血管内皮生长因子D促进胃癌淋巴管生长

目的研究血管内皮生长因子D（VEGF-D）与胃癌淋巴管转移之间的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从人胃癌旁正常组织中扩增人VEGF-D全长cDNA，经T-A克隆酶切鉴定及测序得到完整的序列后，亚克隆并构建pEGFP／VEGF-D真核表达载体，转染低表达VEGF-D的胃癌细胞株SGC7901，通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆，用这种高表达VEGF-D的胃癌细胞接种于裸鼠皮下，用淋巴管内皮细胞透明质酸盐受体（LYVE-1）行免疫组织化学染色观察肿瘤淋巴管密度和形态。结果对照组和转染pEGFP／VEGF-D组肿瘤的重量分别为（1．13±0．40）g和（2．24±0．82）g，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。肿瘤组织内的淋巴管密度分别为2．89±1．32和5．74±1．30，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。周边肿瘤组织存在扩张的功能性淋巴管。结论VEGF-D在胃癌中可能通过主动促进淋巴管生长来促进肿瘤生长和远处转移。     

肝细胞生长因子与胃癌淋巴管生成及淋巴转移的关系

目的明确肝细胞生长因子（HGF）与胃癌淋巴管生成的相互关系及其可能途径，进一步探索HGF在肿瘤淋巴转移中的作用。方法对60例胃癌组织及其邻近正常胃组织和20例胃溃疡组织标本作免疫组织化学染色，并记数血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、HGF、c-Met和淋巴管内皮透明质酸受体-1（Lyve-1），结合胃癌的临床病理资料作相关统计学分析。结果胃癌组织中VEGF-C、HGF、c-Met表达明显上调，其微淋巴管密度（MLD）也明显高于正常胃组织和胃溃疡组织（P〈0．001），有无淋巴转移和远处转移差异有统计学意义（P〈0．05）；胃癌和胃溃疡边缘淋巴管内皮有c-Met表达，HGF和肿瘤MLD之间有明显的正相关系（P〈0．001）和多元线性回归关系（P=0．001）。结论HGF与VEGF．C一样是胃癌的淋巴管生成刺激因子，它可以通过直接或间接途径刺激淋巴管的增生，促进肿瘤淋巴转移。     

检测微淋巴管及其密度和血管内皮生长因子C对结直肠癌的临床意义

目的探讨检测微淋巴管、微淋巴管密度(LMVD)和血管内皮生长因子C(VEGF-C)的表达对结直肠癌的临床意义。方法应用5′-核苷酸酶(5′-Nase)组织化学、SABC免疫组织化学(免疫组化)和RT-PCR检测80例结直肠癌组织和癌旁组织及30例结直肠正常组织的微淋巴管、LMVD和VEGF-C的表达,并随访、记录患者的临床病理参数和生存资料,分析其相关性。结果(1)结直肠癌、癌旁、正常结直肠组织的微淋巴管均被染成棕黄褐色。结直肠癌组织微淋巴管管腔封闭或无腔,为无功能淋巴管；癌旁组织微淋巴管丰富,管腔大,为功能性淋巴管。(2)癌旁组织LMVD为9．76±2．85,明显高于结直肠正常组织的5．49±．43(t=8．220,P＜0．01)；也高于癌组织的2．13±0．96(t= 15．118,P＜0．001)。(3)结直肠癌VEGF-C蛋白表达阳性率(48．8%)和相对表达量(1．09±1．20)明显高于正常结直肠组织(0和0),与VEGF-C mRNA表达一致；且VEGF-C表达与LMVD相关。(4) LMVD、VEGF-C表达与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤部位大小、大体组织学类型无关(均P＞0．05)；与Dukes分期(P＜0．0001、P=0．0234)、淋巴结转移(P＜0．0001、P=0．0059)和生存期(P＜0．0001、P＜0．0001)密切相关。LMVD还与分化程度(P=0．0168)和肝肺血行转移(P=0．0088)相关。结论结直肠癌癌旁微淋巴管为功能性淋巴管；癌旁的功能性微淋巴管和增高的LMVD及肿瘤VEGF-C表达,可作为结直肠癌淋巴管生成的形态学特征、分子表型和判断结直肠癌患者淋巴转移及预后的重要指标。     

