.0 × 10^?3, 8.6 × 10^?3, and 0.36 mM of Cu, Ni, and Fe, respectively. However 45, 59, and 57% reductions in final yield were scored, respectively, at LD₅₀ concentrations of Cu, Ni, and Fe. On the basis of the LD₅₀ of the test metals, Ni was the most inhibitory for nutrient uptake. However, the LD₅₀ concentrations of Cu, Ni, and Fe showed different levels of inhibition for different processes. Although metal concentrations higher than LD₅₀ were found to be more inhibitory, 0.54 mM iron generated maximum inhibitory effect as compared to Cu and Ni. The present study demonstrates that the test cyanobacterium exhibits metal and dose-specific responses toward different physiological and biochemical processes.     

Antimicrobial Properties of Brevinin‐2‐Related Peptide and its Analogs: Efficacy Against Multidrug‐Resistant Acinetobacter baumannii

Brevinin‐2 related peptide (B2RP; GIWDTIKSMG¹⁰KVFAGKILQN²⁰L.NH₂), first isolated from skin secretions of the mink frog Lithobates septentrionalis, shows broad‐spectrum antimicrobial activity but its therapeutic potential is limited by moderate hemolytic activity. The peptide adopts an α‐helical conformation in a membrane‐mimetic solvent but amphipathicity is low. Increasing amphipathicity together with hydrophobicity by the substitutions Lys¹⁶→Leu and Lys¹⁶→Ala increased hemolytic activity approximately fivefold without increasing antimicrobial potency. The substitution Leu¹⁸→Lys increased both cationicity and amphipathicity but produced decreases in both antimicrobial potency and hemolytic activity. In contrast, increasing cationicity of B2RP without changing amphipathicity by the substitution Asp⁴→Lys resulted in a fourfold increase in potency against Escherichia coli [minimal inhibitory concentration (MIC) = 6 μm ) and twofold increases in potency against Staphylococcus aureus (MIC = 12.5 μm ) and Candida albicans (MIC = 6 μm ) without changing significantly hemolytic activity against human erythrocytes (LC₅₀ = 95 μm ). The emergence of antibiotic‐resistant strains of the Gram‐negative bacterium Acinetobacter baumannii constitutes a serious risk to public health. B2RP (MIC = 3–6 μm ) and [Lys⁴]B2RP (MIC = 1.5–3 μm ) potently inhibited the growth of nosocomial isolates of multidrug‐resistant Acinetobacter baumannii. Although the analogs [Lys⁴, Lys¹⁸]B2RP and [Lys⁴, Ala¹⁶, Lys¹⁸]B2RP showed reduced potency against Staphylococcus aureus, they retained activity against Acinetobacter baumannii (MIC = 3–6 μm ) and had very low hemolytic activity (LC₅₀ > 200 μm ).     

地塞米松和吲哚美辛对基质金属蛋白酶-9的抑制作用及其机制研究

目的研究地塞米松和吲哚美辛对U937细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性的影响及抗炎作用机理。方法明胶酶谱法测定MMP-9的活性;Western blot法测定细胞培养上清液中MMP-9蛋白;RT-PCR法测定MMP-9 mRNA的表达。结果地塞米松和吲哚美辛可显著抑制PMA诱导的U937细胞培养上清液中MMP-9的活性,且抑制强度随浓度的增大而增加;地塞米松和吲哚美辛可显著抑制PMA诱导的的U937细胞MMP-9蛋白分泌及mRNA表达,且变化趋势与活性变化一致。结论对MMP-9活性的抑制作用可能是地塞米松和吲哚美辛抗炎作用的机理之一。     

Drug delivery studies in Caco-2 monolayers. III. Intestinal transport of various vasopressin analogues in the presence of lysophosphatidylcholine

The transport of a series of vasopressin and oxytocin analogues with varying lipophilicities was studied in Caco-2 monolayers. Transport was studied across the bare monolayer and after treatment with a phospholipid absorption enhancer, palmitoyl lysophosphatidylcholine. The range in lipophilicity of the analogues, estimated as the capacity factor, was found to be from 0.19 to 3.43. The intrinsic transport of the peptides across Caco-2 monolayers was found to be low. The apparent permeability coefficients, P_app, were in the range of 2 × 10⁻⁸–6 × 10⁷ cm/s. However, peptide transport was significantly greater (P_app in the range of 5 × 10⁻⁶–2 × 10⁻⁵ cm/s) when facilitated by addition of palmitoyllysophosphatidylcholine. The results suggest that polypeptide transport across Caco-2 monolayers does not depend on lipophilicity, but that the facilitated transport does depend on the lipophilicity.