PCR测定血中柯萨奇病毒B RNA对确定病毒性心肌炎病原诊断的价值

目的 研究PCR技术测血中柯萨奇病毒B RNA(CVB-RNA)对病毒性心肌炎病毒病原诊断的价值及其阳性率与病程的关系。方法 对75只小鼠腹腔注射CVB3病毒后,做心肌病理检查和检测血液中CVB-RNA。对145例临床诊断心肌炎患儿测定血中CVB-RNA,对比病毒性心肌炎患儿病程1个月以内104例和病程1个月以上41例的阳性率。结果 75只小鼠病理检查结果有心肌炎改变占85.3%,CVB-RNA阳性率为53.3%。145例患儿CVB-RNA阳性率为46.2%。PCR CVB-RNA病程1个月以内阳性率为56.7%,显著高于病程1个月以上(阳性率为26.8%)。结论 用PCR技术检测病毒性心肌炎血中CVB-RNA的敏感性与可靠性均较高,病程1个月以内阳性率高于1个月以上。     

血清心脏肌钙蛋白I对小儿病毒性心肌炎诊断和转归监测价值

目的：评价心脏肌钙蛋白I(cTnI)对小儿病毒性心肌炎的诊断价值,探讨其与肌酸激酶同功酶(CK-MB)以及病毒性心肌炎的病程、病情演变等之间的关系。方法：采用免疫层析法和速率法测定38例病毒性心肌炎和24例非心肌炎患儿血清cTnI,CK-MB。间接ELISA法测定柯萨基病毒B1-6IgM(CVB1-6-IgM)。结果：病毒性心肌炎患儿血清cTnI和CK-MB阳性率分别为 89.5%,60.5%,明显高于非心肌炎组(8.3%,29.2%)和对照组(0)(P<0.05)。82.4% 的血清cTnI阳性出现在病程1周以内。CVB 1-6 IgM阳性与阴性组的cTnI和CK-MB阳性率差异无显著性。结论：血清cTnI反映心肌细胞损害的敏感性和特异性均高于CK-MB,有较宽的诊断时间窗,是一项极具临床价值的心肌炎诊断和转归监测新指标。     

病毒性心肌炎病原学诊断及患儿细胞免疫功能变化的研究

我们采用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术诊断 40例心肌炎患儿 ,并对 30例临床诊断为心肌炎患儿外周血可溶性白细胞介素 2受体 (ｓＩＬ 2Ｒ)及Ｔ细胞亚群在急性期、恢复期的变化进行探讨 ,现报告如下。对象为 1996年 6月～ 1998年 12月在我院儿科住院的患儿 ,按 1994年全国小儿心血管专业学术会议修订的病毒性心肌炎诊断标准[1] ,临床诊断为急性心肌炎 30例 (病程为 6个月内 )和疑似心肌炎 10例 ,其中男 2 6例 ,女 14例 ;年龄 2个月～ 14岁 ,平均 5 .5岁。患儿于入院后均做心电图、心脏Ｘ线、心肌酶谱及超声心动图检查 ,并取血测定柯萨奇病毒Ｂ组…     

病毒性心肌炎82例

我院 1996年 1月～ 2 0 0 0年 3月收治病毒性心肌炎患儿82例 ,经治疗效果良好 ,现报告如下。临床资料一、一般资料　 82例均为儿科住院病人。男 5 2例 ,女 30例。入院初均作心电图、Ｘ线、心脏二维超声心动图、2 4ｈ动态心电图、心肌酶谱检查 ;应用ＰＣＲ技术检查血柯萨奇病毒ＲＮＡ 5 0例。全部病例均符合病毒性心肌炎诊断标准[1] 。本组急性期 6 7例 (占 82 % ) ,迁延期 13例 ,慢性期 2例。其中起病 <1周者 2 4例 (2 9% ) ,～ 1个月 38例 (76 % ) ;余病例 :病程 1～ 6个月 5例 ,～ 1年 13例 ,>1年 2例。发病年龄 <1岁 7例 ,～ 3岁 18例 ,…     

75例有短阵发作症状儿童的动态心电图监测

目的　探讨动态心电图对儿童短阵发作症状的诊断价值。方法　75例有短阵发作症状儿童分为病毒性心肌炎组(n=40)和对照组(n=35),分别监测动态心电图和常规心电图。结果　病毒性心肌炎组动态心电图阳性率925%,对照组228%,两者有显著性差异(χ2=377,P<005),病毒性心肌炎的动态心电图阳性率(925%)显著高于常规心电图(575%)(χ2=131,P<001)。结论　症状发作时动态心电图改变对病毒性心肌炎有诊断意义,对有短阵发作症状患儿应作动态心电图监测。     