细胞外基质中纤维连接蛋白改变与胃癌微血管形成相关性研究

目的 探讨胃癌细胞外基质中纤维连接蛋白（fibronectin，FN）的改变及其与胃癌组织微血管生成的相关性。方法应用免疫组织化学EnVison^TM法，对80例胃癌组织和20例正常胃腺体组织中FN的表达、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及肿瘤微血管密度（microvessel density，MVD）进行检测。结果FN免疫复合物呈棕黄色分布于胃腺体基底膜及周围的结缔组织间质中。正常组织基底膜中FN染色呈完整线性结构，结缔组织间质中FN染色呈规则的条纹状。胃癌组织基底膜FN的完整线性染色结构被不同程度破坏，结缔组织间质中FN染色加深，形状不规则。胃癌组织中VEGF表达和MVD较正常组织均升高（P〈0．01，P〈0．05）。胃癌结缔组织间质中FN表达与VEGF表达和MVD均存在正相关性（P〈0．01，P〈0．05）；而胃癌组织基底膜FN线性染色缺损程度与VEGF表达和，MVD均无相关性（P〉0．05，P〉0．05）。结论胃癌结缔组织间质中FN表达的增高可能与其微血管形成和发展过程关系密切，FN与VEGF在胃癌微血管的形成和发展的过程中可能存在相互协同和促进关系。     

血管内皮生长因子D在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨血管内皮生长因子D（VEGF．D）在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法收集中山大学附属第一医院2009年3月至2010年2月间收治的39例食管鳞癌及癌旁组织标本。用原位杂交法检测肿瘤组织及癌旁组织中VEGF．DmRNA的表达情况;用免疫组织化学法检测D2．40表达,计算D2—40标记的微淋巴管密度（MLVD）。分析VEGF．DmRNA表达与食管鳞癌临床病理资料及MLVD的关系。结果肿瘤组织中VEGF．DmRNA阳性表达率为56.4％（22／39）．明显高于癌旁组织[2．6％（1／39）,P〈0．05]。有淋巴结转移者VEGF．DmRNA阳性表达率明显高于无淋巴结转移者E92．9％（13／14）比36．0％（9／25）,P〈0．05]。VEGF．DmRNA阳性表达者MLVD明显高于阴性表达者（8．20±1．22比5.31±0．97,P〈0．01）。结论VEGF—D可能通过诱导淋巴管生成促进食管鳞癌淋巴转移。     

胰腺癌组织微血管密度及淋巴管密度的改变及临床意义

目的：研究胰腺癌组织中微皿管密度（MVD）和淋巴管密度（LVD）的变化、与胰腺癌临床病理的联系及相互关系。方法：采用免疫组织化学SABC法应用CD34检测41例胰腺导管腺癌患者配对癌组织和正常胰腺组织中MVD的表达情况,应用D2—40检测配对癌组织、癌旁组织及正常胰腺组织中LVD的表达情况,分析MVD和LVD与肿瘤分化程度、分期和淋巴转移间的相关性以及癌组织MVD与癌旁组织LVD表达之间的关系。结果：癌组织及正常胰腺组织MVD分别为46585±16,935和11．100±4．036,两组差异有统计学意义（P=0．000）。癌组织、癌旁及正常胰腺组织LVD分别为11．244±4．800、15．829±7．470和13．512±5．139;其中癌旁组织与正常胰腺组织LVD差异无统计学意义（P=0．060）,癌旁组织与癌组织的LVD差异有统计学意义（P=0．000）。胰腺癌组织MVD与癌旁组织LVD间存在相关性（P=0.025〈0．05）。结论：胰腺导管腺癌组织中MVD及LVD与肿瘤分化程度、病理分期及淋巴转移相关;胰腺癌组织内MVD与癌旁组织LVD间存在相关性。     

促血管生成素家族在大肠腺癌中的表达及与微血管密度和临床病理特征的关系

目的 探讨促血管生成素-1（Ang-1）、促血管生成素-2（Ang-2）、促血管生成素受体（Tie-2）及血管内皮生长因子（VEGF）在大肠腺癌及癌旁正常组织中的表达，及与微血管密度（MVD）和临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测Ang-1、Ang-2、Tie-2及VEGF在45例大肠腺癌及10例癌旁正常组织中的表达。结果 大肠腺癌组织中的Ang-2蛋白及VEGF蛋白明显高于癌旁正常组织（P〈0．01），腺癌的分化程度越低，Ang-2及VEGF蛋白的表达率越高（P〈0．05），Ang-2与VEGF蛋白的表达存在明显正相关性（r=0．997，P〈0．01）；大肠腺癌组织中的Ang-1蛋白明显低于癌旁正常组织（P〈0．01），腺癌的分化程度越高，Ang-1蛋白的表达率越高（P〈0．05）；Tie-2蛋白在大肠腺癌和癌旁正常组织中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。大肠腺癌的分化程度越低，MVD越高（P〈0．05），腺癌组织中Ang-1蛋白阳性表达组MVD明显低于阴性表达组（P〈0．01），Ang-2蛋白阳性表达组MVD明显高于阴性表达组（P〈0．01）。≥5cm及有淋巴结转移的大肠腺癌组织中，Ang-2蛋白的表达明显增加（x^2=8．889，P〈0．01；x^2=10．020，P〈0．01）。结论 在大肠腺癌组织中，相对Ang-1占优势的Ang-2的过度表达，可能在肿瘤的血管生成和进展过程中起着重要作用。     

淋巴管内皮透明质酸受体1在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 明确淋巴管特异性标记物淋巴管内皮透明质酸受体1（LYVE-1）的表达情况,并探讨其表达与结直肠癌淋巴结转移及预后的关系。方法选取40例结直肠癌标本及其癌旁组织．采用实时定量PCR检测LYVE-1mRNA水平．采用免疫组织化学染色检测LYVE-1蛋白表达水平、淋巴管密度（LVD）及MVD．分析LYVE-1表达和LVD计数与淋巴结转移及患者预后的关系。结果结直肠癌组织中LYVE-1的表达和LVD计数明显高于正常组织（P〈0．05）。有淋巴结转移者LYVE-1表达水平和LVD计数均明显高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。低LVD组术后复发率和3年生存率分别为46．7％和90．1％,高LVD组则分别为60．0％和56．7％（均P〈0．05）;而LYVE-1的表达则与术后复发及预后无明显相关（均P〉0．05）。结论LYVE-1特异性表达于淋巴管,与结直肠癌淋巴结转移密切相关：LVD可用于评价预后。     

淋巴管内皮透明质酸受体-1在直肠癌中的表达及其意义

摘要：为探讨直肠癌中淋巴管内皮透明质酸受体 1(LYVE 1)的表达，以及微淋巴管密度(MLD)与直肠癌淋巴转移的关系。 笔者采用免疫组化技术检测60例直肠癌组织和40例癌旁正常直肠组织中LYVE 1的表达及MLD。结果示，直肠癌组织癌中心区及周边部MLD均显著高于癌旁正常直肠组织；癌周边部的MLD明显高于癌中心区；有淋巴结转移或远处转移组直肠癌中MLD分别比无转移组明显增高(P<0.01)。结论：直肠癌组织中存在肿瘤淋巴管的发生,主要位于癌周边部,其可促进肿瘤淋巴道转移。直肠癌组织的MLD可能成为评价肿瘤淋巴管发生及判断直肠癌淋巴转移的一个指标。     

术前放化疗对直肠癌血管生成的影响及其临床意义

目的研究术前放化疗对直肠癌血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和微血管密度（microvessel density,MVD）表达的影响。方法78例低位直肠癌患者,随机分为两组。术前放化疗组（治疗组）予放疗40Gy,同时给予FOLFOX4方案化疗两次,放疗结束后4～6周接受手术治疗,对照组人院后直接接受手术,手术标本在常规病理检查的同时作肿瘤组织VEGF和MVD的表达分析,用半定量计分方法计算VEGF表达,用Weidner计分法进行MVD记数。结果VEGF积分治疗组为1．05±0．35,对照组为1．91±0．78,P〈0．01;MVD值治疗组为12．6±3．45,对照组为23．8±7．67,P〈0．01;治疗组肿瘤缩小,手术切除率和保肛率高于对照组。结论术前放化疗可明显抑制肿瘤组织的VEGF和MVD表达,并有术前降期作用。     