病毒性心肌炎患儿巨细胞病毒感染的研究

目的：研究小儿病毒性心肌炎的病例中巨细胞病毒的感染情况。方法：用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测急性病毒性心肌炎患儿血清巨细胞病毒(CMV)特异IgM抗体,同时取健康小儿血清标本作为对照。结果：70例病毒性心肌炎中CMV-IgM阳性13例,阳性率 18.6%;与对照组比较阳性1/37,阳性率2.7%,差异有显著性意义(χ2=4.04, P<0.05)。结论：CMV感染是病毒性心肌炎的常见病因之一。     

核素^99M锝心肌灌注显像技术诊断小儿心肌炎的临床应用

为观察核素^mmM锝心肌灌注显像技术诊断小儿心肌炎的临床应用价值。采用周围血管静脉注射核素^99MTCMIBI,SPECT摄像对28例病毒性心肌炎患儿进行检查。结果：26例阳性,2例阴性。该法在本次调查的病例中敏感性达92.8%（26/28例）,且早期检查阳性率更高。病变部位分布在：左室最多占76.9%,右室次之,心房少见,同时对2例伤寒中毒性心肌炎,1例甲亢及1例植物神经紊乱患儿进行该检查,结果：2例伤寒中毒性心肌炎阳性,其它2例阴性。说明核素^99M锝心肌灌注显像技术在诊断小儿心肌受扣方面是有价值的,但无病原学诊断价值。此法在诊断病毒性心肌炎时应排除其它心脏疾病。可作为疑似心肌炎的辅助诊断检查。     

病毒性心肌炎血清肌钙蛋白I测定的意义

通过对柯萨奇Ｂ病毒性心肌炎患儿血清心脏肌钙蛋白Ｉ(ｃＴｎＩ)的检测 ,判断ｃＴｎＩ在诊断病毒性心肌炎 (ＶＭ )中的意义。用固相免疫层析法测定病毒性心肌炎患儿的ｃＴｎＩ。病毒性心肌炎患儿ｃＴｎＩ阳性率 70 .73%(2 9/ 4 1例 ) ,对照组阳性率 4 .35 %(1/ 2 3例 ) ,差异显著 (Ｐ <0 .0 1)。 2周和 4周ＶＭ血清ｃＴｎＩ阳性率分别为 10 0 .0 0 %(2 9/ 2 9)和 5 1.72 %(15 / 2 9)。提示测定ｃＴｎＩ对ＶＭ早期诊断有重要的临床意义病毒性心肌炎血清肌钙蛋白I测定的意义$南京市儿童医院!210008@于毅…     

静脉注射大剂量人血丙种球蛋白治疗病毒性心肌炎

为探讨采用大剂量静脉注射人体丙种球蛋白 (IVIG)治疗小儿病毒性心肌炎的临床疗效及其作用机制 ,本文总结 2 0例小儿病毒性心肌炎患儿应用IVIG的结果。现报告如下资料与方法一、一般资料　 1997年 1月～ 2 0 0 2年 5月我科收治 35例病毒性心肌炎患儿 ,均符合 1999年 9月昆明会议修订的小儿病毒性心肌炎诊断标准[1] 。其中男 2 0例 ,女 15例 ;<4岁 2 3例 ,>?12例 ;病程 <1个月 14例 ,1～ 2个月 10例 ,2～ 3个月 6例 ,3～ 4个月 5例。随机分为治疗组 2 0例 ,对照组 15例。两组在发病年龄、性别、病程、病情轻重方面无差异性。二、方法　两…     

应用聚合酶链反应技术对肠道病毒心肌炎进行病原学诊断的探讨

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测１８例临床诊断病毒性心肌炎及疑似心肌炎患儿血清肠道病毒ＰＮＡ，其中９例阳性，阳性率５０％。ＰＣＲ和斑点杂交方法检测２例因严重病毒性心肌炎死亡患儿心肌标本肠道病毒ＲＮＡ，２例皆阳性，并定为柯萨奇病毒Ｂ３，提示ＰＣＲ及核酸杂交方法具有快速、敏感、特异性强等优点，对小儿病毒性心肌炎的病原学诊断有重要价值。     