膀胱癌组织中PTEN的表达及其与微血管密度的相关性

目的研究膀胱癌组织中抑癌基因PTEN的表达及其与微血管密度（MVD）之间的关系,评价PTEN在膀胱癌发生发展中的作用。方法应用免疫组织化学SP法检测62例膀胱癌组织和18例良性膀胱病变组织中PTEN的表达和MVD,同时结合肿瘤分期分级进行分析。结果62例膀胱癌组织中PTEN阳性率为53．23％（33／62）,18例良性膀胱病变组织PTEN全部阳性表达;PTEN的表达与肿瘤分级密切相关（P〈0．05）;肿瘤组织MVD明显高于良性病变组织;PTEN表达与MVD呈负相关（P〈0．05）。结论PTEN基因突变或缺失所导致的表达障碍可能在膀胱癌的恶性进展和血管生成过程中发挥重要的作用。     

环氧化酶-2在胃癌组织中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法应用免疫组织化学(免疫组化)法检测96例胃癌手术切除标本中COX-2的表达,采用抗CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析COX-2表达与MVD和胃癌主要临床病理特征的相关性。结果胃癌组织COX-2阳性表达率和MVD分别为80.2%和32.5±8.3,显著高于正常胃黏膜的13.3%和13.1±2.4;P<0.01。临床TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期胃癌标本COX-2表达率与MVD为91.4%和34.9±8.7,显著高于Ⅰ和Ⅱ期胃癌标本(P<0.01)。伴有淋巴结转移的胃癌组织中COX-2表达率和MVD分别为87.9%和35.0±8.5,与无淋巴结转移病例相比,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman等级相关分析表明,COX-2表达与MVD呈显著正相关(γ=0.311,P<0.01)。结论COX-2表达在胃癌的肿瘤血管生成中起重要作用,COX-2及其诱导的血管生成与胃癌的浸润和转移密切相关。     

肾细胞癌VEGF表达和MVD检测的临床意义

目的 探讨肾细胞癌（RCC）组织中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达与肿瘤间质微血管密度（MVD）检测的临床意义。方法 采用免疫组化方法对65例肾细胞癌（RCC）及10例正常肾组织进行VEGF单克隆抗体及CD34单克隆抗体染色，观察RCC的VEGF表达与MVD之间的相关性。结果 VEGF的表达与肿瘤间质微血管密度之间存在正相关性，二者均与RCC的病理分级、临床分期及远处转移显著相关（P〈0.05，P〈O．001）。结论 VEGF与MVD可客观准确反映RCC的生物学行为，上述二项指标可作为评估RCC恶性程度、转移及预后的重要指标。     

胃癌组织中hTERT和VEGF表达与微血管密度的关系及其临床意义

目的：探讨胃癌组织中人端粒酶逆转录酶（hTERT）、血管内皮生长因子（VEGF）表达与微血管密度（MVD）的相关性及其临床意义。方法：采用超敏SP法检测138例胃癌的hTERT、VEGF表达和肿瘤MVD,结合临床病理学特征进行相关分析。结果：本组胃癌组织hTERT表达阳性率为81．2％（112／138）,VEGF表达阳性率为85．5％f118／1381,MVD平均为45．8。hTERT阳性表达与胃癌的浸润深度、淋巴结状态、临床分期具有相关性,VEGF阳性表达与组织学分化型、淋巴结转移、血管浸润相关,MVD与浸润深度、淋巴结状态相关;VEGF表达与MVD值存在显著性意义。结论：hTERT激活与VEGF表型在胃癌进程中发挥重要作用,检测hTERT、VEGF表达和MVD,对胃癌诊断和预后的判断具有一定的价值。     

VEGF-C和VEGF-D在胰腺癌中表达及其意义

目的 探讨VEGF-C和VEGF-D在胰腺癌中表达及其与胰腺癌临床病理学特征之间的关系.方法 运用免疫组织化学(SP法)检测30例胰腺癌、癌旁组织、正常胰腺组织中VEGF-C、VEGF-D蛋白表达,且比较VEGF-C、VEGF-D蛋白表达与临床病理等因素之间的相关性.结果 VEGF-C、VEGF-D蛋白在胰腺癌中表达分别为70%(21/30)、73%(22/30)且在胰腺癌、癌旁组织、正常组织表达呈下降趋势.VEGF-C、VEGF-D表达与淋巴转移、临床病理分期呈正相关性(P＜0.05),与胰腺癌组织学分化呈负相关(P＜0.001).结论 VEGF-C、VEGF-D与胰腺癌发生、发展密切相关,与胰腺癌的临床分期、组织分化、以及淋巴转移密切相关,VEGF-C、VEGF-D有望成为胰腺癌抗淋巴道转移的治疗的靶蛋白.     