聚合酶链反应检测病原菌在儿童先天性心脏病术后呼吸机相关性肺炎中的应用价值

目的 探讨聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测病原菌在儿童先天性心脏病术后呼吸机相关性肺炎(ventilator-associated pneumonia,VAP)中的应用价值.方法 我院胸外科重症监护室2016年11月至2017年7月收治的95例先天性心脏病术后发生VAP的患儿中,选取48例患儿行支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage,BAL)及导管内抽吸分泌物(endotracheal tube attracts, ETA)法收集深部气道分泌物,获取病原学标本,并同时行传统气道分泌物定量培养法和PCR法检测病原菌.结果 传统培养法培养72 h后,检出19例标本病原菌呈阳性,共检出病原菌20株,2例标本为混合感染,病原菌检出阳性率为39.2%(19/48).PCR法培养24 h后检出31例标本病原菌呈阳性,共检出病原菌44株,9例标本为混合感染,病原菌检出阳性率为65.3%(31/48).PCR法病原菌总体阳性率高,混合病原菌检出率高.采用ETA和BAL两种方法获取标本,用PCR法检测病原菌,各种病原菌的检出有高度一致性,48例标本中,45例病原菌检测结果一致,一致率高达94%(45/48).结论 PCR法可以快速敏感及准确地检测病原菌,临床中可通过非侵袭性操作ETA方法获取标本,应将PCR法和传统培养法结合作为儿童先天性心脏病术后VAP病原菌的检测方法.     

山东地区肠道病毒中枢神经系统感染187例分析

目的 探讨山东地区中枢神经系统肠道病毒（EV）感染的实验和临床特点。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和病毒培养技术,检测187例无菌性脑膜炎患儿中,CSF中RT-PCR和病毒培养同时阳性者62例（33.16%)。病毒培养阴性的125例中,RT-PCR阳性93例（74%）;此93例中,4例同时在血清或尿分离到EV,本实验中,RT-PCR检测EV脑膜炎的阳性率为82.89%（155/187）,而病毒培养的阳性率为33.16%(62/187)。包括EV RNA的提取,RT-PCR的全部过程在4小时内可以完成,而病毒培养繁杂,平均需要4.6天得出结果。肠道病毒脑膜炎可以散发或局部暴发,临床特点在各个年龄组有所不同,5岁以内者以发热,呕吐,激惹多见,5岁以上者以头痛,畏光,疲劳,肌痛多见。结论 EV是山东地区无菌性脑膜炎最常见的病原体。临床症状一般较轻,无特异性;RT-PCR检测能快速,敏感的诊断EV感染,快速确诊可减少抗生素的应用和住院天数,有较高的社会效益和经济效益。     

测定病毒性心肌炎患儿柯萨奇病毒B特异性IgM的病原学意义

为探讨柯萨奇病毒B特异性IgM（CVB－IgM）的病原学意义，应用免疫印迹试验测定112例病毒性心肌炎患儿的CVB－IgM，结果是阳性33例，总阳性率为29．5％；27例正常儿童中阳性者1例，占3．7％，两者比较差异有显著意义（X2=7．813，P＜0．01）。病程小于2个月者阳性率为40％，与病程2～6个月和大于6个月者（阳性率分别为4．55％和13．33％）比较均有显著差异（X2=9．832，P＜0．01和X2=4．921，P＜0．05）。提示在临床上存在心肌炎症或心肌损伤时，测定CVB－IgM具有早期病原学诊断意义。     

彩色多普勒组织显像在小儿病毒性心肌炎诊断中的应用

本文报告用彩色多普勒组织显像(DTI)测定正常小儿173名,病毒性心肌炎40例,发现DTI在正常小儿的规律。病毒性心肌炎二尖瓣环舒张早期运动速度(MVR-DeV)显著低于正常儿童,40例病毒性心肌炎MVR-DeV降低者占72.5％,经过治疗后MVR-DeV90％以上短期内恢复正常。MVR-DeV降低率显著高于心脏解剖、心功能、心脏血流参数、心电图和心肌酶的异常率。因此,MVR-DeV对病毒性心肌炎的诊断、病情了解以及疗效观察均有重要价值。     

2009—2010年苏州地区博卡病毒感染住院患儿临床特征分析

目的探讨苏州地区因急性呼吸道感染住院患儿中人类博卡病毒(human bocavirus,HBoV)感染的临床特征。方法收集2009年1月—2010年12月因急性呼吸道感染住院的3 826例患儿的痰标本,应用实时PCR检测HBoV DNA,直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒、流感病毒(A、B)、副流感病毒(1～3)和腺病毒,同时采用逆转录PCR检测人偏肺病毒RNA,并进行细菌培养及荧光定量PCR检测支原体DNA,分析HBoV感染的临床特点及流行病学特征,并与呼吸道合胞病毒(RSV)进行比较。结果 3 816份标本共检测到HBoV 272例(7.13%),仅次于RSV;HBoV单独感染率为32.7%,与其他呼吸道病毒的合并感染率为18.38%,高于RSV和其他病毒的合并感染率(P<0.05)。HBoV感染全年均有发生,夏季最多;6～18月龄婴幼儿检出率最高,占48.17%。在住院患儿中,HBoV主要引起支气管肺炎(85.39%),临床症状主要表现为咳嗽(96.63%)、喘息(46.07%)、发热(56.18%)。与RSV相比,HBoV感染患儿的白细胞、中性粒细胞比例、CRP均高于RSV,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBoV是苏州地区小儿呼吸道感染的重要病原体之一,有单独的致病性,与RSV相比,在年龄、季节分布、临床症状、实验室指标等方面有明显差异。     

三种方法对儿童肺炎支原体感染诊断的动态评价

目的评价荧光定量PCR(FQ-PCR)检测肺炎支原体(MP)-DNA(MP-DNA),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MP-IgM,以及MP快速培养三种方法对儿童MP感染诊断的临床价值。方法对经临床和实验室诊断MP感染的患儿同时进行三种方法检测。并分别在病程1、3个月时重复检测。结果 MP感染患儿共153例。入院时首次检测,FQ-PCR阳性率为96%,ELISA为71%,MP快速培养法为24%。其中MP快速培养法的检出率在≤3岁组明显高于>3岁组,差异有统计学意义(P<0.05)。随访至1个月时,MP-DNA检测结果仍有50%以上阳性,而MP-IgM则保持较高的阳性率,此时仍然有44例(29%)患儿存在咳嗽,其中28例(64%)MP-DNA和MP-IgM均为阳性。随访至3个月时有4例(3%)患儿仍存在咳嗽,2例(50%)MP-DNA和MP-IgM均为阳性。结论在三种诊断儿童MP感染的方法中,FQ-PCR检测MP-DNA最敏感,其次为ELISA检测MP-IgM抗体,MP快速培养敏感性最低。MP-IgM检测阳性率至3个月时仍然维持较高水平。     

儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析

目的了解儿童急性下呼吸道感染病毒病原学特点。方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年9月—2009年9月住院的5480例0～12岁下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行8种病毒检测。结果5480例患儿中,2710例检出至少1种病毒,总检出率49.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)检出最多,为1386例,占51.1%,其余,依次是偏肺病毒(hMPV)513例(18.9%),副流感病毒Ⅲ(PIVⅢ)338例(12.5%),腺病毒(ADV)192例(7.1%);流感病毒A(IFA)128例(4.7%),流感病毒B(IFB)79例(2.9%),副流感病毒Ⅰ(PIVⅠ)41例(1.5%),副流感病毒Ⅱ(PIVⅡ)33例(1.2%)。6个月以下年龄组阳性率最高,为43.5%。RSV、hMPV季节性较明显,主要集中在冬春季节(11月至次年4月)。肺炎、毛细支气管炎、支气管炎(伴喘息)、支气管炎(不伴喘息)和哮喘患儿病毒阳性率分别为47.4%、63.6%、50.5%、30.1%和43.5%。结论病毒是儿童急性下呼吸道感染的主要病原。发病年龄主要在婴幼儿,其中RSV和hMPV最常见。     

应用PCR-RFLP技术检测中枢神经系统感染患儿6种疱疹类病毒DNA的实验研究

目的　建立一种能快速区分 6种疱疹类病毒DNA特异的限制性内切酶图谱。方法　 2 0 0 2年 1～ 12月浙江大学儿童医院在疱疹类病毒高度同源序列DNA多聚酶基因中设计两对通用引物 ,该引物能同时扩增单纯疱疹病毒Ⅰ型与Ⅱ型 (HSVI/HSVⅡ )、爱泼斯坦—马尔病毒 (EBV)、人巨细胞病毒 (CMV)、水痘 带状疱疹病毒 (VZV)和人类疱疹病毒 6型 (HHV6) 6种病毒。选择BstUI内切酶对PCR产物进行酶切。 98例怀疑病毒性脑炎、脑膜炎患儿的脑脊液标本用PCR RFLP和ELISA法进行检测。结果　 6种标准病毒株PCR扩增后产物为 5 10～ 5 92bp ,经酶切后能区分为何种病毒 ,其最小检出量为 0 1fg ,与乙肝病毒、真菌、细菌和人类基因组无交叉反应。用该方法检测临床 98份脑脊液标本中的疱疹类病毒 ,13份阳性 ,同时用ELISA法检测该标本 ,5例阳性。PCR阳性检出率为 13 3% ,ELISA为 5 0 9% (P <0 0 5 )。 2例患儿在院外阿昔洛韦已治疗 2～ 3d ,但入院后在其脑脊液中仍能检测到病毒DNA。 10例诊断为疱疹病毒感染患儿经更昔洛韦每天 10mg/kg ,分两次静脉注射治疗 14d后 ,8例临床症状明显好转 ,2例病情未见好转。结论　建立的疱疹类病毒特异的限制性内切酶图谱具有特异敏感 ,快速准确的特点 ,且不受抗病毒药物的影响 ,为中枢神经系统疱