直肠癌组织中低氧诱导因子1α的表达及与微淋巴管密度和淋巴结微转移的关系

目的 探索低氧诱导因子1α(HIF-1α)在直肠癌组织中的表达情况及其与直肠癌微淋巴管密度(MLVD)和淋巴结微转移的关系.方法 收集安徽医科大学第一附属医院2000-2003年间手术切除并经病理证实的中低位直肠癌标本40例,并取相应癌旁组织作为对照.用免疫组织化学方法测定组织中HIF-1α表达、D2-40表达(计算M...     

Lymphatic vessel density, microvessel density and lymphangiogenic growth factor expression in colorectal cancer

OBJECTIVE: Microvessel density (MVD) has been studied as a prognostic marker in human cancers. Quantification of lymphatic vessel density (LVD) is now possible by using new antibodies. Expression of the lymphangiogenic growth factors, VEGF-C and VEGF-D, is associated with poorer clinicopathological outcomes in various tumours. The aim of this study was to quantify LVD and MVD in colorectal cancer, determine the relationship between LVD, MVD and clinicopathological variables and examine the relationship between LVD and tumour expression of VEGF-C and VEGF-D. METHOD: Thirty primary colorectal cancers were immunostained for CD34, lymph vessel endothelial hyaluronan receptor-1 (LYVE-1), VEGF-A and VEGF-D using standard techniques. LVD and MVD were determined by Chalkley grid counting. Tumours were assessed for the presence or absence of LYVE-1 positive lymphatics at different areas within the tumour and the tumour was scored for VEGF-C and VEGF-D immunostaining intensity at the invading tumour edge. Non-parametric tests were used for statistical analysis and a P-value of <0.05 was taken as significant. RESULTS: Lymph vessel endothelial hyaluronan receptor-1 was an excellent lymphatic vessel marker. Within normal bowel wall, lymphatic vessels were found rarely in the superficial colonic mucosa, but were numerous in the submucosa and muscularis propria. In the majority of tumours, lymphatic vessels were located in the peri-tumoural area, intra-tumoural vessels were sparse and tended to be narrow with closed lumina. At the invading tumour edge, VEGF-C expression was higher (P = 0.028) and VEGF-D expression lower (P = 0.011), in tumours in which lymphatic vessels were present. No significant differences between LVD and any clinicopathological variable or route of metastasis were identified. CONCLUSION: Lymphatic vessel density and MVD can be quantified in colorectal carcinoma using immunohistochemical techniques. The balance between expression of VEGF-C and VEGF-D at the invading tumour edge may enhance lymphatic metastasis, by promoting tumour lymphangiogenesis or by activation of pre-existing lymphatic vessels. No relationship was identified between LVD and clinicopathological variables.     

E-钙黏蛋白及黏着斑激酶在直肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨E-钙黏蛋白(E-CD)及黏着斑激酶(FAK)和磷酸化黏着斑激酶(FAK py397)在直肠癌组织中的表达水平及其临床意义.方法 收集2001年至2002年武汉大学人民医院手术切除的直肠癌及对应癌旁组织石蜡标本30例和2006年至2007年手术切除的直肠癌新鲜标本及对应癌旁组织35例,应用免疫组织化学法、Western blot检测E-CD、FAK和FAK py397的表达,采用X2检验分析相关数据.结果 正常直肠黏膜中E-CD呈细胞膜阳性表达,直肠癌组织中E-CD细胞膜表达缺失,直肠癌组织中E-CD、FAK及FAK py397的表达与肿瘤分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关(χ~2=7.099、18.358、25.612,12.316、28.823、23.168,8.927、18.122、22.620,P＜0.05);与年龄、性别无关(χ~2=0.439、1.899、3.676,0.541、4.051、1.135,P＞0.05);癌组织和癌旁组织中FAK及FAK py397表达率分别为83%(54/65)、68%(44/65)和31%(20/65)、26%(17/65),两者比较差异有统计学意义(χ~2=33.707,34.163,20.897,P＜0.05).结论 直肠癌组织中E-CD细胞膜表达缺失、FAK和FAK py397的表达水平明显升高,与肿瘤分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关,可预测肿瘤的生物学行为.